红花对肾间质纤维化实验大鼠肾小管上皮细胞表型转化的抑制作用

目的目的观察红花对结扎单侧输尿管诱导的肾间质纤维化实验大鼠肾小管上皮细胞表型转化的抑制作用。方法结扎单侧输尿管方式复制肾间质纤维化实验动物模型,分别给以红花4.0g·kg-1·d-1、缬沙坦10mg·kg-1·d-1经口灌服,采用免疫组化、原位杂交方法检测大鼠肾脏肾小管上皮细胞表型转化标志物α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)及Ⅲ型胶原的表达。结果单侧输尿管结扎大鼠肾脏α-SMA动蛋白和Ⅲ型胶原的阳性面积及积分光密度较假手术组明显增强,红花及缬沙坦可显著性抑制其表达。结论红花可以通过抑制肾小管上皮细胞的表型转化拮抗肾间质纤维化。

罗格列酮对糖尿病兔肾小管上皮细胞表型转化与NADPH氧化酶的影响

目的:研究罗格列酮对NADPH氧化酶表达的影响,探讨其对肾小管上皮细胞表型转化(EMT)的可能作用机制。方法:取28只新西兰大白兔,随机分为对照组(NC组)、糖尿病组(DM组)和罗格列酮干预组(RGT组),DM组和RGT组以四氧嘧啶耳缘静脉注射,RGT组每天给予罗格列酮1.0mg/kg灌胃。第16周末时测定各组血糖、血脂、肌酐清除率(Ccr)、超氧化物歧化酶(SOD);免疫组织化学检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA),Western印迹检测NADPH氧化酶亚基p22phox的蛋白表达。结果:与NC组比较,DM组Ccr明显升高(P<0.01),SOD明显降低(P<0.05);p22phox和α-SMA蛋白表达升高;与DM组比较,RGT组p22phox和α-SMA蛋白表达降低(P<0.05),而其他指标也有改善。结论:RGT可能通过抑制糖尿病兔肾脏NADPH氧化酶活性,减少肾内氧化应激,阻断α-SMA表达,从而抑制EMT。

病理性损伤因素对肾小管上皮细胞表型转化的影响

目的 :观察低血清、高糖、高蛋白刺激下肾小管上皮细胞向间叶性细胞的表型转化 ,探讨损伤的肾小管上皮细胞在肾小管间质纤维化中的作用。方法 :以体外培养的人近端肾小管上皮细胞为对象 ,分别用含低血清(0 .2mol·L-1小牛血清 )、高葡萄糖 (4.5 g·L-1)、高白蛋白 (15 g·L-1)的培养液培养 7d ,透射电镜检测细胞形态变化 ;免疫组化和Westernblot检测细胞表型改变 ,包括CK、Vimentin、α SMA、Ⅰ和Ⅲ型胶原 ,原位杂交检测Ⅰ型胶原mRNA表达 ,同时检测细胞TGFβ1蛋白表达。 结果 :低血清、高糖、高蛋白直接刺激下 ,肾小管上皮细胞出现明显形态学改变 ,包括细胞变为长梭形 ;透射电镜下细胞内线粒体明显减少 ,粗面内质网明显增加 ,并出现actin样微丝。免疫组化染色和Westernblot显示CK表达明显减弱 ,Vimentin、Ⅰ、Ⅲ型胶原、α SMA和TGFβ1表达增强。原位杂交显示Ⅰ型胶原mRNA表达增强。结论 :低血清、高糖、高蛋白可直接引起人近端肾小管上皮细胞TGFβ1表达增加 。

