白芍总苷对糖尿病大鼠肾小管-间质损伤的保护作用及机制

目的探讨白芍总苷(TGP)对糖尿病大鼠肾小管-间质损伤的保护作用及机制。方法采用链脲佐菌素(STZ)诱导大鼠糖尿病模型。SD大鼠随机分对照组、模型组、白芍总苷给药组(50、100、200mg·kg-1·d-1口服),8wk后观察肾小管-间质损伤指数(TII)的变化。应用免疫组化方法检测肾小管-间质骨桥蛋白(OPN);α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达,Western blot方法检测肾组织硝基酪氨酸(NT)表达。结果模型组大鼠TII明显高于对照组(P<0·01),TGP100、200mg·kg-1给药组TII明显低于模型组(P<0·05,P<0·01)。模型组肾小管-间质OPN与α-SMA蛋白表达明显高于对照组(P<0·01),TGP100、200mg·kg-1给药组肾小管-间质OPN表达明显低于模型组(P<0·01),TGP各剂量给药组肾小管-间质α-SMA蛋白均明显低于模型组(P<0·01)。模型组肾组织NT蛋白表达较对照组增加3·4倍,TGP50、100、200mg·kg-1给药8wk可使肾组织NT蛋白表达分别下降41·2%、43·8%与57·5%。结论白芍总苷对糖尿病大鼠肾小管-间质损伤有明显保护作用,其机制可能与抑制糖尿病肾小管-间质过高OPN与α-SMA表达有关。

广防己致大鼠慢性肾小管-间质损伤的实验研究Ⅰ

目的: 观察广防己醇提取物(RAFE)急性以及不同剂量的RAFE对肾脏慢性毒性。方法:采用常规的急性毒性实验方法和用不同剂量的RAFE(2 5 . 0 ,12 .0 0 ,2 0 0. 0mg·kg-1·d-1)以及马兜铃总酸(10. 0mg·kg-1·d-1)给大鼠间断灌胃13周,分别于给药第4 ,8,13周留取血、尿和肾组织标本,检测相关肾功能和组织学变化。结果:RAFE的LD50 为36. 8g·kg-1,LD50 95 %可信限为38 .8～2 .8 .9g·kg-1;不同剂量的RAFE作用早期,大鼠肾功能改变为氮质血症、大量蛋白尿以及尿NAG酶升高。肾脏组织形态学:中、大剂量和总酸组给药早期主要表现以皮髓质交界为主的急性肾小管坏死,而后可见部分动物肾间质纤维化。结论:NAG可作为大鼠早期肾功能损伤的观测指标之一;RAFE中、大剂量间断灌胃13周均可导致大鼠肾小管功能损害。

马兜铃酸致大鼠慢性肾小管-间质损伤的初步研究

目的：目前国内外尚未见有马兜铃酸（ＡＡ）诱导实验动物慢性肾间质纤维化的报告。本研究目的在于初步观察不同剂量的 ＡＡ可否引起大鼠慢性肾小管－间质损伤。方法：实验动物分为 ３组：（１）低剂量 ＡＡ组（ＡＬ组， Ｎ＝２０）：给以ＡＡ ２．５ｍｇ·ｋｇ－１·ｄ－１，腹膜内注射共１２周；（２）高剂量ＡＡ组（ＡＨ组，Ｎ＝２０）：给以ＡＡ ５ｍｇ·ｋｇ－１·ｄ－１，腹膜内注射共 １２周；（３）对照组（Ｃ组，Ｎ＝６）：给以生理盐水腹膜内注射，每只 ２ ｍｌ／ｄ，共 １２周。 ＡＬ、ＡＨ两组在用药后１、２、４、８、１２周分别处死４只大鼠，Ｃ组动物实验结束时处死，分别进行尿蛋白定量，尿β２－ＭＧ、肾功能、肾脏病理等方面的检查。结果：ＡＬ组在用药后１２周血ＢＵＮ水平有明显升高（Ｐ＜０．０５）；ＡＨ组在用药后８、１２周血ＢＵＮ水平均有明显升高（Ｐ＜０．０５、Ｐ＜０．０１）；而两组动物在用药后各时间点均未见尿蛋白、尿β２－ＭＧ、Ｓｃｒ水平明显升高（Ｐ＞０．０５）；肾病理检查可见两组动物８～１２周后有轻度肾小管－间质损害，尤以 ＡＨ组较为明显。结论：木研究中应用的一定剂量和时间的马兜铃酸可诱导大鼠发生慢性肾小管－间质损害及ＢＵＮ升高，但诱导实验动?

