系统性红斑狼疮患者外周血肽基脯氨酰顺反异构酶1与白细胞介素-17的分析及其临床意义

目的:探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血肽基脯氨酰顺反异构酶1(Pin1)活性的表达与细胞因子白细胞介素-17(IL-17)水平相关性及其临床意义。方法:选取98例SLE患者,其中42例为SLE初治患者,另选43例健康体检者为健康对照组。采用酶联免疫吸附试验检测所有研究对象入组时及98例SLE患者治疗后3个月血清中Pin1、IL-17水平,分析98例SLE患者血清Pin1水平变化及与细胞因子IL-17、SLE疾病活动指数(SLEDAI)评分、实验室指标的相关性,分析42例SLE患者初治时、治疗后3个月时其水平变化及意义。结果:①SLE稳定组外周血的Pin1表达水平明显高于健康对照组(H=28.913,P<0.05),SLE活动组外周血的Pin1表达水平明显高于SLE稳定组(H=31.738,P<0.05)。②SLE患者Pin1与IL-17、SLEDAI评分呈正相关(r=0.640,P<0.05;r=0.461,P<0.05),与抗ds-DNA抗体、C反应蛋白、红细胞沉降率无明显相关性。③SLE初治组外周血的Pin1表达水平明显高于健康对照组(H=55.568,P<0.05),SLE初治组治疗后3个月的Pin1表达水平较治疗前下降(H=28.136,P<0.05)。④血清Pin1水平在有肾脏损害的SLE患者表达增高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:SLE患者外周血Pin1过表达,IL-17增高且与其呈正相关,经过治疗能显著降低Pin1活性,降低IL-17细胞因子水平,抑制Pin1蛋白表达,可能会延缓SLE的进展,Pin1抑制剂可能成为SLE治疗的新靶点之一。

N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸调节α-微管蛋白乙酰转移酶1抑制矽肺纤维化

目的探讨N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸(Ac-SDKP)能否通过对α-微管蛋白乙酰转移酶1(α-TAT1)调节而发挥抗矽肺纤维化作用。方法Wistar大鼠随机分为3组:对照组、矽肺模型组、Ac-SDKP处理组,每组6只。原代培养大鼠的肺成纤维细胞分为5组:对照组、转化生长因子(TGF-β1)诱导组、Ac-SDKP预处理组(TGF-β1+Ac-SDKP)、α-TAT1沉默组(α-TAT1-siRNA+TGF-β1+Ac-SDKP)、α-TAT1过表达组(α-TAT1-cpDNA+TGF-β1+Ac-SDKP)。免疫组化检测大鼠肺组织中α-TAT1的表达与分布,Western blot检测大鼠肺组织及大鼠肺成纤维细胞中I型胶原(Col I)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、乙酰化微管蛋白-α(Ac-Tubα)、α-TAT1蛋白的表达水平。结果矽肺模型组大鼠的肺组织中出现矽结节,α-TAT1在矽结节中表达缺失,Western blot结果显示,矽肺模型组和TGF-β1诱导的肺成纤维细胞中Col I和α-SMA蛋白表达上调,Ac-Tubα和α-TAT1蛋白表达下调。Ac-SDKP治疗可抑制该变化。Ac-SDKP对Col I、α-SMA表达抑制效应可被α-TAT1-siRNA阻断,而α-TAT1过表达可加强Ac-SDKP对Col I、α-SMA表达的抑制作用。结论Ac-SDKP通过调节α-TAT1的表达抑制肌成纤维细胞分化,发挥抑制矽肺大鼠肺纤维化的作用。

