乳猪肾提取液预防顺铂致死性的初步研究

探讨乳猪肾提取液对顺铂致死性的预防作用。方法：实验分为单独皮下注射顺铂组及肾提取液预防组，观察各组动物的死亡率及肾功能损害程度。结果：单独顺铂组小鼠死亡率为３１．３０％肾提取液预防组为０．００％，Ｐ＜０．０５：单独顺铂组大鼠血清尿素氮为３０．６５±１２．７３，肾提取液预防组为２５．７４±２．５３，Ｐ＞０．０５、但后者有下降趋势。结论；肾提取液对顺铂致死性有一定的预防作用。

肾提取液对大鼠庆大霉素肾毒性的防治作用研究

研究乳猪肾提取液对大鼠庆大霉素肾毒性的防治作用。新鲜乳猪肾经匀浆、超滤等处理得肾提取液。肌注庆大霉素100mg／（kg·d）×7d制成大鼠急性肾衰模型。制模同时及造模后分别ip肾提取液15mg／（kg·d），观察大鼠血清尿素氮（Bloodureanitrogen，BUN）、肌酐（Cr）及肾组织变化情况。实验结束时，预防组BUN为9．30±2．60mmol/L，Cr为125．00±26．60μmol／L；模型组BUN为12.80±2.45mmol／L，Cr为167．00±39．60μmol／L，P＜0．01。结果表明，肾提取液可明显减轻庆大霉素对大鼠的肾损害。

肾安提取液对糖尿病小鼠肾脏TGF-β1和p38MAPK表达的影响

目的探讨肾安提取液对链脲佐菌素诱导(STZ)的糖尿病小鼠肾脏转化生长因子-β1(TGF-β1)和p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)表达的影响。方法 STZ诱导的糖尿病小鼠模型,随机分为模型组、厄贝沙坦组[厄贝沙坦10mg/(kg.d)]、肾安提取液组[肾安提取液9.088 mg/(kg.d)],另设正常对照组,疗程4周。RT-PCR检测肾脏TGF-β1和p38MAPK mRNA的表达;免疫化学法检测肾脏磷酸化p38MAPK(p-p38MAPK)和纤连蛋白(FN)表达;并检测血糖、24 h尿蛋白定量、血尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)、肾质量指数、肾小球硬化指数、肾小球基底膜(GBM)厚度。结果肾安组及厄贝沙坦组肾脏TGF-β1和p38 MAPK mRNA表达较模型组明显降低(P<0.01),肾脏p-p38MAPK和FN的表达较模型组明显减少(P<0.01);24h尿蛋白定量、BUN、Scr、肾质量指数、肾小球硬化指数、GBM厚度均较模型组明显改善(P<0.01);肾安组及厄贝沙坦组间上述指标无显著性差异(P>0.05);模型组、厄贝沙坦组及肾安提取液组间血糖差异无统计学意义(P>0.05)。结论肾安提取液可延缓糖尿病肾病的发生发展,机制可能与抑制TGF-β1和p38MAPK的表达有关。

肾安提取液对大鼠残余肾的病理学影响

目的:从肾脏病理组织学方面探讨肾安提取液阻缓肾纤维化的作用及其机制。方法:采用肾大部切除法制作慢性肾衰竭大鼠模型,随机分为7组:正常组、假手术组、模型组、肾安2g/kg组、肾安4g/kg组、肾安8g/kg组及阳性药物尿毒清3.6g/kg对照组,给药疗程2个月。采用肾组织病理半定量积分、Ⅳ型胶原(ColⅣ)半定量积分、增殖细胞核抗原(PC-NA)阳性细胞计数、肾小球细胞总数为观察指标。结果:肾安提取液各剂量组ColⅣ积分较模型组明显降低(P<0.05,P<0.01),其中肾安高剂量组ColⅣ积分较尿毒清组有统计学差异(P<0.05);肾安各剂量组肾小球内细胞总数与PCNA阳性细胞数均较模型组显著降低(P<0.05,P<0.01);在降低肾小球细胞总数上,肾安高剂量组明显优于尿毒清组(P<0.05)。各剂量组肾脏病理半定量积分明显低于模型组(P<0.05,P<0.01),其中,肾安高剂量组明显优于尿毒清组(P<0.01)。结论:肾安提取液通过抑制RK大鼠肾脏PCNA阳性细胞及总的肾小球细胞的增殖,减少细胞外基质(ECM)沉积,从而减轻残余肾组织病理损伤,具有明显的阻缓RK大鼠肾组织纤维化的作用。

