超声波、微波预处理对核桃粕蛋白肽钙螯合能力、结构及稳定性的影响

本研究基于超声波、微波预处理核桃粕蛋白肽及CaCl_(2)的混合物制备核桃粕蛋白肽钙螯合物。分析不同处理对核桃粕蛋白肽钙螯合率、结构变化及稳定性的影响。结果表明,相较未处理的核桃粕蛋白肽钙螯合物(WPP-Ca),超声波处理核桃粕蛋白肽钙螯合物(UP-WPP-Ca)和微波处理核桃粕蛋白肽钙螯合物(MP-WPP-Ca)的螯合率均有所提升,超声波和微波处理有效提高了肽钙螯合能力。基于紫外-可见吸收光谱、傅里叶变换红外光谱分析,发现超声波、微波主要是影响了核桃粕蛋白肽的氨基、羰基、羧基、酰胺键及羧酸盐基团等钙离子结合位点;X射线衍射结果表明超声波、微波处理改变了核桃粕蛋白肽的分子排列进而使核桃粕蛋白肽钙螯合物的结构更有序;荧光光谱结果表明超声波、微波处理促进了芳香族氨基酸与钙离子的螯合。此外,UP-WPP-Ca和MP-WPP-Ca在不同pH值、温度和胃肠道消化中表现出良好的稳定性。总之,超声波、微波预处理后进行的核桃粕蛋白肽钙螯合反应可提高其钙离子螯合能力和稳定性,结果对核桃粕蛋白肽钙螯合物的加工生产及补钙产品的开发具有一定的指导意义。

鱼卵肽钙复合物对大鼠体内促钙吸收作用的研究

通过构造缺钙大鼠模型,研究鱼卵肽钙复合物(EPP-Ca)对缺钙大鼠的补钙效果。结果表明,经过4周的补钙,EPP-Ca使缺钙大鼠增重25.53%,钙吸收率达65.28%,血清钙和血清碱性磷酸酶分别恢复到2.58mmol/L和177.13U/L,股骨重量、骨密度和骨钙含量分别达到877.31mg、0.22g/cm2和254.75mg/g,补钙效果显著优于无机钙,与酪蛋白磷酸肽钙复合物(CPP-Ca)效果相当。EPP-Ca有望成为新型的补钙制剂。

大豆分离蛋白肽钙螯合物的制备及表征

研究了酶解时间和酸法脱酰胺改性对脱植酸大豆分离蛋白肽钙离子螯合能力的影响,并对螯合物的结构特性及营养特性进行表征。结果表明:酶解240 min的肽有较好的钙结合量(57.85mg/g),螯合物得率为28.43%,脱酰胺后钙结合量和螯合物得率分别增加到75.37 mg/g、34.55%;氨基酸分析结果表明酸性氨基酸是参与螯合物形成的重要氨基酸;相对分子质量分布实验结果说明钙离子更倾向于结合相对分子质量大于等于1 000的肽段,螯合物得率高,但相对分子质量小于等于500的肽段是获得更高钙结合量螯合物的重要肽源;红外光谱分析表明钙结合后引起肽段结构的变化,肽链羧基中的O及氨基中的N是主要配位原子;体外消化吸收模拟实验制备的肽钙螯合物有较好的胃胰酶耐受性,经消化后肽段相对分子质量几乎没有变化,钙保留率稳定在87%左右,生物利用率达81.81%。

蛋清肽及肽钙配合物的制备

为获得高生物效价的补钙制剂及提高蛋清蛋白的附加值,首先对鸡蛋清进行酶法改性,筛选实验用酶,采用正交试验,分别对酶解条件及肽钙反应条件进行优化,并采用红外光谱法比较反应前后图谱的变化。结果表明:选择先碱性蛋白酶后中性蛋白酶进行双酶酶解,酶解条件为底物质量分数6%、碱性酶酶底比1:100、pH8.0、酶解时间3h;中性酶酶底比1:25、pH7.0、酶解时间3h。制备肽钙配合物最优反应条件为肽钙(CaCl2)质量比2.5:1、pH9.5、底物质量分数4%、温度55℃,在此条件下,可溶性钙含量为21.15mg/L,水解度为8.66%。制备蛋清肽时,使用双酶的水解效果优于单酶,蛋清肽与钙形成了双单齿配合物,其钙质量分数为8.75%。

