肾母细胞瘤过表达基因(NOV)mRNA含量与骨肉瘤组织中细胞生长、迁移相关基因表达的相关性

目的:探讨肾母细胞瘤过表达基因(NOV)mRNA含量与骨肉瘤组织中细胞生长、迁移相关基因表达的相关性。方法:收集在本院接受手术治疗的骨肉瘤患者78例,取骨肉瘤组织及癌旁组织。经荧光定量PCR法测定其中NOV及促增殖/抗增殖基因、侵袭基因的mRNA表达量,进一步经Pearson检验评估NOV mRNA表达量与骨肉瘤细胞生长、迁移活性的相关关系。结果:骨肉瘤组织中NOV mRNA的表达量显著低于癌旁组织,FoxM1、STIM1、Orai1的mRNA表达量显著高于癌旁组织,抗增殖基因RanBP9、Tap73、Caspase-3、PTEN、P53的mRNA表达量显著低于癌旁组织,侵袭基因EFEMP1、Notch1、Id1、Src的mRNA表达量显著高于癌旁组织(P<0.05)。经Pearson检验发现,骨肉瘤组织中NOV mRNA表达量与促增殖基因FoxM1、STIM1、Orai1的mRNA表达量呈负相关,与抗增殖基因RanBP9、Tap73、Caspase-3、PTEN、P53的mRNA表达量呈正相关,与侵袭基因EFEMP1、Notch1、Id1、Src的mRNA表达量呈负相关(P<0.05)。结论:骨肉瘤组织中NOV呈相对低表达,且NOV mRNA表达量与肿瘤细胞增殖、侵袭活性呈负相关。

肾母细胞瘤过表达基因对肾癌细胞的作用

目的探讨肾母细胞瘤过表达（nephroblastomaoverexpressed，NOV）基因对肾癌细胞增殖、黏附、侵袭和迁移能力的影响。方法构建NOV蛋白表达真核细胞重组表达质粒pEGFP—C1-NOV，转染人肾癌细胞株786—0。通过计数细胞绘制生长曲线、水溶性四氮唑法（WST-1）检测细胞生长抑制率，通过细胞黏附实验、侵袭实验和细胞迁移实验，比较转染pEGFP—C1-NOV组（实验组）与转染空载体组（空载组）及未转染组（空白组）的细胞增殖、黏附、侵袭和迁移能力的差异。结果与空白组比较，实验组48、72h抑制率分别为29．14％、32．46％，空载组分别为9．25％和-8．16％，实验组与空白组比较差异有统计学意义（P〈0．05），空载组与空白组相比差异无统计学意义（P〉0．05）。与层粘连蛋白黏附，实验组A值为0．26±0．03，高于空白组（0．15±0．01）和空载组（0．14±0．02），差异有统计学意义（P〈0．05）；与人纤维连接蛋白黏附，实验组A值为0．28±0．04，高于空白组（0．124±0．095）和空载组（0．128±0．082），差异有统计学意义（P〈0．05）。实验组穿越Matrigel基质胶的细胞数为240．25±23．12，显著高于空白组（56．16±6．25）和空载组（50．28±7．13），差异有统计学意义（P〈0．05）；实验组迁移通过聚碳酸酯微孔滤膜的细胞数为267．25±20．94，显著高于空白组（66．10±5．68）和空载组（56．28±4．11），差异有统计学意义（P〈0．05）。结论NOV可抑制。肾癌细胞的增殖，促进。肾癌细胞786—0的黏附、侵袭和迁移。

骨肉瘤组织中NOV基因表达量检测及与细胞增殖、迁移的相关性研究

目的:探讨骨肉瘤组织中肾母细胞瘤过表达基因(NOV)表达量检测及与细胞增殖、迁移的相关性。方法:2014年5月~2017年8月在孝感市中心医院接受手术治疗的骨肉瘤患者的病灶组织及瘤旁正常组织各97例,分别作为骨肉瘤组、正常对照组。采用荧光定量PCR检测不同组织标本中NOV基因、增殖相关基因、侵袭相关基因的表达量,采用Pearson检验评估骨肉瘤组织中NOV基因表达量及其与细胞增殖、迁移的相关性。结果:骨肉瘤组中NOV mRNA的表达量显著低于正常对照组(P<0.05);骨肉瘤组中KISS-1、TAp73 mRNA的表达量低于正常对照组(P<0.05),VCP、FoxM1、RIPK4、STIM1mRNA的表达量高于正常对照组(P<0.05);骨肉瘤组中DLX1、Sema6A mRNA的表达量低于正常对照组(P<0.05),EFEMP1、GPR56、SOX5、CRYAB mRNA的表达量高于正常对照组(P<0.05)。Pearson检验发现,骨肉瘤组织中NOV基因表达量与细胞增殖基因、侵袭基因的表达量直接相关。结论:骨肉瘤组织中NOV基因表达量低于瘤旁正常组织,且具体表达量与肿瘤细胞增殖、侵袭活性直接相关,可作为骨肉瘤恶性程度判断的可靠指标。

