糖尿病肾病模型:动物模型、二维细胞模拟及三维类器官模型

背景:近几年来,人类多能干细胞衍生的肾类器官及糖尿病肾病啮齿动物模型取得了一定的进展。然而,由于糖尿病肾病发病受环境因素及遗传因素共同作用,发病机制复杂,并且对于此类患者的临床治疗方法需要因人而异。因此,需要开发更灵活和综合的方法,从而发现强有力的临床前证据,以支持对糖尿病肾病患者进行更有针对性的干预。目的:从动物模型、二维细胞培养模拟及三维类器官模型等方面综述了糖尿病肾病模型的研究进展,为进一步的研究提供线索和思路。方法:以“糖尿病,糖尿病肾病,糖尿病肾病模型,糖尿病肾病动物模型,类器官,肾脏类器官,糖尿病肾病细胞模型,糖尿病肾病病证结合动物模型”为中文检索词,“Diabetes,diabetic nephropathy,diabetic kidney diseases,diabetic nephropathy models,diabetic nephropathy animal models,organoids,diabetic and organoids,diabetic and kidney organoids,kidney organoids,diabetic nephropathy cell models,diabetic nephropathy syndrome combined animal models”为英文检索词,检索中国知网及PubMed数据库,最终纳入101篇文献进行综述分析。结果与结论:糖尿病肾病体内模型和体外模型是深入研究糖尿病肾病发病机制的有力工具。动物模型可以观察到多系统之间的相互作用;二维细胞培养操作简便且成本较低;新兴的肾类器官填补了二维和整体水平之间的空白,无种属差异且一定程度模拟了人肾脏的复杂性。随着类器官技术的不断发展,肾类器官有望为探索糖尿病肾病的发病机制、病理生理过程和药物筛选提供一个新的视角。

肾病综合征病人血清lncRNA ANRIL和BDNF水平变化与血栓栓塞的相关性分析

目的探究肾病综合征(NS)病人血清长链非编码RNA(lncRNA)细胞周期激酶抑制因子4基因座中反义非编码RNA(ANRIL)和脑源性神经营养因子(BDNF)水平变化与血栓栓塞(TE)的相关性。方法选取2019年3月至2021年12月在承德市中心医院住院治疗的220例NS病人为研究对象,根据随访结果将其分为NS组118例和TE组102例,另外选取同期体检健康者100例为对照组。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)测定研究对象血清lncRNA ANRIL水平;采用酶联免疫吸附测定(ELISA)检测研究对象血清BDNF水平;使用全自动生化分析仪检测相关生化指标;采用Pearson相关性分析血清lncRNA ANRIL、BDNF水平与生化指标相关性;采用多因素logistic回归分析NS病人发生TE的影响因素;采用受试者操作特征曲线(ROC曲线)分析血清lncRNA ANRIL、BDNF在预测NS病人发生TE中的价值。结果与对照组相比较,NS组、TE组血清lncRNA ANRIL水平显著升高(2.54±0.43比5.82±1.34、8.35±2.17),BDNF水平显著降低[(32.77±8.25)μg/L比(24.49±4.58)μg/L、(18.63±3.62)μg/L](P<0.05);与NS组相比较,TE组血清lncRNA ANRIL水平显著升高,BDNF水平显著降低(P<0.05);对照组、NS组、TE组三组的尿酸、血肌酐、乳酸脱氢酶、血尿素氮、尿蛋白水平呈逐渐升高趋势,血清白蛋白、血红蛋白水平呈逐渐降低趋势(P<0.05)。Pearson相关性分析显示,NS合并TE病人血清lncRNA ANRIL水平与尿酸、血肌酐、乳酸脱氢酶、血尿素氮、尿蛋白水平呈正相关,与血清白蛋白、血红蛋白水平呈负相关(P<0.05);NS合并TE病人血清BDNF水平与尿酸、血肌酐、乳酸脱氢酶、血尿素氮、尿蛋白水平呈负相关,与血清白蛋白、血红蛋白水平呈正相关(P<0.05)。多因素logistic回归分析显示,lncRNA ANRIL、尿蛋白和BDNF是NS病人发生TE的影响因素(P<0.05);ROC曲线结果显示,血清lncRNA ANRIL、BDNF预测NS病人发生TE的曲线下面积(AUC)分别为0.84、0.85,两者联合预测的AUC为0.92,高于lncRNA ANRIL、BDNF单独检测,特异度为83.05%,灵敏度为88.24%。结论NS伴TE病人中血清lncRNA ANRIL水平升高,BDNF水平降低,二者对NS病人发生TE具有一定的预测价值。

