固肾培元方对肾阳虚大鼠耳蜗组织Bcl-2及Bax mRNA表达的影响

目的观察固肾培元方对肾阳虚大鼠耳蜗组织Bcl-2、Bax mRNA蛋白表达的影响。方法采用肌肉注射氢化可的松注射液的方法造成SD大鼠肾阳虚模型;空白组及模型组10mL/kg生理盐水灌胃,中药高、中、低剂量组分别给予固肾培元方31g/kg、15.5g/kg及7.75g/kg灌胃;用RT-PCR的方法检测耳蜗组织Bcl-2、Bax mRNA表达。结果固肾培元方可使肾阳虚大鼠耳蜗Bcl-2 mRNA表达增强,Bax mRNA表达减弱,Bcl-2/Bax比例增加,与空白组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论固肾培元方可通过调节耳蜗相关凋亡因子Bcl-2、Bax mRNA的表达而达到改善听力、保护耳蜗结构与功能的目的。

固肾培元方对肾阳虚大鼠耳蜗组织HSP70mRNA表达的影响

目的观察固肾培元方对肾阳虚大鼠耳蜗组织HSP70mRNA蛋白表达的影响。方法采用肌注氢化可的松注射液的方法造成SD大鼠肾阳虚模型,用RT-PCR的方法检测耳蜗组织HSP70mRNA表达。结果固肾培元方可使肾阳虚大鼠耳蜗HSP70mRNA表达增强,与空白组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论固肾培元方可能通过调节HSP70mRNA的表达而达到改善听力、保护耳蜗结构与功能的目的。

补肾活血法对肾阳虚大鼠内耳细胞Caspase-3凋亡影响的实验研究

目的:观察补肾活血法对肾阳虚大鼠内耳细胞凋亡的影响,为中医肾与耳的关系提供科学依据。方法:30只SD大鼠随机分为空白对照组、模型组和中药组3组,模型组和中药组采用肌肉注射醋酸强的松龙注射液的方法造成SD大鼠肾阳虚模型,检测各组大鼠ABR阈值,观察耳蜗组织切片HE染色及Caspase-3免疫组织化学染色情况。结果:模型组大鼠Corti器毛细胞数目较空白对照组明显减少,耳蜗组织切片Caspase-3免疫组化染色呈强阳性。中药复方可明显改善上述病理变化。结论:肾阳虚对听力有一定影响,中药复方可能通过改善内耳的听觉传导通路,或直接促进内耳细胞功能活动,从而提高耳蜗感音功能。

基于“肾开窍于耳”探讨耳穴与慢性肾脏病

慢性肾脏病(CKD)是指由各种原因引起的肾脏结构和功能异常,导致代谢产物潴留,水、电解质、酸碱平衡紊乱从而引起全身各系统功能损害的临床综合征,可不同程度的影响患者生命健康及生活质量。耳穴疗法作为中医外治法的重要组成部分,采取辨证论治的治疗原则,在慢性肾脏病的临床治疗方面取得了显著的疗效。文章阐述了耳穴疗法的理论基础,以及耳穴治疗在慢性肾小球肾炎、糖尿病肾病、痛风性肾病等慢性肾脏病及其合并症中的运用,以期为今后进一步完善相关研究提供参考。

基于肾虚大鼠耳蜗p38蛋白的表达探讨肾与耳关系的分子机制

目的:通过观察细胞凋亡因子p38丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,p38MAPK)在肾虚大鼠耳蜗中的表达,探讨肾耳关系的部分分子学机制。方法:随机将健康SD大鼠24只分为空白组、模型组及治疗组(各8只)。采用肌肉注射氢化可的松注射液(25 mg·kg^(-1))连续10 d肌肉注射的方法制作肾阴虚模型,治疗组在造模的同时,每日给予补肾方药(10 m L·kg^(-1))灌胃。实验第11天取材,观察大鼠耳蜗和肾脏的病理改变,检测大鼠血浆cAMP/cGMP值,采用RT-PCR法测耳蜗内p38 mRNA的表达。结果:(1)与空白组比较,模型组大鼠与治疗组大鼠cAMP/cGMP值上升(P<0.01),且模型组比值最高,结合大鼠一般状态可认为肾阴虚大鼠造模成功。(2)模型组与治疗组大鼠耳蜗均出现毛细胞缺失、排列不规则等病理改变;模型组与治疗组大鼠肾脏出现肾间质纤维化或消失,肾小管扩张,脂肪变等病理改变。两组大鼠中模型组最为严重。(3)RT-PCR法结果表明,与空白组比较,模型组和治疗组内耳p38蛋白的表达均升高(P<0.01);与模型组比较,治疗组p38蛋白的表达显著下调(P<0.01)。结论:(1)肾虚能导致肾脏及耳蜗同时发生病理学改变;(2)肾虚能增强耳蜗p38蛋白的表达,通过开启p38MAPK从而影响耳蜗细胞的凋亡;(3)补肾方改善大鼠肾虚的状态则能降低p38蛋白的表达,缓解大鼠耳蜗的病理学变化。

