肾康灌肠液保留灌肠治疗慢性肾功能衰竭30例

目的:评价肾康灌肠液保留灌肠治疗慢性肾功能衰竭(CRF)的临床疗效。方法:60例CRF患者随机分为两组,每组各30例。A组:采用常规治疗。B组:采用常规治疗+肾康灌肠液保留灌肠。分别观察病人治疗前、后的临床积分及肾功能指标的变化情况。结果:B组显效8例,有效20例,无效2例,总有效率93.3%;A组显效2例,有效18例,无效10例,总有效率66.7%;B组所用治疗方法降低尿素氮、肌酐作用明显优于A组,提高血红蛋白、红细胞作用也明显优于A组,差异有显著性(P<0.05)。结论:肾康灌肠液保留灌肠治疗早期CRF效果较理想,能缓解病情、改善症状,提高生存质量和延长生存时间。

肾康灌肠液保留灌肠治疗慢性肾衰的临床及护理观察

药物肠道保留灌肠是治疗慢性肾衰的有效方法之一,以肾康灌肠液保留灌肠治疗慢性肾衰前必须做好患者的心理护理,嘱患者灌肠前排便,以37～39℃的药液缓慢的滴入肠内,灌肠时应避开妇女月经期,同时应作好消毒隔离。

Wnt/β-catenin通路在肾衰康灌肠液抑制HK-2细胞缺氧/复氧损伤的作用

目的观察肾衰康灌肠液(大黄、丹参、红花、黄芪)含药血清对缺氧/复氧损伤人肾小管上皮细胞的保护作用,并探讨其对Wnt/β-catenin通路的影响。方法将新西兰大白兔随机分为对照组、肾衰康高剂量组、PBS组,分别予相应药物灌肠3 d后取血清。以对照组、PBS组、肾衰康高剂量组、肾衰康中剂量组、肾衰康低剂量组兔血清分别处理缺氧/复氧HK-2细胞。以ROS荧光探针检测H/R损伤发生。CFSE/PI法、流式细胞分析联合Annexin V-FITC/PI法分析细胞的损伤/凋亡情况。荧光定量PCR技术考察药物对Wnt4、β-catenin mRNA表达的影响。结果与造模前相比,造模后细胞内ROS表达的荧光强度明显增高。CFSE/PI双染显示,与对照组和PBS组相比,肾衰康高、中、低剂量组细胞死亡率明显降低,且以肾衰康高剂量组死亡率最低。Annexin V-FITC/PI联合流式细胞术检测显示,与对照组[12 h,(45.6±2.2)%]和PBS组[12 h,(41.6±0.7)%]相比,肾衰康低、中、高剂量组均有明显的凋亡/死亡抑制[12 h,低剂量组(14.8±0.3)%,中剂量组(10.3±0.6)%,高剂量组(12.9±0.9)%]。荧光定量PCR结果显示,肾衰康灌肠液含药血清对Wnt4 mRNA表达有显著上调作用,对β-caterin mRNA表达有显著双向调节作用(P<0.05)。结论肾衰康灌肠液含药血清对缺氧/复氧损伤HK-2细胞的凋亡/死亡有明显的抑制效果,其作用可能与激活Wnt/β-catenin通路有关。

