人尿酸盐转运子1第3内含子突变对海南黎族人群高尿酸血症发生的影响

目的明确人尿酸盐转运子(h URAT)1第3内含子(h URAT1 IVS-3+11G>A)突变对海南黎族人群高尿酸血症发生的影响。方法海南黎族高尿酸血症患者100例为观察组,同期行体检的海南黎族非高尿酸血症者100例为对照组。采用突变特异性扩增系统(ARMS)对比两组h URAT1 IVS-3+11G>A等位基因突变情况。结果观察组h URAT1基因IVS-3+11G>A多态性A等位基因频率显著高于对照组(P<0.05)。经单因素及Logistics回归分析显示:饮酒、体重超重及携带h URAT1 IVS-3+11G>A多态性A等位基因为影响海南黎族高尿酸血症发生的独立风险因素(P<0.05)。结论 h URAT基因突变可能影响了海南黎族人高尿酸血症的发生,这一结果为此类疾病的遗传学病因探索提供了参考。

尿酸转运蛋白的基因组学及临床实验研究进展

尿酸是人体内细胞内核酸和其他嘌呤类化合物代谢的最终产物，血尿酸水平过高会导致痛风、心血管疾病，并与胰岛素抵抗、代谢综合征、肥胖、高血压发病等密切相关。血尿酸水平取决于尿酸生成与清除之间的平衡，嘌呤摄入过多或尿酸排泌减少均可导致血尿酸升高。人体尿酸代谢中，肾脏是排泌尿酸的最主要器官，约有2／3经肾脏途径排出，其他则通过肠道等肾外途径排泌。尿酸在肾脏的代谢首先经肾小球滤过，后通过肾近曲小管重吸收，再经肾小管分泌及分泌后重吸收，最终10%左右被清除。本文重点对近5年新发现的尿酸转运相关基因及蛋白的基因组学研究和实验研究结果，以尿酸分泌及排泄角度分类作一综述。

高尿酸血症患者URAT1基因rs524023位点多态性检测及临床意义

目的检测高尿酸血症(HUA)患者人尿酸盐转运子(URAT1)基因rs524023位点多态性并探讨其临床意义。方法将2019年3月至2021年4月在上海市宝山区罗店医院进行健康体检的200例体检者纳入研究,详细记录所有体检者的一般资料,采集其血液样本检测血生化指标和URAT1基因rs524023位点多态性。依据是否合并HUA分为合并HUA组47例和不合并HUA组153例,比较两组受检者的临床资料、URAT1基因rs524023位点等位基因和基因型频率分布,采用多因素Logistic回归分析URAT1基因rs524023位点多态性和HUA影响因素的交互作用。结果合并HUA组和未合并HUA组受检者在年龄、体质量指数(BMI)、血尿酸(SUA)、肌酐(Scr)、血尿素氮(BUN)、甘油三酯(TG)和肾小球滤过率(eGFR)水平方面比较差异均有统计学意义(P<0.05);在URAT1基因rs524023位点上,合并HUA组和未合并HUA组受检者的等位基因C、T的频率分别为27.66%、72.34%vs 41.83%、58.17%,基因型CC、TC、TT的频率分别10.64%、51.06%、38.30%vs 28.10%、37.91%、33.99%,差异均有统计学意义(P<0.05);年龄、BMI、高血脂和慢性肾病是影响HUA发病的影响因素,URAT1基因rs524023位点多态性与BMI≥25 kg/m^(2),合并高血脂和慢性肾病等HUA发病影响因素在相乘模型中存在交互作用(OR'值分别为0.81、1.17、1.57、2.16,P'值分别为0.31、0.03、0.03、0.02),增加了HUA的发病风险。结论URAT1基因rs524023位点突变可能会增加HUA发生的概率,且与BMI、高血脂和慢性肾病之间存在交互作用。

