TBBPA-DHEE暴露对大鼠肾上腺髓质嗜铬细胞瘤PC12细胞的影响及机制

目的:研究四溴双酚A双(2-羟基乙基)醚[tetrabromobisphenol A bis(2-hydroxyetyl)ether,TBBPA-DHEE]对大鼠肾上腺髓质嗜铬细胞瘤(PC12)细胞的影响及潜在的作用机制。方法:将PC12细胞随机分为5组,分别为空白对照组、溶剂对照组(0.05%二甲基亚砜)、TBBPA-DHEE低剂量组(5μg/mL)、中剂量组(20μg/mL)和高剂量组(35μg/mL),按分组对应处理48 h;通过MTT实验分析TBBPA-DHEE对PC12细胞的半数抑制浓度(IC_(50));采用试剂盒检测PC12细胞中超氧化物歧化酶(SOD)活力、丙二醛和活性氧含量,以及细胞培养液中NO和Ca^(2+)含量;采用ELISA法检测PC12胞内电压门控钙离子通道(voltage-gated calcium channel,VGCC)含量;采用蛋白质免疫印迹法测定钙离子信号通路相关蛋白表达。结果:TBBPA-DHEE(≥20μg/mL)暴露显著抑制PC12细胞活力,半数抑制浓度为33.4μg/mL;与对照组相比,5、20和35μg/mL TBBPA-DHEE组PC12细胞SOD活力、丙二醛及活性氧含量显著升高(P<0.05),细胞培养液中NO和Ca^(2+)含量显著增加(P<0.01或P<0.05),VGCC含量显著降低(P<0.01);5μg/mL TBBPA-DHEE组钙离子信号通路中p-CaMKⅡ、p-ERK1/2和p-CREB蛋白相对表达水平显著降低(P<0.01),20和35μg/mL TBBPA-DHEE组CaM、MKP-1、p-CaMKⅡ、p-ERK1/2和p-CREB蛋白相对表达水平显著降低(P<0.01)。结论:TBBPA-DHEE暴露可显著抑制PC12细胞活力并导致细胞氧化损伤,其可能通过下调VGCC表达,影响细胞钙离子稳态,进而影响钙离子信号通路相关蛋白的表达,从而产生神经毒性。

阻塞性睡眠呼吸暂停综合征肺动脉高压患者肾上腺髓质素、心钠素的变化

目的探讨阻塞性睡眠呼吸暂停综合征(OSAS)患者肺动脉高压的发生率及肺动脉高压变化与血浆中肾上腺髓质素(ADM)、心钠素(ANP)浓度变化间的关系。方法随机选择32例中老年健康者为对照组,确诊为OSAS者61例。用心脏B超测量其肺动脉压力,放射免疫分析法测定其血浆ADM和ANP浓度。结果61例OSAS中肺动脉高压26例,肺动脉高压发生率为42.6%。ADM浓度:OSAS非肺动脉高压与对照组相比差异有显著性(P<0.05),肺动脉高压组与非肺动脉高压组及对照组差异均有显著性(P<0.001)。ANP浓度:OSAS肺动脉高压组、非肺动脉高压组、对照组三者间比较差异有显著性(P<0.001)。结论OSAS患者肺动脉高压发生率高。血浆ADM、ANP 浓度与肺动脉高压的程度呈正相关。ANP参与了肺动脉高压的病理生理过程。

肾上腺髓质素的降压作用及其在组织中分布的观察

本实验用电生理和免疫组化方法观察了肾上腺髓质素（ａｄｒｅｎｏｍｅｄｕｌｌｉｎ，ＡＭ）对正常和高血压大鼠血压的影响和对主动脉环张力的作用以及ＡＭ在一些组织中的分布特点。结果显示ＡＭ对高血压大鼠的降压幅度远大于正常鼠；对主动脉环张力的降低作用具有剂量依赖性和内皮依赖性；ＡＭ免疫组化反应除在嗜铬细胞瘤和肾上腺髓质细胞内呈阳性反应外，在肺、肾和心肌组织内都显示出不同程度的阳性。提示ＡＭ在机体血压和循环调节中具有重要作用。

用微囊牛肾上腺髓质细胞移植治疗恶性肿瘤疼痛研究

用胶原酶消化法分离牛肾上腺髓质细胞,用海藻酸钠-聚赖氨酸-海藻酸钠(APA)法包埋牛肾上腺髓质细胞,将微囊牛肾上腺髓质细胞植入恶性肿瘤病人的珠网膜下腔,移植后不使用免疫抑制剂。结果显示在30例恶性肿瘤患者中,显效率为67％(20例),有效率为27％(8例),无效率为6％(2例),镇痛作用维持时间长达150天,除个别病人发烧和腰痛外未发现其它明显副作用。