止消通脉宁干预转化生长因子-β_1诱导人肾小管上皮细胞表型转化的研究

目的观察止消通脉宁药物血清对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导人肾小管上皮细胞(HK-2)表型转化的影响,并探讨其机制。方法将HK-2细胞用含10%胎牛血清的DMEM/F12(1∶1)培养基培养并分为空白对照组、TGF-β1诱导组(TGF-β110 ng/mL)、空白血清对照组(TGF-β110 ng/mL+10%空白血清)、干预1组(TGF-β110 ng/mL+10%低剂量止消通脉宁药物血清)、干预2组(TGF-β110 ng/mL+10%中剂量止消通脉宁药物血清)、干预3组(TGF-β110 ng/mL+10%高剂量止消通脉宁药物血清)。药物干预24 h后,免疫组化检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和E-钙黏蛋白(E-cadherin)的表达。在24、48、72 h应用酶联免疫吸附法检测细胞培养上清中Ⅰ型胶原(ColⅠ)、Ⅲ型胶原(ColⅢ)和纤连蛋白(FN)的含量。结果正常HK-2细胞表达E-cadherin,不表达α-SMA,经TGF-β1刺激后细胞表型发生转变,E-cadherin的表达明显减弱,α-SMA表达明显增强,且ColⅠ、ColⅢ和FN的分泌明显增加,与空白对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。止消通脉宁药物血清干预后α-SMA表达明显减弱,E-cadherin表达明显增强;同时抑制了ColⅠ、ColⅢ和FN的分泌,与TGF-β1诱导组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论止消通脉宁在一定程度上能够抑制人肾小管上皮细胞表型转化,减少细胞外基质成分的分泌,具有防治肾间质纤维化的作用。

加味升阳益胃汤对大鼠肾小管上皮细胞表型转化的影响

为探讨补脾肾活血升阳除湿法组方加味升阳益胃汤对阿霉素肾病大鼠肾小管上皮细胞表型转化的影响,对72只大鼠采用尾静脉二次注射阿霉素法建立模型。实验动物分为空白组、模型组、苯那普利组、中药低剂量组及中药高剂量组。观察实验大鼠治疗前后一般状态;将肾组织病理切片进行HE、Masson染色,观察治疗前后病理改变及肾间质病变情况;采用免疫组化半定量分析法检测肾小管间质中的α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达水平。结果表明,8周后,与模型组比较,中药低、高剂量组、苯那普利组大鼠尿蛋白下降明显,且差异有显著意义(P<0.05),中药高剂量组的肾小管间质损害评分下降明显(P<0.05),中药低、高剂量组及苯那普利组肾间质中α-SMA过度表达减少,且差异有显著意义(P<0.05),肾小管间质α-SMA的表达水平与肾小管间质损害程度有明显相关性(P<0.05)。结论:加味升阳益胃汤能减少阿霉素肾病大鼠尿蛋白排泄量,能下调肾小管间质α-SMA表达,从而抵制肾小管上皮细胞向肌成纤维细胞(间充质细胞)转化来减轻肾小管间质损害。

白藜芦醇对TGF-β1介导的肾小管上皮细胞表型转化和Hedgehog信号的影响

目的探讨白藜芦醇(Res)对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的肾小管上皮细胞(NRK-52E)表型转化(EMT)的影响及其分子机制。方法体外培养肾小管上皮细胞,分为对照组、诱导组(TGF-β1:5μg/L)、干预1组(TGF-β1+Res10μmol/ml)和干预2组(TGF-β1+Res100μmol/ml)。采用细胞免疫荧光和qRT-PCR技术检测EMT、细胞外基质和Hedgehog信号相关分子表达水平。结果 TGF-β1作用NRK-52E细胞后,不仅促进其受体TGF-β1R表达(P<0.05),且肌成纤维细胞标志物(α-SMA)和基质成分Ⅲ型胶原的表达增加,上皮细胞标志物(E-cadherin)表达下降。应用Res干预后,不仅抑制甚至逆转了上述结果,且抑制了TGF-β1介导的MMP-2/TIMP-2比值下降(P<0.05),促进基质成分降解。此外,Res也抑制TGF-β1诱导的PCNA表达上调(P<0 05),以及增殖相关的Hedgehog信号(Shh、Ptch1和Gli 1)活化(P<0.05)。结论 Res可能通过拮抗Hedgehog信号来抑制TGF-β1所诱导的NRK-52E细胞增殖、EMT和细胞外基质累积。

雌激素对实验性肾间质纤维化大鼠肾小管上皮细胞表型转化的影响

目的探讨雌激素在单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾间质纤维化模型中对肾小管上皮细胞表型转化的影响。方法雌性SD大鼠30只,随机分为4组:对照组;生理雌激素组(单纯UUO);低雌激素组(UUO+OVX);高雌激素组(UUO+E2)。21d后处死各组大鼠,用光镜观察梗阻肾组织病理变化,并用免疫组化和RT-PCR方法检测肾组织α-SMA蛋白和mRNA的表达。结果生理雌激素组出现肾小管间质纤维化改变,其肾组织α-SMA表达上调,与对照组相比有统计学意义(P<0.01);和生理雌激素组相比,低雌激素组纤维化病变加重,α-SMA表达明显增多(P<0.05);而高雌激素组则病变减轻,上述表达减少(均为P<0.05)。结论雌激素可能通过抑制UUO大鼠肾小管上皮细胞表型转化而发挥延缓肾间质纤维化的作用。

