肽酰精氨酸脱胺酶抑制剂YW3-56的研究进展

6-二甲基氨基萘酚-2-基-N-S-[1-苄基氨甲酰基-4-(2-氯乙酰氨基丁基)]-甲酰胺(YW3-56)水溶性较差,是肽酰精氨酸脱胺酶的特异性抑制剂,分子结构比较复杂。YW3-56可以通过调节自噬、中性粒细胞胞外诱捕网以及炎症反应等作用,在结直肠癌、乳腺癌、非小细胞肺癌、鼻咽癌等多种肿瘤以及脓毒症、严重失血、急性肾损伤、腹主动脉瘤破裂等危重病发挥着重要的干预作用。现综述近年来YW3-56的应用进展,期望加深对YW3-56药理学作用的认识,并为肿瘤以及危重病的治疗提供新思路。

肽酰精氨酸脱氨酶4和组蛋白H3瓜氨酸化与高级别脑胶质瘤的相关性研究

目的:研究肽酰精氨酸脱氨酶4和组蛋白H3瓜氨酸化的表达与脑胶质瘤分级的关系。方法:选取2020年1月—2022年1月在河南大学淮河医院进行手术治疗的脑胶质瘤患者30例为脑胶质瘤组,其中18例为Ⅲ级、12例为Ⅳ级,取手术计划切除范围内正常脑组织为对照组。免疫组织化学检测肽酰精氨酸脱氨酶4和组蛋白H3瓜氨酸化的表达情况,并分析其与脑胶质瘤分级的关系。结果:与正常组织相比较,Ⅲ级和Ⅳ级胶质瘤组织,肽酰精氨酸脱氨酶4和组蛋白H3瓜氨酸化的表达水平上调,且上调程度与胶质瘤的级别成正比。结论:肽酰精氨酸脱氨酶4和组蛋白H3瓜氨酸化在胶质瘤组织高表达,且表达水平与级别相关,提示PAD4介导的组蛋白瓜氨酸化参与脑胶质瘤的发展。

肽酰精氨酸的翻译后修饰

肽酰精氨酸残基甲基化作用是细胞质与细胞核内蛋白质翻译后修饰的普遍方式。精氨酸残基甲基化蛋白质与许多细胞生物学过程有关,包括转录调节、RNA代谢和DNA损伤修复等。生物体内精氨酸N-甲基转移酶类、肽酰精氨酸脱亚氨酶类与JMJD6等催化肽酰精氨酸残基进行甲基化、瓜氨酸化和去甲基化的动态修饰。这种动态修饰对细胞生物学功能有重要调节作用。

牙龈卟啉单胞菌肽酰精氨酸脱亚氨酶的克隆与表达

目的:构建牙龈卟啉单胞菌外膜蛋白肽酰精氨酸脱亚氨酶(PAD)克隆表达重组子,转化于大肠杆菌BL21中,并在最适宜条件下诱导表达。方法:以牙龈卟啉单胞菌ATCC33277全基因组DNA为模板,利用PCR技术获得目的基因PAD,将扩增得到的PAD基因定向插入线性克隆载体PMD18-T Vector中,得到克隆重组子PMD18-T-PAD。经PCR和双酶切鉴定正确的克隆重组子PMD18-T-PAD与表达载体PET-28a经Xhol和Ncol双酶切后,在一定连接体系下,连接构建表达质粒PET-28a-PAD。鉴定正确的原核重组表达质粒PET-28a-PAD,转化大肠杆菌BL21感受态细胞,在不同浓度异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)及时间诱导下表达融合蛋白。以抗His Tag单克隆抗体为一抗,Western免疫印迹鉴定。结果:DNA测序结果表明,PAD与NCBI核酸数据库中收录的PAD序列同源性达100%;37℃,IPTG浓度为0.5mmol/L,250r/min振摇培养6h的诱导条件下,PAD可高效表达。结论:本实验成功构建了PAD的克隆表达重组子,并在大肠杆菌中表达了PAD蛋白,为进一步研究PAD的免疫学性能及相应的抗体制备奠定了基础。

肽酰精氨酸脱亚氨酶催化趋化因子瓜氨酸化

蛋白质分子内精氨酸残基瓜氨酸化是蛋白质翻译后修饰作用之一,肽酰精氨酸脱亚氨酶(PAD)催化趋化因子发生瓜氨酸化反应,改变趋化因子的生物学活性,显示出PAD在体内免疫系统中的调节作用。