肾上腺髓质素前体在高血压时的变化

本文应用特异性放免方法了自发性高血压大鼠（ＳＨＲ）及原发性高血压患者（ＥＨ）组织及血浆肾上腺髓质素前体（ｐｒｏＡＤＭ１５３－１８５）含量。结果显示：ＳＨＲ血管条ｐｒｏＡＤＭ１５３－１８５明显 对照组Ｗｉｓｔａｒ大鼠（２２０．６±２．６ｖｓ１７８．２±２．３ｐｇ－ｍｇｗｗ）而血交ｐｒｏＡＤＭ１５３－１８５明显低于对照组（１４．９±２．５ｖｓ３１．６±１．６ｐｇ／ｍｌ），肺、肺肾、左室。

开窍中药对牛肾上腺髓质细胞儿茶酚胺分泌的影响

目的探讨开窍中药冰片、牛黄、麝香、石菖蒲及苏合香对牛肾上腺髓质细胞儿茶酚胺分泌的影响。方法体外培养牛肾上腺髓质细胞,HPLC-ECD检测其分泌儿茶酚胺的含量,分别考察5种开窍药对乙酰胆碱、藜芦定碱和56 mmol·L-1高钾溶液诱导的儿茶酚胺分泌的影响。结果5种开窍中药均显著抑制乙酰胆碱、藜芦定碱诱导的儿茶酚胺分泌(P<0.05或P<0.01)而对高钾溶液诱导的儿茶酚胺分泌均无显著影响;对乙酰胆碱诱导的儿茶酚胺分泌的抑制作用随浓度升高而增强(P<0.05或P<0.01)。结论开窍中药具有抑制交感活性作用,且通过乙酰胆碱受体途径和电压依赖型钠离子通道发挥作用。

电针对震颤麻痹大鼠中脑黑质和肾上腺髓质酪氨酸羟化酶的影响──免疫荧光组化方法

我们以前的实验证明电针“阳陵泉”和“舞蹈震颤区”等穴，可使震颤麻痹大鼠的旋转次数明显少于对照组。本研究旨在通过免疫荧光组化方法显示电针对动物模型中脑黑质及肾上腺髓质酪氨酸羟化酶（TH）的影响。结果表明：在健侧黑质内可见有TH阳性细胞，电针组的TH阳性细胞数明显多于对照组，而且荧光亮度也比对照组强。在6-羟多巴胺毁损侧的黑质区内，仅在电针组见到个别TH阳性细胞及纤维。双侧肾上腺髓质内均有TH阳性细胞反应，电针组的荧光反应强于对照组，结果提示电针可能使TH活性增强。

大鼠肾上腺髓质增生模型的建立

目的 :建立大鼠肾上腺髓质增生 (AMH)模型。方法 :A、B、C组 (实验组 )分别皮下注射 0 .1%利血平 1.0ml (kg·d) ,2 5 %苯甲酸钠咖啡因 1.0ml (kg·d) ,0 .1%利血平和 2 5 %苯甲酸钠咖啡因各 [0 .5ml (kg·d) ],D组 (对照组 )皮下注射 0 .9%生理盐水 [1.0ml (kg·d) ],观察大鼠第 6周血压 ,2 4h尿中 3 甲氧 4 羟基苦杏仁酸 (VMA)的含量。肾上腺的病理变化。结果 :实验组与对照组比较 ,血压均无显著性差异 (P均 >0 .0 5 )。 2 4h尿中VMA含量有显著性差异 (P <0 .0 1,P <0 .0 5 ,P <0 .0 5 )。髓质百分数有显著性差异 (P <0 .0 1,P <0 .0 5 ,P <0 .0 1)。结论 :用利血平。