海洋骨胶原低聚肽钙配合物的稳定性

以三文鱼骨为原料制备海洋骨胶原低聚肽钙配合物,以分子量分布和钙含量为指标,研究了热处理、pH和体外胃肠道模拟消化对海洋骨胶原低聚肽钙配合物稳定性的影响。结果表明:海洋骨胶原低聚肽钙配合物具有较好的热稳定性,各个分子量区间的比例变化不超过2%,配合物的钙含量无显著性差异;海洋骨胶原低聚肽钙配合物在酸性和碱性条件下,分子量小于1000u的总含量略有升高,但升高不到8%,钙含量有所降低,但在广泛的pH范围内仍然有65%以上的钙含量;海洋骨胶原低聚肽钙配合物经过蛋白酶消化后,分子量小于1000u的总含量略有升高,但升高不到6%,经过胃蛋白酶消化和胰蛋白酶共同消化后,仍然有40.5%的钙含量。这说明海洋骨胶原低聚肽钙配合物具有一定的热稳定性、pH稳定性以及消化稳定性,是一种具有潜力的肽钙补充剂产品。

鱼鳞胶原蛋白肽钙螯合物制备工艺的优化

采用响应面法对罗非鱼鳞胶原蛋白肽钙螯合物的制备工艺进行优化,建立了肽钙螯合率与时间、肽与氯化钙质量比、温度、pH的数学模型。最佳制备参数为:时间39min、肽与氯化钙质量比3.3∶1、温度61℃和pH7.2,此条件下肽钙螯合率的验证值为65.01%,与预测值(65.05%)无显著性差异。红外光谱分析表明罗非鱼鳞胶原蛋白肽与钙形成了螯合物。为新型钙制剂的开发及鱼鳞的高值化利用提供了理论依据。

海洋骨胶原低聚肽钙的分离纯化及结构鉴定

以三文鱼骨作为原料,以碳酸钙作为钙源制备出海洋骨胶原低聚肽钙,对其总蛋白含量、螯合率、得率进行测定,结果表明总蛋白含量为62.56%±0.26%,螯合率为51.38%±0.09%,螯合物得率为42.06%±0.10%。然后利用反相高效液相色谱(RP-HPLC)对其进行分离纯化,收集得到8个组分峰,利用Q-TOF质谱仪测定肽序列,共分析出22个肽段,分子量大多在1000 u以下。

胶原多肽钙的制备及小鼠应用试验

以制革厂准备工段的边角废料为原料,经酶两步法水解制备出高纯度的胶原多肽,选择合适的钙源使之和胶原多肽复合,制备出易于人体吸收、胶原与钙双补的新型补钙制剂,经小鼠应用试验证明效果良好。

牛骨蛋白酶解制取肽钙的研究进展

文章首先简要介绍了牛骨的成分,重点对羟基磷灰石和胶原蛋白的结构进行了描述;接着对常用酶的作用位点以及酶解的研究现状进行了详细介绍。通过对氨基酸螯合钙和多肽螯合钙的螯合和吸收机制进行比较,确定多肽螯合钙的优越性和研究的必要性,并对目前多肽螯合钙的结构分析方法,不同分子量多肽钙的分离以及多肽钙产品的研发情况进行了详细概括。

胶原多肽钙预防骨质疏松的研究

采用维甲酸对Wistar大鼠进行灌胃以建立骨质疏松模型,以葡萄糖酸钙作为阳性对照,同时采用维甲酸与胶原多肽钙共同灌胃的方法,通过测定骨钙、胫骨组织切片等指标,研究了胶原多肽钙对骨质疏松的预防作用。结果表明,适当摄入胶原多肽钙能够增加骨钙含量,使胫骨结构均匀,对骨质疏松有一定的预防作用。

离体牙短期应用酪蛋白磷酸多肽钙磷复合体再矿化的实验研究

目的:评价短期应用10%酪蛋白磷酸多肽钙磷复合体(complex of casein phosphopeptide and amorphous calcium phosphate,CPP-ACP)(商品名:Tooth Mousse护牙素)离体牙釉质片再矿化的功效。方法:将正畸需要拔出的离体前磨牙15颗从冠根向一分为二,共30个实验样本,用自凝材料包埋于塑料圈内,根据扫描电镜样品的要求打磨抛光,抛光后的牙釉质面积为3mm×3mm。用数字随机表的方法随机分成4个实验组和1个对照组,每组6个。对照组是用37.5%磷酸酸蚀浸泡牙釉质2 min后不用护牙素浸泡,实验组均用37.5%磷酸酸蚀浸泡牙釉质2min后分别用Tooth Mousse护牙素涂搽牙面30 min,置于蒸馏水中浸泡。每组浸泡的时间逐步累加,A、B、C、D实验组分别浸泡时间为1、5、10、20h。每组待第2天在同一时间涂搽护牙素及在蒸馏水中浸泡的步骤同第1天,每天更换蒸馏水一次。每组连续作用5次。扫描电镜观察及用能谱检测钙的质量分数,统计分析各组釉柱再矿化与浸泡时间的关系。结果:A、B、C、D实验组釉质表面钙质量分数是(67.38±0.89、67.63±0.56、67.71±0.52、69.11±0.27)和酸蚀组65.74±0.74之间的差异有统计学意义(F=21.568,P=0.000<0.01);用(Student-Newman-Keuls)法做多组间样本均数的两两统计比较分析,A、B、C组间差异均无统计学意义(P>0.05);D实验组与A、B、C组间差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:Tooth Mousse护牙素体外实验在蒸馏水环境中多次短时间每天20h浸泡离体牙釉质在减少脱矿和促进再矿化方面较实验其余3组作用显著。