“慢性肾衰基本方”对肾小管-间质纤维化防治作用的实验研究

目的:研究“慢性肾衰基本方”的拮抗肾小管-间质纤维化(TIF)作用。方法:5/6肾切除大鼠模型给药4周,检测动物血尿素氮(BUN)和血清肌酐(Scr)水平;应用HE染色及PASM染色结合半定量计分法评估肾小管-间质损伤程度;应用免疫组化染色结合数码医学图象分析系统定量评判肾小管-间质α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、角蛋白18(CK-18)、胶原I(Col-I)和纤连蛋白(FN)的表达量。结果:CRF模型未治疗组BUN、Scr水平显著较假手术组升高,肾小管-间质严重纤维化,α-SMA表达量显著上调而CK-18表达量显著下调,Col-I和FN表达量也显著上调。经"慢性肾衰基本方"治疗后CRF大鼠BUN、Scr水平显著下降,TIF指数降低,肾小管上皮细胞表达CK-18回升,Col-I、FN及α-SMA表达也有不同程度回降。结论:“慢性肾衰基本方”可通过抑制肾小管上皮细胞转分化为肌成纤维细胞、抑制肾小管-间质ECM合成而防治TIF。

霉酚酸酯对糖尿病大鼠肾小管-间质损伤的保护作用及机制

研究霉酚酸酯(MMF)对糖尿病大鼠肾小管-间质损伤的保护作用,并探讨其可能机制。应用链脲佐菌素诱导大鼠糖尿病模型,随机分三组:对照组、模型组与MMF给药组。8周后观察尿白蛋白排泄率(AER)、肾小管-间质病理形态学变化,应用免疫组化方法检测肾小管-间质骨桥蛋白(OPN)与α-平滑肌肌动蛋白(-αSMA)蛋白表达,Western印迹检测肾组织IL-1与TNF-α蛋白表达。结果表明,糖尿病大鼠AER与肾小管-间质损伤指数(TII)明显高于对照组(P<0.01),MMF给药组AER与TII明显低于模型组(P<0.05);免疫组化显示模型组肾小管-间质OPN与-αSMA表达阳性面积明显高于对照组(P<0.01),MMF给药组肾小管OPN与与-αSMA表达阳性面积明显低于模型组(P<0.01);Western印迹显示模型组肾组织IL-1与TNF-α表达较对照组分别增加2.8倍与3.8倍,MMF给药组IL-1与TNF-α表达分别下降73%与70%(P<0.01)。研究显示MMF对糖尿病肾小管-间质损伤有明显保护作用,其机制可能部分与抑制肾小管-间质OPN与-αSMA表达有关。

急性肾小管-间质损伤与微小病变型肾综急性肾损伤发生的相关性

目的:探讨急性肾小管-间质损伤是否为MCD患者易于发生AKI的病理因素,及其急性肾小管-间质损伤高发的临床因素。方法:回顾性分析MCD患者急性肾小管-间质损伤发生率及损伤程度,对比发生AKI与未发生AKI的MCD患者急性肾小管-间质损伤严重程度;进一步分析临床指标、可疑肾毒性药物的使用与急性肾小管-间质损伤的相关性。结果:MCD患者急性肾小管-间质损伤的发生率为95.6%;MCD患者发生AKI组急性肾小管-间质损伤程度重于未发生AKI组,差异具有统计学意义(P<0.05);血清Alb水平与MCD患者急性肾小管-间质损伤程度呈负相关,而BUN、TG水平与MCD患者急性肾小管-间质损伤程度则呈正相关;使用可疑肾毒性药物组的急性肾小管-间质损伤显著重于未使用组,差异具有统计学意义(P<0.001)。结论:MCD患者普遍存在急性肾小管-间质损伤这一病理改变可能是其AKI高发的病理因素,有效循环血容量不足及可疑肾毒性药物的使用是导致MCD患者急性肾小管-间质损伤及AKI高发的重要因素。