黄芪甲苷在糖尿病肾病中的保护作用及机制研究进展

糖尿病肾病(DN)作为糖尿病主要的微血管并发症之一,已成为目前终末期肾病患者死亡的主要原因之一。DN的发病机制复杂,主要涉及炎症、氧化应激、细胞凋亡等。目前临床关于DN的治疗主要是控制血糖,但并不能完全阻止DN的发展。黄芪甲苷是黄芪中提取的天然产物,具有多种生物活性,包括抗炎症反应、抗氧化应激、抗细胞凋亡以及抗肾脏纤维化等。因此,深入了解黄芪甲苷的肾脏保护机制,可以为DN的治疗提供新思路。

基于“肾主水”探讨AVP-V2R-AQP2轴与肾病阴虚水肿的关系

肾病阴虚水肿常见于肾脏病中、后期患者,有着难治性、顽固性的特点,并且随着病情进展、利尿药物的应用而逐渐加重,临床关注度低,治疗措施有限,治疗效果不佳。血管升压素(AVP)-加压素受体2(V2R)-水通道蛋白2(AQP2)轴是机体调节水盐平衡的关键通路,且与肾脏排泄钠失常直接相关。根据中医“象”思维,认为“肾主水”理论推导的肾病阴虚水肿发病机制与AVP-VR2-AQP2轴导致肾病阴虚水肿相类似。故本文将基于“肾主水”理论,结合王悦芬教授临床经验,从中、西医不同的角度及运用中医药调控AVP-VR2-AQP2轴治疗肾病阴虚水肿等方面,深入探讨“肾主水”、AVP-V2R-AQP2轴、肾病阴虚水肿三者之间的联系,进一步认识“肾主水”机制,探讨AQP2作为肾病阴虚水肿新型生物标志物的可能,为肾病阴虚水肿的治疗提供新思路,为中医药现代化研究提供可靠依据。

温阳活血法改善微循环治疗糖尿病肾病研究进展

糖尿病对肾脏的损伤主要是各种因素导致的微循环障碍,呈慢性进行性发展。阳虚血瘀型是糖尿病肾病临床中的常见证型,气阴不足,久而损及阳,阳气不足,运血不畅故肾络瘀阻,即出现肾脏微循环障碍,进而导致水肿、蛋白尿、肾功能不全等症状。通过总结近年来有关温阳活血法治疗糖尿病肾病的临床和实验研究,介绍了中药单体、提取成分和中药复方通过改善肾脏血流动力学异常、抑制氧化应激和炎症反应、抑制铁死亡、调节自噬等,缓解肾络瘀阻,改善糖尿病肾病肾脏微循环障碍,进而延缓病情进展,以期为糖尿病肾病的防治提供一定的辨证思路。

王小琴“气、血、水并治”学术思想在特发性膜性肾病中的应用

王小琴是国家中医药管理局中医肾病重点学科、湖北省中医院(湖北中医药大学附属医院)肾病科学科带头人,医学博士,二级教授,主任医师,博士生导师,全国首批优秀中医临床人才,第七批全国老中医学术继承人指导老师,湖北省第二届医学领军人才。老师悬壶三十余载,学理溯源岐黄仲景,衷中参西相得益彰,立论中正平和严谨,擅以经方治疗肾病。笔者有幸师从老师,撷取老师学术之精华,希冀与同行有所裨益。

