尿毒清颗粒对腺嘌呤诱导的慢性肾功能衰竭大鼠肾皮质TGF-β_1及其下游基因mRNA表达的影响

为了研究尿毒清颗粒的作用机制,以灌胃腺嘌呤诱导的慢性肾功能衰竭Wistar大鼠为实验材料,用SYBR Green I实时荧光定量PCR(Real-time Fluorescent Quantitative PCR,Real-time FQ-PCR)技术检测了大鼠肾皮质转化生长因子-β1(Transfer Growth Factor-β1,TGF-β1)及其下游基因mRNA的表达变化,利用免疫组织化学(Immuno Histo Chemistry,IHC)技术检测了CRF大鼠肾皮质TGF-β1蛋白表达的变化.结果发现,尿毒清颗粒可以降低慢性肾功能衰竭大鼠肾皮质TGF-β1及其下游基因mRNA的表达,能够降低大鼠肾皮质TGF-β1蛋白的表达,P<0.05,差异具有显著性.尿毒清颗粒可以通过TGF-β1通路起到缓解慢性肾功能衰竭大鼠病理变化的作用,为尿毒清颗粒治疗慢性肾功能衰竭药理机制研究提供了实验基础.

慢性肾功能衰竭大鼠肾皮质基因组DNA表观遗传学变化的MSAP分析

以灌胃腺嘌呤诱导的慢性肾功能衰竭Wistar大鼠为实验材料,用高效液相色谱法(HPLC)检测了大鼠血清Hcy浓度的变化;应用甲基化敏感扩增多态性(methylation-sensitive amplification polymorphism,MSAP)技术,检测了慢性肾衰大鼠肾皮质基因组DNA甲基化程度的变化,并对MSAP差异片段进行了分析.结果发现:(1)慢性肾衰大鼠血清Hcy浓度由正常的(10.56±1.20)μmol/L上升为(16.64±1.57)μmol/L,P<0.05,差异具有显著性.(2)慢性肾衰大鼠肾皮质基因组总甲基化率由正常的(41.95±1.94)%降低为(38.43±3.27)%,P<0.05,差异具有显著性.(3)甲基化差异片段涉及多个基因,其中包括多个甲基化转移酶相关基因.结果表明慢性肾功能衰竭大鼠会出现高同型半胱氨酸血症和肾皮质基因组总甲基化水平的降低,多个基因内部或上下游DNA序列出现甲基化状态变化.

尿酸清对慢性肾功能衰竭继发高尿酸血症大鼠肾脏病理学的影响

目的观察尿酸清对慢性肾功能衰竭继发高尿酸血症大鼠肾脏病理学的影响。方法将34只健康SD雄性大鼠,随机分为3组。模型组14只及尿酸清组14只采用5/6肾切除方法造肾功能衰竭大鼠模型。尿酸清组造模后给予尿酸清5.625 g/(kg.d),灌胃,每日1次;假手术组6只及模型组常规喂养,每日等量蒸馏水灌胃1次。实验第16周末,采集24 h尿液后处死大鼠,对肾组织进行组织形态学观察,测定血尿素氮、血肌酐、内生肌酐清除率及24 h尿蛋白定量。结果病理形态学观察表明,尿酸清组肾组织损伤程度明显轻于模型组,且血尿素氮、血肌酐2、4 h尿蛋白定量均较模型组明显降低(P<0.01),内生肌酐清除率较模型组明显升高(P<0.01)。结论尿酸清能够保护残存肾单位,减轻代偿肾小球的滤过系统损伤及硬化进展,减轻肾小管和间质的损伤及病变的发展,促进肾组织病理损害的修复,是治疗慢性肾功能衰竭继发高尿酸血症的有效方剂。