儿童1p与16q共缺失相关性肾母细胞瘤1例

患者女性,2岁6个月,2021年11月检查发现右侧腹部肿块就诊。B超示:右后腹膜探及一低回声包块,大小14.8 cm×11.8 cm×11.7 cm,边界清,形态不规则,内回声不均匀,内见少量细小钙化斑及散在细小无回声区,与右肾关系密切,包块左下切缘可见残余肾组织,包块上缘紧贴肝右叶,与肝脏分界尚清,肝脏受压向左移位。包块后缘紧贴脊柱,左侧缘紧贴腹腔干及肠系膜上动脉,血管受压向左移位。包块边缘可见多枚低回声结节,皮髓质分界不清。下腔静脉局部受压变窄。

青蒿琥酯调节AMPK/mTOR/ULK1信号通路对肾母细胞瘤细胞增殖、凋亡和自噬的影响

目的探讨青蒿琥酯对肾母细胞瘤细胞增殖、凋亡和自噬的作用及其分子机制。方法体外培养人肾母细胞瘤细胞株SK-NEP-1并以0、12.5、25.0、50.0、100.0、150.0μmol/L浓度的青蒿琥酯处理,采用CCK-8法测定各组细胞活力并筛选出青蒿琥酯最佳作用浓度。将SK-NEP-1细胞随机分为对照组、青蒿琥酯(100.0μmol/L)组、AMPK抑制剂Dorsomorphin(10.0μmol/L)组、青蒿琥酯(100.0μmol/L)+Dorsomorphin(10.0μmol/L)组,以青蒿琥酯和Dorsomorphin单独或联合处理各组细胞后,采用CCK-8法检测各组细胞活力,采用平板克隆形成实验检测各组细胞的集落形成情况;采用流式细胞术检测各组细胞的凋亡情况;采用MDC荧光染色法检测各组细胞的自噬情况;采用蛋白免疫印迹法检测各组细胞中凋亡相关蛋白[B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、cleaved多聚ADP核糖聚合酶(PARP)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)]、自噬相关蛋白[轻链3(LC3)Ⅱ、LC3Ⅰ、Beclin-1]及AMPK/mTOR/ULK1信号通路相关蛋白的表达情况。结果不同浓度青蒿琥酯均可抑制SK-NEP-1细胞的活力(均P<0.05),且随浓度升高其抑制作用增强。用100.0μmol/L青蒿琥酯和10.0μmol/L Dorsomorphin分别处理SK-NEP-1细胞后,与对照组相比,青蒿琥酯组细胞的凋亡率、自噬空泡相对量及Bax、cleaved PARP、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Beclin-1、p-AMPK/AMPK、p-ULK1/ULK1蛋白表达水平均升高(均P<0.05),细胞活力、集落形成率及Bcl-2、p-mTOR/mTOR蛋白表达水平均降低(均P<0.05);Dorsomorphin组细胞凋亡率、自噬空泡相对量及Bax、cleaved PARP、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Beclin-1、p-AMPK/AMPK、p-ULK1/ULK1蛋白表达水平均降低(均P<0.05),细胞活力、集落形成率及Bcl-2、p-mTOR/mTOR蛋白表达水平均升高(均P<0.05)。青蒿琥酯和Dorsomorphin联合干预SK-NEP-1细胞逆转了青蒿琥酯的抗肿瘤作用。结论青蒿琥酯可能通过激活AMPK/mTOR/ULK1信号通路增强肾母细胞瘤细胞自噬,进而抑制其增殖并促进其凋亡。