人多肽N-乙酰氨基半乳糖转移酶2基因反义RNA表达质粒的构建及其功能的初步研究

反义封闭人多肽N-乙酰氨基半乳糖转移酶2(pp-GalNAc-T2)的基因表达,对胃癌细胞SGC7901中转化生长因子-β1(TGF-β1)与基质金属蛋白酶2(MMP2)基因表达及细胞增殖有影响.在对几株肿瘤细胞的pp-GalNAc-T2基因表达水平进行分析后,以高表达pp-GalNAc-T2的人胃癌细胞株SGC7901的总RNA为模板,利用RT-PCR方法扩增两段不同长度pp-GalNAc-T2基因片段,构建反义表达载体转染胃癌细胞SGC7901,通过G418筛选,建立一系列旨在封闭胃癌细胞SGC7901ppGalNAc-T2基因表达的亚细胞克隆.通过流式细胞术、荧光显微镜、RT-PCR及Western印迹检测反义封闭pp-GalNAc-T2基因RNA表达后胃癌细胞SGC7901增殖以及TGF-β1、MMP2表达水平的变化.反义封闭pp-GalNAc-T2基因表达后,胃癌细胞SGC7901 pp-GalNAc-T2的表达水平明显降低,细胞分裂增殖减慢,表明反义封闭pp-GalNAc-T2基因表达对胃癌细胞SGC7901的生长增殖有影响.结果还显示,反义封闭pp-GalNAc-T2基因表达可使TGF-β1、MMP2基因在mRNA与蛋白质表达水平均增加,提示pp-GalNAc-T2基因表达可能对胃癌细胞SGC7901浸润转移产生影响.以上结果表明,pp-GalNAc-T2基因在肿瘤细胞中广泛表达,并可能与肿瘤的增殖及浸润转移相关.

脯氨酰寡肽酶抑制剂S17092对脂质超载人肝细胞株LO2脂质沉积的改善作用及其机制

目的观察脯氨酰寡肽酶(POP)抑制剂S17092对脂质超载人肝细胞株LO2脂质沉积的改善作用,并探讨其机制。方法将LO2细胞随机分为3组,对照组LO2细胞用1%无脂肪酸(FFA)的1640培养基培养,模型组LO2细胞用FFA制备脂质超载模型后再用1640培养基培养,实验组LO2细胞制备脂质超载模型后再加入含S17092的1640培养液培养。各组细胞继续培养24 h后,采用油红O染色法观察各组细胞内脂质沉积情况,采用Bio-Rad蛋白质测定法检测各组细胞内甘油三酯(TG),采用实时荧光定量PCR法检测各组细胞内POP、固醇调节元件结合蛋白-1c(SREBP-1c)、脂肪酸合成酶(FAS)、乙酰辅酶A羧化酶1(ACC1)、硬脂酰辅酶A去饱和酶(SCD1)mRNA。结果油红O染色结果显示,与对照组相比,模型组LO2细胞内含有大量的红染颗粒,而实验组较模型组红染颗粒相对较少。对照组、模型组、实验组细胞内TG水平分别为(1.995±0.221)pmole/μL、(2.910±0.030)pmole/μL、(2.573±0.113)pmole/μL,组间相比,P均<0.05。与对照组相比,模型组、实验组细胞中POP、SREBP-1c、FAS、ACC1、SCD1 mRNA相对表达量明显升高(P均<0.05);与模型组相比,实验组细胞中POP、SREBP-1c、FAS、ACC1、SCD1 mRNA相对表达量明显降低(P均<0.05)。结论POP抑制剂S17092可改善脂质超载LO2细胞的脂质沉积,其机制可能与抑制SREBP-1c及其靶基因的表达有关。