王雪峰教授治疗儿童难治性肾病综合征合并特应性皮炎经验探析

难治性肾病综合征治疗困难、复发率高,现代研究发现患者多伴有外周血总IgE升高,与特应性疾病有很多相似之处,推测二者在发病机制、细胞因子改变等方面存在相似性,难治性肾病合并特应性皮炎者临床治疗更为棘手。王雪峰教授根据《黄帝内经》理论,提出难治性肾病激素疗法中会逐步出现“壮火内盛”“壮火食气”及“少火不足”三个阶段,认为激素依赖型肾病及频复发型肾病的病机关键是“壮火食气”,而本病治疗的重点是维持少火生气的功能,减少“壮火食气”的副作用,从而防止激素依赖及频复发。同时指出,难治性肾病合并特应性皮炎者不同于普通疮疖,此乃阴虚结毒,体虚邪盛,渍后毒未去而阴益伤,故病难已。治疗上强调根据肾病的不同阶段处方用药,同时注重益气养阴,临床每获良效。

健脾泄浊解毒方治疗糖尿病肾病临床研究

目的:观察健脾泄浊解毒方对糖尿病肾病(DN)患者炎症因子、氧化因子、血糖、肾功能、肠道菌群等指标的影响。方法:采用随机数字法将100例DN患者平均分为对照组和观察组各50例,对照组给予常规疗法治疗,观察组给予健脾泄浊解毒方治疗,比较治疗前后两组患者炎症因子(CRP、TNF-α、IL-6)、血糖(PBG、FBG、HbA1c)、肾功能(UALB、BUN、eGFR)、氧化因子(SOD、MDA、TAOC)、免疫因子(CD3^(+)、CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+))及肠道菌群(双歧杆菌、乳酸杆菌、拟杆菌、肠球菌、大肠杆菌)的变化。结果:治疗后,观察组患者CRP、TNF-α、IL-6、MDA、CD8^(+)、PBG、FBG、HbA1c水平及肠球菌数目均显著降低,且观察组各水平均显著低于对照组;而两组患者SOD、TAOC、CD3^(+)、CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)比值、eGFR及有益菌群的数量均升高,且观察组的SOD、TAOC、CD3^(+)、CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)比值、eGFR及有益菌群的数值均比对照组显著升高(P<0.05)。结论:健脾泄浊解毒方治疗糖尿病肾病可显著减轻炎症反应,提升免疫功能,改善患者血糖水平、氧化因子水平和肾功能指标,且利于机体肠道有益菌群的增加,疗效显著。

膜性肾病中西医诊断与治疗

膜性肾病(membranous nephropathy,MN)是一种肾小球疾病,多发于中老年人,80%患者表现为肾病综合征,可归属中医水肿、肾水等范畴。MN在我国发病率逐年攀升,占住院患者肾活检的32.98%[1],75%的MN发病机制不明,称为特发性膜性肾病(idiopathic membranous nephropathy,IMN)。本期肾海探骊论坛特邀国内肾病领域的中医、中西医结合专家陈以平、谢院生、刘宝利、刘伟敬和刘玉宁教授从中西医角度探讨IMN的诊断与治疗。本次论坛由刘玉宁教授主持。

难治性肾病综合征的中西医诊断与治疗

难治性肾病综合征(refractory nephrotic syndrome,RNS)指原发性肾病综合征(nephrotic syndrome,NS)经标准激素治疗无效,或出现激素依赖,或有疗效而后频复发者。目前,RNS的治疗是医疗的重点和难点。因此,本期论坛特邀请首都医科大学附属北京中医医院赵文景教授,河南中医药大学第一附属医院张琳琪教授,北京协和医院陈丽萌教授,以及北京中医药大学东直门医院刘伟敬教授和刘玉宁教授就RNS中西医诊断与治疗问题展开讨论。本期论坛由刘玉宁教授主持。

