六味地黄丸对肾上腺皮质激素型肾阴虚小鼠的药效学研究

目的 观察六味地黄丸对肾上腺皮质激素型肾阴虚小鼠的滋阴补肾作用。方法 制作小鼠肾阴虚模型进行耐疲劳、耐寒、耐缺氧、吞噬碳粒和体液免疫试验。结果 六味地黄丸呈剂量依赖性延长肾阴虚小鼠游泳和耐缺氧时间 ,提高耐寒能力 ,增加碳粒廓清指数及抗体生成能力。

促肾上腺皮质激素型垂体瘤术后一过性低血钾三例

例1患者女，34岁，间断性头痛头晕5年，近1个月加重伴恶心。体格检查：满月脸、水牛背及向心性肥胖，轻微外伤后即有皮肤淤血及瘀斑。垂体增强磁共振成像（MRI）示：垂体右部见类圆形低信号影，大小约0．7cm×0．5cm，强化程度低于垂体正常实质强化。2016年3月31日行经鼻蝶垂体瘤切除术。病理学诊断为促肾上腺皮质激素（ACTH）型垂体腺瘤。手术路人为经鼻蝶垂体瘤切除术，患者术后行常规补钾，但出现一过性严重低血钾症状。患者手术前后血钾离子水平变化特征见图1。

吸入型肾上腺皮质激素在哮喘或慢阻肺中的应用评价

目的:旨在回顾此类药物的进展和临床评价以期为临床合理用药提供参考。方法:检索和采用中、外文献的综述。结果及结论:伴随对哮喘和慢性阻塞性肺疾病认识的更新,吸入性肾上腺皮质激素疗效确切,在治疗支气管哮喘、气管炎、慢性阻塞性肺疾病发作期的治疗价值已得到大多数学者的肯定与共识。

下丘脑室旁核区促肾上腺皮质激素释放激素Ⅰ型受体表达及信号通路的研究进展

本文就下丘脑室旁核区促肾上腺皮质激素释放激素Ⅰ型受体表达的影响因素、相关的信号通路作一综述。在生理状态下 ,大鼠促肾上腺皮质激素释放激素Ⅰ型受体在下丘脑室旁核区的表达非常低 ,急、慢性应激、促肾上腺皮质激素释放激素、脂多糖促进下丘脑室旁核区促肾上腺皮质激素释放激素Ⅰ型受体表达 ,而大剂量糖皮质激素抑制下丘脑室旁核区促肾上腺皮质激素释放激素Ⅰ型受体表达。促肾上腺皮质激素释放激素Ⅰ型受体是与G蛋白相耦联的跨膜结构的受体 ,第二信使为环腺苷一磷酸 ,后者激活蛋白激酶A信号途径 ,促肾上腺皮质激素释放激素的诸多作用都是通过此信号途径实现的。

人促肾上腺皮质激素释放因子Ⅰ型受体EC1片段在原核系统中的可溶性表达

目的:研究人促肾上腺皮质激素释放因子Ⅰ型受体(hCRFR1)EC1区蛋白片段在原核表达系统中可溶性表达的影响因素。方法:以pcDNA3.1-hCRFR1全长质粒为模板,PCR扩增EC1区分别编码118和88个氨基酸残基(分别对应融合蛋白GST-EC1118和GST-EC188)的片段,将其插入pGEX-4T2载体,转化大肠杆菌BL21(DE3),用IPTG诱导目标蛋白表达;采用GSTrap FF亲和纯化柱对目标蛋白进行纯化,并用Western印迹证实。结果:与GST-EC1118相比,GST-EC188可溶性表达增加,为下一步hCRFR1相关研究的开展奠定了基础。结论:hCRFR1的EC1区M1～N19及N108～V118两个片段影响该区域在原核系统中表达的可溶性,推测可能与富含疏水性氨基酸有关。

