注射用脑蛋白水解物对大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞增殖与氧化损伤的影响

目的:探讨注射用脑蛋白水解物对大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞的增殖与过氧化氢氧化损伤的影响。方法:采用MTT法,观察不同浓度的注射用脑蛋白水解物对体外培养的大鼠肾上腺嗜铬瘤细胞(PC12)生长及过氧化氢损伤保护的作用。结果:注射用脑蛋白水解物对PC12细胞的增殖及氧化损伤的保护作用存在量效关系。结论:注射用脑蛋白水解物可促进PC12细胞生长,并可保护细胞减轻过氧化氢的损伤。

牵正散合大补阴丸对蛋白酶抑制因子Ⅰ诱导的帕金森病体外细胞模型大鼠肾上腺嗜铬瘤细胞的增殖和凋亡的影响

目的观察牵正散合大补阴丸水煎剂对蛋白酶抑制因子I(proteasome inhibitor I,PSI)诱导的帕金森病体外细胞模型大鼠肾上腺嗜铬瘤细胞(pheochromocy-toma cells,PC12)增殖、凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法共设立9组,分别是模型组、模型加药组7组(PSI+Q0组,PSI+Q25组,PSI+D0组,PSI+D25组,P+D25+Q25组,P+D25+Q0组,P+Q25+D0组)以及空白对照组。流式细胞术检测牵正散合大补阴丸水煎剂对PC12细胞模型中细胞凋亡的影响;NBT核黄素比色法检测不同浓度药物处理PC12细胞模型后细胞上清液中总超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)含量;蛋白免疫印迹法检测PC12细胞模型中泛素/蛋白酶体途径中相关因子TBP1-19、PA28α的表达水平。结果(1)与空白对照组相比,模型组与模型加药组细胞坏死、凋亡呈升高趋势;与模型组相比,P+Q25+D0组及P+Q0组、P+Q25组细胞坏死、凋亡趋势下降。(2)与空白对照组相比,模型组的SOD值降低(P<0.05);与模型组相比,各模型加药组SOD值升高(P<0.05)。(3)与空白对照组相比,模型组TBP1-19、PA28α蛋白的表达降低;与模型组相比,各模型加药组TBP1-19、PA28α蛋白的表达水平升高。结论牵正散、大补阴丸水煎剂及其合方均可改善PSI诱导的PC12细胞的细胞坏死及凋亡情况,可能是通过影响泛素/蛋白酶体途径中相关蛋白TBP1-19和PA28α的表达水平来改善PSI诱导的PC12细胞模型的凋亡和SOD活性,且不同浓度的合方对PSI诱导的PC12细胞模型保护程度不同。

肾上腺嗜铬细胞瘤1例报告

患者男,58岁。因头痛、心慌、腹痛,阵发性高血压3年于1994年3月30日入院。3年前偶头痛、心慌、腹痛,每次发作持续3小时,每周发作1次。1个月前发作频繁,血压高达21.23/9.92Kpa。门诊经CT、B超检查拟诊:右肾上腺嗜铬细胞瘤既往有红斑狼疮,长期服用强的松。查体:血压19/

牛肾上腺嗜铬细胞瘤16例的病理形态分析

目的：分析16例牛肾上腺嗜铬细胞瘤的病理形态。方法：选取2015年1月-2016年1月收检的肾上腺嗜铬细胞瘤病牛16例作为样本。取肿瘤标本，经福尔马林固定后，采用Giemsa嗜铬染色方法染色，并于OLYMPUS—BH2显微镜下观察细胞的病理形态及组织学特点。结果：16例病牛肿瘤病灶均位于单侧。肾，数量均为单个，形状多呈圆形，平均直径（6．37±0．14）cm，切面颜色以土黄色为主，肿瘤组织类型以巢团型为主，细胞形态多角形占比最大，13例病牛细胞染色结果呈阳性，癌细胞可见棕黑色颗粒。结论：应采用Giemsa嗜铬染色方法对牛肾上腺嗜铬细胞瘤的病理形态加以分析，以了解其病理特点，为人类肾上腺嗜铬细胞瘤的治疗提供参考。