肾上腺髓质素在心血管系统的分布及在心血管功能调节中的作用

目的：观察肾上腺髓质素（ａｄｒｅｎｏｍｅｄｕｌｉｎ，ＡｄＭ）在大鼠心血管系统的分布及缩血管活性肽对血管平滑肌细胞中肾上腺髓质素表达的影响。方法与结果：应用免疫组织化学方法（ＡＢＣ法）证实，在大鼠的外周组织，尤其是主动脉和心肌等心血管组织以及培养的血管内皮细胞、血管平滑肌细胞和心肌细胞，均含有丰富的免疫活性的肾上腺髓质素。应用半定量反转录－聚合酶链式反应（ＲＴ－ＰＣＲ）分析方法证实，缩血管活性肽－内皮素（ＥＴ－１）和血管紧张素Ⅱ（ＡＧＴ）可明显地降低培养的血管平滑肌细胞中肾上腺髓质素ｍＲＮＡ水平，这一作用可选择性地分别被ＥＴ－１的特异性受体阻断剂ＢＱ１２３和ＡＧＴ的特异性受体阻断剂Ｄｕｐ７５３所抑制，提示ＥＴ－１／ＡＧＴ可抑制肾上腺髓质素的表达。应用［３Ｈ］－ＴｄＲ掺入和细胞计数发现，肾上腺髓质素可抑制培养的自发性高血压大鼠（ＳＨＲ）血管平滑肌细胞的ＤＮＡ合成和细胞增殖。结论：心血管系统含有丰富的肾上腺髓质素，其表达受ＥＴ－１和ＡＧＴ的调控，它可能作为一种增殖抑制因子而抑制ＳＨＲ血管平滑肌细胞ＤＮＡ合成和细胞增殖。

电针对慢性炎症疼痛大鼠背根神经节牛肾上腺髓质22肽及其受体基因表达的影响

[目的]观察电针对完全福氏佐剂(complete freund’s adjuvant,CFA)致慢性疼痛大鼠患侧腰背根神经节(dorsal root ganglion,DRG)牛肾上腺髓质22肽(BAM22)与其感觉神经元特异性受体(SNSR)、MOR与DOR基因表达的影响。[方法]200±20g雄性SD大鼠30只,随机分成正常对照组、模型对照组、电针组,每组10只,模型对照组、电针组右足CFA造模。电针组从造模24h开始治疗,患侧"足三里"穴,2/100Hz,30min,1次/d,治疗10d,其余2组不予治疗。采用辐射热法检测大鼠缩爪潜伏期观察大鼠患侧热痛敏变化,免疫组化法检测患侧背根神经节BAM22多肽的含量,定量PCR(quantitative polymerase chain reaction,qPCR)法检测患侧背根神经节SNSR、MOR与DOR mRNA的表达。[结果]经过10d的治疗,电针组的痛阈与模型对照组相比,有显著提高(P<0.05)。免疫组化结果显示,电针干预后,患侧背根神经节的BAM22阳性细胞率比模型对照组有显著的提高(P<0.01)。定量PCR结果显示,电针极大地促进了SNSR(P<0.01)、MOR(P<0.01)与DOR mRNA(P<0.01)在患侧DRG中的表达。[结论]电针对CFA大鼠慢性疼痛有良好的干预作用,推测该作用与电针增强患侧腰背根神经节BAM22多肽表达,增强其非阿片受体SNSR与其阿片受体MOR与DOR mRNA表达相关。

降钙素原联合肾上腺髓质素前体中段肽在脓毒症诊断中的应用

目的探讨肾上腺髓质素前体中段肽(MR-proADM)和降钙素原(PCT)在脓毒症诊断中的作用,为临床感染性疾病的诊断提供依据。方法入住ICUS且符合脓毒症诊断标准的患者67例,分为脓毒症组(A组)、严重脓毒症组(B组)、脓毒性休克组(C组),对照组(D组)为健康体检者。患者入住ICU 24 h内抽血检测血浆/血清中MR-pro ADM和PCT浓度,通过建立受试者工作特征曲线分析诊断指标的敏感性、特异性并确立临界值。结果与D组相比,67例脓毒症患者MR-pro ADM及PCT均显著增高(X^2=28.104、25.645,P<0.01),A、B、C组之间MR-pro ADM及PCT浓度差异均有统计学意义(P<0.01)。MR-proADM曲线下面积(AUC)较PCT的AUC大,其中A组差异最显著,分别为0.917和0.864。A组MR-proADM和PCT敏感性分别为89.0%和84.0%,B组、C组两者敏感性相近,各组使用PCT和MR-proADM联合诊断时敏感性和特异性均优于单个指标。结论随着脓毒症患者病情的加重,PCT和MR-proADM浓度均显著升高,脓毒症病症较轻时MR-proADM对脓毒症的诊断效果优于PCT,两者联合检测效果优于单独检测。