促肾上腺皮质激素释放因子1型受体拮抗剂:21-羟化酶缺陷症治疗新曙光

21-羟化酶缺陷症(21-OHD)是以皮质醇缺乏,伴或不伴醛固酮缺乏和高雄激素血症为主要特征的一类疾病,需终生补充外源性糖/盐皮质激素治疗。为控制高雄激素血症常需超常规剂量的外源性糖皮质激素,但效果仍不理想。促肾上腺皮质激素释放因子(CRF)1型受体拮抗剂可直接阻断促肾上腺皮质激素生成,抑制肾上腺源性雄激素产生,减少糖皮质激素治疗剂量,从而降低不良反应发生率。现就21-OHD治疗及CRF1型受体拮抗剂研究现状作一综述。

促肾上腺皮质激素释放激素1型受体拮抗剂CP154,526潜在靶点预测研究

目的虚拟筛选促肾上腺皮质激素释放激素1型受体拮抗剂(CP154,526)的潜在作用靶点。方法本研究以CP154,526为研究对象,以PharmMapper服务器为工具,采用反向分子对接法筛选它的潜在靶点,并采用PyRx 0.8软件中Autodock vina进行正向分子对接验证。结果靶蛋白转甲状腺素蛋白(TTR)与CP154,526的打分排前,它们的药效团分子特征一致。CP154,526与TTR的核心氨基酸有相互作用。结论 TTR可能是CP154,526的作用靶蛋白之一。

蝶窦内异位沉默型稀疏颗粒型促肾上腺皮质激素细胞腺瘤一例

本文报道发生于蝶窦内异位沉默型稀疏颗粒型促肾上腺皮质激素细胞腺瘤一例。患者女,60岁,颅脑CT及MRI检查示蝶窦内实性肿块,蝶窦窦壁变薄,局部见骨质破坏,累及枕骨斜坡。MR增强扫描病灶似筛泡样强化,同时伴有空泡蝶鞍。病理证实为蝶窦内异位稀疏颗粒型促肾上腺皮质激素细胞腺瘤,结合患者阴性临床检测,最终诊断为蝶窦内异位沉默型稀疏颗粒型促肾上腺皮质激素细胞腺瘤。

早年心理创伤与促肾上腺皮质激素释放激素受体1型基因多态性对视觉空间记忆的影响

目的探讨早年创伤与促肾上腺皮质激素释放激素受体1型(CRHR1)基因多态性对工作记忆的影响。方法根据暴露于唐山大地震的情况将受试者分为婴儿期暴露组(n=176)、胎儿期暴露组(n=172)、对照组(n=187);胎儿期暴露组又分为孕早期(1~3个月,n=50)、孕中期(4~6个月,n=59)、孕晚期(7~9个月,n=63)。采用简易视觉空间记忆测验(BVMT-R)和霍普金斯词汇学习测验(HVLT-R)分析3组人群的工作记忆情况;提取受试者外周血中的DNA,采用荧光定量PCR方法分析CRHR1 rs242924和rs7209436基因多态性,采用两因素析因设计资料的方差分析方法分析影响工作记忆的因素(地震应激和基因分型)是否具有交互作用。结果胎儿期暴露组、婴儿期暴露组BVMT-R总分较对照组明显下降;CRHR1基因型分为A/T基因携带者和C基因携带者2组,C基因型携带者在婴儿期、胎儿期暴露组中的BVMT-R总分比对照组均明显降低[(22.5±8.1)分比(28.9±5.7)分,t=-4.231,P<0.01;(23.0±8.5)分比(28.9±5.7)分,t=-3.201,P<0.05];对照组C基因携带者的BVMT-R总分比A/T基因携带者升高[(28.9±5.7)分比(25.8±7.3)分,t=-2.215,P<0.05]。地震暴露组和基因型两因素交互作用于BVMT-R总分(F=4.028,P<0.05)。结论胎儿期和婴儿期遭受地震创伤对视觉空间记忆存在持续性的潜在影响;早年地震创伤与CRHR1易感基因型的交互作用可能是视觉空间记忆受损的主要原因。