大黄酸对糖尿病大鼠肾小管上皮细胞表型转化的影响

目的:探讨大黄酸防治糖尿病肾病的机制。方法:60只雄性Wistar大鼠随机分为对照组(n=20只)和糖尿病模型组(n=40只),模型组大鼠给予腹腔内一次注射STZ60mg/kg诱导糖尿病模型,再随机分为糖尿病组和大黄酸组。大黄酸组给予大黄酸150mg/(kg.d)灌胃。16周后测定大鼠24h尿蛋白,光镜观察肾小管间质损害及纤维化,免疫组织化学法检测肾小管上皮细胞内肌成纤维细胞标志蛋白α-SMA和间质细胞标志蛋白Vimentin的表达,并对结果进行半定量分析。结果:糖尿病组大鼠24h尿蛋白排泄增加(P<0.01),肾小管上皮细胞α-SMA和Vimentin阳性表达面积分别为(0.2763±0.0529)和(0.1388±0.0336);大黄酸组大鼠24h尿蛋白排泄较糖尿病组减少,肾小管间质损伤和间质纤维化程度减轻,其肾小管上皮细胞α-SMA、Vimentin阳性表达面积分别为(0.1449±0.0447)和(0.822±0.0176),表达较糖尿病组显著下调(P<0.01)。结论:大黄酸能显著下调糖尿病大鼠肾小管上皮细胞α-SMA、Vimentin表达,阻抑肾小管上皮细胞的表型转化。

胰岛素样生长因子-I对体外培养的肾小管上皮细胞表型转化的作用

目的探讨胰岛素样生长因子-I(IGF-I)对体外培养的肾小管上皮细胞(HKC)表型转化的作用及IGF-I和TGF-β1之间有无协同作用。方法分为4组:(1)无血清对照组;(2)阳性对照组TGF-β1(8μg/L);(3)IGF-I(1、10、50和250μg/L)组;(4)IGF-I(50μg/L)+TGF-β1(8μg/L)和IGF-I(250μg/L)+TGF-β1(8μg/L)联合作用组。采用免疫荧光和免疫组化双染色法、流式细胞仪和酶联免疫吸附法观察HKC胞质中抗原角蛋白、钙黏蛋白、波形蛋白和-αSMA的表达,检测细胞培养上清液纤连蛋白和Ⅰ型胶原的浓度。结果IGF-I(50、250μg/L)能诱导HKC细胞表达波形蛋白、-αSMA,失去角蛋白和钙黏蛋白的表达;使-αSMA阳性的HKC细胞数显著高于阴性对照组。联合作用组-αSMA阳性的细胞数明显高于IGF-1或TGF-β1单用组,但无协同作用;IGF-I(10、50、250μg/L)组培养上清液纤连蛋白、Ⅰ型胶原的浓度明显升高,有剂量和时间依赖性。结论IGF-I能诱导肾小管上皮细胞发生表型转化;IGF-I和TGF-β1对诱导HKC转化无协同作用。

HBV-DNA阳性血清对体外肾小管上皮细胞表型转化的影响

目的 研究 HBV-DNA阳性血清对肾小管上皮细胞表型转化的作用。方法 以体外培养的人近端肾小管上皮细胞系 (HK-2 )为对象 ,分别用健康人血清、HBV-DNA阳性血清刺激 ,用免疫组织化学检测角蛋白(CK)、波形蛋白 (vimentin)、α-平滑肌肌动蛋白 (α-SMA)和 型胶原的蛋白表达。结果 在 HBV-DNA阳性血清直接作用下 ,肾小管上皮细胞免疫组化染色显示 CK弱阳性 ,vimentin、α-SMA和 型胶原增强。结论 在HBV-DNA阳性血清直接作用下 ,体外培养的正常人近端肾小管上皮细胞系 HK-2可发生上皮向间叶的表型转化。