45例 ^(131)I-MIBG 肾上腺髓质显像临床应用

用１３１Ｉ－ＭＩＢＧＳＰＥＣＴ对４５例病人肾上腺髓质显像，结果原发性高血压组（ｎ＝２０）７５％患者（１５／２０）４８ｈ呈稀疏显像；肾上腺髓质增生组（ｎ＝６）患者腺体均增大，２４ｈ即成较清晰至清晰显像；嗜铬细胞瘤组（ｎ＝１０）２４ｈ即成显著显像。ＥＣＴ显像结果与病理／手术一致。表明该技术对嗜铬细胞瘤（尤其无症状、异位、多发、恶性、转移性及家族性）定位与定性诊断的敏感性，特异性及准确性都高于Ｂ超、ＣＴ与尿ＶＭＡ测定。指出心肌不显像可作为间接诊断嗜铬细胞瘤的有价值辅助诊断指标。

肾上腺髓质增生症的诊断与治疗(附8例报告)

目的提高对肾上腺髓质增生症（AMH）的诊断与治疗水平。方法总结分析 1998年 5月～2002年 5月我院收治的 8例 AMH患者的临床资料。结果 8例患者 CT检查肾上腺均发现异常,术前诊断 AMH 4例,嗜铬细胞瘤 4例。8例均行单侧肾上腺全切除,7例痊愈,1例因对侧有增生,术后1月复发。结论AMH的诊断需与嗜铬细胞瘤鉴别,尤其是定位检查发现有结节时,确诊靠术中探查和病理检查;经腹手术是AMH治疗的主要方法,术中应注意探查双侧肾上腺。

艾灸对实验性关节痛大鼠肾上腺髓质影响的观察

关节炎中医谓之痹证,为临床常见病,关节痛是它的主要症状,针灸治疗关节痛临床报道较多,并取得了较好的效果。

椎管内注射牛肾上腺髓质22肽差异性翻转吗啡耐受作用

牛肾上腺髓质22肽(bovineadrenalmedulla22,BAM22)是脑啡肽原A的一种降解产物,与阿片受体和感觉神经元特异性受体(sensoryneuron-specificreceptor,SNSR)均有亲合力。本研究的目的是探讨BAM22对吗啡耐受的影响。连续7d对大鼠椎管内注射20μg吗啡形成吗啡耐受后,分为吗啡组、盐水组和BAM22组,第8天三组大鼠椎管内分别注射吗啡、生理盐水和BAM22,第9天三组大鼠椎管内均注射吗啡后,运用撤足反射、福尔马林实验和免疫组织化学等方法观察吗啡的作用效果。结果显示:在撤足反射实验中,BAM22组的吗啡能延长撤足反射潜伏期最大可能作用的48.5%,并持续约1h;在福尔马林实验中,BAM22组的吗啡能分别缩短福尔马林引起的第一期和第二期疼痛行为变化3.2min和24min,比盐水组分别减少45%和82%(P<0.05,P<0.001);此外,在免疫组织化学实验中,BAM22组的吗啡能显著减少热刺激引起的脊髓背角c-Fos蛋白表达,其I-II层、III-IV层和V-VI层均减少约80%(P<0.001)。本研究从整体和细胞水平表明,BAM22能翻转吗啡的耐受,这种作用在持续性疼痛模型中的表现要比急性痛中更为明显,显示BAM22对吗啡耐受的差异性调制;同时也提示感觉神经元特异性受体可能参与吗啡耐受的调制。

肾上腺髓质脂肪瘤

目的 总结肾上腺髓质脂肪瘤 (AML)的影像学表现及临床特征。资料与方法 回顾性分析经手术病理证实的 10例AML的影像学和临床病理特点 ,并复习文献。结果 10例AML中 ,右侧 7例 ,左侧 3例 ,CT表现为含脂肪组织的混杂密度肿块 ,增强扫描无强化。术前CT诊断准确率为 10 0 %。B超检查 ,8例诊断为AML ,1例诊断为左肾上极肾血管平滑肌脂肪瘤 ,另 1例诊断为右腹膜后肿块占位。结论 AML的CT表现为含脂肪组织的混杂密度肿块 ,增强扫描无强化 ,CT检查可以明确诊断。

应急大鼠肾上腺髓质嗜铬细胞颗粒数目与其钙含量的关系

采用电镜细胞立体形态计量法及电镜X射线显微定量分析术 ,对制动应急大鼠的肾上腺髓质细胞内嗜铬颗粒数密度和颗粒内Ca浓度变化进行测量。结果显示 ,两者在制动过程中均呈进行性下降 ,但颗粒内钙浓度的下降快于颗粒数目的减少 (P <0 0 1)。该结果支持颗粒内钙释放入胞质 ,参与胞质内游离钙浓度的升高 ,进而激发颗粒胞吐的假设 。