固肾培元方对肾阳虚大鼠听力影响的实验研究

目的观察固肾培元方对肾阳虚大鼠听力的影响,为中医肾与耳的关系提供新的实验资料。方法将耳廓反应灵敏的健康SD大鼠随机选取6只用于空白组,其余24只用于肾阳虚造模。采用肌注氢化可的松注射液的方法造成肾阳虚模型,造模14 d后,分为模型组、中药高剂量组、中药中剂量组、中药低剂量组。治疗组造模结束后开始给药,连续给药2周。实验期间观察大鼠的反应、活动情况、进食量、毛色、大小便等。给药结束后,采用MEB-2200肌电图/诱发电位仪检测大鼠的Ⅰ波、Ⅲ波潜伏期、Ⅰ-Ⅲ波峰间潜伏期及听性脑干反应(ABR)。结果固肾培元方可使肾阳虚大鼠ABR阈值降低,Ⅰ波、Ⅲ波潜伏期、Ⅰ-Ⅲ波峰间潜伏期均缩短,与空白组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论固肾培元方能够起到改善听力作用。

补肾活血方对肾阳虚大鼠耳蜗组织JNK mRNA表达的影响

目的:观察补肾活血方对肾阳虚大鼠耳蜗组织JNK mRNA表达的影响。方法:随机选取耳廓反应灵敏的健康SD大鼠8只用于空白对照组,模型组、补肾活血方组采用肌注氢化可的松注射液的方法造成肾阳虚模型,治疗组在造模的同时,每日给予补肾活血方药灌胃,空白对照组、模型组每日给予0.9%氯化钠溶液灌胃。2周后测试大鼠听性脑干反应(ABR),随后处死大鼠。在超净工作台上剥离耳蜗,用RT-PCR的方法检测耳蜗组织JNK mRNA的表达。结果:与空白对照组比较,模型组ABR及内耳JNK mRNA的表达显著升高(P<0.01);与模型组比较,补肾活血方组ABR及JNK mRNA的表达显著下调(P<0.01)。结论:补肾活血方可能通过调节JNK mRNA的表达而起到提高听力,改善耳蜗结构的作用。

补肾活血方对肾阳虚大鼠耳蜗组织Fas mRNA表达的影响

目的:观察补肾活血方对肾阳虚后大鼠耳蜗组织Fas mRNA表达的影响。方法:将耳廓反应灵敏的健康SD大鼠随机选取8只用于空白对照组,其余16只用于肾阳虚造模。采用氢化可的松注射液0.02 g·kg-1im的方法造成肾阳虚模型,造模14 d后,分为模型组、补肾活血方ig 3.1 g·kg-1组。治疗组造模结束后开始给药,连续ig给药2周。给药结束后测试大鼠听性脑干反应(ABR),随后处死动物。股动脉取血测试环磷酸腺苷(cAMP)、环磷酸鸟苷(cGMP);在超净工作台上剥离耳蜗,用RT-PCR的方法检测耳蜗组织Fas mRNA的表达。结果:空白组耳蜗Fas mRNA的表达为0.210 1±0.025 6,模型组Fas mRNA的表达为0.551 4±0.090 3,补肾活血方组Fas mRNA的表达0.242 9±0.052 5。经统计学分析,模型组大鼠耳蜗组织Fas mRNA的表达与空白组相比,明显上调,具有统计学意义(P<0.01);补肾活血方可降低肾阳虚大鼠耳蜗Fas mRNA的表达,与模型组比较,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:耳蜗组织中Fas蛋白的改变可能是促进肾阳虚后耳蜗病变发展的因子之一,补肾活血方可能通过调节Fas mRNA的表达而起到提高听力,改善耳蜗结构的作用。

固肾培元方对肾阳虚大鼠耳蜗组织NF-κBp65 mRNA表达的影响

目的:观察固肾培元方对肾阳虚大鼠耳蜗组织NF-κBp65 mRNA蛋白表达的影响。方法:采用肌注氢化可的松注射液的方法造成SD大鼠肾阳虚模型,用RT-PCR的方法检测耳蜗组织NF-κBp65 mRNA表达。结果:固肾培元方可使肾阳虚大鼠耳蜗NF-κBp65 mRNA表达增强,与模型组比较,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论:固肾培元方可能通过调节耳蜗相关凋亡因子NF-κBp65 mRNA的表达而达到改善听力、保护耳蜗结构与功能的目的。