特发性肾性低尿酸血症相关的急性肾衰竭一例报告及文献复习

特发性肾性低尿酸血症(idiopathic renal hypouricemia,i RHUC)又称家族性肾性低尿酸血症,是一种常染色体隐性遗传性疾病。该病是因编码肾小管尿酸转运子的基因(SLCC2A12或SLC2A9)出现失活突变,造成肾小管对尿酸的转运功能受损,尿酸重吸收和(或)排泄增多,从而导致低尿酸血症。i RHUC可导致运动诱发急性肾功能衰竭(急性肾衰)及泌尿系统结石等并发症,临床上较罕见,且部分临床医师对其认知不足,易导致误诊、漏诊。本文报道1例SLC22A12基因突变的i RHUC患者运动后诱发急性肾衰的病例,并结合相关文献报道进行复习。

雌二醇对肾小管上皮细胞hUAT基因及蛋白表达的影响

目的观察不同浓度雌二醇对肾小管上皮细胞(HK-2细胞)人尿酸盐转运子(hUAT)基因表达的影响。方法取18瓶HK-2细胞,随机分为对照组、E1、E2组,每组6瓶。对照组培养液为DMEM+0.5%乙醇,E1组为DMEM+10-8mol/L雌二醇+0.5%乙醇,E2组为DMEM+10-6mol/L雌二醇+0.5%乙醇。均培养48 h。采用实时荧光定量PCR及Western blot法分别检测三组细胞中hUAT mRNA及蛋白的相对表达量。结果所有标本均能检测到hUAT mRNA和蛋白的表达。E1组hUAT mRNA表达水平为对照组的167%,E2组hUAT mRNA表达水平为对照组的187%。蛋白表达与mRNA表达结果一致。结论雌二醇可上调hUAT mRNA及蛋白的表达。

四妙散加味方对人肾小管上皮细胞UAT和URAT1基因表达的影响

目的:观察低、高剂量四妙散加味方(SMSJWF)是否调节人肾小管上皮细胞(HK-2细胞)尿酸盐转运子(hUAT)mRNA和有机阴离子转运体(hURAT1)mRNA的表达。方法:根据培养液中所含四妙散加味方剂量的不同,将HK-2细胞分为:DMEM/F-12+6 mL/2 kg四妙散加味方低剂量组;DMEM/F-12+12 mL/2 kg四妙散加味方高剂量组;DMEM/F-12+苯溴马隆4.8 mg/d阳性对照组;仅使用DMEM/F-12+空白血清对照组。四组细胞分别培养48 h,采用实时荧光定量PCR检测HK-2细胞中hUATmRNA、hURAT1 mRNA的相对表达量(2△△Ct法)。结果:所有标本均能检测到hUAT mRNA和hURAT1 mRNA的表达。低、高剂量组和阳性对照组hUAT mRNA表达水平均明显高于空白对照组(P<0.05);低剂量和阳性对照组的hURAT1 mRNA的表达明显低于空白对照组(P<0.05),而高剂量组hURAT1 mRNA的表达明显高于其他各组(P<0.05)。结论:低、高剂量四妙散加味方可上调hUAT mRNA表达;低剂量四妙散加味方与苯溴马隆均可下调hURAT1mRNA的表达,这可能是其降尿酸的作用机制之一。

泄浊除痹方总黄酮体外对尿酸吸收的影响及分子机制探讨

目的:研究泄浊除痹方总黄酮体外对尿酸吸收的影响及其分子机制。方法:利用小鼠肾小管上皮细胞(mouse renal tubular epithelial cells,RTECs)进行尿酸吸收实验,考查不同浓度泄浊除痹方总黄酮对细胞尿酸吸收的影响;RT-PCR检测不同药物作用浓度下小鼠肾脏尿酸转运蛋白1(mouse renal-specific transporter,RST)的基因表达。结果:泄浊除痹方总黄酮在1～2.5 g/L浓度范围内对尿酸吸收有显著抑制作用,并能使RST表达明显下调。结论:泄浊除痹方能够通过下调RST基因表达降低RTECs尿酸吸收作用。

