鸡传染性支气管炎病毒肾型毒株血凝特性的研究

本文对鸡传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）澳大利亚Ｔ株和分离的四株肾型毒株（ＢＪ＿（９３０１）、ＢＪ＿（９３０２）、ＴＪ＿（９３０１）、ＨＮ＿（９３０１）株）的血凝特性进行了系统研究。结果表明ＩＢＶ供试毒株经１～２％胰蛋白酶处理后，能凝集鸡和小鼠红细胞，同一毒株对两种红细胞的凝集价相近，且均能被ＩＢＶ澳大利亚Ｔ株血清所抑制。处理后的ＩＢＶ对鸡红细胞的血凝以缓冲液浓度０．０１～０．０５ＭｐＨ６．０～８．４为宜，对反应温度及稀释液种类无严格要求。ＩＢＶ的血凝活性能耐受３７℃２３天、５６℃１２小时、８０℃１．５小时，但在－３０℃、４℃和室温下保存２个月后，绝大部分丧失血凝活性。ＩＢＶ经０．２％甲醛、０．２％脱氧胆酸钠、２％硼氢化钠、０．０１Ｍ高碘酸钠３７℃灭活２４小时，仍能保持其血凝活性。从ＩＢＶ的血凝活性可被过量胰蛋白酶破坏和氯仿灭活，推断该血凝素可能是由脂质和蛋白质组成。

IBV肾型毒株与呼吸型疫苗株鉴别方法的建立与应用

【目的】建立基于鸡传染性支气管炎病毒(IBV)S1基因的反转录-复合PCR方法,为IBV流行毒株和呼吸型疫苗株的分型鉴定提供技术支持。【方法】根据IBVN基因序列设计合成1对特异性通用引物,建立IBV的分子生物学检测方法,用以对IBV进行检测。通过对GenBank上公布的IBVS1基因全序列的分析比对,找出呼吸型疫苗株和地方肾型流行毒株相对保守的差异序列,设计合成2对引物,建立可以对这2类IBV毒株进行鉴别的反转录-复合PCR方法,同时对该方法的敏感性和重复性进行检测,并对该方法进行了实际应用。【结果】建立了区别IBV肾型毒株和呼吸型毒株的分型方法,该方法敏感性好,能检出经106稀释后的基因组RNA,且具有可重复性;临床应用显示,该方法对呼吸型毒株和近年来的地方肾型分离株具有较好的分型效果,而对较早时期的肾型分离株(YI株和澳大利亚T株)的扩增结果为阴性;经鉴定,近年来感染鸡群并引起高死亡率的分离毒株主要为肾型IBV。【结论】建立了区别IBV肾型毒株和呼吸型毒株的分型方法,该方法特异性强、敏感性高、重复性好,能将我国地方流行的肾型IBV毒株与呼吸型疫苗株完全区分开来。

鸡肾型传染性支气管炎病毒分离与鉴定

山东龙口地区某鸡场相继发生以白色水样痢疾、迅速消瘦、采水量增加为主要临床特征的疾病,通过采集病料接种鸡胚传代培养后分离到一株毒株,对该毒株进行血凝试验、NDV干扰试验、琼脂凝胶扩散试验及雏鸡回归试验研究。结果表明,经过持续的鸡胚传代,第3代开始形成蜷缩胚,第5代蜷缩的胚胎达到50%;第3代到第5代的尿囊液经过1%胰蛋白酶进行处理后具备了血凝性;该分离株在干扰实验中很大程度影响了NDV在鸡胚中的增殖;在雏鸡回归试验中,试验雏鸡感染了分离的病毒后,致死率为60%,发病率可以达到100%;感染鸡出现斑驳肾等病理变化,实验结果充分表明分离到的病毒为鸡肾型IBV。

鸡传染性支气管炎肾型弱毒株J9的免疫原性试验

以不同剂量 (1 0 3 .8～ 1 0 4 .9TOCID50 /只 )的IB肾型弱毒株J9免疫接种 1 5～ 70日龄SPF鸡 ,然后用部分国内分离的IBV肾型强毒株HV、NB90、L_1、TJ和国外肾型标准强毒株T攻击。三次试验初步表明 ,J9株具有对这些强毒株攻击的不同程度的免疫保护作用。

鸡传染性支气管炎肾型弱毒株J_9的安全性试验

以不同剂量 (10 3.3～ 10 5.5TOCID50 )IB肾型弱毒J9株 ,经眼、鼻途径接种 1～ 6 7日龄不同品种的鸡、接种后 2周内无任何临床不良反应 ,表明了J9株的临床安全性。将J9株用SPF雏鸡在负压隔离器内连续 7次传代 ,均无临床不良反应 ,并回收到病毒株 ,该毒株的临床安全性和遗传稳定性得到进一步证明。

鸡肾型传染性支气管炎病毒的分离与鉴定

自两个鸡场发病鸡群分离到两个肾型IBV毒株,分别命名为F1、F2株,并对其培养特性、理化特性、血凝性、致病性、免疫学特性以及对新城疫病毒的干扰性等方面进行研究。结果表明,两个毒株均能导致鸡胚感染,引起鸡胚出血、萎缩、绒毛尿囊膜增厚;IBV分离株对乙醚敏感,对酸碱有一定的耐性,属有囊膜病毒,该病毒不耐热,56℃ 30min即能灭活;分离株均能抑制鸡新城疫病毒B株在鸡胚中繁殖;分离株回归42日龄雏鸡后从第3天开始发病,发病率为100%,病死率为20%～30%。此外,用本病毒制备的油乳剂灭活苗,基本上可抵抗该毒株的攻击。