肾上腺素能β3受体基因多态性与冠心病及冠状动脉病变程度的相关性研究

目的探讨肾上腺素能β3受体（β3-AR）基因多态性与冠心病及冠状动脉病变的相关关系。方法选择冠心病患者120例，114名健康者为对照。应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（PCR—RFLP）检测分析肾上腺素能良受体基因型，比较对照组与冠心病组的基因型及等位基因频率之间的差异，同时对冠心病患者中不同β3肾上腺素能受体基因型的冠状动脉病变程度进行比较。结果①冠心病组和对照组Trp64Trp、Trp64Arg和Arg64Arg的基因型频率分别为68．3％、30．0％、1．6％和69．2％、29．8％、0．9％。冠心病组Arg等位基因频率（16．6％）与对照组频率（15．8％）近似（P〉0．05），突变频率两组相比差异无统计学意义。②冠心病不同冠脉病变支数亚组间多态性分布差异无统计学意义（χ^2=0．471，P=0．790）。结论肾上腺素能艮受体基因多态性与冠心病及不同冠脉病变支数无相关性。

美托洛尔对心力衰竭大鼠心脏β_3肾上腺素能受体mRNA表达水平的影响

【目的】探讨心力衰竭大鼠心脏β3肾上腺素能受体(β3受体)mRNA表达,以及β受体阻滞剂美托洛尔对其的干预效果。【方法】28只大鼠随机分为假手术组(n=10)和心力衰竭组(n=18),主动脉缩窄法建立心衰模型。3个月后心力衰竭组存活16只分为心衰对照组,美托洛尔组,每组8只。美托洛尔组以美托洛尔6mg·kg-·1d-1口服灌注,心衰对照组灌注等量生理盐水。口服灌注3个月后检测血流动力学,心室质量指数及RT鄄PCR方法测定心室β3受体mRNA表达。【结果】与假手术组比较,心衰对照组大鼠心率明显增快(P<0.05),左室收缩末压、左室内压最大收缩和舒张速率的绝对值显著降低,左室舒张末压显著增高(P均<0.01)。美托洛尔组大鼠血流动力学参数明显改善(P<0.01)。与假手术组比较,心衰对照组大鼠心室质量指数明显增加,美托洛尔组大鼠较心衰对照组明显下降(P<0.01)。心衰对照组、美托洛尔组心室β3受体mRNA表达明显高于假手术组(P<0.01),但心衰对照组、美托洛尔组之间比较无统计学意义(P>0.05)。【结论】心衰大鼠心脏β3受体mRNA表达明显增加。美托洛尔可以改善心衰大鼠的血流动力学,明显抑制心室重塑,但对心室β3ARmRNA表达无显著影响。

肾上腺素能β_3受体的研究进展与临床应用探讨

用拮抗剂完全阻断β1和β2肾上腺素受体功能后,人类仍然存在显著地脂解作用,从而发现了肾上腺素β3受体(β3-AR)[1],自1989年以来,人们对不同种属的β3-AR先后克隆成功[2～3],且研究发现β3-AR通过负性肌力作用对心功能产生影响,其激动剂通过刺激白色脂肪组织的脂解作用和棕色脂肪组织的产热作用,起到抗肥胖作用;同时通过增加脂肪组织对胰岛素的敏感性和反应性,对2型糖尿病产生治疗作用;研究其机理会对心血管、肥胖和2型糖尿病的治疗有重大意义,结合中医整体观念思考目前临床用药亦会有所启迪。

β_3肾上腺素能受体与心力衰竭的研究进展

β3肾上腺素能受体 ( β3AR)属于G蛋白偶联受体超家族 ,研究显示 ,与 β1AR和 β2 AR不同 ,β3AR激动可抑制心肌收缩力。心力衰竭时左室 β3AR密度增高 ,心肌细胞 β3ARmR NA及受体蛋白表达上调。β3AR与Gi/o蛋白偶联 ,参与NO cGMP介导的负性肌力作用。β1/β2 /β3AR阻滞剂布拉洛尔可以完全阻断其作用 ,而 β1/β2 AR阻滞剂无效。心力衰竭时随交感神经持续激活 ,出现 β1AR下调、β2 AR功能性脱偶联、β3AR持续上调 ,导致心功能的进展性恶化。本文拟对