脯氨酰顺反异构酶1调控低氧诱导内皮间充质转化的作用及机制

目的探讨低氧条件下肺动脉内皮细胞(PAECs)中脯氨酰顺反异构酶(Pin1)的表达及其调控内皮间充质转化(EndMT)的作用及机制。方法利用低氧(1%O_(2))24 h建立低氧诱导的EndMT细胞模型。将PAECs分为4组,常氧组(Nor)、常氧+Pin1慢病毒敲低组(Nor+Pin1-shRNA)、低氧组(Hyp)、低氧+Pin1慢病毒敲低组(Hyp+Pin1-shRNA),分别培养24 h。应用5-溴-2-脱氧尿嘧啶(EdU)方法检测各组细胞增殖,细胞迁移实验(Transwell)检测细胞迁移。蛋白印迹法(Western blot)检测Pin1、缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)的表达,并检测EndMT相关标志物α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、血管内皮钙黏蛋白(VE-cadherin)、锌指转录因子(Snail)以及转化生长因子-β1(TGF-β1)相关信号通路的表达。多组间均数比较采用单因素方差分析。结果Nor+Pin1-shRNA组Pin1的蛋白相对表达量(0.292±0.061)明显低于Nor组(0.798±0.054),Hyp+Pin1-shRNA组Pin1的蛋白相对表达量(0.475±0.039)明显低于Hyp组(1.403±0.076),差异有统计学意义(F=271.983,P<0.01);Hyp组(1.135±0.086)和Hyp+Pin1-shRNA组(1.043±0.054)HIF-1α的蛋白相对表达量明显高于Nor组(0.735±0.042),差异有统计学意义(F=60.954,P<0.01);Hyp组(20.500±1.871)EdU阳性细胞数明显高于Nor组(7.167±1.169),Hyp+Pin1-shRNA组(9.327±1.633)EdU阳性细胞数明显低于Hyp组,差异有统计学意义(F=128.416,P均<0.01);Hyp组(464.500±10.599)细胞数明显高于Nor组(179.250±11.955),Hyp+Pin1-shRNA组(320.000±17.607)细胞数明显低于Hyp组,差异有统计学意义(F=501.244,P<0.01);Hyp组(1.205±0.061)α-SMA的蛋白相对表达量明显高于Nor组(0.725±0.089),Hyp+Pin1-shRNA组α-SMA的蛋白相对表达量(0.870±0.058)明显低于Hyp组,差异有统计学意义(F=50.820,P<0.01);Hyp组(0.547±0.066)VE-cadherin的蛋白相对表达量明显低于Nor组(0.975±0.079),Hyp+Pin1-shRNA组(0.797±0.051)VE-cadherin的蛋白相对表达量明显高于Hyp组,差异有统计学意义(F=27.934,P<0.01);Hyp组Snail(0.955±0.063)、TGF-β1(1.042±0.087)、p-Smad2(1.180±0.062)的蛋白相对表达量明显高于Nor组(0.510±0.036、0.647±0.053、0.807±0.053),Hyp+Pin1-shRNA组Snail(0.492±0.061)、TGF-β1(0.792±0.051)、p-Smad2(0.910±0.036)的蛋白相对表达量明显低于Hyp组,差异有统计学意义(F=82.842、38.131、48.617,P<0.01)。结论低氧条件下,PAECs中Pin1表达升高,并发生EndMT,抑制Pin1可减弱EndMT,其机制是Pin1通过影响TGF-β1-Smad信号通路,促进Snail等转录因子的表达。

戊二酰亚胺类抗生素S-632A对D-半乳糖老化小鼠海马神经元Aβ及其相关蛋白表达的影响

目的:观察戊二酰亚胺类抗生素S-632A对D-半乳糖老化小鼠模型(DGAM)海马神经元β-淀粉样肽(β-amyloid,Aβ)及其相关蛋白表达的影响。方法:采用免疫组织化学染色和免疫印记方法,检测DGAM海马神经元Aβ、β-分泌酶(Beta-site APP cleaving enzyme,BACE)、内质网Aβ结合蛋白(Endoplasmicreticulum amyloidβpeptide binding protein,ERAB)和早老蛋白1(Presenilin-1,PS-1)的表达水平,并观察应用戊二酰亚胺类抗生素S-632A对DGAM海马神经元的保护作用。结果:对照组小鼠海马神经元Aβ及其相关蛋白BACE,ERAB和PS-1表达量少,而DGAM小鼠海马神经元Aβ及其相关蛋白表达水平明显增加,与对照组比较差异具有高度显著性(P<0.01),S-632A组上述各种蛋白的表达结果与对照组接近。结论:DGAM小鼠海马神经元存在着Aβ及其相关蛋白BACE,ERAB和PS-1表达的上调,S-632A可明显改善模型动物中上述蛋白的异常表达,对小鼠神经元具有营养和保护作用。

