缬沙坦下调糖尿病大鼠肾皮质葡萄糖转运蛋白1和TGFβ_1 mRNA的表达

观察血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂缬沙坦对实验性糖尿病大鼠肾脏皮质葡萄糖转运蛋白 1(GLUT1 )和转化生长因子 β1 (TGFβ1 )mRNA表达的影响 ,以探讨其保护肾功能的机理。用链尿佐菌素腹腔注射法复制糖尿病大鼠模型 ,动物随机分为糖尿病组、缬沙坦治疗组及对照组 ;分别于实验第 4、6周末测定大鼠平均动脉压、血糖、血肌酐、尿肌酐、肾重 体重、尿白蛋白排泄率及平均肾小球面积和平均肾小球体积。用逆转录 PCR(RT PCR)法对肾皮质GLUT1及TGFβ1 mRNA表达进行半定量分析。在第 4周及第 6周末 ,各组大鼠平均动脉压无差异 ,治疗组肌酐清除率、肾重 体重、尿白蛋白排泄率及肾小球平均面积和平均体积均显著低于同时期的糖尿病组。糖尿病组GLUT1 及TGFβ1mRNA表达较正常组显著增高 ,治疗组二者表达均有所下降。缬沙坦能够下调糖尿病大鼠肾皮质GLUT1 及TGFβ1mRNA表达 ,具有保护肾脏的作用。

大鼠单侧输尿管梗阻致肾间质纤维化与TGF β_1 mRNA表达的关系

目的：探讨转化生长因子β1（TGFβ1）在单侧输尿管梗阻（UUO）所致肾间质纤维化中的作用。方法：应用原位杂交，生化分析及病理形态学观察等技术，研究UUO术后1、3、7、14、21d不同时相肾皮质中TGFβ1mRNA表达与小管间质病变、羟脯氨酸代谢的关系。结果：UUO肾组织中羟脯氨酸含量逐渐增加及间质面积增宽，伴TGFβ1mRNA表达增高。结论：TGFβ1lmRNA表达增加是UUO致肾间质纤维化的重要原因之一。

糖尿病大鼠肾脏蛋白聚糖Ⅱ和转化生长因子-β_1mRNA的动态变化

目的了解糖尿病大鼠肾皮质中蛋白聚糖Ⅱ(PGⅡ)mRNA和转化生长因子-β1(TGF-β1)mRNA随时间的变化及相互关系。方法用链脲佐菌素(STZ)造成大鼠糖尿病模型,在造模成功后第3、7、14、30、60、90天分别用免疫组化法检测糖尿病组和对照组肾脏Ⅳ型胶原分布,半定量RT-PCR法检测肾皮质PGⅡmRNA和TGF-β1mRNA的含量。结果与对照组相比,糖尿病组肾脏Ⅳ型胶原含量增加(除第3、7天,其余时点均P<0.05),TGF-β1mRNA从第7天起升高(P<0.05),PGⅡmRNA后期升高(第60天P<0.05鸦第90天P=0.01)。PGⅡmRNA和TGF-β1mRNA呈正相关关系(r=0.7熏P<0.01)。结论STZ诱导的糖尿病大鼠肾皮质TGF-β1mRNA和PGⅡmRNA先后升高,TGF-β1mRNA可能是引起PGⅡmRNA升高的原因之一。

磷酸化的cAMP反应元件结合蛋白_1在糖尿病大鼠肾小球中表达增强

目的探讨磷酸化的cAMP反应元件结合蛋白1(P CREB1)在糖尿病大鼠肾组织中的表达特征及与细胞外基质积聚的关系。方法雄性Wistar大鼠切除右肾2周后随机分为对照组和糖尿病组,用链脲佐菌素复制糖尿病模型。分别于1、2、4、8和12周用免疫组化检测纤维黏连蛋白(FN)、层黏连蛋白(LN)及P CREB1的表达,Western印迹和RT PCR检测肾皮质CREB1磷酸化(活性)及mRNA的表达。结果糖尿病组FN与LN在4周时开始升高,并持续到12周。CREB1的活性及其mRNA在2、4和8周增高,在12周时降至正常。结论CREB1可能在糖尿病肾病细胞外基质积聚中发挥一定作用。