嗜铬细胞瘤合并胰腺炎1例报告

嗜铬细胞瘤（pheochromocytoma,PHEO）起源于肾上腺髓质、交感神经节或其他部位的嗜铬组织,瘤体持续或间断地释放大量儿茶酚胺,引起持续性或阵发性高血压和多个器官功能代谢紊乱。PHEO是一种少见疾病,但随着近年来诊断技术的进展,本病的发现率逐渐开高,约占高血压患者的1%左右,在肾上腺意外瘤中占到4%。对PHEO作出正确诊断非常重要。

膀胱嗜铬细胞瘤(附7例报告)

膀胱嗜铬细胞瘤为一种罕见的异位嗜铬细胞瘤,本文报告了我院收治的7例。膀胱嗜铬细胞瘤最具特征性的临床表现是与排尿有关的高血压发作,及头痛、心悸、血尿、视物模糊或大汗。通过测定血、尿中升高的儿茶酚胺及其代谢产物可确立术前诊断,定位诊断则首推 CT检查。膀胱嗜铬细胞瘤的治疗为手术切除肿瘤,大多数病人可获痊愈。

嗜铬细胞瘤的CT诊断(附20例报告)

嗜铬细胞瘤大部分发生于肾上腺髓质,另有10%左右发生于肾上腺以外的嗜铬组织。目前公认CT是诊断本病的可靠方法,结合临床和化验可达到定位、定性的目的。本文收集我院1987年7月—1989年8月间经手术及病理证实的20例嗜铬细胞瘤,就其CT表现及某些病理基础做一探讨分析,供同道参考。

9种高血压 需警惕嗜铬细胞瘤

今年世界高血压日的主题是'知晓你的血压'。而嗜铬细胞瘤引发的继发性高血压由于症状不典型,70%的患者会被误诊。因此,如果出现不明原因的高血压,服用降压药后无效或出现反常性反应时,需引起警惕。今年50岁的唐阿姨,是一名家庭妇女,2个月前突然出现头痛头晕、心慌心跳等症状,血压莫名其妙地往上蹿,最高时竟达到190/110mm Hg!更让人焦虑的是,即使唐阿姨严格遵照医嘱服用降压药,也无法把血压降下来,这让她的病情时刻处于凶险的状态中。

葡萄内脂对PC12神经细胞损伤的保护作用研究

目的探讨葡萄内脂对过氧化氢(H2O2)诱导的肾上腺嗜铬瘤细胞(PC12)神经细胞损伤的保护作用。方法体外培养PC12细胞,建立PC12细胞过氧化氢损伤模型。将处于对数生长期的PC12细胞分为正常对照组、模型组、阳性对照组、5μmol/L葡萄内脂组、25μmol/L葡萄内脂组、50μmol/L葡萄内脂组。采用不同浓度(5μm/L,25μm/L和50μm/L)葡萄内脂对PC12细胞进行干预,通过测定细胞存活率、细胞上清液中乳酸脱氢酶水平和细胞内氧化活性物质(ROS)水平评价干预效果。结果模型组PC12细胞存活率显著低于正常对照组及阳性对照组; 25μmol/L、和50μmol/L葡萄内脂组PC12细胞存活率(与阳性对照组相当)显著高于模型组,随着葡萄内脂浓度的增加,H2O2诱导损伤的PC12细胞的存活率呈升高趋势,组间比较差异有统计学意义(P <0. 05)。模型组PC12细胞上清液乳酸脱氢酶水平明显高于正常组及阳性对照组,5μmol/L、25μmol/L和50μmol/L葡萄内脂组细胞上清液乳酸脱氢酶水平(与阳性对照组相当)均显著低于模型组,且随着葡萄内脂浓度的增加,乳酸脱氢酶水平呈降低趋势,组间比较差异有统计学意义(P <0. 05)。模型组PC12细胞ROS水平显著高于正常对照组及阳性对照组,5μmol/L、25μmol/L和50μmol/L葡萄内脂组PC12细胞ROS水平(与阳性对照组相当)均显著低于模型组,且随着葡萄内脂浓度的增加,ROS水平呈降低趋势,差异有统计学意义(P <0. 05)。结论葡萄内脂对H2O2诱导损伤的PC12神经细胞具有明显的保护作用,可能与其能维持细胞膜的完整性、发挥抗氧化作用有关。