IL-18对肾小管上皮细胞表型转化的影响

目的:研究IL-18对体外培养肾小管上皮细胞表型转化的影响,以明确IL-18在慢性肾脏疾病中的可能作用机制。方法:应用体外细胞培养技术培养人肾小管上皮细胞株(HK2)。应用RTPCR技术检测α平滑肌肌动蛋白(αSMA)、转化生长因子β1(TGFβ1)mRNA水平,用免疫细胞化学方法(ICC)及Westernblot技术分别检测IL18对HK2细胞表达αSMA蛋白的影响。结果:(1)IL-18可促进HK2细胞表达αSMA、TGFβ1mRNA,且两者之间呈正相关(P<0.05)。(2)IL18增加αSMA阳性HK2细胞百分数(P<0.05)。(3)IL18使HK2细胞αSMA蛋白表达水平增加。结论:IL-18可剂量和时间依赖性地促进肾小管上皮细胞转分化为肌成纤维细胞,促进肾间质纤维化。

TGF-β_(1)通过miR-21d-5p调控BMP7表达诱导肾小管上皮细胞增殖及迁移

目的:探讨转化生长因子-β_(1)(TGF-β_(1))可能通过微小RNA-21d-5p(miR-21d-5p)对骨形态发生蛋白7(BMP7)的调控,从而对肾小管上皮细胞的增殖以及迁移的影响及可能机制。方法:观察TGF-β_(1)处理的肾小管上皮细胞HK-2并检测miR-21d-5p的表达,在HK-2细胞中分组转染miR-21d-5p或anti-miR-21d-5p,再使用TGF-β_(1)处理,观察过度表达或抑制表达miR-21d-5p对TGF-β_(1)诱导肾小管上皮细胞的细胞活性及迁移的影响。分析TGF-β_(1)、miR-21d-5p与BMP7的靶向关系。共转染miR-21d-5p和pcDNA3.1-BMP7,或anti-miR-21d-5p和si-BMP7,使用TGF-β_(1)处理,评估TGF-β_(1)、miR-21d-5p与BMP7的在肾小管上皮细胞的增殖以及迁移的相互关系。结果:TGF-β_(1)处理HK-2细胞后,miR-21d-5p表达和迁移细胞数量升高(P<0.05),P21和E-钙黏蛋白(E-cadherin)水平降低(P<0.05)。过度表达miR-21d-5p增加TGF-β_(1)诱导HK-2细胞增殖和迁移上调(P<0.05),降低P21和E-cadherin蛋白表达(P<0.05),过度表达BMP7可以逆转此过程。抑制miR-21d-5p降低TGF-β_(1)诱导HK-2细胞增殖和迁移细胞水平(P<0.05),显著升高P21和E-cadherin蛋白水平(P<0.05),被抑制表达的BMP7可以逆转此过程。结论:TGF-β_(1)可能通过miR-21d-5p靶向调控BMP7表达,从而诱导肾小管上皮细胞增殖及迁移,进一步影响肾脏纤维化进展。

基于AKT/GSK-3β信号通路探讨熟地黄提取物对糖尿病肾病大鼠肾小球脏层上皮细胞表型转化的影响

目的基于蛋白激酶B(AKT)/糖原合成酶激酶(GSK)-3β信号通路,探讨熟地黄提取物对糖尿病肾病大鼠肾小球脏层上皮细胞表型转化的影响。方法建立糖尿病肾病大鼠模型,分为对照组、模型组、阳性对照组和熟地黄提取物组,分别进行8 w给药治疗,统计治疗后各组尿蛋白、尿肌酐、血糖、血清肌酐等指标,并统计肾脏E-钙黏蛋白(cadherin)、肾病蛋白(Nephrin)、肌间线蛋白(Desmin)、α-平滑肌肌动蛋白(SMA)mRNA及蛋白和p-AKT、p-GSK-3β蛋白表达情况。结果各组尿蛋白和尿肌酐差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组相比较,模型组、阳性对照组和熟地黄提取物组尿蛋白和尿肌酐均显著升高,且模型组和阳性对照组尿蛋白及尿肌酐明显高于熟地黄提取物组(均P<0.05)。各组血糖和血清肌酐差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组相比较,模型组、阳性对照组和熟地黄提取物组血糖和血清肌酐均显著升高,且模型组和阳性对照组血糖及血清肌酐明显高于熟地黄提取物组(均P<0.05)。各组E-cadherin、Nephrin、Desmin、α-SMA mRNA及蛋白表达差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组相比较,模型组、阳性对照组和熟地黄提取物组E-cadherin、Nephrin mRNA及蛋白表达均显著降低而Desmin、α-SMA mRNA及蛋白均显著升高(P<0.05),且模型组E-cadherin、Nephrin mRNA及蛋白表达明显低于阳性对照组和熟地黄提取物组,Desmin、α-SMA mRNA及蛋白表达明显高于阳性对照组和熟地黄提取物组(P<0.05)。各组p-AKT、p-GSK-3β蛋白表达差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组相比较,模型组、阳性对照组和熟地黄提取物组p-AKT、p-GSK-3β蛋白表达均显著升高,且模型组p-AKT、p-GSK-3β蛋白表达明显高于阳性对照组和熟地黄提取物组(P<0.05)。结论熟地黄提取物可能是通过影响AKT/GSK-3β信号通路抑制糖尿病肾病大鼠肾小球脏层上皮细胞表型转化。