微小RNA-876-3p靶向肽基脯氨酰顺反异构酶A调控胃癌细胞增殖和顺铂耐药性的作用机制研究

目的研究微小RNA-876-3p(miR-876-3p)通过调控肽基脯氨酰顺反异构酶A(PPIA)对胃癌细胞增殖和顺铂(DDP)耐药性的影响。方法体外培养胃癌细胞MKN28,用低浓度梯度递增方法诱导MKN28细胞形成顺铂耐药性,以构建顺铂耐药细胞株(MKN28/DDP)。MKN28和MKN28/DDP细胞各包含4个实验组:阴性对照组、第1转染组(转染si-PPIA)、第2转染组(转染miR-876-3p mimics)和第3转染组(转染si-PPIA+miR-876-3p inhibitor)。用顺铂1μg·mL^-1处理各组MKN28细胞,用顺铂5μg·mL^-1处理各组MKN28/DDP细胞,培养24 h。以实时荧光定量-PCR法检测各组细胞中miR-876-3p表达水平,蛋白质印迹法检测各组细胞中PPIA蛋白的表达水平,细胞计数试剂盒法检测各组细胞增殖活力,流式细胞术检测各组细胞细胞凋亡水平。结果miR-876-3p在正常胃上皮细胞GES-1、胃癌细胞MKN28和MKN28/DDP中的相对表达量分别为1.01±0.21,0.41±0.15和0.32±0.11,MKN28与GES-1比较,差异有统计学意义(P<0.01);MKN28/DDP与MKN28比较,差异有统计学意义(P<0.05)。在表达miR-876-3p实验中,1μg·mL^-1顺铂处理MKN28,阴性对照组和第3转染组的细胞活力分别为(1.00±0.04)%,(0.65±0.03)%;这2组的细胞凋亡率(41.87±1.65)%,(68.98±4.12)%。5μg·mL^-1顺铂处理MKN28/DDP,阴性对照组和第3转染组的细胞活力分别为(1.01±0.02)%,(0.72±0.05)%;这2组的细胞凋亡率分别为(34.66±0.94)%,(56.71±3.03)%,组间比较差异均有统计学意义(均P<0.05)。miR-876-3p可靶向结合PPIA。以1μg·mL^-1顺铂处理MKN28细胞,阴性对照组、第1转染组和第3转染组的细胞活性分别为(1.01±0.03)%,(0.58±0.04)%和(0.97±0.02)%;这3组的细胞凋亡率分别为(39.96±2.01)%,(71.12±2.98)%和(45.14±2.47)%。以5μg·mL^-1顺铂处理MKN28/DDP细胞,这3组的细胞活性分别为(1.01±0.04)%,(0.63±0.06)%和(0.94±0.05)%;这3组的细胞凋亡率分别为(31.95±1.31)%,(62.88±5.63)%和(36.84±2.11)%。上述指标:第1转染组与阴性对照组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05);第3转染组与第1转染组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论过表达miR-876-3p可明显上调胃癌细胞对顺铂的敏感性,其机制是通过靶向下调PPIA的表达从而降低胃癌细胞增殖、增加其凋亡。

Pin1和β-连环素在胃癌组织中的表达及其临床意义

目的探讨肽酰脯氨酰异构酶1(Pin1)与β-连环素在胃癌发生、发展中的作用。方法应用免疫组化SP技术对50例胃癌组织(胃癌组)及30例正常胃组织(对照组)中Pin1、β-连环素表达进行检测,分析两指标间相关性及与胃癌临床病理学特征的关系。结果胃癌组及对照组Pin1表达阳性率分别为24.0%(12/50)、0,β-连环素异常表达率分别为62.0%(31/50)、23.3%(7/30),P均<0.05;Pin1与β-连环素在胃癌组织中的表达密切相关(r=0.51,P<0.01);Pin1及β-连环素表达与胃癌病理分化程度、临床分期、淋巴结转移有关(P<0.05)。结论Pin1和β-连环素异常表达可能在胃癌发生、发展中起重要作用,可作为指导肿瘤治疗及判断转移、预后等的参考指标之一。