SIRT1/SIRT3轴在糖尿病肾病肾小管-间质损伤中的作用研究

[目的]探讨沉默信息调节因子1(silent information regulator 1,SIRT1)/SIRT3轴在Zucker糖尿病肥胖(Zucker diabetic fatty,ZDF)大鼠肾小管-间质损伤中的作用。[方法]将16只清洁级雄性ZDF大鼠随机分为模型组和SIRT1过表达组,另将ZL大鼠8只设为正常组。建模成功后,分别检测尿蛋白(urinary protein,UP)、尿微量蛋白(urinary albumin,U-ALB)、空腹血糖(fasting blood glucose,FBG)和血肌酐(serum creatinine,Scr)水平。苏木素-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色和Masson染色后,镜下观察肾组织病理改变。以实时定量聚合酶链式反应(Real-time polymerase chain reaction,Real-time PCR)检测SIRT1和SIRT3 mRNA表达;Western blot测定肾组织SIRT1、SIRT3、微管相关蛋白轻链3 (microtubule-associated protein light chain 3,LC3)、p62和Parkin蛋白表达;免疫组化检测α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)表达。[结果]与正常组比较,模型组FBG、UP、U-ALB和Scr水平均明显升高(P<0.01);SIRT1和SIRT3 mRNA表达下降(P<0.05),SIRT1、LC3Ⅱ/Ⅰ和Parkin等蛋白表达明显降低(P<0.01),p62蛋白表达明显升高(P<0.05);肾间质α-SMA阳性细胞数增加(P<0.01);肾小球呈局灶性纤维化,局灶性肾小管上皮细胞空泡变、坏死及萎缩,出现管型,肾间质纤维增生。与模型组比较,SIRT1过表达组FBG、Scr和U-ALB水平均降低(P<0.01,P<0.05);SIRT1和SIRT3 m RNA表达增加(P<0.05,P<0.01);SIRT1、SIRT3、LC3Ⅱ/Ⅰ和Parkin等蛋白表达明显升高(P<0.05,P<0.01),p62蛋白表达明显降低(P<0.01);肾间质α-SMA阳性细胞数减少(P<0.01);肾脏病理改变减轻。[结论]SIRT1/SIRT3信号轴可能通过改善线粒体自噬,减轻肾小管-间质损伤,对肾脏起到保护作用。

细胞因子在慢性肾缺血与肾小管-间质纤维化过程中的作用

肾脏慢性缺血随着病情的进展会发展为肾小管间质纤维化。目前研究发现,血管紧张素-Ⅱ(AngⅡ)、低氧诱导因子-1(HIF-1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、转化生长因子-β(TGF-β)、内皮素(ET-1)、血小板衍生生长因子(PDGF)、结缔组织生长因子(CTGF)在肾纤维化中发挥了重要作用,阻断各细胞因子导致肾小管-间质纤维化的过程是当前的研究热点。

78例慢性肾脏病患者血瘀证与肾小管-间质病理损伤的相关性分析

目的:探讨慢性肾脏病(CKD)患者血瘀证与临床指标及肾脏病理之间的关系。方法:采用横断面调查,对符合纳入/排除标准的78例CKD患者于肾活检前24h内行中医虚损证候、血瘀证及湿热证评分;分析血瘀证积分与中医虚损证候积分、湿热证积分、年龄、病程、血压、体重指数(BMI)、24h尿蛋白定量、血浆白蛋白(Alb)、血肌酐(Scr)、尿酸(UA)、eGFR、血红蛋白(Hb)、血小板(PLT)、血三酰甘油(TG)、血胆固醇(CHO)、纤维蛋白原(FBI)等临床指标及肾脏病理损伤半定量积分之间的关系。结果:(1)经过多元相关回归分析及多元逐步回归分析,发现患者的瘀血证积分与虚损证型积分、湿热证积分及肾小管间质病理损伤积分之间有统计学意义(P<0.05)。(2)瘀血积分病程≥13个月组与4～6个月组存在统计学差异(P<0.05)。(3)瘀血积分在不同中医虚损证型中的分布均存在统计学差异(P<0.01),其中无虚损证型组与脾肾阳虚组存在统计学差异(P<0.05),与肝肾阴虚组及阴阳两虚组存在统计学差异(P<0.01)。(4)瘀血证积分随着患者肾小管-间质损伤程度不同而变化,其中多灶状损伤组分别与无损伤组、灶状损伤组存在统计学差异(P<0.01)。结论:(1)在CKD患者中存在瘀血证伴随中医虚损证型出现的情况;(2)湿热证与血瘀证之间存在密切联系,"湿热夹瘀"可能是CKD患者的重要中医证候;(3)血瘀证与肾小管间质损伤存在相关性,血瘀证可能是导致CKD进展的重要因素。