URAT1基因多态性与哈萨克族人群高尿酸血症发病影响因素的交互作用

目的探讨人尿酸盐转运子(URAT1)基因rs524023位点基因多态性与哈萨克族高尿酸血症(HUA)发病影响因素间的交互作用。方法选取符合纳入标准的哈萨克族194例HUA患者和841例不合并HUA者作为研究对象,收集一般资料及血液标本后,检测一般生化指标及URAT1基因rs524023位点多态性。运用遗传模型(加性模型、显性模型和隐性模型)分析URAT1基因多态性与哈萨克族HUA的关联;采用多因素Logistic回归分析URAT1基因多态性与HUA影响因素间的交互作用。结果年龄(OR=1.02,95%CI=1.01~1.04)、慢性肾脏病(OR=5.99,95%CI=3.01~11.26)和高甘油三酯血症(OR=3.61,95%CI=2.49~5.24)为哈萨克族HUA的危险因素,而女性(OR=0.44,95%CI=0.31~0.62)为哈萨克族HUA的保护因素。遗传模型分析发现,TC、TT和TT+TC基因型相对于CC基因型表现为哈萨克族HUA的危险因素(OR>1,95%CI不跨1)。交互作用结果显示,女性携带rs524023位点突变表现为哈萨克族HUA的保护因素(P<0.05,OR'=0.16);慢性肾脏病患者携带rs524023位点突变可增加哈萨克族HUA的患病风险(P<0.05,OR'=2.12)。结论 URAT1基因rs524023位点突变可能增加哈萨克族HUA的易感性,且与性别、慢性肾脏病间存在交互作用。

高尿酸血症和痛风易感基因单核苷酸多态性研究新进展及应用

尿酸盐转运子基因是近年全基因组扫描锁定的高尿酸血症和痛风易感基因,如SLC22A12、SLC2A9、ABCG2基因等,其编码肾尿酸盐转运系统相关蛋白质,参与肾脏对尿酸的重吸收和分泌.目前锁定的尿酸盐转运子基因可解释约7%的血尿酸水平变异,有影响力的位点期待被发现.已有研究将这些易感基因应用到药物基因组学及孟德尔随机化研究领域,是未来新的发展方向.

URAT1基因多态性与维吾尔族高尿酸血症的交互作用研究

目的探索人尿酸盐转运子基因(URAT1)rs3825018、rs505802和rs524023位点基因多态性与维吾尔族高尿酸血症(HUA)的交互作用。方法选取2014年11月～2016年12月在新疆乌鲁木齐市某附属医院健康管理中心参加健康体检的维吾尔族2340例作为研究对象,并根据尿酸水平分为HUA组(n=986)与对照组(n=1354)。测量研究对象的身高、体重、腰臀围、血压等一般指标,并收集其禁食12 h后的静脉血液标本,检测血尿酸、肌酐、葡萄糖、总胆固醇和三酰甘油等生化指标及URAT1基因rs3825018、rs505802和rs524023位点基因多态性。结果 HUA组与对照组的URAT1基因rs3825018、rs505802和rs524023位点等位基因及基因型频率分布比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。遗传模型分析发现,无论是否调整年龄和性别,rs3825018、rs505802和rs524023三个多态性位点在三个遗传模型中均与维吾尔族HUA无显著相关(95%CI跨越1)。交互作用结果显示,维吾尔族女性携带rs505802位点突变在相加模型中存在负交互作用(S=-0.146,P<0.05)。结论URAT1基因rs3825018、rs505802和rs524023位点突变可能不会影响维吾尔族HUA的易感性,维吾尔族女性携带rs505802位点突变可能会在一定程度上降低发生HUA的风险。