嗜铬细胞瘤手术3例配合体会

嗜铬细胞瘤是机体嗜铬性组织内生长出来的一种分泌大量儿茶酚胺的肿瘤,90％属良性。大部分发生于肾上腺髓质。临床上可因肿瘤分泌大量的肾上腺素和去甲肾上腺素,出现高血压和代谢的改变,手术切除可获痊愈。我院自1988年以来手术治疗三例男性2例,女性1例,年龄21—57岁。

B超实时显象诊断嗜铬细胞瘤

本文报告15例B超诊断经手术病理证实的嗜铬细胞瘤,着重探讨B超诊断的价值。 仪器与方法应用Aloka SSD—256、ATL MK—600型超声诊断仪。探头频率分别为3.5MH_z和3.0MH_z,用135机摄相或录相记录。

可乐定抑制试验诊断嗜铬细胞瘤

嗜铬细胞瘤虽然有高血压,头痛和大汗等临床特征,但要与原发性高血压鉴别,并非易事。因此最终诊断不得不依靠血或尿中儿茶酚胺(CA)及其代谢产物的测定,尽管如此,生化测定结果莫棱两可。患者的诊断,仍是临床上的一个难题。虽然组胺、酪胺及胰高血糖素等试验有助于最终确定诊断。

何为嗜铬细胞瘤?

嗜铬细胞瘤是一种发生于肾上腺髓质内嗜铬细胞的肿瘤。由于这些细胞中含有一些容易被二铬酸钾染成棕黄色的颗粒,因此,称为嗜铬细胞。这种化学反应称为嗜铬反应。此外,交感神经节内也有一些嗜铬细胞,也可发生嗜铬细胞瘤。约有10％的嗜铬细胞瘤为恶性。嗜铬细胞瘤最突出的症状是继发性高血压。 嗜铬细胞瘤多发生于右侧肾上腺,少数为双侧性的,还有一些异位的、肾上腺以外的嗜铬细胞瘤。这类肿瘤可释放肾上腺素和去甲肾上腺素到血流中。

肾上腺外副神经节瘤的诊断与治疗

1908年Alezai和Peyron首先报道了一组副神经节瘤病，1912年，Pick建议将肾上腺内嗜铬细胞瘤命名为嗜铬细胞瘤，而肾上腺外嗜铬性肿瘤称为副神经节瘤。它起源于神经嵴，与交感神经同源并伴行，由具有神经分泌功能的主细胞群构成。其分布较广泛，可分布于有副神经节的区域，自颅底至盆腔的中轴线附近，以腹膜后较为常见，其次纵隔、颈部、颅底、膀胱等，大多数为非功能性，

肾上腺外副神经节瘤47例临床病理分析

目的探讨肾上腺外副神经节瘤临床病理特点、生物学行为。方法对安徽省立医院2013年1月至2018年12月47例肾上腺外副神经节瘤病例的临床表现、组织学特点及免疫组织化学染色结果进行分析。结果47例肾上腺外副神经节瘤,其中男性23例,女性24例,年龄范围为31~75岁,平均年龄51.0岁。24例位于腹膜后,20例位于头颈部,3例位于膀胱。1例位于腹膜后者伴有肝转移,其余46例术中未发现远处转移。肿瘤实质由主细胞和支持细胞组成。免疫组织化学染色显示主细胞表达嗜铬素A(CgA)、突触素(Syn)、神经细胞黏附分子56(CD56)、不表达细胞角蛋白(CK),支持细胞表达酸性钙结合蛋白(S⁃100)。与其余46例肾上腺外副神经节瘤相比,发生肝转移者无特殊病理形态学特征。结论肾上腺外副神经节瘤组织学形态与生物学行为不一。所有肿瘤均有转移潜能,需要长期随访。