β_3肾上腺素能受体通过微小RNA对慢性心力衰竭大鼠左心房肌L型钙离子通道的调控

目的探讨β_3肾上腺素能受体(β_3-AR)对慢性心力衰竭(CHF)大鼠左心房肌L型Ca2+通道亚单位α2δ-2编码基因CACNA2D2的调控是否与微小RNA(miRNA)-1及miRNA-328存在关联。方法 22只雄性Wistar大鼠随机选6只为正常对照组(NC组),另16只采用皮下注射异丙肾上腺素建立CHF动物模型,将存活的12只大鼠再随机分为CHF组6只和BRL组(在大鼠尾静脉注射β_3-AR特异性激动剂BRL-37344) 6只。采用超声心动图检测大鼠左心房内径(LAD)、左心房射血分数(LAEF)及LVEF。采用苏木精-伊红染色检测大鼠左心房肌病理学变化。采用实时荧光定量PCR检测大鼠左心房肌β_3-AR、CACNA2D2以及miRNA-1、miRNA-328表达水平。结果BRL组大鼠LAD显著大于NC组和CHF组[(4. 42±0. 15) mm vs (3. 50±0. 21) mm和(4. 09±0. 17) mm,P <0. 01]; BRL组LAEF显著低于NC组和CHF组[(34. 91±1. 51)%vs (59. 89±3. 17)%和(40. 09±0. 95)%,P <0.01]。与CHF组比较,BRL组大鼠左心房肌细胞水肿进一步加重,可见明显肥大细胞等病理学改变更显著。与NC组比较,CHF组大鼠左心房肌β3-AR、CACNA2D2、miRNA-1及miRNA-328表达上调(P <0. 01);与CHF组比较,BRL组大鼠左心房肌β3-AR、CACNA2D2、miRNA-1及miRNA-328表达进一步上调(P <0. 01)。miRNA-1、miRNA-328、CACNA2D2与β3-AR表达呈正相关(r=0. 870、0. 904、0. 911,P <0. 01); CACNA2D2与miRNA-1、miRNA-328表达呈正相关(r=0. 880、0. 954,P <0. 01)。结论β3-AR对左心房CACNA2D2的正性调控可能与miRNA-1、miRNA-328存在关联。

心肌梗死后心力衰竭大鼠上胸段硬膜外阻滞治疗后心功能和β_3肾上腺素能受体表达变化

目的:探讨上胸段硬膜外阻滞治疗对心肌梗死(MI)后心力衰竭大鼠心功能和β3肾上腺素能受体基因表达的影响.方法:48只大鼠随机分为假手术组(S组,n=12)和左冠状动脉结扎组(LAD组,n=36),LAD组大鼠再随机分为心衰组(CHF组,n=14)和硬膜外阻滞治疗组(HTEA组,n=14).4 wk后各组均经寰枕关节置入PE-10导管至胸段硬膜外腔,置管术后24 h S组和CHF组于硬膜外腔注入9 g/L生理盐水(100μL/kg,2次/d,4 wk).HTEA组于硬膜外腔注入1.25 g/L布比卡因(100μL/kg,2次/d,4 wk).4 wk后行超声多普勒测定心功能的参数;测量和计算心脏与体质量(HW/BW)、左心室与体质量(LVW/BW)的比值;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)半定量测定心肌组织β3AR和eNOS mRNA.结果:与CHF组相比较,HTEA组的LVEDd和LVEDs减小,EF和FS有所增加;HW/BW和LVW/BW有所降低;β3AR和eNOS mRNA表达明显减少.结论:上胸段硬膜外阻滞治疗可以改善MI后心衰大鼠的心功能,减缓心室重构,降低或延缓β3AR和eNOS mRNA的表达.