下调上皮内膜蛋白1抑制胶质母细胞瘤恶性生物学行为的实验研究

目的研究下调上皮内膜蛋白1(EMP1)对胶质母细胞瘤U251与U87细胞系增殖、侵袭、迁移、凋亡及U87细胞系荷瘤小鼠肿瘤体积及免疫组化指标的影响。方法采用siRNA干扰技术下调胶质母细胞瘤细胞系U87与U251中EMP1的表达。RT-qPCR和Western blot检测EMP1mRNA和蛋白的表达;CCK8和Transwell实验检测EMP1下调后肿瘤细胞增殖迁移及侵袭能力;流式细胞术检测EMP1下调后肿瘤细胞凋亡表达水平;构建U87细胞系裸鼠荷瘤模型,免疫组化法检测Ki-67和MMP2的表达。结果RT-qPCR和Western blot结果显示siRNA-EMP1导致EMP1的表达降低(P<0.05),CCK8和Transewll实验显示下调EMP1后肿瘤细胞的增殖、迁移及侵袭能力被显著抑制(P<0.05);流式细胞术结果显示下调EMP1后肿瘤细胞的凋亡能力明显增强(P<0.05);U87细胞系裸鼠荷瘤模型中下调EMP1后肿瘤细胞生长延缓,Ki-67及MMP2的表达降低。结论EMP1的表达下调可以抑制胶质母细胞瘤的增殖、迁移及侵袭,促进凋亡,延缓荷瘤小鼠肿瘤的生长与侵袭,从而抑制胶质母细胞瘤的恶性生物学行为。

山奈酚靶向B细胞淋巴瘤2相关蛋白A1抑制肾透明细胞癌细胞生物行为

目的 探讨山奈酚(Kaempferol)靶向B淋巴细胞瘤2相关蛋白(BCL2)A1抑制肾透明细胞癌(ccRCC)细胞的作用机制。方法 将ccRCC细胞(ACHN和769-P)分成Vector组(转染空载质粒)或Control组(正常培养)、Kaempferol组(Kaempferol处理细胞)和Kaempferol+BCL2A1组(转染BCL2A1并用Kaempferol处理)。生物信息学预测Kaempferol靶点并分析其与临床不良表型之间关系。噻唑蓝(MTT)检测不同浓度Kaempferol处理细胞的活力。CCK-8试剂盒和克隆形成检测细胞增殖能力。Transwell实验检测细胞迁移、侵袭能力。裸鼠移植瘤实验检测Kaempferol体内抑制细胞增殖能力。免疫组化检测增殖细胞抗原Ki67。Western印迹检测BCL2A1及上皮细胞间质转化(EMT)相关蛋白表达。结果 生物信息学数据库和软件分析显示,Kaempferol靶向BCL2A1,BCL2A1在ccRCC组织中表达上调且与临床不良表型有关。Kaempferol浓度和时间依赖性明显抑制ccRCC细胞BCL2A1蛋白表达(P<0.05)。以120或150μmol/L浓度分别作用ACHN、769-P细胞后,细胞活力明显下降(P<0.05)。以相应浓度Kaempferol作用细胞后,ccRCC细胞增殖、迁移和侵袭能力明显下降(P<0.05)。Kaempferol组移植瘤体积、重量、Ki67相对表达量和BCL2A1蛋白表达明显小于Control组(P<0.05)。与Vector组相比,BCL2A1组中BCL2A1蛋白表达明显增加(P<0.05)。与Control组相比,Kaempferol组中BCL2A1蛋白表达、增殖细胞、克隆细胞、迁移和侵袭细胞数明显减少(P<0.05);与Kaempferol组相比,Kaempferol+BCL2A1组上述指标明显增多(P<0.05)。细胞经Kaempferol干预后,E-cadherin蛋白表达明显增加,N-cadherin和Vimentin蛋白表达明显减少,而BCL2A1可明显逆转Kaempferol对EMT相关蛋白表达的影响(P<0.05)。结论 Kaempferol可抑制细胞增殖、迁移和侵袭能力,其可能是通过靶向调节BCL2A1蛋白表达,影响EMT相关蛋白表达实现的。