肾衰康灌肠液含药血清对HK-2细胞缺氧/复氧损伤的预防作用

目的考察肾衰康灌肠液含药血清对人肾小管上皮细胞(HK-2)缺氧/复氧损伤的预防作用。方法家兔灌肠给药后采血,离心取血清,分为空白组、PBS组及含药血清高、中、低剂量组。各组血清预培养HK-2细胞24 h后,将细胞随机分为对照组、PBS组及含药血清高、中、低剂量组,二氯化钴(Co Cl2)进行缺氧/复氧造模,CFSE/PI染色、Annexin V-FITC/PI双染色、流式细胞分析检测造模后细胞凋亡/死亡率,ROS荧光探针检测观察含药血清对空白组、模型组、预防组细胞ROS水平的影响,PCR技术测定PBS组、含药血清组细胞AKT、NF-κB、MAPK mRNA表达。结果与对照组、PBS组比较,含药血清组细胞死亡率明显降低,以高剂量组最显著,并表现出明显的凋亡/死亡率抑制作用。造模后,预防组细胞ROS升高水平明显低于模型组,而且恢复至正常水平时间明显缩短。含药血清组AKT、NF-κB、MAPK mRNA表达先下降(0～4 h)再逐渐上升(4～12 h),并对NF-κB、MAPK mRNA表达呈现一定剂量依赖性,与PBS组比较有显著差异(P<0. 05)。结论肾衰康灌肠液含药血清可预防HK-2细胞缺氧/复氧损伤,其机制可能与抑制细胞氧化应激、减少细胞ROS过量聚积有关。

肾衰康灌肠液通过内质网应激对HK-2细胞缺氧/复氧损伤的保护作用及机制研究

目的:探讨肾衰康灌肠液是否有抗内质网应激治疗HK-2细胞缺氧/复氧损伤的作用。方法:利用新西兰大白兔灌肠制备肾衰康灌肠液含药血清,分别加入经缺氧/复氧损伤造模的HK-2细胞,并随机分为缺氧/复氧组、正常培养组、低剂量组、中剂量组、高剂量组,造模时分别检测细胞内ROS表达情况,判断细胞缺氧情况及造模时间,造模成功后0、4、8、12、24、48 h后分别使用CFSE/PI法、流式细胞法检测细胞凋亡,使用q(RT)-PCR法、WB法检测GRP78、CHOP的mRNA和蛋白表达。结果:中药肾衰康灌肠液对缺氧/复氧引起的细胞凋亡有抑制效果,中药组GRP78、CHOP基因的表达均发生明显下降,蛋白表达变化不明显。结论:中药肾衰康灌肠液有抗内质网应激治疗HK-2细胞缺氧/复氧损伤的作用。

肾衰康灌肠液配合西药治疗慢性肾功能衰竭68例

目的:探讨中药肾衰康灌肠液配合西医治疗慢性肾功能衰竭(CRF)患者对改善肾功能和延缓CRF进展的疗效。方法:采用肾衰康灌肠液(丹参、红花等)配合西药治疗本病68例,并设对照组。结果:治疗组总有效率为85.29%,明显高于对照组42.65%(P<0.01),治疗后血肌酐(Scr)和血尿素氮(BUN)均显著降低(P<0.05),1年内治疗组中有3/10的患者进入肾脏病终末期(ESRD),显著低于对照组的13/18(P<0.05)。结论:本方法对本病具有活血祛瘀,解毒化浊的功效。

肾衰康灌肠液含药血清对HK-2细胞缺氧/复氧损伤的保护作用及对Caspase-3、Bax、Bcl-2mRNA表达的影响

目的观察肾衰康灌肠液含药血清对缺氧/复氧损伤肾小管上皮细胞(HK-2细胞)凋亡的抑制作用,并探讨其对缺氧/复氧损伤HK-2细胞凋亡相关基因Caspase-3、Bax、Bcl-2表达的影响。方法将家兔随机分为空白组、PBS组、肾衰康组,予相应灌肠3 d后取血清,分别制备含空白血清、PBS血清、25%肾衰康灌肠液含药血清、50%肾衰康灌肠液含药血清、75%肾衰康灌肠液含药血清,利用各组血清分别处理缺氧/复氧损伤HK-2细胞。利用ROS荧光探针检测缺氧/复氧损伤情况,利用CFSE/PI、流式细胞术检测细胞凋亡情况;利用RT-PCR检测各组HK-2细胞Caspase-3、Bax、Bcl-2基因表达情况。结果与造模前相比,造模后细胞内ROS荧光强度增强,提示造模成功。CFSF/PI结果显示,与模型组相比、PBS组,肾衰康各组细胞凋亡明显被抑制,呈剂量依赖性。流式细胞术结果显示,与对照组[4 h,(42.7±3.5)%;12 h,(41.9±2.2)%]、PBS组[4 h,(40.9±1.2)%;12 h,(39.8±0.7)%]比较,肾衰康各组凋亡/死亡率明显被抑制(P<0.05),低剂量组[4 h,(18.5±0.2)%;12 h,(17.3±0.3)%]、中剂量组[4 h,(13.2±2.1)%;12 h,(14.1±0.6)%]、高剂量组[4 h,(10.7±0.1)%;12 h,(12.2±0.9)%]。RT-PCR结果显示,与对照组、PBS组比较,肾衰康各组Caspase-3、Bax mRNA表达明显被抑制(P<0.05),Bcl-2mRNA表达明显增加(P<0.05),以高剂量组明显。结论肾衰康灌肠液可以有效改善HK-2细胞缺氧/复氧损伤作用,其机制与下调促凋亡基因Caspase-3、Bax表达,上调抗凋亡基因Bcl-2表达有关。