脂多糖刺激人血管内皮细胞分泌内皮素和肾上腺髓质素及其机制研究

目的 :研究脂多糖 (LPS)刺激人血管内皮细胞 (HVEC)分泌内皮素 - 1(ET - 1)与肾上腺髓质素 (Adm)的机制。方法 :在培养的HVEC上 ,用放射免疫法测定不同浓度LPS刺激HVEC分泌的ET - 1与Adm ,以及不同的细胞信号转导阻断剂对其分泌的影响。结果 :LPS呈时间和浓度依赖性地增加HVEC分泌ET - 1和Adm ,ET - 1/Adm比值与对照组比较无明显差异 (P >0 0 5 )。在LPS刺激基础上 ,细胞外信号调节激酶 (ERKs)抑制剂PD0 980 59和P38蛋白激酶抑制剂SB2 0 2 190 可明显降低LPS刺激HVEC分泌ET - 1(P <0 0 1) ,仅SB2 0 2 190 显著降低Adm的分泌 (P <0 0 5 ) ,其余PKC抑制剂H7,钙调素 (CaM)抑制剂W7,Ca2 + 阻断剂nicardipine,钙调神经磷酸酶 (CaN)抑制剂环孢霉素 (CsA)对LPS刺激HVEC分泌ET - 1和Adm均无明显影响 (P >0 0 5 )。结论 :LPS刺激HVEC分泌ET - 1可能与ERKs和P38两条途径有关 ,LPS刺激HVEC分泌Adm只与P38信号通路有关 ,两者均不取决于PKC、Ca2 + 、CaM、CaN依赖的信号通路。

CT对肾上腺髓质脂肪瘤的诊断价值

目的总结肾上腺髓质脂肪瘤(adrenal myelolipoma,AML)的CT表现特点,探讨其诊断价值。方法回顾性分析经手术病理证实的AML的影像学和病理学特点。结果15例AML中,肿块多呈圆形或类圆形,边界清楚。含有脂肪组织为主的肿块8例;混杂密度的肿块4例;不含或含少许脂肪组织的肿块3例;其中4例有钙化灶。CT增强扫描肿瘤组织、分隔和包膜轻度强化,脂肪组织无强化为特征性表现。结论结合临床表现,CT可对肾上腺髓质脂肪瘤明确诊断。

大黄酚对大鼠肾上腺髓质嗜铬细胞瘤分化株细胞缺氧损伤的保护作用

目的观察大黄酚对缺氧引起的大鼠肾上腺髓质嗜铬细胞瘤分化株(PC12)细胞损伤的保护作用。方法培养PC12细胞,采用自制的密闭三气培养箱建立缺氧所致的PC12细胞损伤模型,根据不同条件,分为对照组、模型组、大黄酚组(包括1μg/ml组和5μg/ml组)。于缺氧处理前及处理后1、2、6、12、24h,每个时间点取6个复孔。采用四甲基偶氮唑盐法(MTT)检测PC12细胞增殖活性,高倍显微镜下观察PC12细胞核形态,测定各组上清液中超氧化物歧化酶(SOD)含量,免疫组化法测定各组线虫抗凋亡基因的人类同源基因表达蛋白(BCL-2)的表达,实时定量PCR测定p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)和含半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)mRNA的表达。结果①缺氧处理后12 h,MTT法测定大黄酚1μg/ml组的细胞活力高于模型组;缺氧处理24 h,大黄酚1μg/ml组和5μg/ml组的细胞活力均高于模型组,差异均有统计学意义(P<0.05)。②从缺氧处理后1 h开始,大黄酚1μg/ml组和5μg/ml组的SOD值高于模型组,差异有统计学意义(P<0.05)。③从缺氧后2 h开始,大黄酚1μg/ml组和5μg/ml的BCL-2阳性率均高于模型组。④从缺氧处理2h开始,模型组p38MAPK mRNA表达量高于大黄酚1μg/ml组和5μg/ml组,差异有统计学意义(P<0.05)。从缺氧处理6 h开始,模型组Caspase-3mRNA表达量高于大黄酚1μg/ml组和5μg/ml组,差异有统计学意义(P<0.05)。⑤缺氧处理后12、24 h,模型组细胞的细胞核皱缩、形态不清,内见颗粒样物质形成增多;大黄酚组的细胞核形态较清楚,少见颗粒样物质形成。结论大黄酚可以减轻缺氧所致PC12细胞的损伤,对PC12细胞有保护作用。