吡格列酮对糖尿病大鼠肾皮质TGF-β_1基因表达的抑制作用

SD大鼠以链脲佐菌素腹腔注射诱发成糖尿病模型。吡格列酮治疗明显降低糖尿病大鼠肾皮质转化生长因子β_1(TGF-β_1)mRNA水平,结果提示吡格列酮对糖尿病肾病的保护作用可能与其降低肾皮质TGF-β_1基因表达有关。

胞外调节蛋白激酶在糖尿病肾病中激活机制及健脾益肾活血中药的干预作用

目的:观察健脾益肾活血中药对糖尿病肾病(DN)大鼠肾皮质中磷酸化胞外调节蛋白激酶(P-ERK)、转化生长因子(TGF-β1)基因、血小板衍化生长因子(PDGF-B)基因的表达及肾脏病理变化的影响。探讨ERK被激活的分子机制及中药复方对DN肾脏的保护作用机制。方法:雄性Wistar大鼠33只,腹腔注射链脲佐菌素建立早期DN模型。将大鼠随机分为正常组、模型组、中药治疗组。观察6周。检测血糖、肾肥大指数,用Western Blot检测肾皮质P-ERK;用RT-PCR技术检测TGF-β1mRNA、PDGF-BmRNA的表达。结果:治疗后6周模型组和治疗组血糖值、肾肥大指数和肾小球系膜细胞基质(ECM)相对面积均明显高于正常组(P值均小于0.01)。治疗组血糖值、肾肥大指数、(ECM)相对面积低于模型组,(P值均小于0.01)。治疗组肾皮质P-ERK、TGF-β1mRNA、PDGF-BmRNA的表达均明显低于模型组,肾组织病变明显减轻。结论①ERK参与了DN的发生与发展。②中药复方抑制DN大鼠肾皮质中ERK的活性,并下调TGF-β1mRNA、PDGF-BmRNA的过度表达,减轻肾组织病理改变;③中药复方对DN肾脏的保护作用,可能与抑制ERK活性有关。④ERK活化与DN高血糖、TGF-β1RNA及PDGF-BmRNA的过度表达有关。

转化生长因子β_1在单侧肾切除糖尿病大鼠肾皮质中表达

目的研究转化生长因子β1(TGFβ1)在单侧肾切除糖尿病大鼠肾皮质中表达。方法将Wistar大鼠随机分成单侧肾切除A组和单侧肾切除糖尿病B组,观察STZ注射一、四周后血糖、血胰岛素水平、体重、肾重、肾重/体重及肾组织蛋白含量变化。利用Northern杂交检测肾皮质TGFβ_、1α(Ⅳ)前胶原及纤维连接蛋白(FN)mRNA表达,Western杂交检测TGFβ_1蛋白水平。另外,使用荧光分光度法测定血浆、肾皮、髓质血管紧张素转换酶(ACE)活性变化。结果 B组血糖进行性升高,血胰岛素水平逐渐下降,尽管体重逐渐下降,肾重、肾重/体重及肾组织蛋白含量却逐渐增加,四周末与A组相比有显著性差别(P<0.05)。Northern杂交表明B组肾皮质内TGFβ_1表达明显增加,一、四周分别升高1.75和3.94倍(P<0.05),同时1α(Ⅳ)前胶原及FN mRNA表达也进行性增加,Western杂交显示B组TGFβ_1蛋白表达在一、四周分别升高0.95倍和2.1倍。虽然B组血浆ACE活性有下降趋势,但肾皮质内ACE活性却逐渐升高,四周有显著意义(P<0.05)。结论糖尿病状态下肾皮质TGFβ_1,表达进行性增加是肾脏肥大的重要因素之一,局部肾素-血管紧张素(RAS)系统异常可能参与其发病过程。