清热泄浊化瘀方对人肾小管上皮细胞UAT和URAT1基因表达的影响

目的:观察不同浓度清热泄浊化瘀方(QRXZHYF)是否调节人肾小管上皮细胞(HK-2细胞)尿酸盐转运子(hUAT)mRNA和有机阴离子转运体(hURAT1)mRNA的表达。方法:根据培养液中所含清热泄浊化瘀方浓度的不同,将HK-2细胞分为:(1)A组:DMEM/F-12+6mL/2kg清热泄浊化瘀方组;(2)B组:DMEM/F-12+12mL/2kg清热泄浊化瘀方组;(3)C组:DMEM/F-12+23.5mL/2kg清热泄浊化瘀方组;(4)对照组D组:仅使用DMEM/F-12组;每组均培养6瓶细胞。上述细胞在不同培养液中分别培养48h。采用实时荧光定量PCR检测HK-2细胞中hUAT mRNA,hURAT1 mRNA的相对表达量(2△△Ct法)。结果:所有标本均能检测到hUAT mRNA的表达,A、B、C组hUAT mRNA表达水平均明显高于对照组,(P<0.05),且其提高hUATmRNA水平程度呈剂量依赖性;各组间hURAT1 mRNA表达明显,A、B、C组与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:不同浓度的清热泄浊化瘀方均可调节hUAT mRNA表达,且具有剂量依赖性;清热泄浊化瘀方对hURAT1 mRNA表达无调节作用。

桂枝汤对高尿酸血症小鼠肾保护作用的研究

目的:研究桂枝汤对高尿酸血症小鼠肾保护作用及其机制。方法:用氧嗪酸钾诱导小鼠产生高尿酸血症模型,并随机分为6组:空白对照组、模型对照组、别嘌呤醇组(5 mg·kg^(-1))、桂枝汤组(900、1 799和3 598 mg·kg^(-1))。苏木精-伊红染色观察小鼠肾脏组织病理学变化;商品化试剂盒测定小鼠血清和尿液中尿酸、肌酐和尿素氮水平以及肝脏黄嘌呤氧化酶(XOD)活性。采用Western blot方法检测动物肾脏尿酸盐转运子(URAT1)、葡萄糖转运子9(GLUT9)、三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员2(ABCG2)、有机阳离子转运子1(OCT1)、OCT2、有机阳离子/肉毒碱转运子1(OCTN1)和OCTN2。结果:与模型对照组比较,桂枝汤可明显降低高尿酸血症小鼠血清尿酸、肌酐和尿素氮水平,增加尿液尿酸和肌酐浓度,提高尿酸排泄分数。另外,桂枝汤可有效抑制高尿酸血症小鼠肝脏XOD活性,下调模型动物肾脏URAT1和GLUT9蛋白水平,上调肾脏ABCG2、OCT1、OCT2、OCTN1和OCTN2蛋白水平。结论:桂枝汤可能通过抑制高尿酸血症小鼠肝脏XOD活性以减少尿酸生成、调节肾脏有机离子转运子蛋白水平以促进尿酸及其他有机离子排泄,从而发挥其降尿酸和肾保护作用。

高血磷对5/6肾切除大鼠肾Ⅱa型钠-磷协同转运子基因表达的影响及司维拉姆的干预作用

目的研究高血磷对5/6肾切除大鼠肾脏Ⅱa型钠-磷协同转运子(NaPi-2)mRNA表达的影响及司维拉姆(Renagel)的干预作用。方法42只SD大鼠,随机分为5/6肾切除加高磷饲料组(STNx+HP)(含P1.2%)、5/6肾切除加低磷饲料组(STNx+LP)(含P0.2%)、5/6肾切除加正常磷饲料组(STNx+NP)、5/6肾切除高磷饲料+Renagel组(STNx+HP+Ren)(Renagel在饲料中占2%)、假手术高磷饲料组(Sham+HP)、假手术低磷饲料组(Sham+LP)、假手术正常磷饲料组(Sham+NP)。术后14d,测定血清离子钙(iCa)、磷(P)、全段甲状旁腺激素(iPTH)、血1,25-(OH)2D3和尿磷酸盐排泄分数(FEp)。RT-PCR检测NaPi-2mRNA在肾脏的表达。结果STNx+Hp组的血P、iPTH明显高于STNx+LP组及假手术3个组(P均<0.05);上述5个组间的血iCa、1,25-(OH)2D3差异无统计学意义(P均>0.05)。STNx+LP组血P、iPTH均明显低于STNx+HP组(P均<0.05)。STNx+HP组较STNx+LP组肾NaPi-2mRNA表达明显减少(P<0.01)。STNx+HP+Ren组较STNx+HP组NaPi-2mRNA表达明显增加。结论高磷血症是促进5/6。肾切除大鼠血iPTH增高且不受钙和1,25-(OH)2D3影响的独立因素。高磷显著地降低5/6肾切除鼠肾NaPi-2mRNA表达,而司维拉姆能显著降低血磷及iPTH,增加肾NaPi-2mRNA表达。