心力衰竭急性失代偿期患者血清HPSE与LOX-1的表达水平及相关性研究

目的探讨心力衰竭急性失代偿期(ADHF)患者规范化治疗前后血清乙酰肝素酶(HPSE)、凝集素样氧化低密度脂蛋白受体-1(LOX-1)、N末端B型利钠肽原(NT-proBNP)的水平变化情况,并分析三者间的相关性。方法选取2019年5月至2020年12月内蒙古科技大学包头医学院第一附属医院心内科收治的ADHF患者50例。于规范治疗前后检测其血清HPSE、LOX-1、NT-proBNP水平,并通过Pearson相关分析或Spearman秩相关分析探究血清HPSE、LOX-1、NT-proBNP三者间的相关性。结果与治疗前相比,50例ADHF患者治疗后血清NT-proBNP、HPSE、LOX-1水平均降低,差异有统计学意义(P<0.05)。Spearman秩相关分析结果显示,HPSE、LOX-1水平与NT-proBNP水平均呈显著正相关(r_(s)=0.839,P=0.000;r_(s)=0.902,P=0.000)。Pearson相关分析结果显示,HPSE与LOX-1水平亦呈显著正相关(r=0.761,P=0.000)。结论HPSE、LOX-1可能参与了心力衰竭的发生、发展过程,其具有评估ADHF患者病情严重程度及预后的应用前景。

石斛多糖DOP-1-1的制备及其体外促进骨形成的机制

目的制备石斛多糖(DOP-1-1)并探讨其对前成骨细胞MC3T3-E1细胞增殖、分化和矿化作用。方法从铁皮石斛多糖(DOP)中系统分离纯化获得了一种均质多糖(DOP-1-1),并通过高效凝胶渗透色谱法、单糖分析、红外光谱、甲基化分析、GC-MS和核磁共振光谱研究了DOP-1-1的结构。体外实验分别通过MTT法、ALP活性测定和茜素红S染色检测DOP-1-1对MC3T3-E1细胞增殖、分化和矿化的影响。同时,采用Western blot测定DOP-1-1对MC3T3-E1细胞中骨相关蛋白质(Pin1、BMP2、RUNX2)的表达影响。结果DOP-1-1是一种均质多糖,其相对分子量为3611,由甘露糖、葡萄糖和半乳糖组成。DOP-1-1在低浓度下促进成骨细胞增殖的活性,其中2.0、4.0μmol/L DOP-1-1的作用相当于阳性对照17β-雌二醇(E2)。与对照组比较,E2和DOP-1-1(4.0、8.0μmol/L)使MC3T3-E1细胞中ALP活性和矿化率增加(P<0.01)。特别是,DOP-1-1(8.0μmol/L)的ALP活性和矿化率高于阳性对照E2(P<0.001)。此外,DOP-1-1组MC3T3-E1细胞中Pin1、BMP2、RUNX2蛋白表达高于对照组(P<0.05)。结论DOP-1-1体外能促进MC3T3-E1细胞的增殖、分化和矿化,作用机制与激活Pin1/BMP2信号通路相关。

胰高血糖素样肽-1通过抑制sirtuin脱乙酰基酶SirTl刺激胰腺β细胞增殖

叉头样转录因子1（Fox01）是胰高血糖素样肽-1（GLP-1）信号传导通路中一种重要的转录效应器，Fox01活性依赖于沉默调节因子1（SirTl）调节的脱乙酰作用。本研究旨在观察GLP-1作用中SirTl可能的功能。