肾络通对肾间质纤维化模型小鼠肾小管上皮细胞表型转化的影响

目的探讨肾络通治疗肾间质纤维化的可能作用机制。方法纯系C57BL/6J野生小鼠(WT)及肾上腺髓质素基因敲除杂合子小鼠(AMKO)随机分为假手术组、模型组、依普利酮组及肾络通组,每组5只。除假手术组外,其余各组结扎左侧输尿管复制肾间质纤维化小鼠模型。依普利酮组给予依普利酮100 mg/(kg·d)加入饲料喂养,肾络通组给予肾络通溶液26 g/(kg·d)灌胃,假手术组和模型组给予蒸馏水0.3 ml灌胃,共10天。HE、Masson染色观察各组小鼠梗阻侧肾组织病理改变;免疫组化法及Western Blot法检测肾组织α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、转化生长因子-β1(TGF-β1)、肾上腺髓质素(ADM)的表达;检测血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)水平。结果 WT及AMKO小鼠各组血Scr和BUN含量比较差异均无统计学意义(P>0.05)。肾脏病理结果显示,模型组肾小管扩张、上皮细胞坏死,肾间质大量炎性细胞浸润,胶原组织沉积显著增多,依普利酮组和肾络通组可明显抑制间质炎性细胞浸润及胶原沉积。与本鼠种假手术组比较,WT模型组和AMKO模型组α-SMA、TGF-β1表达明显升高,而ADM表达明显降低(P<0.01)。与本鼠种模型组比较,依普利酮组和肾络通组α-SMA、TGF-β1表达明显降低,而ADM表达明显升高(P<0.05或P<0.01)。两鼠种之间比较,AMKO假手术组、模型组、依普利酮组、肾络通组ADM表达均低于相应的WT小鼠组(P<0.05或P<0.01)。结论肾络通可能通过上调ADM表达,降低α-SMA、TGF-β1表达,从而抑制肾小管上皮细胞表型转化,减轻了肾脏病理损伤。

病理性因素对体外肾小管上皮细胞表型转化的影响

目的通过低血清、高糖、高白蛋白的刺激,观察肾小管上皮细胞的表型变化。方法以体外培养的人近端肾小管上皮细胞系HKC为对象,分别用低血清(2％小牛血清)、高糖(25 mmol/L)、高白蛋白(1.5 g/L)刺激,用透射电镜检测细胞形态变化;用免疫组织化学(组化)检测角蛋白(CK)、波形蛋白(vimentin)、α-平滑肌肌动蛋白(SMA)、I型胶原和转化生长因子(TGF)-β1的蛋白表达;Western blot进一步检测I型胶原蛋白表达的动态变化;细胞原位杂交检测I型胶原基因表达。结果在低血清、高糖、高白蛋白直接作用下,肾小管上皮细胞形态变化明显,包括呈梭形改变。透射电镜下细胞表面微绒毛及细胞内线粒体明显减少,粗面内质网明显增加。免疫组化染色显示CK减弱,vimentin、α-SMA、I型胶原和TGF-β1增强。Western blot显示I型胶原表达增加,且与损伤程度正相关。原位杂交显示I型胶原基因表达增加。结论在低血清、高糖、高白蛋白直接作用下,体外培养的正常人近端肾小管上皮细胞系HKC发生了上皮向问叶的表型转化。