hURAT1基因真核表达重组体的构建及意义

目的构建pcDNA3.1(-)/hURAT1真核表达重组体。方法提取人全血基因组DNA,进行PCR扩增,将纯化的扩增产物与表达载体pcDNA3.1(-)连接后转化DH5α感受态细胞。重组质粒经BamHⅠ和EcoRⅠ酶切后,应用核苷酸序列测定方法进行鉴定。结果PCR扩增得到hURAT1第2外显子至第5内含子长1 958 bp的基因片段。该片段与表达载体pcDNA3.1(-)连接后转化DH5α感受态细胞。重组质粒经酶切和核苷酸序列测定方法鉴定,证实hURAT 1片段插入序列和方向正确。结论hURAT 1基因组DNA片段插入真核表达载体pcDNA3.1(-)的序列和方向正确,可用于后续基因功能研究,尤其是编码序列和内含子序列变异的功能研究。

缺血再灌注损伤后大鼠肾小管上皮细胞有机阴离子转运蛋白的表达及其功能

目的探讨大鼠肾脏缺血再灌注损伤（IRI）后肾小管上皮细胞有机阴离子转运蛋白（OAT）1和3表达及功能变化。方法建立大鼠IRI模型，于术后第1、2、4、6天取血及肾组织标本。常规测定Scr浓度及观察肾脏组织形态。分别用免疫组织化学和Western印迹检测肾脏组织OAT1和3蛋白表达。毛细血管电泳仪检测肾脏对氨基马尿酸（PAH）排泄率。钼蓝分光光度法测定基侧膜钠-钾-ATP酶（Na^＋-K^＋-ATP酶）活性。另设假手术组作对照。结果模型组大鼠术后第1天肾小管上皮细胞坏死脱落，管腔内可见大量管型，刷状缘消失，基底膜裸露；Scr显著升高。与假手术组比较，模型组大鼠肾组织匀浆及肾小管上皮细胞OAT1和OAT3表达增强；PAH排泄率降低[（0．53±0．15）比（4．00±0．67）ml／min，P〈0．01]；肾小管上皮细胞基侧膜Na^＋-K^＋-ATP酶活性降低[（9．33±1．37）比（15．07±0．15）μmolPi·（mg蛋白）^-1·h^-1，P〈0．01]。损伤后第2天及第4天，损伤的肾小管逐渐修复，OAT1和3表达逐渐降低，PAH排泄率和Na^＋-K^＋-ATP酶活性逐渐增加；至第6天时肾小管基本恢复正常。结论急性肾缺血再灌注导致大鼠肾小管上皮细胞可逆性损伤，损伤初期肾小管OAT1和OAT3表达增强，转运有机阴离子功能下降，PAH排泄减少。

特发性肾性低尿酸血症相关的运动诱发急性肾衰竭一例

特发性肾性低尿酸血症是一种罕见的常染色体隐性遗传的肾小管疾病，因编码肾小管尿酸转运子的基因出现失活性突变，造成肾小管对尿酸的转运功能受损，尿酸重吸收减少和（或）排泄增多，从而引起低尿酸血症。