鱼蛋白肽钙的分级及肽与钙的结合性能研究

以白鲢采肉后的鱼骨为原料制备鱼蛋白肽钙,用无水乙醇分级分离得到6个级分:水不溶性级分CA、50%、60%、70%、80%、90%乙醇不溶性级分CB、CC、CD、CE、CF,采用红外分析法和葡聚糖凝胶色谱法等手段比较了各级分间的差异。结果表明:各级分中均含有一定量的肽和钙,6个级分可以归为3类:CA得率最高,水溶性最差,钙通过化学键与分子量较大的肽结合;CB、CC相似,得率最低,钙通过化学键与小肽或氨基酸结合;而CD、CE和CF三者相似,水溶性好,钙呈游离态,通过物理吸附作用与鱼蛋白肽结合。

离体年轻恒牙片短期应用酪蛋白磷酸多肽钙磷复合体再矿化的实验研究

目的评价短期应用10%酪蛋白磷酸多肽钙磷复合体(CPP-ACP;商品名:Tooth Mousse护牙素)离体牙釉质再矿化的效果。方法将离体前磨牙制成牙釉质牙片作为标本,天平称重后用37.5%磷酸酸蚀浸泡2 min,吹干5 min后用天平称重。再将酸蚀后的牙片用Tooth Mousse护牙素涂搽牙面30 min,在蒸馏水中浸泡1 h,吹干5 min后用天平称重。依据作用时间的不同分为A^L等12个组。统计分析各实验组与酸蚀组浸泡后重量与时间的关系。结果经统计分析各组浸泡后的平均重量与对照组之间差异无统计学意义(P>0.05),各组组间比较差异也无统计学意义(P>0.05)。结论 Tooth Mousse护牙素的再矿化作用不是直线上升的而是呈曲线上升。

利用鱼糜漂洗水回收的蛋白肽制备肽钙复合物

以钙结合率为指标,对从鱼糜漂洗废水中回收的肌浆蛋白肽(recycled myogenpeptide,RMP)与钙离子的结合条件进行优化。最佳结合条件为p H9、35℃、钙离子浓度4 mmol/L、RMP浓度5 g/L、反应时间1h,此时钙结合率为85.00%。RMP-Ca复合物具有较好的酸碱稳定性,在p H 5~9范围内钙保留率高达85%以上。一定的加热处理会导致RMP-Ca复合物钙保留率下降,经过121.1℃高温处理后钙还能保留70.14%。RMP-Ca复合物具有很好的抗消化性,消化后钙保留率高达95.31%。

酪蛋白磷酸多肽钙磷复合体在口腔治疗中的研究进展

口腔的防龋保健作用及意义逐渐受到人们的关注。氟化物长期应用于抗龋的治疗,由于用量无法控制较易出现不良并发症。而酪蛋白磷酸多肽钙磷复合体作为一种新型的口腔抗龋用品,具有较好的再矿化作用,安全、有效、操作方便。该文就酪蛋白磷酸多肽钙磷复合体的结构特点、再矿化和对致龋菌的作用以及最新的临床研究等进行综述。

罗非鱼鱼鳞肽钙复合物的稳定性研究

以罗非鱼鱼鳞为原料制备肽-钙复合物,以钙的结合量为指标,研究了体外胃肠道模拟消化、小肠刷状缘膜酶、共存食物成分、pH、热处理等因素对罗非鱼鱼鳞肽钙复合物稳定性的影响。结果表明,罗非鱼鱼鳞肽钙复合物对消化酶、小肠刷状缘膜酶的降解具有较高的耐受性,对NaCl、乳糖具有较好的稳定性(p>0.05);但对50℃以上的热处理较为敏感,钙结合量显著下降(p<0.05)。鱼鳞肽钙复合物在pH2.0的酸性条件下易于解离,但在弱碱性条件比较稳定,pH9.0时钙结合率可达89.65%。推测肽钙复合物在小肠内主要以结合物的形式存在以阻止钙在碱性条件下的沉淀。

