甲型流感病毒H3N2诱导狗肾传代细胞凋亡的研究

目的探讨甲型流感病毒对体外培养的狗肾传代细胞系(MDCK)的凋亡诱导作用。方法用不同血凝单位的甲型流感病毒感染MDCK细胞,经HE染色、琼脂糖凝胶电泳以及流式细胞术等方法检测凋亡情况。结果甲型流感病毒感染MDCK后,在细胞形态上呈现凋亡特有变化;电泳出现典型梯状条带;AnnexinV染色流式细胞仪检测出在一定范围内,细胞凋亡率与病毒的浓度呈正相关。结论甲型流感病毒能够诱导体外培养的MDCK细胞凋亡,且在一定范围内,细胞凋亡率与病毒的浓度呈正相关。

非洲绿猴肾细胞传代培养中细胞消化液的优化试验

通过比较0.25%胰蛋白酶和改良的细胞消化液(0.02%EDTA-0.25%胰蛋白酶)对非洲绿猴肾(Vero)传代细胞系的消化分散效果,确定最适合实际生产需要的细胞消化液。结果表明,用改良的细胞消化液消化Vero传代细胞系,消化时间短,消化效果好,优于0.25%胰蛋白酶的消化效果。

犬疱疹病毒的分离鉴定

犬疱疹病毒引起１周龄以下仔犬严重和高死亡的疾病，用犬肾传代细胞ＭＤＣＫ，从濒死发病犬的肾脏器官分离获得一株疱疹病毒，经鉴定为犬疱疹病毒。培养液观察病毒大小为１４０ｎｍ有囊膜病毒，核酸型为ＤＮＡ，对乙醚敏感，对热抵抗力弱，５６℃经４分钟灭活，ｐＨ４．５时３０分钟失去感染力，用分离毒接种７日龄的幼犬引起典型的疱疹病毒感染症状，并从人工感染试验的幼犬回收到病毒。

干扰素-α2a对流感病毒感染的MDCK作用的研究

目的探讨干扰素-α2a对甲型流感病毒感染的狗肾传代细胞系(MDCK)的作用。方法采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法观察不同浓度(0.01、0.1、1、10、100U/ml)IFN-α2a在H3N2病毒感染MDCK0h、1h和4h后对细胞活性的影响。结果不同浓度的IFN-α2a能抑制正常生长及病毒感染1h、4h后的MDCK的增殖,但能促进病毒感染0h后的MDCK的生长,其中1.0U/ml组与对照组相比有显著差异(P<0.01)。结论IFN-α2a除了可抑制MDCK生长之外,还能促进H3N2感染初期细胞的增殖。

MDBK细胞传代中染色体畸变发生的研究

目的牛肾传代细胞系(mardin-darby bovine kidney,MDBK)通常用于疫苗生产过程中病毒的增殖,为了检验该细胞系安全性、监测细胞培养过程中是否发生染色体畸变,确保细胞系有清楚的遗传背景。对MDBK细胞系的原始细胞库、基础细胞库、工作细胞库最高限制代次细胞库以及超出最高限定代次10代的细胞进行了细胞核型分析。方法通过对不同代次细胞的染色体核型对比数据及染色体模式数变异率的分析数据,包括每个代次细胞染色体相对长度和着丝粒指数、染色体众数、染色体核型模式图等的数据的对比分析,结果该细胞系染色体分布频率在正常二倍体细胞(2n=52)附近。结论该细胞系在使用代次内染色体无显著变异,属于优质细胞系,可用于疫苗生产中病毒的增殖,使用代次范围控制在工作细胞库最高限制代次以内。

俄罗斯研制出衣原体灭活菌苗

最近,全俄实验兽医学研究所等人研制出灭活培养乳化衣原体菌苗,利用能够适应高鼻羚羊胚胎肾传代细胞系的B8个菌株以获得抗原(衣原体稳定产生滴度8.5—9.0LD50/0.2ml)。用这种菌苗在不同地区对衣原体病不安全的集体农庄和农场进行了生产试验。