五种常见病原体感染与紫癜性肾炎患儿肾小管-间质损伤的相关性研究

目的:比较起病时无感染的紫癜性肾炎患儿与发病时存在支原体、链球菌、腺病毒、合胞病毒及流感病毒这5种常见病原体感染的患儿在肾小管及肾间质的损伤程度上的区别以明确以上5种病原体是否在紫癜性肾炎的发病过程中对肾小管及肾间质造成进一步损伤。方法:按照实验室检查结果将患儿分为无感染组及支原体感染组、链球菌感染组、腺病毒感染组、合胞病毒感染组及流感病毒感染组,比较其肾小球、肾小管、肾间质损伤程度。将各感染组分别分为有症状组及隐性感染组,组间比较其肾小管、肾间质损伤程度。结果:各组间肾小球损伤情况无明显差别。支原体感染组患儿在肾小管及肾间质的损伤程度上与无感染组患儿相比无差别,而链球菌、腺病毒、合胞病毒及流感病毒感染组的肾小管及肾间质损伤比无感染组严重。将以上四组患者分别分为有症状组及隐性感染组,组间比较发现其肾小管及肾间质损伤程度无差别。结论:链球菌、腺病毒、合胞病毒及流感病毒感染可能在紫癜性肾炎的发病过程中对肾小管及肾间质造成进一步损伤,且这种损伤的严重程度与感染的严重程度不相关。

三芪参散防治慢性肾小管-间质病变的实验研究

目的:探讨三芪参散防治腺嘌呤诱发大鼠慢性肾小管-间质病变的作用机制。方法:(1)按每天15mg/100g体重的剂量给大鼠灌服腺嘌呤,同时也灌服三芪参散0.4g/次,每d2次,连续21d。(2)按上述剂量给大鼠灌服腺嘌呤21d后,再灌服三芪参散0.4g/次,每d2次,连续30d。结果:两种处理方法都显示三芪参散能明显减少大鼠的24h尿蛋白(UPQ)和24h尿视黄醇结合蛋白(RBP)的排泄量,降低血清尿素氮(BUN)、肌酐(Scr)、甘油三脂(TG)、总胆固醇(TC)、血浆纤维蛋白原(FI)水平、血粘度和肾组织内羟脯氨酸(Hyp)含量。结论:三芪参散对腺嘌呤诱发大鼠慢性肾小管-间质病变有保护作用。

肾间质泡沫细胞MCP-1/CCR2的表达与肾小管-间质损害的关系

目的:检测Alport综合征、膜增生性肾小球肾炎、局灶节段硬化性肾小球肾炎、特发性膜性肾病及IgA肾病患者肾间质区域泡沫细胞浸润与MCP-1/CCR2蛋白的表达及小管-间质损害的相关性。方法:选取诊断明确的Alport综合征患者5例、膜增生性肾小球肾炎患者28例、局灶节段硬化性肾小球肾炎患者35例、特发性膜性肾病患者36例、IgA肾病患者34例作为研究对象。采用免疫组织化学法检测各例患者肾间质区域(除肾小管)MCP-1与CCR2的表达并分析其与肾小管-间质损害积分的相关性。结果:(1)肾小球疾病患者肾间质区域浸润的泡沫细胞上均可见MCP-1和CCR2蛋白的同时表达。(2)在各类原发性肾小球疾病患者中,泡沫细胞浸润组肾间质区域MCP-1和CCR2蛋白的表达明显高于无泡沫细胞组(P<0.05)。(3)MCP-1和CCR2蛋白的阳性表达值与肾小管-间质损害积分呈正相关(P<0.05)。结论:各种病理类型的肾小球疾病间质区域浸润的泡沫细胞可同时分泌产生MCP-1和CCR2蛋白,参与了肾小管-间质损害的发生。抑制泡沫细胞的浸润和阻断MCP-1/CCR2通路可延缓肾脏疾病的进展。