肾安提取液对糖尿病小鼠肾脏AP-1和TGF-β_1表达的影响

目的:探讨肾安提取液对链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病小鼠肾脏转录激活蛋白-1(AP-1)和转化生长因子-β1(TGF-β1)表达的影响。方法:STZ诱导的糖尿病小鼠模型,随机分为模型组、厄贝沙坦组(厄贝沙坦10mg.kg-1.d-1)、肾安低、中、高剂量组(肾安提取液2.272mg.kg-1.d-1、4.544mg.kg-1.d-1、9.088mg.kg-1.d-1),另设正常对照组,疗程4周。检测肾脏AP-1(western blot分析法)、TGF-β1mRNA(实时荧光定量PCR法)及蛋白(western blot分析法)、纤连蛋白(免疫化学法)表达;并检测血糖、24h尿蛋白定量、血肌酐(Scr)、肾质量指数、肾小球硬化指数。结果:肾安各组及厄贝沙坦组肾脏AP-1和TGF-β1mRNA及蛋白表达较模型组明显降低(P<0.01),肾脏FN的表达较模型组明显减少(P<0.05,P<0.01);24h尿蛋白定量、肾质量指数、肾小球硬化指数均较模型组明显改善(P<0.01);肾安高剂量组Scr明显降低(P<0.05);肾安高剂量组及厄贝沙坦组间上述指标差异无统计学意义(P>0.05);模型组及各药物干预组间血糖差异无统计学意义(P>0.05)。结论:肾安提取液可延缓糖尿病肾病的发生发展,机制可能与抑制AP-1和TGF-β1的表达有关。

肾安提取液对5／6肾切除模型肾组织学的影响

目的 本研究将药物的有效作用部位黄芪甲苷、淫羊藿苷、大黄蒽醌等进行分离提取，观察其复方提取物(肾安提取液)对残余肾模型(RK)肾组织病理学及增殖细胞核抗原(PCNA)表达的影响。方法 Wistar雄性大鼠随机分成7组：正常组、假手术组、模型组、肾安2g／kg组、肾安4g／kg组、肾安8g／kg组及尿毒清组行肾大部切除术，在术后3个月每公斤体重分别灌服肾安2g、4g、8g及尿毒清3，6g，假手术及模型组灌服0．9％Nacl 10ml／kg，每日1次，疗程2个月。采用大鼠存活率、血尿素氮(BUN)、血肌酐(SCr)、PCAN及IV型胶原表达(CoIV)等为观察指标。结果 肾安不同剂量组均能明显提高RK模型存活率、能明显降低BUN、SCr(与模型组比较P<0．05，P<0．01)，其中以肾安大剂量组最显著；肾组织积分结果表明，肾安4g／kg组及8g／kg组肾小球及间质纤维化较模型组明显减轻(P<0．05，P<0．01)；免疫组化及半定量分析结果表明上述两组总的肾小球细胞、PCAN阳性细胞数及CoIV表达明显减少(与模型组比较P<0．05，P<0．01)。结论 PCNA表达与肾纤维化呈正相关关系。肾安提取液能减少RK肾组织PCNA表达，抑制纤维化，稳定肾功能，提高存活率，以大剂量组更明显，进一步探索中药提取物对肾纤维化的影响具有重要意义。

肾安提取液对糖尿病肾病小鼠肾脏结缔组织生长因子及Ⅳ型胶原的影响

目的:观察肾安提取液对糖尿病肾病(DN)小鼠肾脏的保护作用,对肾脏结缔组织生长因子(CTGF)及Ⅳ型胶原(Col-Ⅳ)的影响。方法:腹腔注射链脲佐菌素(STZ)建立小鼠DN模型,模型成功后随机分为6组:正常对照组、DN模型组、厄贝沙坦组、肾安高剂量组、肾安中剂量组、肾安低剂量组,药物干预4周后,检测相对肾重、血糖、24h尿蛋白量、血肌酐等,免疫组织化法检查肾皮质CTGF和Col-Ⅳ的表达。结果:DN小鼠相对肾重、血糖、24h尿白蛋量、血肌酐、肾皮质CTGF和Col-Ⅳ表达等显著升高,肾安提取液可降低肾皮质CTGF和Col-Ⅳ的表达,改善DN小鼠蛋白尿、肾功能等。结论:肾安提取液能保护DN小鼠肾脏,其机制可能与降低肾皮质CTGF和Col-Ⅳ的表达有关。