血清VEGF、MIP-1α、MVD在不同病理特征肾母细胞瘤患儿中的表达水平

目的:分析血清血管内皮生长因子(VEGF)、巨噬细胞炎性蛋白-1α(MIP-1α)、微血管密度(MVD)在不同病理特征肾母细胞瘤患儿中的表达水平。方法:选取2015年1月至2023年5月该院收治的89例肾母细胞瘤患儿设为观察组,另选取同期该院89名健康体检儿童设为健康组。比较两组及不同病理特征肾母细胞瘤患儿血清VEGF、MIP-1α、MVD水平。结果:观察组血清VEGF、MIP-1α、MVD水平均高于健康组,差异有统计学意义(P<0.05);不同病理特征肾母细胞瘤患儿血清VEGF、MIP-1α、MVD水平比较,Ⅲ~Ⅳ期>I~Ⅱ期,肿瘤破裂>肿瘤未破裂,淋巴结转移>淋巴结未转移,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:肾母细胞瘤患儿血清VEGF、MIP-1α和MVD水平较高且与病理分期、肿瘤破裂情况、淋巴结转移情况等病理特征存在相关性。

肾母细胞瘤中CyclinD1蛋白的表达及其意义

目的探讨CyclinD1蛋白在肾母细胞瘤中表达及其意义。方法将28例肾母细胞瘤和19例瘤旁肾组织制作组织芯片,并用免疫组织化学方法检测其中CyclinD1蛋白及p53蛋白的表达。结果CyclinD1和p53蛋白在肾母细胞瘤和瘤旁肾组织标本中的阳性表达率差异有统计学意义(P<0.05),在肾母细胞瘤不同分化程度组差异亦有统计学意义(P<0.05)。CyclinD1蛋白表达与p53蛋白表达呈正相关(P<0.05)。结论CyclinD1及p53可作为判断肾母细胞瘤分化程度的标志物,CyclinD1蛋白异常表达及p53突变可能在肾母细胞瘤发生中发挥重要作用。

Vimentin及Cyclin D_1蛋白在肾母细胞瘤中的表达及临床意义

目的:探讨Vimentin及CyclinD1蛋白在肾母细胞瘤中的表达及临床意义。方法:使用免疫组化ABC法测定肾母细胞瘤和正常对照组中Vimentin及CyclinD1蛋白的表达。结果:Vimentin的表达仅在肾母细胞瘤组和正常对照组的上皮分化区中对比有显著差异(P<0.05),其阳性表达率分别为93.9%(31/33)和40.0%(4/10)。Vimentin强表达与肾母细胞瘤的组织学分级相关,低分化组强阳性率72.2%(13/18),比中度分化组37.5%(3/8)和高分化组14.3%(1/7)明显高;且Vimentin强表达与肿瘤预后密切相关,转移、复发组与无转移、复发组Vimentin强阳性率分别为76.5%(13/17)和25.0%(4/16),差异有显著性(P<0.05)。CyclinD1蛋白在肾母细胞瘤组的上皮分化区中表达率为75.8%(25/33),而在正常对照组的相应表达率为40.0%(4/10),有显著性差异(P<0.05),但二者在间叶分化区的阳性表达率无统计学意义(P>0.05),且其表达与肿瘤组织学分级无关,同时CyclinD1在转移、复发组和无转移、复发组中的强阳性表达率分别为58.8%(10/17)和18.8%(3/16),有显著性差异(P<0.05)。结论:Vimentin及CyclinD1蛋白与肾母细胞瘤的发生有关,且Vimentin高表达与肿瘤分级程度及复发、转移等因素有关,此二者均可作为评估肾母细胞瘤预后的指标。

肾母细胞瘤中cyclinD1和P16蛋白的表达研究

目的:探讨cyclinD1和P16蛋白在肾母细胞瘤发生发展中的作用及其与临床病理特征的关系。方法:应用免疫组化法测定36例肾母细胞瘤和8例正常肾脏组织中cyclinD1和P16蛋白的表达。结果:(1)肾母细胞瘤中cyclinD1及P16蛋白的表达阳性率分别为55.56%(20/36)、61.11%(22/36);肾母细胞瘤组cyclinD1蛋白表达与正常组比较差异有统计学意义(P<0.05),瘤组织P16蛋白表达与正常组比较差异无统计学意义(P>0.05)。(2)肾母细胞瘤的组织分型、临床分期和有无淋巴结转移对cyclinD1和P16蛋白表达的影响无显著性差异(P>0.05)。(3)cyclinD1蛋白与P16蛋白的表达无明显相关性(P>0.05)。结论:(1)cyclinD1蛋白的高表达与肾母细胞瘤的发生密切相关。(2)cyclinD1和P16蛋白的浆型表达与该肿瘤的发生密切相关。