心力衰竭发展过程中β_3肾上腺素受体自身抗体的产生及意义

目的为加深对心力衰竭自身免疫机制的理解,研究了在心力衰竭发生发展过程中β3肾上腺素受体(β3AR)自身抗体的产生及其意义。方法采用腹主动脉缩窄法制备心力衰竭大鼠模型,应用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法检测大鼠血清中针对β3AR细胞外第2环的自身抗体,并观察了其生物效应。结果①实施腹主动脉缩窄术4周后,心力衰竭模型组大鼠心脏质量与体质量的比值明显增加,8周后心功能各项指标显著降低,并随时间进一步加重,光镜下显示心肌呈多灶性变性病变,发生严重胶原纤维化,胶原容积分数显著增加,表明心力衰竭模型制备成功;②心力衰竭模型大鼠血清中β3AR自身抗体水平(吸光度值)在术后4周即明显升高,至8周时达峰值,保持至12周后,该抗体水平又开始下降。这表明在心力衰竭发展过程中,机体可产生β3AR自身抗体,并呈现产生、维持和自然消退的自我消长变化规律;③β3AR自身抗体对乳鼠心肌细胞跳动频率有明显的抑制效应,该效应可被非特异性βAR拮抗剂bupranolol所阻断,但不能被特异性β1AR和β2AR拮抗剂nadolol所阻断,说明该负性变时效应主要是通过β3AR介导的。结论在心力衰竭过程中产生的β3AR自身抗体可能对心力衰竭的发展有重要的病理生理作用。

β_3肾上腺素受体对前蛋白转化酶枯草溶菌素9和低密度脂蛋白受体表达的影响

目的观察激动β3肾上腺素受体(β3-AR)对载脂蛋白E基因敲除(apoE-/-)老年高脂小鼠血脂、肝脏前蛋白转化酶枯草溶菌素9(PCSK9)和LDL受体(LDLR)表达水平的影响。方法选择10周龄雄性C57BL/6小鼠10只(A组)。apoE-/-小鼠40只给予高脂饲料饲养至36周龄,随机分为4组,分别为高脂模型组(B组)、阿托伐他汀阳性药物对照组(C组)、β3-AR激动剂小剂量组(D组)、β3-AR激动剂大剂量组(E组),每组10只,共干预12周。采用Beckman CX7全自动生化分析仪,检测血清TC、TG、VLDL/LDL-C、HDL-C水平,采用Western blot测定肝脏PCSK9和LDLR表达水平。结果与B组比较,C组、D组和E组TC、VLDL/LDL-C明显下降,C组、B组、D组LDLR水平明显上调,C组PCSK9水平明显上调(P<0.05,P<0.01);与C组比较,D组和E组TG、PCSK9水平明显下降,D组LDLR水平明显下降,HDL-C水平明显升高,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论β3-AR调脂、升高LDLR、降低PCSK9表达水平是其抗动脉粥样硬化的多重作用机制之一。

激动β_3肾上腺素受体对载脂蛋白E基因敲除小鼠动脉粥样硬化斑块的影响

目的探讨激动β3肾上腺素受体(β3-AR)对载脂蛋白E基因敲除(apoE-/-)小鼠血脂、动脉粥样硬化(AS)斑块、B族Ⅰ型清道夫受体(SR-BⅠ)的影响。方法选择10周龄C57BL/6小鼠10只作为正常对照组(A组,等量生理盐水腹腔注射),10周龄apoE-/-小鼠50只,高脂饮食至36周龄时随机分为高脂模型组(B组,等量生理盐水腹腔注射)、阿托伐他汀阳性药物对照组(C组,10mg/kg灌胃)、β3-AR激动剂小剂量组(D组,1.65μg/kg腹腔注射)、β3-AR激动剂大剂量组(E组,3.0μg/kg腹腔注射)与β3-AR拮抗剂组(F组,5.0μg/kg腹腔注射),分别给予β3-AR激动剂或β3-AR拮抗剂腹腔注射2次/周,共12周。48周龄时全自动生化仪检测小鼠血脂,取胸主动脉行病理观察,Western blot测定SR-BⅠ蛋白表达水平的变化。结果与B组比较,C组、D组、E组TC、VLDL/LDL-C显著下降(P<0.01);胸主动脉粥样斑块面积减小(P<0.01);SR-BⅠ蛋白表达水平显著上调(P<0.05)。D组、E组TG水平显著下降(P<0.01)。结论激动β3-AR通过改善apoE-/-高脂小鼠血脂代谢,上调SR-BⅠ,促进胆固醇逆转运,进而起到了减小胸主动脉斑块面积、抗AS的作用。