温和灸对慢性内脏痛敏模型大鼠结肠CRFR2表达的影响

目的:观察温和灸对慢性内脏痛敏(Chronic Visceral Hyperalgesia,CVH)模型大鼠行为学及结肠组织促肾上腺皮质激素释放因子2型受体(Corticotrophin Releasing Factor Receptor 2,CRFR2)蛋白及其mRNA表达的影响。方法:采用乳鼠结直肠扩张(Colorectal Distention,CRD)刺激建立CVH大鼠模型,模型制备成功后选取双侧天枢、上巨虚穴分别进行温和灸及假灸干预,1次/d,连续7 d。全部干预结束后,以腹部撤回反射(Abdominal Withdrawl Reflex,AWR)评分作为检测大鼠内脏痛敏的行为学指标;采用免疫组织化学法、实时荧光定量PCR法观察结肠组织CRFR2蛋白及其mRNA的表达。结果:在不同强度的CRD刺激下,与正常组相比,模型大鼠AWR评分升高(P<0.01)。温和灸组干预后,大鼠AWR评分下降(P<0.01)。模型组大鼠CRFR2蛋白及其mRNA表达均高于正常组(P<0.01),温和灸干预后,CRFR2蛋白及其mRNA表达进一步升高(P<0.01)。假灸组与模型组比较,差异无统计学意义。结论:温和灸有效缓解CVH模型大鼠内脏痛敏状态,与其升高结肠组织CRFR2蛋白及其mRNA的表达有关。

促肾上腺皮质激素释放激素及受体在婴儿痉挛症致痫组织中的表达

目的婴儿痉挛症(Infantile spasm,IS),又称West综合症,属于年龄依赖性癫痫综合症,脑组织促肾上腺皮质激素释放激素(Corticotropin releasing hormone,CRH)多被认为是IS的可能致病机制,目前尚未在人IS患者致痫灶中得到直接依据。试验研究IS患者手术切除致痫灶中CRH的表达,探讨CRH信号途径与IS癫痫痉挛发作及发病机制的相关性。方法选取2011年6月-2014年6月17例IS患者临床手术切除的致痫灶标本与6例尸检正常对照作比较,利用Real-time PCR、Western Blot和免疫组织化学检测IS致痫灶标本中CRH和促肾上腺皮质激素释放激素1型受体(Corticotropin releasing hormone receptor 1,CRHR1)的表达和细胞定位,分析其与癫痫发作的相关性。进一步检测下游蛋白激酶C(Protein kinase C,PKC)信号的表达,分析其与CRHR1及癫痫发作的关系。结果在17例IS致痫灶标本中,CRH和CRHR1的表达较对照组明显升高。CRH主要在神经元表达,CRHR1则分布于神经元、星形胶质细胞和小胶质细胞。CRH和CRHR1的表达水平与癫痫发作频率存在相关性。PKC高表达于IS致痫灶,分布于神经元、星形胶质细胞和小胶质细胞,且与CRHR1的表达水平及癫痫发作频率存在相关性。结论 CRH、CRHR1及其下游信号PKC高表达于IS致痫灶,且与痉挛性癫痫发作呈明显正相关,提示CRH信号途径可能参与了IS的发病机制,支持IS的CRH发病假说。

左归降糖解郁方对模拟糖尿病并发抑郁症环境下海马神经元的影响

目的观察左归降糖解郁方对模拟糖尿病并发抑郁症(DD)环境下海马神经元的影响,探讨其可能的作用机制。方法海马神经元原代细胞取自受孕18 d SD大鼠胎鼠,葡萄糖联合皮质酮干预构建DD海马神经元细胞模型。将培养的海马神经元随机分为正常组、空白血清组、模型组、阳性药(二甲双胍+氟西汀)药物血清组、中药(左归降糖解郁方)药物血清组和阻断剂组。正常组和模型组给予等量培养液,阻断剂组给予促肾上腺皮质激素释放激素1型受体(CRHR1)阻断剂安塔拉明200μmol/L,其余组给予体积分数为10%的药物血清或空白血清,造模干预18 h后,尼氏染色检测海马神经元损伤情况,高内涵细胞成像分析(HCA)技术检测CRHR1、突触可塑性相关蛋白切丝蛋白(Cofilin)和肌动蛋白(Actin)蛋白的表达,实时荧光定量PCR检测CRHR1、Cofilin和Actin mRNA的表达。结果与正常组及空白血清组比较,模型组海马神经元神经网络、树突棘断裂或消失,尼氏小体数量显著减少,CRHR1表达明显上调(P<0.01),Cofilin和Actin表达明显下调(P<0.05);与模型组比较,阳性药药物血清组、中药药物血清组和阻断剂组可一定程度上逆转上述变化(P<0.05,P<0.01)。结论左归降糖解郁方对模拟DD环境下海马神经元具有保护作用,其机制与调控CRHR1、Cofilin、Actin的表达有关。