PADI4单核苷酸多态性与类风湿关节炎相关性的Meta分析

目的探讨肽酰精氨酸脱亚胺基酶4(PADI4)基因单核苷酸多态性与类风湿关节炎(RA)发病风险的关系。方法采用Meta分析方法对相关研究结论进行合并效应值估计,进行异质性检验、发表偏倚评估和风险比的Meta分析。结果共有国内外符合条件的13篇文献纳入分析,累计病例和对照者数分别为11 039例和10 395例。因存在异质性,将PADI4-94研究结果分亚洲人组和欧洲人组进行Meta分析,发现PADI4-94单核苷酸多态性(SNP)与亚洲人种RA风险相关,而与欧洲人种的RA风险无关,综合采用随机效应模式Meta分析时,总体显示PADI4-94与RA风险相关;PADI4-104文献中有一篇存在异质性,排除后经固定效应模式Meta分析显示,PADI4-104 SNP与RA风险存在相关性。发表偏倚评估显示虽有一定的发表偏倚,但剪补法分析显示偏倚不改变相关性结论。结论 PADI4-94和PADI4-104 SNP与RA的发病风险相关。

PADI4基因多态性与类风湿关节炎的相关性研究

目的探讨重庆地区汉族人群肽酰精氨酸脱亚胺基酶4(peptidylarginine deiminase4,PADI4)单核苷酸多态性(SNP)与类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)之间的关系。方法采用聚合酶链反应-限制性内切酶片段长度多态性(PCR-RFLP)法检测302例RA患者和322名健康对照者的PADI4rs874881SNP多态性,同时检测类风湿因子(Rheumatoidfactor,RF)、抗环瓜氨酸肽抗体(cyclic citrullinated peptide,CCP)和抗角蛋白抗体(anti-keratin antibody,AKA)3种RA的特异性自身抗体。结果健康对照组PADI4rs874881C/C、C/G和G/G基因型频率分别为0.332、0.488和0.180;RA组分别为0.295、0.474和0.232,与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。RA组RF、抗CCP抗体和抗AKA抗体检测阳性率、滴度水平与PADI4rs874881基因分型均无相关性(P>0.05)。结论重庆汉族人群PADI4rs874881多态性与RA的易感性无关,与RF、CCP及AKA等抗体的阳性率无相关性。

microRNA调控脓毒症中性粒细胞胞外诱捕网的研究进展

中性粒细胞胞外诱捕网(neutrophil extracellular traps,NETs)主要由网状脱氧核糖核酸(DNA)骨架构成,是中性粒细胞内除吞噬和脱颗粒外的新型抗菌机制。脓毒症时感染引起全身炎症反应,导致大量NETs释放,抗菌的同时进一步放大炎症级联反应,引起组织损伤且加重脓毒症病情进展。目前研究发现,miR-146a、miR-155、miR-378a-3p和miR-15b-5p通过不同机制调控脓毒症中NETs形成,影响脓毒症患者存活率及器官损害。本文总结了NETs的形成,阐述microRNA(miRNA)对脓毒症NETs的调控机制,为脓毒症的靶向治疗提供新的理念与思路。

PADI4-94及104单核苷酸多态性与类风湿关节炎的相关性研究

目的研究肽酰精氨酸脱亚胺基酶(peptidylarginine deiminase,PADI)基因多态性与类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)易感性和发病机制的关系。方法采用直接测序法检测了130例RA患者和性别、年龄匹配的130名健康体检者的PADI4-94和104单核苷酸多态性(SNP),同时对RA患者的抗环瓜氨酸肽抗体(cyclic citrullinated peptide,CCP)等指标进行检测。结果 RA组与健康对照组的PADI4-94和104基因均检测到CC、CT和TT三种基因型,RA组PADI4-94各基因型频率(CC:26.1%,CT:50.8%,TT:23.1%)与健康对照组(CC:40.8%,CT:41.5%,TT:17.7%)比较,差异有统计学意义(χ2=6.274,P=0.043);RA组PADI4-94少见等位基因T频率(48.5%)与健康对照组(38.5%)比较,差异有统计学意义(P=0.021)。RA组PADI4-104各基因型频率(CC:33.1%,CT:48.5%,TT:18.5%)与健康对照组(CC:43.8%,CT:43.1%,TT:13.1%)比较,差异无统计学意义(χ2=3.567,P=0.168);RA组PADI4-104少见等位基因T频率(42.7%)与健康对照组(34.6%)比较差异无统计学意义(P=0.059)。就少见基因T携带者(TT和CT)频率在两组中的统计显示,RA患者PADI4-94和104基因中少见基因T携带频率显著高于健康对照组(P值分别为0.013和0.041)。按性别分组分析未发现PADI4-94和104基因型分布有性别差异。结论汉族人群PADI4-94基因与RA易感性相关,PADI4-94和PADI4-104少见基因携带者的RA患病风险较高,PADI4基因在RA发生发展中的作用机制值得进一步深入研究。