组织切片肾小球微分离技术在肾脏病研究中的应用

目的 :建立组织切片肾小球微分离技术 ,并将其应用于肾脏病分子病因学的研究。 方法 :选取肾脏病患者的肾活检组织石蜡切片。选取结构正常的肾小球、节段硬化肾小球和球性硬化肾小球分别进行肾小球微分离。一步法提取微分离肾小球DNA。PCR 微型凝胶电泳检验DNA质量。质量合格DNA应用于高保真PCR扩增TGF βⅡ型受体基因片段和聚丙烯酰胺凝胶电泳。 结果 :在成功获取肾小球丝球体的同时 ,相邻组织肾小囊壁保留完好 ;微分离小球一步法提取的DNA合格率 87 5 % ;各样本经高保真PCR扩增后 ,杂带少 ,目的条带清晰。密度随肾小球硬化程度递减。 结论 :本研究利用常规肾活检组织石蜡切片建立了肾小球微分离技术 ,进而用微分离肾小球提取DNA成功地进行了DNA扩增 。