miR-214-3p对缺糖缺氧再灌注诱导PC12细胞凋亡的作用及机制

目的探讨miR-214-3 p对缺糖缺氧再灌注诱导PC12细胞凋亡的作用及机制。方法利用数据库TargetScan 7.2预测miR-214-3 p和B淋巴细胞瘤因子2样蛋白2(BCL2L2)之间的结合位点;选取人胚肾293T细胞共转染分为BCL2L2 mRNA 3′UTR野生型荧光素酶报告载体+miR-214-3 p mimic(wt+mimic)组、BCL2L2 mRNA 3′UTR野生型荧光素酶报告载体+mimic negative control(wt+NC)组、BCL2L2 mRNA 3′UTR突变型荧光素酶报告载体+miR-214-3 p mimic(mut+mimic)组及BCL2L2 mRNA 3′UTR突变型荧光素酶报告载体+mimic NC(mut+NC组),检测4组293T细胞荧光素酶的发光活性;肾上腺嗜铬神经细胞瘤12(PC12)细胞转染miR-214-3 p mimic(mimic组)、miR-214-3 p mimic NC(mimic NC组)、miR-214-3 p inhibitor(inhibitor组),miR-214-3 p inhibitor NC(inhibitor NC组),采用蛋白免疫印迹法检测BCL2L2蛋白表达;PC12细胞作为对照(Control组),用缺氧缺糖(OGD/R)处理PC12细胞构建缺血再灌注细胞模型(OGD/R组),用miR-214-3 p mimic转染PC12细胞,然后用OGD/R处理PC12细胞(OGD/R+mimic组),采用实时荧光定量聚合酶链式反应检测Control组和OGD/R组miR-214-3 p及BCL2L2 mRNA表达,采用蛋白免疫印迹法检测Control组、OGD/R组及OGD/R+mimic组裂解胱天蛋白水解酶3(Cleaved-caspase3)、B淋巴细胞瘤-2相关X(Bax)及B淋巴细胞瘤因子2(Bcl2)的蛋白表达。结果数据库Targetscan 7.2预测结果表明,miR-214-3 p与BCL2L2的3′UTR区之间存在结合位点;荧光素酶报告基因实验结果表明,wt+mimic组荧光素酶活性低于wt+NC组,mut+mimic组和mut+NC中荧光素酶活性无明显差异;mimic NC组BCL2L2的蛋白表达高于mimic组,inhibitor NC组BCL2L2的蛋白表达低于inhibitor组(P<0.05);与Control组比较,OGD/R组PC12细胞中BCL2L2 mRNA和蛋白表达水平降低、miR-214-3 p mRNA表达升高,差异有统计学意义(P<0.05);OGD/R组Cleaved-caspase-3和Bax表达分别高于Control组、低于OGD/R+mimic组,但Bcl2表达分别低于Control组、高于OGD/R+mimic组(P<0.05)。结论过表达miR-214-3 p可靶向结合并下调BCL2L2的表达,从而加速PC12细胞的凋亡。

低氧引起PC12细胞保护性自噬的激活

目的 初步探讨低氧对PC12细胞自噬功能的影响。方法 应用低氧培养箱给予实验组细胞1%氧浓度的低氧处理,对照组置于正常含氧的培养箱中。首先,实验组细胞分别低氧处理6、12、24 h,用Western blotting检测自噬相关蛋白LC3和Beclin1的表达,用RT-PCR检测LC3 m RNA的变化,用透射电子显微镜（透射电镜）检测自噬小体的变化;其次,给予自噬抑制剂3-MA后,用MTT检测细胞活力,用caspase3活性检测试剂盒检测caspase-3的活性,用Western blotting方法检测cleaved caspase-3的表达。结果 1随着低氧时间延长,PC12细胞自噬相关蛋白LC3及Beclin1表达增高,12~24 h最高,随后下降,LC3 m RNA水平也出现相应增高趋势。2给予自噬抑制剂3-MA能进一步降低低氧处理后细胞活力,而caspase-3的活性增强,其活性形式表达增高。结论 自噬在PC12细胞发生低氧被激活,并且可能通过抑制凋亡发挥保护作用。