细胞周期蛋白D1(cyclinD1)及p16蛋白在肾母细胞瘤中的表达

目的 探讨细胞周期蛋白D1(cyclinD1)和p16蛋白在肾母细胞瘤中的表达、相关性及其意义。方法 应用免疫组织化学方法检测 4 2例肾母细胞瘤患者组织中cyclinD1和 p16蛋白的表达情况。结果 4 2例中cyclinD1蛋白过表达率为 4 5 .2 3% ,p16蛋白表达缺失率为 6 9.0 4 % ,p16阳性表达与病理组织类型、患儿预后明显相关 (P <0 .0 1)阳性表达者预后好。结论 (1) p16 -cyclinD1- pRb通路异常与肾母细胞瘤的发病机制密切相关 ,(2 )cyclinD1过表达是肿瘤发生的早期事件 ,(3) p16蛋白表达可作为判断肾母细胞瘤预后的一项指标。

膜型基质金属蛋白酶-1表达水平与胶质母细胞瘤患者放射治疗抵抗的相关性

目的探讨膜型基质金属蛋白酶-1(MT1-MMP)表达水平与胶质母细胞瘤(GBM)患者放射治疗抵抗的相关性。方法选取2021年1月至2022年1月新疆维吾尔自治区人民医院收治的112例GBM患者为研究对象,根据放射治疗反应性不同将研究对象分为放射治疗敏感组(放射治疗敏感,75例)和放射治疗抵抗组(放射治疗抵抗,37例)。比较分析两组患者的临床特征。分析GBM患者放射治疗抵抗的独立影响因素。结果两组患者的年龄、性别、体重指数、吸烟史比例、发病部位、Karnofsky功能状态评分比较差异均无统计学意义(P>0.05),放射治疗抵抗组患者的肿瘤最大径、非全部切除比例、MT1-MMP表达水平均大于或高于放射治疗敏感组,差异均有统计学意义(P<0.05)。多因素logistic回归分析结果显示,肿瘤最大径、MT1-MMP表达水平、非全部切除均为GBM放射治疗抵抗的独立危险因素(P<0.05)。结论MT1-MMP表达水平升高为GBM患者放射治疗抵抗的独立危险因素,可为GBM的诊断与治疗提供新思路。

p16蛋白在肾母细胞瘤中的表达

目的:探讨p16蛋白在肾母细胞瘤中的表达及临床意义。方法:应用S-P免疫组织化学方法对42例肾母细胞瘤常规石蜡标本进行p16蛋白检测。结果:42例中p16蛋白表达缺失率为69.05％,p16蛋白阳性表达与病理组织类型、患儿预后显著相关(P<0.01),阳性表达者预后好。结论:p16蛋白表达可作为判断肾母细胞瘤预后的指标。

肾母细胞瘤组织中ras癌基因P^(21)蛋白和表皮细胞生长因子受体的观察

应用免疫组化方法观察了30例肾母细胞瘤组织中ras癌基因P^21蛋白和表皮细胞生长因子受体(EGFr),发现P^21蛋白主要在间叶细胞表达。EGFr阳性细胞在间叶细胞和肾小管上皮型细胞中多见,且以上皮型细胞呈强阳性染色。结果提示肾母细胞瘤组织细胞学和基因蛋白水平表达的多样性。

肾母细胞瘤患儿血清α_1-抗胰蛋白酶、α_1-酸性糖蛋白和铜兰蛋白的测定

α_1-抗胰蛋白酶(α_1-AT)、α_1-酸性糖蛋白(α_1-AG)和铜兰蛋白(CP)属急性时相蛋白,在某些恶性肿瘤患者体液中有明显变化,国内外学者对其变化规律进行了大量的研究,但与小儿肾母细胞瘤的关系尚未见报道。作者对18例肾母细胞瘤患儿血清α_1-AT、α_1-AG和CP含量进行了测定。