全反式维甲酸对糖尿病大鼠肾小管-间质Prohibitin表达的影响

目的探讨全反式维甲酸对糖尿病大鼠肾小管-间质Prohibitin表达的影响。方法24只链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病大鼠,随机分为治疗组(T),模型组(D)各12只和12只正常组(N),T组给予全反式维甲酸20mg/(kg.d)油溶液灌胃,D组和N组分别灌等量的溶剂,4、8周每组各处死大鼠6只,测量尿清蛋白排泄率、肾重/体重、血肌酐、血糖(BS)。肾组织Massons染色。免疫组化方法检测肾小管-间质Prohibitin的表达。结果全反式维甲酸可缓解肾小管的损伤,减少肾间质的细胞外基质,4、8周时尿清蛋白的排泄率治疗组分别显著低于模型组(P<0.01),血肌酐治疗组与同期模型组相比也显著降低。治疗组肾小管-间质Prohibitin的表达上调,明显高于模型组。结论全反式维甲酸可能通过上调肾小管-间质Prohibitin的表达防止肾间质的纤维化,保护肾功能。

糖尿病大鼠肾小管-间质Prohibitin的表达

目的探讨糖尿病大鼠肾小管-间质Prohibitin的表达。方法24只雄性SD大鼠分为12只链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病大鼠模型组(D)和12只正常组(N),4、8周每组各处死大鼠6只,测量24h尿清蛋白排泄率、肾重/体重、血肌酐、血糖(BS)。肾组织Masson染色。免疫组化方法检测肾小管-间质Prohibitin的表达。结果4、8周时尿清蛋白的排泄率正常组分别显著低于模型组[(1.90±0.36)μg/minVS(3.35±0.56)μg/min,P<0.01;(1.73±0.36)μg/minVS(4.53±0.87)μg/min,P<0.01];肾小管-间质Prohibitin的表达正常组明显高于模型组。模型组肾小管-间质的细胞外基质增多。结论糖尿病大鼠肾小管-间质Prohibitin的表达下调,与肾小管-间质损伤的严重程度呈正相关。

儿童原发性肾小球肾炎转铁蛋白与肾小管-间质病变的观察

目的 观察儿童肾小球疾病时尿蛋白和尿转铁蛋白(TRF)与肾小管-间质病变的关系及其临床意义。方法 对22例肾小球肾炎患儿(单纯性血尿9例,单纯性肾病5 例,血尿伴蛋白尿8 例)进行肾组织活检,并对肾小球、肾间质病变程度进行评分,同时测定尿TRF。结果 ①儿童肾小球肾炎单纯性血尿、单纯性肾病者的肾小管间质病变较轻,预后较好;血尿伴蛋白尿者肾小管间质病变明显,与单纯性血尿和单纯性肾病患儿的差异有显著性(P<0.05),易发生慢性肾功能不全。②3组间肾小球损害的差异无显著性(P>0.05),22 例患儿的肾小球病变与肾小管间质病变不相关(P=0.234)。③单纯性肾病、血尿伴蛋白尿患儿的尿TRF明显增高,与单纯性血尿患儿的差异均有显著性(P<0.05)。④血尿伴蛋白尿患儿肾小管间质病变与尿TRF增高呈正相关性(r=0.615,P=0.025)。⑤单纯性肾病患儿尿TRF亦明显增高,其肾小管间质病变较轻,可能与治疗效果较好、尿蛋白和尿TRF持续时间较短有关。结论 儿童肾小球疾病的发展和预后不仅与肾小球本身的病变有关,更与肾小管间质病变的严重程度密切相关,尿蛋白和尿铁离子可导致肾小管间质损害。

益肾汤防治IgA肾病肾小管-间质损伤的临床研究

目的:通过临床观察IgA肾病患者尿中α1-MG、NAG酶、MCP-1的变化,探讨"益肾汤"对IgAN肾小管-间质损害的影响。方法:将80例IgAN患者,随机分为两组,治疗组给予常规治疗和"益肾汤",对照组给予常规治疗和洛丁新(苯那普利)。观察两个疗程(2个月),检测尿RBC、24h尿蛋白定量,尿α1-MG、尿NAG酶、尿MCP-1。结果:治疗组总有效率73.81%,优于对照组的60.53%,以上观察指标治疗组均优于对照组(P<0.05)。结论:益肾汤治疗IgA肾病有效,能减轻肾小管-间质损伤,减缓肾脏炎症反应造成的急性损伤,从而改善IgAN预后。