乙酰半胱氨酸泡腾片对百草枯中毒患者肺纤维化改善的研究

目的:研究乙酰半胱氨酸泡腾片对百草枯中毒患者肺纤维化的改善。方法:百草枯中毒患者60例随机分成治疗组30例,对照组30例,治疗组在常规治疗基础上加用乙酰半胱氨酸泡腾片治疗。结果:治疗组治疗后体内α-1酶抗胰蛋白(α1-AT)、谷胱甘肽(GSH)升高程度明显优于对照组,而且随着用药时间的延长检测浓度也越高。治疗前后自身对照差异有显著性(P<0.05﹚。结论:乙酰半胱氨酸泡腾片能控制肺纤维化的发生和发展,可作为治疗百草枯中毒的有效手段之一。

Pin1在乳房外Paget病的表达及意义

目的:分析Pin1染色后乳房外Paget病组和对照组切片中Pin 1的表达及意义。方法:采用免疫组化染色的方法,对27例乳房外Paget病和10例正常皮肤标本进行Pin1免疫组化染色,并将乳房外Paget病组按照浸润深度分成三组分别观察。结果:乳房外Paget病组阳性率74.07%,其中51.85%为高表达,对照组阳性率30%,均为低表达,差异具有统计学意义(P<0.05)。乳房外Paget病标本按照浸润深度分成三组进行比较,差异来自对照组与乳房外Paget病各组之间,在乳房外Paget病组内部进行两两比较无统计学意义。结论:Pin1在正常皮肤组织中不表达或极低表达,在乳房外Paget病患者皮损中的表达增高。

利拉鲁肽调控高脂诱导的非酒精性脂肪肝病的分子机制

目的探讨大鼠非酒精性脂肪肝病(NAFLD)模型中利拉鲁肽对炎症反应和抗氧化能力的影响及对脂类代谢相关酶的表达调控。方法 SD大鼠70只,25只给予正常饮食,45只采用高糖饮食加高脂灌胃12周,正常组和模型组随机挑取5只大鼠处死。确定NAFLD模型成功建立后,随机分为空白对照组(n=20)、模型对照组(n=20)和利拉鲁肽治疗组(n=20)。利拉鲁肽治疗组给予利拉鲁肽60μg/(kg·d)皮下注射,模型对照组给予生理盐水1ml/(kg·d)皮下注射。利拉鲁肽治疗开始4周和8周后,各组处死大鼠各半,测定各组血浆中炎性因子、氧化因子、抗氧化因子、肝功能和脂类的变化,检测肝脏的形态学改变,采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测胆固醇调节元件结合转录因子-1c(SREBF-1c)和乙酰辅酶A羧化酶α(ACCα)的mRNA表达,应用免疫组织化学和Western blotting检测SREBF-1c和ACCα的蛋白质表达。结果与模型对照组比较,利拉鲁肽治疗4周和8周后,血浆中C反应蛋白(CRP)、白细胞介素(IL)-1α、IL-1β、IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、丙二醛(MDA)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)含量降低(P<0.05);超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)和总抗氧化能力(T-AOC)增加(P<0.05),肝脏组织脂肪颗粒沉积减少;肝脏组织中SREBF-1c和ACCα的mRNA和蛋白表达下调(P<0.05)。利拉鲁肽治疗8周与治疗4周比较,上述指标进一步改善。结论利拉鲁肽可以减轻NAFLD中炎症反应,提高抗氧化能力,改善肝功能;利拉鲁肽可能通过下调肝脏组织中SREBF-1c和ACCα的表达,减少脂质的生成,缓解肝脏组织中的脂肪变性,而且随治疗时间的增加,对NAFLD的防治作用更明显。