益肾活血提取液对同型半胱氨酸所致的兔VSMCs增殖的抑制作用

目的探讨益肾活血提取液(YSHXC)对同型半胱氨酸(HCY)诱导的兔主动脉平滑肌细胞(VSMCs)增殖的影响。方法组织贴块法体外原代培养兔VSMCs,建立HCY诱导的VSMCs增殖模型并分组:正常组、HCY刺激组、HCY+YSHXC组、HCY+叶酸组。采用MTT法检测细胞的增殖活度,免疫组化技术检测增殖细胞核抗原(PCNA)的表达,并采用流式细胞术检测细胞周期。结果YSHXC及叶酸均能降低PC-NA的表达(P<0.01),且中药组低于叶酸组(P<0.05)。细胞周期也有相应的变化,与HCY组相比,YSHXC组G0/G1期细胞比例显著升高,S期与G2/M期细胞显著降低(P<0.01),基本接近正常对照组(P>0.05)。结论YSHXC能抑制HCY诱导的VSMCs增殖,下调细胞内PCNA的表达,这可能与YSHXC推动细胞周期时相的改变有关。

肾安提取液对糖尿病肾病模型小鼠肾脏AGEs、RAGEs的影响

目的观察肾安提取液对糖尿病肾病(DN)模型小鼠肾脏AGEs、RAGEs的影响。方法小鼠随机分为正常对照组、DN模型组、厄贝沙坦组、肾安高剂量组、肾安中剂量组、肾安低剂量组,采用腹腔注射链脲佐菌素(STZ)建立小鼠DN模型,药物干预4周后,Realtime-PCR检测肾脏RAGEs mRNA表达,免疫组化法检测肾脏RAGEs的表达,分光光度法检测肾组织AGEs含量。结果 DN组小鼠肾脏AGEs、RAGEs mRNA、RAGEs表达较正常对照组显著升高(P<0.01),肾安提取液各剂量组肾脏AGEs、RAGEs mRNA、RAGEs表达较DN组显著降低(P<0.05,P<0.01)。结论肾安提取液能保护DN小鼠肾脏,其机制可能与降低肾皮质RAGEs mRNA、RAGEs表达,降低肾组织AGEs含量有关。

肾安提取液对3T3细胞增殖及α-肌动蛋白表达影响的实验研究

目的:从细胞学方面探讨肾安提取液阻缓肾纤维化的作用及其机理。方法:采用3T3细胞系作为成纤维细胞模型,以碱性成纤维细胞因子(bFGF)为刺激因子,分别进行细胞增殖和免疫组化实验。结果:肾安提取液对3T3细胞的抑制作用呈显著的剂量依赖关系;48 h 6.25 mg/m l,12.5 mg/m l,25 mg/m l组、72 h 3.12 mg/m l,6.25 mg/m l,12.5 mg/m l,25 mg/m l组与对照组对细胞增殖的影响比较,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01);其中25 mg/m l组72 h与48 h比较,差异有统计学意义(P<0.05);但与尿毒清组比较差异无统计学意义(P>0.05)。肾安提取液对bFGF刺激的α-肌动蛋白(α-actin)表达的抑制作用随剂量增加而增强。结论:提示肾安提取液可能通过抑制bFGF刺激的成纤维细胞的增殖及α-actin表达,从而减缓肾纤维化。

肾茶提取液对肾结石模型影响的实验研究

目的:探讨肾茶对大鼠肾结石模型影响的相关机制。方法:在乙二醇法诱导的大鼠肾结石模型上,灌胃予肾茶提取液,以大鼠的尿pH值、尿草酸、尿量、尿钙及肾组织学检查作为观察指标。结果:(1)肾茶提取液组大鼠饮水量正常,尿量增加,可降低尿钙浓度与尿草酸的含量,其与模型组比较(P<0.01)有极显著性差异;与枸橼酸钾组相比(P<0.05),有显著性差异。(2)肾茶提取液组对尿液pH值无改变,其与正常组比较(P>0.05)无显著性差异;与枸橼酸钾组相比(P>0.05),无显著性差异。(3)肾茶提取液组能显著减轻肾结石程度,与枸橼酸钾组相比,无显著性意义。(4)肾茶提取液组使肾小管管腔内结晶形成物明显减少,对肾组织恢复,与枸橼酸钾组相比,有优于枸橼酸钾组的趋势。结论:肾茶提取液可以增加尿量;降低尿草酸含量及尿钙的浓度;能抑制肾脏草酸钙结晶沉积;对尿pH值无改变。