水杨酸钠致耳鸣大鼠模型海马区CRF1R的表达

目的:观察水杨酸钠致耳鸣大鼠模型海马区促肾上腺皮质激素释放因子1型受体(CRF1R)的表达。方法:24只大鼠随机分为3组,每组8只。A组:腹腔注射10%水杨酸钠溶液350mg/(kg·d),持续21d;B组:腹腔注射10%水杨酸钠溶液350mg/(kg·d),持续14d;C组:腹腔注射等量的生理盐水,持续14d。给药前2天、首次给药后2h和给药结束后对每只大鼠进行ABR测定,免疫组织化学方法以及Western Blot方法检测CRF1R在各组大鼠海马区的表达情况。结果:给药前2天各组大鼠ABR反应阈差异无统计学意义(P>0.05);首次给药后2hA组、B组大鼠反应阈分别较给药前提高了25.90dB SPL和25.03dB SPL(均P<0.01);给药结束后,A组、B组大鼠反应阈分别较给药前提高了34.91dB SPL和32.62dB SPL(均P<0.01),C组大鼠各时间点反应阈无明显变化(P>0.05)。免疫组织化学以及Western Blot方法显示大鼠脑海马区CRF1R的表达量A组>B组>C组(P<0.05)。结论:水杨酸钠致耳鸣大鼠脑海马区CRF1R的表达增加,且随注射时间的延长而增加,说明CRF1R可能在边缘系统参与耳鸣这一过程中发挥了重要作用。

青少年期创伤性应激对大鼠成年后情绪和学习记忆的影响

目的:研究青少年期创伤性应激经历对大鼠成年后HPA轴功能、情绪和学习记忆能力的影响。方法:健康青少年雄性Wistar大鼠随机分为对照组(control group)和应激组(stress group),每组12只。采用不可回避的足底电击建立创伤性应激模型。采用旷场实验、高架十字迷宫和水迷宫评估大鼠行为学改变;地塞米松抑制试验测试HPA功能;放射免疫法测定血浆皮质酮含量;免疫组化和Western blot检测海马促肾上腺皮质激素释放激素1型受体(CRF1)表达水平。结果:与对照组相比,应激组出现明显的焦虑样行为和对环境的探索性降低,表现为在旷场实验中,中央格停留时间和直立次数均减少(P<0.05);高架十字迷宫实验中,开放臂停留时间减少和粪粒数增加(P<0.05);学习能力降低,表现为第二天水迷宫实验逃离潜伏期显著延长(P<0.05)。应激组HPA轴功能失调,血浆皮质酮水平不被地塞米松抑制。与对照组相比,应激组大鼠海马CRF1受体表达下调(P<0.05)。结论:青少年期经历的创伤性应激导致焦虑水平升高、学习与记忆功能受损,引发HPA轴功能失调。其机制之一可能与海马CRF1表达下调有关。这可能是个体成年后更易出现应激相关的情绪与认知障碍的原因。

CRFR1拮抗剂CP-154526的脱靶作用

目的:CP-154526是选择性促肾上腺皮质激素释放激素1型受体(CRFR1)拮抗剂,但其脱靶作用仍未阐述清晰。方法:本研究以CP-154526为研究对象,以化合物-蛋白相互组学为手段,构建其药物-药物网络并做数据挖掘。结果:DRAR-CPI实验结果显示CP-154526与23个药物相似,与抗肿瘤药物和抗感染药物相似较多,与治疗帕金森病Bromocripti最为相似。数据挖掘进一步分析发现CP-154526可与单胺氧化酶B有作用。结论:CP-154526可能具有抗肿瘤、抗感染等多方面脱靶作用,还可能通过单胺氧化酶B治疗帕金森病症。本研究为快速评价药物的全面疗效提供一种思路。