肾衰康灌肠液治疗缺血性AKI作用机制的研究进展

急性肾损伤(acute kidney injury,AKI)是造成多器官损伤的临床危重症,肾缺血再灌注损伤(renal ischemia reperfusion injury,RIRI)导致的肾小管上皮细胞凋亡是缺血性AKI发生、发展的重要原因[1],迄今为止现代医学尚无任何有效的措施减轻肾组织损伤、促进肾脏修复[2]。肾衰康灌肠液是目前唯一以治疗AKI为适应症获批上市的中成药,由大黄、丹参、红花、黄芪按1.5∶1∶1∶1.5比例制备而成,含有大黄素、黄芪甲苷、黄芪多糖、红花素等多种成分。叶传蕙教授利用肾衰康灌肠液治疗各种原因所致的AKI患者173例,治愈率达90.7%,有效改善肾脏存活率[3]。现代药理研究发现,肾衰康灌肠液能有效抑制肾小管上皮细胞凋亡,其机制与抑制多种凋亡通路有关,现将肾衰康灌肠液治疗AKI的机制研究进展做一综述。

肾衰康灌肠液在急性肾缺血再灌注损伤中的作用及对p38-MAPK信号通路的影响

目的:研究肾衰康灌肠液在肾缺血再灌注损伤中的作用及其对p38-MAPK信号通路的影响。方法:采用新西兰大白兔灌肠制备肾衰康灌肠液含药血清,体外培养人肾小管上皮细胞株(HK-2细胞),并将其随机分为缺血再灌注组、PBS组、低剂量干预组、中剂量干预组、高剂量干预组,共5组。PBS组常规培养,对缺血再灌注组和低、中、高剂量干预组行急性缺血再灌注损伤造模。缺血再灌注开始后立即给予低剂量干预组(25%高剂量血清+75%空白血清)、中剂量干预组(50%高剂量血清+50%空白血清)、高剂量干预组(100%高剂量血清)含药血清处理。与此同时,缺血再灌注组和PBS组分别给予等量PBS灌肠后所得的兔血清,PBS组不予以细胞造模处理。操作0、4、8、12、24和48h后,分别采用RT-PCR法检测细胞中P38MAPK基因表达情况,采用Annexin V-FITC/PI联合流式细胞术分析细胞凋亡情况。结果:4h时,低剂量组细胞凋亡率为(13.5±0.2)%,中剂量组为(7.8±2.1)%,高剂量组为(13.3±0.1)%;12h时,低剂量组细胞凋亡率为(14.8±0.3%),中剂量组为(10.3±0.6)%,高剂量组为(12.9±0.9%),均显著低于对照组[4h,(47.8±3.5)%;12h,(45.6±2.2)%]和PBS组[4h,(45.7±1.2)%;12h,(41.6±0.7)%]。含药血清处理模型细胞4h后,与PBS组比较,低、中、高剂量组中MAPK基因表达均显著降低(P<0.05),且从8~12h,MAPK基因表达升高,逐渐恢复至正常水平。结论:肾衰康灌肠液可抑制肾缺血再灌注模型中HK-2细胞凋亡,可能是通过抑制p38-MAPK基因表达实现的。