低分子肝素钙/磺达肝癸钠序贯联合双嘧达莫预防性抗凝在肾病综合征中的应用效果及安全性

目的探讨低分子肝素钙/磺达肝癸钠序贯联合双嘧达莫预防性抗凝在原发性肾病综合征(PNS)中的应用效果及安全性。方法回顾性选取2020年3月至2022年12月期间四川省凉山彝族自治州第一人民医院收治的188例PNS患者,根据肾穿刺活检病理结果及磷脂酶A2受体抗体分为膜性肾病组(n=73)与非膜性肾病组(n=115)。两组患者均根据血清白蛋白水平,采用低分子肝素钙或磺达肝癸钠序贯联合双嘧达莫抗凝。比较两组患者治疗前及治疗后4周、治疗后6个月的肾功能指标[白蛋白、尿素氮、血肌酐、肾小球滤过率(eGFR)和24 h尿蛋白定量(24 h PRO)],治疗前及治疗后4周的血栓弹力图指标[反应指数(R时间)、凝血时间(K时间)、血栓最大弹力度(MA)、凝血指数(CI)和α角],以及随访6个月记录血栓事件、出血事件。结果治疗后4周、6个月,两组的白蛋白、eGFR均较治疗前明显升高,尿素氮、血肌酐、24 h PRO均较治疗前明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05),但两组治疗后各肾功能指标比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。治疗后4周,两组患者的R时间、K时间均较治疗前明显延长,MA、CI值和α角均较治疗前明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05),但两组患者治疗后4周的R时间、K时间、MA、CI值和α角比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。膜性肾病组患者的血栓、出血事件发生率分别为6.85%、10.96%,均高于非膜性肾病组(0.87%、3.48%),但两组间血栓事件总发生率、出血事件发生率比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论低分子肝素钙/磺达肝癸钠序贯联合双嘧达莫预防性抗凝有利于改善PNS患者的肾功能,缓解高凝状态,降低血栓栓塞事件发生率,且非膜性肾病患者获益较膜性肾病患者更明显,安全性更高。

五苓散与麻黄五苓散对阿霉素肾病大鼠肾功能保护效应的比较研究

目的观察并比较五苓散与麻黄五苓散对阿霉素肾病(adriamycin nephropathy,AN)模型大鼠的干预效应,并研究其作用机制。方法50只SD大鼠随机分成5组,即空白对照组、模型组、贝那普利组、五苓散组、麻黄五苓散组。除空白对照组外,所有大鼠采用尾静脉注射盐酸阿霉素方法复制大鼠肾病模型。各给药组分别灌胃相应药物,给药期间监测大鼠每周体质量;5周后检测24 h尿量和尿蛋白;检测血清中肌酐(serum creatinine,SCr)、血尿酸(serum uric acid,SUA)、尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)含量;Western blot检测肾组织中肾病蛋白(nephrin)、足突蛋白(podocin)表达水平;HE染色观察大鼠肾组织病理变化。结果与空白对照组比较,模型组大鼠平均体质量显著下降(P<0.01),尿量减少(P<0.05),24 h尿蛋白显著增加(P<0.01),SCr、SUA及BUN水平均显著升高(P<0.01),HE染色显示肾组织细胞形态不规则,胞核变形,染色质边集,nephrin、podocin蛋白表达显著下降(P<0.01)。与模型组比较,麻黄五苓散组大鼠平均体质量增加(P<0.01),尿量增加(P<0.05),24 h尿蛋白含量明显降低(P<0.05),SUA和BUN水平显著下降(P<0.01),大鼠肾组织微观病理损伤明显减轻,nephrin、podocin蛋白表达显著升高(P<0.01)。与五苓散组比较,麻黄五苓散组大鼠尿量显著增加(P<0.01),24 h尿蛋白含量明显减少(P<0.05),nephrin蛋白表达显著升高(P<0.01)。结论麻黄五苓散可有效抑制阿霉素肾病大鼠肾组织损伤,降低尿蛋白,改善肾功能。与五苓散比较,麻黄五苓散具有更明显的利尿和抑制尿蛋白作用。

新型TBC1D8B变异引起肾病综合征肾移植治疗1例

局灶节段性肾小球硬化症(focal segmental glomerulosclerosis,FSGS)是一种原发性足细胞损伤或各种慢性肾病引起继发性瘢痕形成过程导致足突细胞耗竭的疾病[1],以足细胞耗竭驱动的肾小球硬化为特征性[2]。FSGS的典型临床表现包括蛋白尿和肾病综合征(nephrotic syndrome,NS)。根据对类固醇治疗的反应,NS可分为类固醇敏感型NS和类固醇抵抗型NS[3]。