磷脂酰肌醇3激酶特异性抑制剂LY294002对结核杆菌低分子多肽抗原激活γδT细胞的影响

目的观察磷脂酰肌醇3激酶（P13K）特异性抑制剂LY294002对CD3单克隆抗体（CD3mAb）活化的T细胞及结核杆菌低分子多肽抗原（Mtb-Ag）激活γδT细胞的影响，探讨P13K在CD3mAb活化的T细胞及Mtb-Ag启动的78T细胞TCR途径信号转导中作用。方法分离获取健康人外周血单个核细胞（PBMC），用CD3mAb、佛波醇酯＋离子霉素（PMA＋IM）、Mtb-Ag刺激PBMC，采用流式细胞术检测CD3’T细胞和78T细胞0、6、12、24、48h和72h的CD69分子的表达情况。PBMC经LY294002（0、0．4、2、10~tmol／L）处理后再刺激培养，用EIA试剂盒检测CD3mAb和PMA＋IM刺激组CD3’T细胞白细胞介素（IL）一2的含量；经CD3PE和CD69FITC、v6PE和CD69FITC双染后，检测LY294002对CD3mAb活化T细胞和Mtb．Ag活化的γδT细胞增殖的影响，并计数培养扩增10d的细胞数量。结果用CD3mAb刺激24hCD3’T细胞和γδT细胞CD69的表达均达高峰（均在56％左右），用PMA＋IM刺激6h，均达高峰（均在99％左右），用Mtb-Ag刺激24h，亦均达高峰，但CD3^＋T细胞和γδT细胞CD69的表达分别为（16．0±0．0）％和（75．2±0．7）％，3组同时间点CD3^＋T细胞CD69的表达之间差异均有统计学意义（均P〈0．05），而78T细胞CD69的表达在PMA＋IM刺激组高于CD3mAb刺激组和Mtb-Ag刺激组（均P〈0．05），后两组差异则没有统计学意义（均P〉0．05）。用LY294002终浓度分别为0、0．4、2、10μmol／L处理的样本，CD3mAb刺激组CD3^＋T细胞CD69的表达分别为（52．0±0．5）％、（46．3±0．4）％、（33．2±0．4）％和（19．1±0．0）％；Mtb-Ag刺激组78T细胞CD69的表达分别为（66．2±0．6）％、（58．4＋0．5）％、（38．1±0．3）％和（19．3±0．1）％。0、0．4、2、10μmol／LLY294002处理CD3＋T细胞后，CD3mAb刺激组IL-2的含量分别为（561．1±86．2）、（477．0±75.5）、（280．3±53．9）、（36．0±8．7）ng／L，PMA＋IM刺激组为（1922．2±371．3）、（1928．3±381．7）、（1938．1±262．1）、（1915．4±201．6）ng／L。CD3^＋T细胞的总数由培养前的1．5×10^6分别增殖到（35．6±8．4）×10^6、（31．1±7．3）×10^6、（18．7＋5．0）×10^6和（7．0±2．0）×10^6；γδT细胞的总数由培养前的1．5×10^6分别增殖到（7．0±1．1）×10^6、（4．7＋1．0）×10^6、（1．3＋0．8）×10^6和（0.2±0．1）×10^6。结论Mtb-Ag可特异性的激活78T细胞，其活化信号转导需通过TCR通路，LY294002对CD3mAb活化的T细胞及Mtb-Ag启动的γδT细胞具有明显的抑制作用。

ppGalNAcT2反义RNA对胃癌细胞SGC7901生物学特性的影响

目的:研究人胃癌细胞SGC7901中多肽N-乙酰氨基半乳糖转移酶2(pp-GalNAc-T2)基因表达与肿瘤转移相关基因MMP2,TGF-β1表达的相关性,以及对细胞增殖和形态生物学特性的影响。方法:用两个已构建好的反义表达载体转染胃癌细胞SGC7901,通过G418筛选,建立一系列旨在封闭胃癌细胞SGC7901ppGalNAc-T2基因表达的亚细胞克隆。通过共聚焦显微镜,RT-PCR检测反义封闭pp-GalNAc-T2基因RNA表达后,胃癌细胞SGC7901中TGF-β1,MMP2表达水平,细胞增殖以及形态的变化。结果:反义封闭pp-GalNAc-T2基因表达后,胃癌细胞SGC7901pp-GalNAc-T2的表达水平明显降低,细胞的形态发生改变,分裂增殖减慢。结果还显示,反义封闭pp-GalNAc-T2基因表达可使TGF-β1,MMP2基因在mRNA表达水平均增加,提示pp-GalNAc-T2基因表达可能对胃癌细胞SGC7901浸润转移产生影响。结论:pp-GalNAc-T2可能在肿瘤的增殖、浸润和转移中发挥作用。