激动β_3肾上腺素能受体上调载脂蛋白A-Ⅰ促进泡沫细胞胆固醇流出的研究

目的通过激动或抑制HepG2细胞的β3肾上腺素能受体(β3-AR),探讨β3-AR调节胆固醇逆转运过程的可能机制。方法将培养的HepG2细胞随机分为对照组、β3-AR激动剂组(激动剂组)和β3-AR拮抗剂组(拮抗剂组),ELISA法检测上清液载脂蛋白(apo)A-Ⅰ、apoA-Ⅱ及β3-AR水平;测定细胞内胆固醇、游离胆固醇和胆固醇酯水平,3 H标记的胆固醇测定胆固醇流出率,实时定量PCR和蛋白印迹法分别检测细胞中三磷酸腺苷结合盒转运蛋白A1(ABCA1)和肝X受体α亚型(LXRα)的表达。结果与对照组比较,激动剂组apoA-Ⅰ、游离胆固醇、胆固醇流出率显著增加,胆固醇、胆固醇酯显著降低,ABCA1和LXRαmRNA及ABCA1和LXRα蛋白显著增加;拮抗剂组胆固醇、胆固醇酯显著升高,apoA-Ⅰ、胆固醇流出率显著减少,ABCA1和LXRαmRNA及ABCA1和LXRα蛋白显著降低。与激动剂组比较,拮抗剂组ABCA1和LXRαmRNA及ABCA1和LXRα蛋白显著降低(0.49±0.10 vs1.24±0.02,0.85±0.05 vs 1.32±0.05,0.38±0.01 vs 1.45±0.20,0.08±0.01 vs 0.76±0.02,P<0.01)。结论激动HepG2细胞的β3-AR,可上调apoA-Ⅰ表达,促进巨噬细胞源性泡沫细胞胆固醇逆转运相关蛋白的表达。

糖尿病大鼠膀胱肾上腺素能β3受体的改变

目的观察糖尿病大鼠膀胱中肾上腺素能B3受体（β3-AR）的表达在糖尿病膀胱病变发生发展中的作用。方法将80只大鼠按随机化原则分为糖尿病模型组（n=40）及正常对照组（n=40）。应用链脲佐菌素60mg／kg腹腔注射，诱导形成I型糖尿病大鼠模型，分别在发病第2、4、6、8、10周时处死取全膀胱，称重，取材制作光镜病理标本及提取蛋白，采用蛋白印迹法检测各组大鼠膀胱逼尿肌细胞肾上腺素能β3受体蛋白的表达。结果糖尿病模型组大鼠体质量组增长缓慢，膀胱湿重增加（P〈0．05）。糖尿病组膀胱逼尿肌细胞肥大，变性，排列紊乱松散，胶原及纤维组织明显增生，出现空泡；晚期逼尿肌细胞萎缩，仅见大量的胶原及弹性纤维成分。糖尿病大鼠膀胱逼尿肌细胞肾上腺素能B3受体蛋白表达高于正常对照组（P〈0．05）；2周：（0．73±0．09）比（0．35±0．04），4周：（0．81±0．13）比（0．32±0．06），6周：（0．72±0．05）比（0．33±0．04），8周：（0．55±0．07）比（0．33±0．06），10周：（0．52±0．07）比（0．33±0．05）（P〈0．05）。结论各时间段的糖尿病组膀胱逼尿肌均出现损害，各时间段的糖尿病组膀胱逼尿肌细胞中肾上腺素能β3受体含量均增加，肾上腺素能B3受体在糖尿病膀胱病变的发生发展中发挥萤要作用．

β_3-肾上腺素受体基因多态性与冠心病支架植入术后再狭窄相关性研究

目的探讨β3-肾上腺素受体基因多态性与冠心病支架植入术(PCI)后支架内再狭窄的相关性。方法 2003—2009年我院冠心病PCI术后患者经造影复查证实支架内再狭窄者(再狭窄组)41例,再选取经造影复查无支架内再狭窄者(非再狭窄组)50例,采用聚合酶链反应-限制片段长度多态性技术对β3-肾上腺素受体基因Trp64Arg多态性位点基因型进行检测,比较两组患者基因型分布及等位基因有无差异。结果非再狭窄组患者基因型分布及等位基因频率与再狭窄组比较,差异均无统计学意义(P>0.05),多因素Logistic回归分析显示PCI术后冠状动脉再狭窄与高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)的偏回归系数为-1.452(P<0.05),相对危险度为0.234〔95%可信区间(0.06,0.99)〕。结论β3-肾上腺素受体基因多态性与冠心病PCI术后支架内再狭窄无关,HDL-C是冠状动脉再狭窄的独立保护因素。