单细胞RNA测序技术在肾病中的研究进展

单细胞转录组测序(scRNA-seq)技术为生物医学带来了许多新发现,能高分辨率、高通量和可重复地进行转录分析,识别新的细胞类型,形成细胞图谱。而传统测序方法只能反映样本中所有细胞基因表达的整体水平而无法揭示单个细胞之间的基因表达异质性。本文阐述了scRNA-seq技术发展史,概述该技术可能应用于揭示肾脏疾病的发生机制,有利于肾病诊断和治疗。

补阳还五汤合升降散治疗糖尿病肾病临床观察

目的观察补阳还五汤合升降散加减对Ⅲ、Ⅳ期糖尿病肾病(DKD)的治疗效果,为临床实践提供理论依据。方法将80例DKD患者随机分为2组,治疗组采用补阳还五汤合升降散加减治疗,对照组给予盐酸贝那普利片治疗。治疗12周后,观察治疗前后2组中医临床症状积分、血糖、肾功能、24 h尿蛋白定量等的变化。结果对于Ⅲ、Ⅳ期DKD患者,治疗12周后,治疗组中医临床症状积分、血糖、肾功能、24 h尿蛋白定量等均较对照组改善明显(P<0.05)。结论补阳还五汤合升降散加减治疗DKD效果满意,可以更好地降低尿蛋白、延缓DKD进程、改善生活质量。

芪参补肾活血汤联合西医常规治疗早期糖尿病肾病的疗效观察

糖尿病肾病(DKD)是糖尿病患者常见的慢性并发症,属于微血管病变之一,因长期血糖控制不佳,导致肾功能渐进性损坏,早期主要症状为少量尿蛋白,患者表现为尿中泡沫增多或无任何表现,容易被忽视,若不进行有效干预,会逐步发展为慢性肾病以及终末期肾病。因此,早诊断、早治疗对糖尿病肾病患者的预后非常重要。目前对糖尿病肾病的治疗一般采用多种手段联合方式,包括改变生活方式、优质低蛋白饮食、降糖、控制血压、调节脂代谢、改善微循环等,以减缓肾脏损伤的进程[1-2];效果不够理想。

基于“阳化气,阴成形”论治特发性膜性肾病

特发性膜性肾病(idiopathic membranous nephropathy,IMN)是成年人肾病综合征中的常见类型,临床有高度水肿、大量蛋白尿等表现,且30~50%的IMN患者会发展为终末期肾病[1]。西药治疗蛋白尿药物有限,相关指南中对中高危以上患者还另外推荐免疫抑制治疗,但临床患者对免疫抑制剂敏感度具有异质性,且由此带来的副作用不可避免[2]。近年来,随着我国IMN发病率升高,患者身心健康受到严重危害,给此病的临床诊治更是增加了困难和挑战。

中医药靶向JAK/STAT信号通路防治IgA肾病的研究进展

IgA肾病(IgA nephropathy,IgAN)是IgA为主的免疫球蛋白在肾小球系膜区以颗粒状或团块状弥漫沉积为特征的疾病[1],以反复发作性的血尿、蛋白尿、肾功能损伤和水肿为主要的临床表现[2],是终末期肾病(end-stage renal disease,ESRD)形成的重要原因之一[1]。有数据表明我国IgA肾病患者占原发性肾小球肾炎的34.0%~52.7%[2]。

非奈利酮治疗糖尿病肾病的效果及对肾功能、炎症因子、心血管疾病发生率的影响

糖尿病肾病(DKD)是糖尿病严重并发症之一,由糖尿病糖代谢异常继而引起肾小球滤过及肾小管分泌和重吸收改变,随着病程不断进展最终导致终末期肾病而功能衰竭^([1])。有研究显示,全球有超过约1.2亿DKD患者,且发病率逐年上升,随着病情的加重,患者生活质量下降,家庭和医疗压力日趋增大^([2])。

泌尿系结石梗阻性肾病的中西医治疗现状探讨

梗阻性肾病是临床常见的泌尿系统疾病之一,发病率高,可以发生在从婴儿到老年的所有年龄段[1],尿路结石是导致梗阻性肾病的常见原因[2]。近年来,中国尿路结石发病率持续上升,梗阻性肾病造成的慢性肾病(chronic kidney disease,CKD)比例呈现上升趋势。