他莫昔芬介导小胶质细胞LRRK-2表达对炎症刺激PC12细胞的影响

目的探讨他莫昔芬对小胶质细胞的富含亮氨酸重复序列激酶2(LRRK2)基因及相关炎症因子表达的影响。方法取原代小胶质细胞分为CON组、脂多糖(LPS)组、LPS+他莫昔芬组、LPS+LRRK2组;以LPS刺激激活小胶质细胞,用他莫昔芬调控小胶质细胞激活;将各组小胶质细胞与大鼠肾上腺嗜铬瘤细胞(PC12)细胞共培养24 h;Western Blot法检测小胶质细胞的LRRK2、一氧化氮合成酶(iNOS)表达,酶联免疫吸附法(ELISA)测定TNF-α、IL-1β水平;Hochest染核法检测PC12细胞凋亡/存活比。结果他莫昔芬抑制LPS刺激后小胶质细胞的LRRK2表达,通过抑制LRRK2下调iNOS、TNF-α及IL-1β释放,进而降低小胶质细胞与PC12细胞共培养体系炎症表达及PC12细胞凋亡/存活比。结论 LRRK2是小胶质细胞炎症因子iNOS释放的上游调控靶点,他莫昔芬可通过调控LRRK2基因抑制小胶质细胞激活,从而减轻炎症相关多巴胺能神经元损伤。

Preso在PC12细胞氧化应激损伤中的作用

目的通过建立大鼠肾上腺髓质嗜铬瘤分化细胞株(PC12)氧化应激损伤模型,研究一类新型结构蛋白脊椎形态发生突触后致密物质95(PSD-95)相关调节因子(Preso)在氧化应激损伤中的作用以及有可能的作用方式。方法建立PC12细胞氧化应激损伤模型,通过Western blot法检测损伤后Preso蛋白表达变化;通过干涉Preso蛋白表达,四甲基啖唑蓝(MTT)检测细胞存活率及乳酸脱氢酶(LDH)检测细胞损伤程度评价Preso在氧化应激损伤中的作用;使用地佐环平(MK-801)阻断离子型谷氨酸受体(NMDAR)激活,然后通过MTT法检测细胞存活率及LDH法检测细胞损伤程度,分析Preso在氧化应激损伤中可能起作用的途径。结果氧化应激损伤能够使Preso蛋白表达增高,而干涉Preso蛋白表达能够有效提高氧化应激损伤后细胞存活率,而抑制NMDAR激活会削弱干涉Preso蛋白表达的细胞保护作用。结论 Preso对于氧化应激损伤起到了促进的作用,干涉Preso表达可减轻细胞氧化应激损伤;Preso蛋白很可能通过结合突触后致密物质95进而促进NMDA受体激活,起到加重细胞氧化应激损伤作用。

锰对PC12细胞的增殖抑制及其Erk1/2活化表达

目的 探讨锰在细胞丝裂原活化蛋白激酶信号转导通路Erk1/2活化表达的作用及其相互之间的关系 ,研究其对基底神经节损伤作用的机制。方法 取对数生长期PC12细胞 ,用含 2 0 0、40 0、60 0、80 0 μmol/LMnCl2 的培养液 ,分别作用 1、2、3、4d ,噻唑蓝 (MTT)比色试验、平板集落形成实验和台盼蓝拒法筛选锰的细胞毒性剂量 ;免疫印记法 (Western blot)检测磷酸化Erk1/2 (p Erk2 )水平。结果 MTT和平板克隆形成实验检测结果显示 2 0 0～ 80 0 μmol/LMnCl2 作用 1、2、3、4d均对PC12细胞株有显著的抑制作用 ,且呈剂量和时间依赖效应关系 ,而且 60 0 μmol/LMnCl2 作用 4d对PC12的抑制率可达 5 0 %以上。Western blot结果显示 60 0 μmol/LMnCl2 作用 1、2、3、4d可见p Erk2逐渐降低 ,其中作用 2d时较对照明降低了 75 % (n =3 ,P <0 0 5 ) ,2 0 0、40 0、60 0 μmol/LMnCl2 分别作用 4d时 ,p Erk2亦逐渐降低 ,当 40 0 μmol/LMnCl2 作用 4d时较对照明降低了 78% (n =3 ,P <0 0 1)。结论 使用Erk通路MEK1/2特异性阻制剂PD980 5 9实验结果表明 :锰可能通过MEK1/2磷酸化下游的Erk1/2 ,下调p Erk。锰对PC12细胞的毒性作用可能是通过关闭胞外信号调节激酶(ERK)