橘红痰咳液联合乙酰半胱氨酸治疗慢性阻塞性肺疾病的临床研究

目的探讨橘红痰咳液联合乙酰半胱氨酸治疗慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者的临床疗效。方法选取2016年10月—2017年10月在濮阳市安阳地区医院进行治疗的COPD患者82例,随机将患者分为对照组(41例)和治疗组(41例)。对照组口服溶解后的乙酰半胱氨酸泡腾片,0.6 mg/次,2次/d;治疗组在对照组基础上口服橘红痰咳液,20 m L/次,3次/d。两组患者均经过12周治疗。评价两组患者临床疗效,同时比较治疗前后两组患者动脉血气分析指标、肺功能指标、血清细胞因子水平和氧化应激水平。结果治疗后,对照组临床有效率为80.49%,显著低于治疗组的95.12%,两组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。治疗后,两组氧分压(p O_2)和血氧饱和度(Sa O_2)水平及一秒用力呼气容积(FEV_1)、用力肺活量(FVC)和最大呼气流量(PEF)均显著升高(P<0.05),二氧化碳分压(p CO_2)水平显著下降(P<0.05),且治疗组上述动脉血气和肺功能指标改善后水平明显优于对照组,两组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。治疗后,两组血清IL-6、髓样细胞触发受体-1(s TREM-1)、单核细胞趋化因子-1(MCP-1)和丙二醛(MDA)水平均显著降低(P<0.05),γ-干扰素(IFN-γ)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)水平显著增加(P<0.05)。同时,治疗后治疗组上述血清细胞因子和氧化应激水平明显优于对照组,两组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。结论橘红痰咳液联合乙酰半胱氨酸治疗COPD,有利于患者肺功能和动脉血气指标改善,并降低机体炎症和氧化应激水平。

rs2233678和rs2233679多态性与福建汉族人群肺癌易感性及临床病理学特征的关系

目的了解福建汉族人群肽酰脯氨酰基顺反异构酶1(Pin1)基因rs2233678(-842G/C)和rs2233679(-667T/C)多态性分布规律及其与肺癌发生、发展的关系。方法采用聚合酶链反应(PCR)技术,对80例汉族肺癌患者和135例健康对照的Pin1基因启动子进行扩增并对PCR产物直接测序,分析Pin1基因启动子多态性与肺癌易感性及其临床病理学特征的关系。结果 rs2233678位点只检测到GG和GC两种基因型,没有检测到CC基因型。rs2233678和rs2233679位点的等位基因和基因型分布在肺癌组和健康对照组中比较差异无统计学意义(P>0.05);其组成的单体型C-C、G-C和G-T均与肺癌发生风险无相关性(P>0.05),rs2233678的基因型分布与肺癌的临床病理学特征无相关性(P>0.05),rs2233679的基因型分布与肺癌病理类型呈弱相关(r=0.285,P=0.010)。结论 rs2233678和rs2233679多态性可能与福建汉族人群肺癌易感性无关,rs2233679的基因型分布与肺癌病理类型有一定的相关性。

泌尿、生殖系统

螺旋CT诊断囊性肾癌的价值,术前超选择性肾动脉化疗栓塞对小肾癌保肾手术的价值,13例囊性肾癌的影像学分析,局限性肾肿瘤的保肾手术治疗25例临床分析,谷胱甘肽转硫酶-Pi与缺氧诱导因子-1α在膀胱癌组织中的表达及意义组蛋白去乙酰酶抑制剂MS-275抑制膀胱癌的实验研究,经皮下注射树突状细胞治疗膀胱肿瘤的病理改变,汽化电切加黏膜下定期浸润注射吡柔比星预防膀胱癌复发,217例膀胱移行细胞癌外科治疗的临床分析,晚期前列腺癌骨转移的综合性治疗,