儿童心衰患者血清抗β_3肾上腺素受体自身抗体对乳鼠心肌细胞跳动频率的影响

目的观察儿童心力衰竭患者血清中抗β3肾上腺素受体(β3AR)自身抗体对乳鼠心肌细胞跳动频率的影响。方法①以人β3AR细胞外第二环176-202氨基酸残基序列的合成肽段作为抗原,采用ELISA筛选正常儿童和心衰儿童血清中抗β3AR自身抗体。用亲和纯化法提纯抗β3AR自身抗体阳性血清中的IgG。②设立β3AR激动剂BRL37344、β3AR自身抗体阳性血清IgG、β3AR自身抗体阳性血清IgG+β1AR、β2AR阻断剂Nadolol、β3AR自身抗体阳性血清+非特异性βAR阻断剂Bupranolol、β3AR自身抗体阳性血清+β3AR抗原、阴性对照IgG以及空白对照各组观察该抗体对乳鼠心肌细胞跳动频率的影响。结果①心衰儿童血清中抗β3AR自身抗体的阳性率为30%(15/50),明显高于正常同质儿童的12%(6/50,P<0·05);②该抗体可以使培养的乳鼠心肌细胞跳动频率下降[由(128.0±10.86)次/min下降为(64.7±8.72)次/min,P<0·01];③该作用不能被β1、β2受体阻断剂Nadolol阻断,但可被非特异性β受体阻断剂Bupranolol或β3AR细胞外第二环抗原肽段阻断;④该抗体的负性变时效应在观察时间内(6h)无衰减。结论儿童心衰患者血清中含有较高滴度的抗β3AR自身抗体并具有负性变时效应,且该抗体的负性变时效应具有不脱敏现象。

β_3肾上腺素能受体激动对慢性心力衰竭大鼠左心房细胞内向整流钾电流的影响

目的:探讨β3肾上腺素能受体(β3-adrenoreceptor,β3-AR)特异性激动剂BRL-37344对慢性心力衰竭(chronic heart failure,CHF)大鼠左房细胞内向整流钾电流(inward rectifier potassium current,Ik1)的影响。方法:建立CHF大鼠模型,24只Wistar大鼠分为Sham组、CHF组和BRL组,检测左房内径(left atrium diameter,LA)、左房射血分数(left atrial ejection fraction,LAEF),记录Ik1。结果:BRL组大鼠的LA显著大于CHF组和Sham组(P<0.05),BRL组大鼠的LAEF显著低于CHF组和Sham组(P<0.05);BRL组大鼠左房细胞Ik1密度与CHF组无统计学差异。结论:BRL-37344加重CHF大鼠的心房重构及收缩功能下降;BRL-37344对CHF大鼠心房细胞Ik1密度无显著影响。

性别因素对β_3肾上腺素受体的表达和功能影响

β3肾上腺素受体(β3-AR)是位于细胞膜表面的G 蛋白偶联受体,参与介导儿茶酚胺作用。该受体不仅表达于全身脂肪组织,还广泛分布于心肌组织、膀胱等[1]。在不同性别人群中,β3-AR的表达和功能存在差异,这使得不同性别人群在疾病的预防、治疗、预后等方面并不完全一致。

山东地区肾上腺素能β3受体基因多态性与冠心病的相关性研究

目的:研究山东地区肾上腺素能β3受体(β3-AR)基因多态性与冠心病及其危险因素的之间的关系。方法:对相互间无一级亲属关系的120例冠心病患者及114例非冠心病正常对照组人群,进行体重指数、腰臀围比、空腹血糖、血脂、血压、心电图、心脏彩超等检测,同时应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)核苷酸分型技术检测肾上腺素能β3受体基因及其基因多态性进行分析。结果:(1)冠心病组和正常对照组Trp64Trp、Trp64Arg和Arg64Arg的基因型频率分别为68.3%,30.0%,1.6%和69.2%,29.8%,0.9%。冠状动脉粥样硬化性心脏病组Arg等位基因频率(16.6%)与对照组(15.8%)频率近似(P>0.05),突变频率在冠心病与非冠心病之间相比无显著性差异。(2)多态性分布在冠状动脉粥样硬化性心脏病组不同冠脉病变支数亚组中也无显著性差异(x2=0.471,P=0.790)。结论:肾上腺素能β3受体基因Trp64Arg突变与山东地区人群冠心病的发生、发展无明显相关性。

