真核肽链释放因子3a/gspt1在肝癌组织中的表达

目的 检测肝细胞癌组织中真核肽链释放因子（eRF）3a（eRF3a）/gspt1的表达与临床病理特征的关系,探讨eRF3a/gspt1在肝细胞肝癌发生和进展中的作用。方法 应用实时定量聚合酶链反应（Real-time PCR）、Western blot法检测30例肝细胞癌患者手术切除的癌组织和癌旁组织中eRF3a/gspt1的mRNA和蛋白表达。结果 73.3%肝癌组织中eRF3a/gspt1的mRNA表达显著高于癌旁组织,66.7%肝癌组织中eRF3a/gspt1的蛋白表达显著高于癌旁组织,肝癌组织中eRF3a/gspt1的mRNA表达与性别、年龄、肿瘤大小、甲胎蛋白（AFP）、肿瘤包膜和门脉癌栓差异均无相关（P〈0.05）,而与乙肝、病理分级有关,肝癌组织中eRF3a/gspt1的蛋白表达与性别、年龄、肿瘤大小、AFP、肿瘤包膜和门脉癌栓差异均无相关（P〈0.05）,而与乙肝、病理分级有关,肝癌组织中eRF3a/gspt1的mRNA表达和蛋白表达之间有相关（P〈0.05）。结论 eRF3a/gspt1的高表达可能增加肝癌细胞的蛋白合成,促进肝癌的进展。

水稻苗期致死突变体的鉴定及其基因定位

肽链释放因子RF1通过识别终止密码子在翻译终止过程中起重要调控作用。获得水稻苗期致死突变体,明确OseRF1-1表达模式,为进一步研究OseRF1-1功能奠定基础。以粳稻花之舞和T-DNA插入突变体为材料,利用Tail-PCR、石蜡切片技术、Southern杂交和Northern杂交技术鉴定一个肽链释放因子eRF1-1的T-DNA单拷贝插入突变体ls。采用DNAMAN6.0软件和SMART对OseRF1-1进行生物信息学分析,利用RT-qPCR方法分析OseRF1-1的组织特异性表达。通过PEG介导方法转化拟南芥,明确OseRF1-1的亚细胞定位。结果显示,ls突变体植株在3-5叶分蘖期迅速死亡;ls突变体叶鞘与分蘖节连接区域褐化,分蘖节越往下部位症状较严重;Tail-PCR分析结果显示,ls突变体T-DNA插入时丢失了T-DNA的右边界和NOS的终止子序列导致GUS和OseRF1-1融合转录,而GUS的终止密码子仍然存在,进而引起OseRF1-1不能进行正常翻译;ls突变体转录出GUS和OseRF1-1的融合转录子;OseRF1-1在各组织中均检测到表达且在穗中高表达;该基因定位于细胞核和细胞质。ls突变体导致水稻苗期致死可能是由于T-DNA插入OseRF1-1导致该基因不能正常转录引起。