胱抑素C、α_(1)-微球蛋白及尿微量白蛋白单独及联合检测对多发性骨髓瘤合并肾损伤的诊断价值

目的胱抑素C(Cys-C)、α_(1)-微球蛋白(α_(1)-MG)及尿微量白蛋白(UMA)单独及联合检测对多发性骨髓瘤(MM)合并肾损伤的诊断价值。方法依据肾损伤情况将113例MM患者分为损伤组(n=36)和未损伤组(n=77),比较两组患者及不同肾损伤类型MM合并肾损伤患者的Cys-C、α_(1)-MG及UMA水平。绘制受试者工作特征(ROC)曲线,计算曲线下面积(AUC),评估Cys-C、α_(1)-MG及UMA单独及联合检测对MM合并肾损伤的诊断价值。结果未损伤组患者Cys-C、α_(1)-MG及UMA水平均明显低于损伤组,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。肾衰竭型MM患者Cys-C、α_(1)-MG及UMA水平均明显高于肾病综合征型患者,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。Cys-C、α_(1)-MG及UMA联合检测诊断MM合并肾损伤的AUC为0.804(95%CI:0.733~0.876),灵敏度为0.889,特异度为0.909,均高于三者单独检测。结论MM合并肾损伤患者Cys-C、α_(1)-MG及UMA水平较高,三者联合检测诊断MM合并肾损伤的价值较高。

Fosl-1、β-catenin及Wnt蛋白在儿童肾母细胞瘤中的表达及临床意义

目的检测Fos样抗原1(Fosl-1)、β-连环蛋白(β-catenin)及Wnt蛋白在儿童肾母细胞瘤中的表达情况,结合临床资料,探讨其与儿童肾母细胞瘤发生、转移及预后的关系。方法采用免疫组化法检测57例肾母细胞瘤及癌旁组织中Fosl-1、β-catenin及Wnt蛋白的表达。分析三种蛋白与患者临床资料的关系。采用Cox多因素回归分析探讨它们的表达与患者预后的关系。结果Fosl-1、β-catenin及Wnt蛋白在癌组织中的高表达、异常表达率均高于癌旁组织(P<0.05)。在TNM分期、转移情况等临床特征下,Fosl-1高表达与Wnt蛋白异常表达在癌组织、癌旁组织中均有差异(P<0.05);在肿瘤转移情况下,β-catenin异常表达在癌旁组织中有差异(P<0.05)。Cox多因素回归分析示转移情况、β-catenin异常表达对肾母细胞瘤患儿预后有独立影响(P<0.05)。生存曲线示Fosl-1高表达、β-catenin及Wnt异常表达均降低肾母细胞瘤患儿生存率。结论Fosl-1、β-catenin及Wnt蛋白可能参与肾母细胞瘤的发生转移,并影响其预后,为肾母细胞瘤的诊治提供新的思路及理论基础。

肾母细胞瘤中ERCC1、TUBB3、TOP2A mRNA的表达及临床意义

目的探讨核苷酸切除修复交叉互补基因(excision repair cross complementation 1,ERCC1)、3型β微管蛋白编码基因(ClassⅢβ-tubulin,TUBB3)和DNA拓扑异构酶Ⅱα(TopoisomeraseⅡA,TOP2A)mRNA在小儿肾母细胞瘤组织中的表达及临床意义。方法收集18例肾母细胞瘤组织标本及14例癌旁组织标本,通过分支-DNA液相芯片法检测标本中ERCC1、TUBB3、TOP2A mRNA的表达水平,并分析上述基因表达与肾母细胞瘤临床病理的关系。结果肾母细胞瘤组织中ERCC1、TUBB3和TOP2A高表达率分别为44.4%、50.0%和66.7%,均显著高于癌旁组织的7.1%、7.1%和14.3%,差异有统计学意义(P<0.05)。ERCC1高表达率与肾母细胞瘤临床分期和病理类型有关(P<0.05),TOP2A高表达率与肾母细胞瘤临床分期相关(P<0.05)。结论小儿肾母细胞瘤组织中ERCC1、TUBB3和TOP2A mRNA表达高于癌旁组织,可能参与肾母细胞瘤的发生发展过程。