CCN3在胶质瘤细胞中的表达及对肿瘤侵袭作用影响的初步研究

目的以低恶性胶质瘤细胞A172和高恶性胶质瘤细胞U87为研究模型,观察分泌型蛋白肾母细胞瘤过表达基因(NOV/CCN3)在胶质瘤细胞中的表达并初步探讨可能的分子生物学机制。方法用实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)实验检测A172和U87细胞中CCN3的表达情况,同时用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测A172和U87细胞培养上清液中CCN3的蛋白含量,Transwell试验观察CCN3刺激前后A172细胞及U87细胞的侵袭能力。结果 U87细胞中CCN3在mRNA的表达水平是A172细胞中的15.63倍,CCN3在A172细胞培养上清液中的含量是48.62 pg/m L,而在U87细胞培养上清液中的含量是549 pg/m L;U87细胞的侵袭能力强于A172细胞,10 ng/m L的CCN3能明显增强A172细胞的侵袭能力,而对细胞增殖能力无明显影响。结论 CCN3的表达可能与胶质瘤的恶性程度密切相关,并与胶质瘤侵袭能力有关,与肿瘤增殖能力无关。

过表达NOV/CCN3可促进食管癌细胞的生长、迁移和侵袭

背景与目的:食管癌是我国最常见的恶性肿瘤之一。肾母细胞瘤过表达基因(nephroblastoma overexpressed gene,NOV)NOV/CCN3在肿瘤的发生、发展中起重要作用。本文研究过表达NOV/CCN3对食管癌细胞增殖、迁移以及浸润的影响。方法:构建NOV/CCN3过表达质粒pEGFP-C1-NOV,利用脂质体转染的方法转染人食管癌细胞株ECa-109、SEG-1、BIC-1。用蛋白质印迹法(Western blot)技术检测NOV蛋白在实验组(转染pEGFP-C1-NOV质粒的ECa-109、SEG-1、BIC-1)和空载体组(转染pEGFP-C1质粒的ECa-109、SEG-1、BIC-1)的表达水平。通过计数细胞绘制细胞生长曲线,比较2组的细胞增殖差异。通过细胞划痕实验,比较实验组和对照组细胞迁移能力的差异。通过Transwell细胞侵袭实验,比较2组细胞的侵袭差异。结果:Western blot结果显示,实验组NOV蛋白的表达明显高于空载体组(P<0.05)。细胞生长曲线显示,实验组细胞生长速度比空载体组快(P<0.05);细胞划痕迁移实验显示,实验组细胞迁移速度显著高于空载体组(P<0.05)。细胞侵袭实验显示,实验组细胞穿越Matrigel基质胶的细胞数显著快于空载体组(P<0.05)。结论:NOV过表达可促进食管癌细胞的增殖,并促进食管癌细胞的迁移和侵袭。

NOV基因对肾透明细胞癌细胞MMP表达的影响

目的探讨肾母细胞瘤过表达基因(NOV)对肾透明细胞癌细胞基质金属蛋白酶(MMP)表达的影响。方法构建NOV蛋白表达真核细胞重组表达质粒pEGFP-C1-NOV,转染人肾癌细胞株786-O。通过实时定量RT-PCR的方法定量转染pEGFP-C1-NOV细胞(实验组)、转染空载体细胞(空载组)和未转染的786-O细胞(空白组)的基质金属蛋白酶(MMP)亚型(包括MMP-1、MMP-2、MMP-3、MMP-7、MMP-9、MMP-13)的表达水平。方差分析法比较实验组与空载组及空白组各MMP亚型表达水平的差异。结果实验组与空白组和空载组比较,MMP-1、MMP-3和MMP-13表达水平升高(P<0.05),而MMP-2和MMP-7的表达水平下降(P<0.05)。实验组MMP-9的表达水平与空白组和空载组差异无统计学意义(P>0.05)。结论 NOV可调节肾透明细胞癌细胞MMP的表达,NOV对MMP的调节可能是NOV发挥功能的机制之一。