实验性肾小管间质纤维化中肾小管上皮细胞表型转化的研究

目的 观察和研究肾小管间质纤维化过程中肾小管上皮细胞发生表型转化的现象及其形态特点。方法 结扎大鼠一侧肾静脉 ,制作大鼠肾小管间质纤维化模型 ,连续饲养 2 5d。每 5d杀检 5只 ,对肾脏重点检查 ,未结扎肾静脉的对侧肾作为对照 ,采用光镜、透射电镜、偏振光显微镜及免疫组织化学方法 [链霉素抗生物素蛋白 过氧化物酶 (SP)法 ]观察肾组织的病理变化以及肾小管上皮细胞的表型转化情况。结果 肾静脉结扎侧肾逐渐出现肾小管萎缩 ,肾间质淋巴、单核细胞浸润和纤维化等肾小管间质纤维化的典型病变。免疫组织化学观察发现 ,随着病变的发展 ,损伤的肾小管上皮细胞角蛋白表达逐渐减弱 ,而α平滑肌肌动蛋白、波形蛋白、转化生长因子 β1和Ⅰ、Ⅲ型胶原的表达逐渐增强 ,肾间质中也出现角蛋白阳性的间质细胞。透射电镜下可见肾小管上皮细胞内线粒体减少 ,内质网和微丝增多 ,并可见肾小管上皮细胞突破基底膜游离到肾间质中。天狼星红染色偏振光显微镜观察显示早期肾间质中Ⅲ型胶原增生为主 ,后期以Ⅰ型胶原为主。结论 在大鼠肾小管间质纤维化病变的发生和发展中 ,肾小管上皮细胞可转化为间质成纤维细胞 。

游离脂肪酸对体外肾小管上皮细胞表型转化的影响

目的研究游离脂肪酸(FFAs)对人类近曲肾小管上皮细胞株(HK-2)表型转化的作用。方法应用流式细胞技术和免疫组织化学方法检测不同剂量的FFAs在不同时间点上对HK-2细胞形态学及α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达的影响。结果FFAs呈剂量和时间依赖性促进HK-2细胞表达α-SMA;在高浓度的FFAs作用下,HK-2细胞呈梭形成纤维细胞样改变。结论在FFAs作用下,体外培养的正常人近曲肾小管上皮细胞发生上皮向间叶的表型转化。

TGF-β1对话Hedgehog-Gli1信号调控肾小管上皮细胞表型转化和胶原累积

该研究旨在探讨Hedgehog-Gli1（HH）信号在肾小管上皮细胞表型转化（epithelial-mesenchymal transition,EMT）和胶原累积中的作用及与TGF-β1信号的对话机制。该实验通过体外培养大鼠肾小管上皮细胞NRK-52E,以溶剂作为对照组,以1～50 ng/m L重组蛋白sonic hedgehog（Shh）或5 ng/m L TGF-β1作为诱导组,以加入或不加入HH信号特异性阻断剂环靶明（cyclopamine,Cyp）5μmol/L为干预组。细胞培养24 h,采用ELISA、q RT-PCR、免疫细胞荧光染色和Western blot等方法检测HH信号相关分子（Ptch1、Smo和Gli1）、TGF-β1、EMT相关分子（Rac1蛋白、肌成纤维细胞标志物α-SMA和上皮细胞标志物E-cadherin）、III型胶原m RNA或蛋白的表达。结果发现,外源性Shh上调Smo和Gli1表达,抑制Ptch1表达,继而激活HH信号;HH信号活化抑制肾小管上皮细胞E-cadherin的表达,上调α-SMA、III型胶原和TGF-β1的表达。环靶明干预后,Smo表达下调,进而抑制HH信号、EMT和胶原累积,并下调TGF-β1的表达。应用TGF-β1诱导小管上皮细胞EMT,同时也上调HH信号分子Smo和Gli1的表达,下调Ptch1的表达,提示TGF-β1可诱导HH信号活化。综上所述,HH信号和TGF-β1均参与了肾小管上皮细胞EMT和胶原累积过程。HH信号活化可促进TGF-β1的表达,同时TGF-β1能激活HH信号,推测TGF-β1与HH信号可能存在交叉对话以调控EMT和胶原累积。