肾母细胞瘤1基因及其启动子甲基化在多发性骨髓瘤患者中的表达及其与病程的关联研究

目的探讨肾母细胞瘤1(WT1)基因及其启动子甲基化在多发性骨髓瘤中的表达意义及其与病程的关联性。方法入组确诊的多发性骨髓瘤患者43例(观察组)和健康对照者20例(对照组),检测2组研究对象骨髓WT1 mRNA表达水平及其基因启动子区甲基化阳性情况,并分析WT1基因及其启动子甲基化与病程的关联性。结果所有多发性骨髓患者WT1 mRNA表达水平低于对照组,而启动子甲基化水平高于对照组(P均<0. 05);男性患者WT1 mRNA表达水平低于对照组,而启动子甲基化水平高于对照组(P均<0. 05);女性患者启动子甲基化水平高于对照组(P <0. 05)。多发性骨髓瘤患者WT1 mRNA表达增高与病程延长呈负相关(r=-0. 101,P <0. 05),其中男性患者WT1 mRNA表达增高与病程延长呈负相关(r=-0. 090,P <0. 05),女性患者WT1 mRNA表达增高与病程延长呈负相关(r=-0. 180,P> 0. 05)。WT1启动子甲基化水平增高与病程病程延长呈正相关(r=0. 150,P <0. 05);男性和女性患者中启动子甲基化水平增高与病程延长也均呈正相关(r=0. 181,P <0. 05;r=0. 120,P <0. 05)。结论多发性骨髓瘤患者中存在WT1 mRNA表达减低,但女性不太明显;患者病程越长,WT1 mRNA表达水平越低,而其启动子甲基化水平越高,这提示WT1基因及其启动子甲基化状态在多发性骨髓瘤疾病进展过程中可能发挥了一定的作用。

nm23-H_1mRNA表达与肾母细胞瘤临床行为的关系

应用Northernblot分子杂交技术，检测30例肾母细胞瘤及其对应正常肾组织中nm23－H1mRNA表达。通过nm23－H1mRNA水平的比较及其与临床病理的分析，发现肾母细胞瘤nm23－H1mRNA呈低表达，随着病程的演进和转移的出现，肿瘤细胞中nm23－H1mRNA表达水平呈显著性降低，与肿瘤的病理类型无显著相关性（P＞0．05）。提示nm23－H1RNA低表达可能是肾母细胞瘤演进和转移的重要因素。

肾母细胞瘤中Stat3 HIF-1α及VEGF的表达及意义

目的研究血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF），信号传导与转录激活因子3（signal transducer and activator of transcription3，Stat3）和低氧诱导因子HIF-1α（hypoxia-induciblefactor-1α，HIF-1α）在肾母细胞瘤（Wilms’tumor，WT）中的表达及其临床意义。方法应用免疫组化SABC法辅以计算机图像分析的方法，研究Stat3，HIF-1α与VEGF在52例WT组织，47例瘤旁组织及8例正常肾组织表达强度情况。结果VEGF，Stat3及HIF-1α在WT组织中表达强度较瘤旁组织及正常肾组织显著增强（P〈0．05），且瘤旁组织中VEGF表达强度高于正常肾组织。另外，临床分期Ⅲ～Ⅳ和预后不良病理类型的WT中Stat3及VEGF表达强度明显高于临床分期Ⅰ～Ⅱ的WT，预后不良病理类型及直径≥6cm的WT中HIF-1α表达强度较预后良好型及直径〈6cm的WT升高。结论VEGF，Stat3及HIF-1α表达与肾母细胞瘤的发展预后有关，参与了肿瘤血管的生成及肿瘤的增殖侵袭，Stat3可能对HIF-1和VEGF的表达起着重要的调控作用，对于靶向治疗肾母细胞瘤具有一定意义。