CHOP/ERO1-α通路在肾衰康灌肠液抑制HK-2细胞缺氧/复氧损伤中的作用

目的探讨肾衰康灌肠液含药血清改善肾小管上皮细胞株(HK-2)细胞缺氧/复氧损伤的作用是否与抑制CHOP/ERO1-α凋亡信号通路减轻内质网应激介导的细胞凋亡有关。方法利用家兔灌肠制备肾衰康灌肠液含药血清,二氯化钴(CoCl2)进行缺氧/复氧模型建立,牛血清体外培养肾小管上皮细胞株(HK-2)。实验分为对照组(不予处理)、模型组(建立缺氧/复氧损伤模型)、肾衰康组(建立缺氧/复氧模型后加入肾衰康含药血清)、4-PBA组(缺氧/复氧模型建立后加入内质网抑制剂),于缺氧/复氧模型建立后0,4,12h利用CFSF/PI染色检测各组细胞的凋亡情况,RT-qPCR检测GRP78、CHOP、ERO1-α的mRNA表达,以及Western Blot检测GRP78、CHOP、ERO1-α蛋白表达情况。结果与对照组比较,模型组出现了明显的细胞凋亡;与模型组比较,肾衰康组组缺氧/复氧损伤HK-2细胞死亡率明显降低,并表现出明显的凋亡抑制作用。4h、12h,与对照组比较,模型组组CHOP、ERO1-α、GRP78的蛋白及mRNA表达明显增加(P<0.05),说明模型组HK-2细胞发生了ERS,且CHOP\ERO1-α凋亡信号通路被激活,与模型组比较,肾衰康组、4-PBA组CHOP、ERO1-α蛋白及mRNA表达明显被抑制(P<0.05),说明肾衰康与4-PBA作用相似,均能减轻缺氧/复氧损HK-2细胞内质网应激,抑制CHOP/ERO1-α凋亡信号通路。结论肾衰康灌肠液可以有效改善HK-2细胞缺氧/复氧损伤作用,该机制是通过下调CHOP、ERO1-α表达抑制CHOP/ERO1-α凋亡信号通路减轻内质网应激介导的凋亡而发挥作用。

肾衰康灌肠液对慢性肾功能衰竭大鼠保护作用的研究

目的观察肾衰康灌肠液对慢性肾功能衰竭大鼠的影响。方法采用"单肾切除加腺嘌呤灌胃法"建立大鼠肾衰模型。28d后,治疗组大鼠每天用高、中、低剂量的肾衰康灌肠液,尿毒清组用20%尿毒清混悬液灌胃。60d后收集尿液,处死大鼠,取血、留取肾组织,测定血Ca2+、P3+及血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、中分子物质(MMS)和24小时尿蛋白定量、尿Ca2+、P3+,进行统计学处理。结果肾衰康灌肠液对慢性肾衰竭大鼠的血Ca2+、P3+及Scr、BUN和24小时尿蛋白定量、尿Ca2+、P3+有不同程度的改善。结论肾衰康灌肠液对大鼠慢性肾衰竭有一定的保护作用。

叶氏肾康方在肾脏病中的开发及研究进展

叶氏肾康方由生黄芪、酒大黄、丹参、红花4味药组成,是叶传蕙教授基于肾脏疾病“虚、瘀、湿、毒”的基本病机及长期的临床实践创制而成。但有时急慢性肾衰竭患者不适合传统口服剂型,经过多年的研究,叶氏肾康方已被开发3种新剂型:注射液、栓剂和灌肠液,广泛应用于急慢性肾衰竭,并取得了良好的疗效。本文就叶氏肾康方3种剂型的临床应用及研究进展进行综述,以期为其合理用药、扩大临床治疗范围及开发更多剂型提供参考依据。