高钙含量肽钙螯合物的制备与表征分析

[目的]制备肽钙螯合物以提高钙的生物利用度。[方法]以羊骨胶原肽和CaCl_2为原料,综合考虑螯合率、螯合物得率和螯合物中的钙含量,确定高钙含量肽钙螯合物的制备工艺并对螯合物进行表征分析。[结果]胶原肽浓度90mg·mL^(-1),肽钙质量比为2∶1、pH8.0、40℃螯合30min,制备的螯合物,钙含量高达9.81%,远远高于螯合率最高时的1.26%。肽螯合Ca^(2+)前后:微观结构由疏松的片状变成致密的颗粒状;主物质的质荷比由1 230.57增加至2 278.69;脯氨酸含量变化最大,由10.96g·100g^(-1)降至5.62g·100g^(-1);螯合位点是肽链羧基中的O及氨基中的N。[结论]综上所述,综合考虑其螯合率、螯合物中的钙含量以及螯合物得率,得到高钙含量肽钙螯合物的制备工艺。在此工艺下肽钙螯合形成了新的化合物。此研究结果为新型补钙制剂的工厂化生产提供了参考。

大豆肽钙复合物的溶解稳定性研究

为了研究不同大豆肽钙复合物的溶解稳定性,以大豆多肽为原料制备大豆肽钙复合物,分析了50mg/mL浓度下肽钙溶液在离心前后的固形物含量与多肽含量,以及析出沉淀的组成成分,最后研究了超高温瞬时灭菌处理对不同浓度肽钙溶液凝胶形成的影响。结果表明,不同多肽所制备的肽钙复合物溶解稳定性有显著差异;BML-Ca在500mg/mL浓度下仍然为澄清溶液状态;在经过杀菌处理后,300～500mg/mL浓度下均产生了凝胶现象。因此,大豆肽钙复合物BML-Ca更加适合制备口服液产品的要求,最适的溶解浓度在200～300mg/mL。

大豆肽钙螯合物的制备、稳定性及表征

豆粕通过醇洗、酸沉、水解工艺制备大豆肽,并将大豆肽与钙离子进行螯合反应,制备大豆肽钙螯合物。测定了大豆肽钙螯合物的氨基酸组成及在磷酸盐溶液中、不同pH下的稳定性,并对大豆肽钙螯合物进行DSC、TGA、Zeta电位、XRD分析。结果表明:大豆肽钙螯合物的钙结合量为53.03 mg/g,与CaCl2相比,大豆肽钙螯合物具有更高的钙保留率;具有较高钙螯合能力的大豆肽的相对分子质量主要集中在小于1 kDa的范围内;大豆肽与钙离子螯合后,谷氨酸和天冬氨酸含量由34.33%提高至49.83%;大豆肽钙螯合物在不同pH条件下均未发生较大程度的解离;大豆肽与钙离子反应后,电负值由-37.73 mV降到-12.32 mV;大豆肽钙螯合物在XRD图谱中的衍射峰收窄,峰值由20°偏移至22.5°,同时在42.5°出现1个微弱的衍射峰,且氯化钙的特征峰消失,表明大豆肽与钙离子形成了新的化合物;大豆肽钙螯合物具有更好的热稳定性。

钙结合卵黄高磷蛋白磷酸肽的制备及其肽钙螯合物的结构表征

以鸡蛋蛋黄为原料制备卵黄高磷蛋白磷酸肽(phosvitin phosphopeptide,PPP),并与钙离子螯合制备肽钙补充剂。通过高温高压处理卵黄高磷蛋白,先用胰蛋白酶酶解,以水解度和肽钙结合率为指标,进一步优化碱性蛋白酶的酶解条件以制备PPP。PPP与钙螯合获得螯合物PPP-Ca,通过紫外光谱、红外光谱分析、圆二色谱分析、扫描电镜和Zeta电位分析表征PPP-Ca的结构特性。结果表明最佳酶解条件为加酶量5%、酶解90 min、pH 9.0、温度40℃,在此最优条件下水解度为(25.45±0.17)%,肽钙结合率为(93.41±1.10)%。结构表征发现PPP-Ca主要通过羧基、氨基和磷酸基团相互作用结合,PPP和钙离子结合后其结构变得紧密有序,且有聚集现象。