益肾活血提取液对oxLDL诱导的人脐静脉内皮细胞CD40、MMP-9及VCAM-1表达的影响

目的观察益肾活血提取液对氧化型低密度脂蛋白（oxLDL）诱导的人脐静脉内皮细胞（HUVECs）CD40、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）、血管细胞黏附分子-1（VCAM-1）表达的影响。方法原代培养HUVECs,取3~5代细胞用于试验,提取细胞RNA及蛋白。采用实时定量RT-PCR检测HUVECs VCAM-1 mRNA表达,采用W estern印迹法观察HUVECs CD40及MMP-9的蛋白表达变化。结果 刺激组CD40、MMP-9及VCAM-1的表达较空白组明显升高（1.48±0.34 vs 0.45±0.16;1.54±0.16 vs 0.62±0.12,12.82±0.16 vs 1.00±0.01,P均〈0.001）,大、中、小剂量的益肾活血提取液可以不同程度地抑制oxLDL诱导的HUVECs、CD40、MMP-9及VCAM-1的高表达。结论益肾活血提取液具有改善内皮细胞功能的作用,其机制与抑制oxLDL诱导的HUVECs CD40、MMP-9及VCAM-1的高表达有关。

保肾宁提取液对糖尿病肾病大鼠的防治作用

目的观察保肾宁提取液对糖尿病肾病(DN)大鼠肾脏细胞凋亡及相关基因蛋白Bax与Bcl-2表达的影响。方法将SD大鼠单侧肾切除加腹腔注射链脲佐菌素(STZ)复制DN模型,每日灌胃保肾宁提取液,8周后检测24 h尿蛋白及肾功能,流式细胞术检测大鼠肾组织Bax及Bcl-2的表达,原位末端标记法(TUNEL)检测大鼠肾皮质细胞凋亡。结果保肾宁提取液能明显改善糖尿病肾病大鼠肾功能,大鼠肾皮质细胞Bcl-2表达增强,Bax表达减弱;肾小管和肾小球内凋亡细胞数明显减少。结论保肾宁提取液可通过调节凋亡相关蛋白Bcl-2及Bax的表达抑制肾脏细胞凋亡,从而发挥肾脏保护作用。

肾安提取液对糖尿病小鼠肾脏TGF-β1表达的影响

目的:探讨肾安提取液对链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病小鼠肾脏转化生长因子-β1(TGF-β1)表达的影响。方法:STZ诱导的糖尿病小鼠模型,随机分为模型组、厄贝沙坦组(厄贝沙坦10mg.kg-1.d-1)、肾安低、中、高剂量组(肾安提取液2.272、4.544、9.088mg.kg-1.d-1),另设正常对照组,疗程4周。检测TGF-β1 mRNA(实时荧光定量PCR法)及蛋白(Western blot分析法)、纤连蛋白(FN)及Smad7蛋白(免疫化学法)表达;透射电镜观察超微结构;并检测血糖、24h尿蛋白定量、肾质量指数、肾小球硬化指数。结果:肾安各组及厄贝沙坦组TGF-β1 mRNA及蛋白表达较模型组明显降低(P<0.01),肾脏FN及Smad7的表达较模型组明显减少(P<0.05,P<0.01);肾脏超微结构改善,肾小球基底膜增厚被明显抑制(P<0.05,P<0.01);24h尿蛋白定量、肾质量指数、肾小球硬化指数均较模型组明显改善(P<0.01);肾安高剂量组及厄贝沙坦组间上述指标无统计学意义;模型组及各药物干预组间血糖差异无统计学意义。结论:肾安提取液可能通过抑制TGF-β1的表达,减轻ECM积聚;并抑制TGF-β1/Smad7信号转导,减少足细胞凋亡,从而对DM肾损害起保护作用。