老年心力衰竭大鼠心脏和肺β_3肾上腺素能受体的实验研究

目的探讨老年心力衰竭(心衰)模型大鼠心脏及肺β3肾上腺素能受体(β3-AR)变化及相互关系。方法选择雄性老年Wistar大鼠48只,应用主动脉结扎术制备心衰模型。大鼠随机分为假手术组和心衰组,每组24只,每组术后5、7、9、11周每个时间点各6只。测定2组大鼠血流动力学、病理、心肌及肺组织β3-AR mRNA表达。结果与假手术组比较,心衰组术后9、11周心率、左心室收缩末压、左心室压力最大上升速率显著降低,左心室压力最大下降速率显著增高,5、7、9、11周左心室舒张末压显著增高,差异有统计学意义(P<0.01)。心衰组术后7周出现肺水肿,术后9周出现心肌核坏死。心衰组术后5、7、9、11周每个时间点肺组织β3-AR mRNA表达较2周前均明显减低(P<0.05)。心衰组术后9、11周心肌组织β3-AR mRNA表达较假手术组明显升高(1.21±0.26 vs 0.98±0.22,1.26±0.23 vs 1.05±0.24,P<0.01)。结论心衰时,肺组织β3-AR mRNA表达下降,心肌组织表达升高,且肺的变化先于心肌组织。

β_(3)肾上腺素能受体基因多态性与高血压患者心脑血管事件的相关性研究

目的探讨β_(3)肾上腺素能受体(β_(3)-AR)基因Trp64Arg多态性与高血压患者发生心脑血管事件的相关性。方法选择首都医科大学宣武医院心脏内科及河北省人民医院心血管内科确诊为原发性高血压(EH)无心血管疾病的门诊患者755例,根据基因分型分为Trp/Trp(TT)组282例,Trp/Arg(TA)组361例,Arg/Arg(AA)组112例。记录主要不良心脑血管事件(MACCE)。结果3组MACCE发生率比较,有统计学差异(P=0.006)。Kaplan-Meier曲线分析显示,AA组MACCE发生率明显高于TA组和TT组(P_(log rank)=0.006)。β_(3)-AR基因AA基因型对MACCE、冠状动脉疾病、脑卒中有显著的独立预测作用(95%CI:1.322~3.175,P=0.001;95%CI:1.050~2.930,P=0.032;95%CI:1.238~5.408,P=0.011)。结论高血压患者β_(3)-AR基因AA变异对MACCE、冠状动脉疾病和脑卒中的发生具有显著的独立预测作用,与其他已知的心脑血管危险因素无关。

β3肾上腺素能受体在糖尿病并发心力衰竭中的作用

β3肾上腺素能受体（β3AR）是继β1、β2肾上腺素能受体后又发现的一种β肾上腺素能受体。临床调查结果表明,2型糖尿病并发心功能不全的发病率和死亡率明显高于一般人群,是非糖尿病患者的4～8倍[1]。近年来对β3AR在糖尿病及心力衰竭中的研究表明,β3AR激动剂有一定的抗糖尿病作用;在心力衰竭早期产生心肌保护作用,但在心力衰竭晚期则出现促进心力衰竭发展的作用。

β3-肾上腺素能受体基因过表达促进心肌细胞肥大

目的:通过慢病毒转染使心肌细胞过表达β3-肾上腺素能受体(β3-adrenoreceptor,β3-AR)基因,研究其对体外培养鼠原代心肌细胞肥大的影响。方法:体外培养新生SD大鼠心室肌细胞,细胞培养24 h后,分别以转染复数(multiplicity of infection,MOI)20、50、80、100转染只携带绿色荧光蛋白(GFP)慢病毒(空病毒),病毒转染72 h后,在倒置荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白GFP表达情况,以确定最佳转染复数。心肌细胞以最佳MOI值转染携带β3-AR基因慢病毒24 h后,去甲肾上腺素(norepinephrine,NE)诱导心肌细胞48 h,建立转染后体外心肌肥厚模型。蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测β3-AR、原癌基因c-myc、c-fos的蛋白表达水平。结果:用不同MOI的慢病毒转染心肌细胞,转染效率不同,以MOI=50转染效率最高;NE诱导心肌细胞48 h后,随β3-AR表达增加,c-myc、c-fos蛋白水平表达增加(Control组:0.098±0.012、0.105±0.008 vs NE组:0.174±0.012、0.164±0.015 vsβ3-AR转染组:0.268±0.010、0.325±0.014,P<0.05),心肌肥厚加重。结论:以携带β3-AR的慢病毒转染心肌细胞可有效增加β3-AR表达,随β3-AR表达增加,心肌肥厚加重。