吡咯列酮对单肾切除的糖尿病大鼠肾脏纤维化的作用

目的 观察盐酸吡咯列酮对单肾切除的糖尿病大鼠肾脏纤维化的影响,并从纤维化相关基因表达改变的角度探讨其机制。方法 采用PAS、Northern blot和Western blot方法,检测口服吡咯列酮[3mg/(kg·d)]治疗对单肾切除的SIZ(35mg/kg)诱导性糖尿病大鼠模型的肾小球 ECM积聚情况,肾皮质中TGF-β1和TIMP-1的mRNA水平,以及PAI-1蛋白表达水平的作用。结果 与CTR和CTR+P组相比,DM的血糖、血脂、SBP和左肾/体重比均明显升高,肾小球ECM积聚程度明显增加,肾皮质中TGF-β1和TIMP-1的mRNA水平明显增加,PAI-1的蛋白含量也明显增加;与DM组相比,DM+P组的血糖、血脂和SBP无明显改变,但24h尿蛋白量、左肾/体重比和肾小球ECM积聚程度明显降低,肾皮质中TGF-β1和TIMP-1的mRNA水平明显降低,PAI-1的蛋白含量也明显降低。结论 吡咯列酮在不影响代谢的情况下能延缓单肾切除的糖尿病大鼠肾脏纤维化的进展。其作用机制可能与吡咯列酮能够抑制肾皮质中TGF-β1、TIMP-1和PAI-1的基因表达水平有关。

中药复方治疗早期糖尿病肾病的实验研究

目的:观察中药复方对糖尿病大鼠肾皮质TGF-β1、Ⅳ型胶原基因表达等指标的影响,探讨该复方防治早期糖尿病肾病的作用机制。方法:Wistar雄性大鼠采用链脲佐菌素(STZ),造成糖尿病模型,随机分为正常组、模型组、西药对照组、中药治疗组4组,用药干预8周后,观察24h尿微量白蛋白(Ualb)、肾皮质转化生长因子β1mRNA表达、肾皮质Ⅳ型胶原mRNA表达及各组肾组织形态学改变情况。结果:模型组肾皮质转化生长因子β1mRNA表达、肾皮质Ⅳ型胶原mRNA表达均明显升高;中药组肾皮质TGF-β1mRNA、Ⅳ型胶原mRNA表达与模型组比较均有所下降;电镜观察结果显示:肾小球基底膜增厚及足突融合显著减轻。结论:中药复方可能通过抑制糖尿病大鼠肾皮质TGF-β1mRNA与Ⅳ型胶原mRNA表达而实现其对糖尿病大鼠肾脏病变的保护作用。

ACEI和Losartan对SHR肾局部RAS作用的比较

目的：了解基础状态动物模型肾局部ＲＡＳ的水平，观察其在用转换酶抑制剂（ＡＣＥＩ）和血管紧张素受体拮抗剂（ＡＴ１ＲＡ）干预治疗后的变化，探讨、比较这两种药物对肾保护作用的分子生物学机制。方法：用反转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）， 分别对自发性高血压大鼠（ＳＨＲ）肾皮质内ＡＣＥ和ＡＴ１ 受体ｍ ＲＮＡ表达进行测定，观察用ＡＣＥＩ或ＡＴ１ＲＡ干预治疗后的变化。结果：（１）与ＷＫＹ比，基础状态下ＳＨＲ肾皮质内ＡＣＥ和ＡＴ１受体ｍ ＲＮＡ表达均显著升高（两组Ｐ＜ ０．０５）；（２）与对照组相比，用ＡＣＥＩ后ＳＨＲ 肾皮质内ＡＣＥｍ ＲＮＡ 被抑制（Ｐ＜ ０．０５），但ＡＴ１ 受体ｍ ＲＮＡ无变化；（３）与对照组相比，用ＡＴ１ＲＡ后，ＳＨＲ肾皮质内ＡＣＥ和ＡＴ１ 受体ｍ ＲＮＡ均被抑制（两组Ｐ＜ ０．０５）。结论：ＡＣＥＩ和ＡＴ１ＲＡ 都对ＳＨＲ局部ＲＡＳ有作用，但作用机理和途径可能不同，ＡＴ１ 受体可能存在多方面调节机制。ＡＣＥＩ似乎仅作用于ＡＣＥ，对ＡＴ１ 受体可能没有直接作用；ＡＴ１ＲＡ在作用于ＡＴ１ 受体的同时。

螺内酯对单侧输尿管梗阻大鼠肾脏的保护作用

目的观察螺内酯对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾皮质金属蛋白酶1组织抑制剂(TIMP-1)介导的肾间质纤维化的影响。方法UUO大鼠给予螺内酯20mg·kg-1·d-1灌胃,用免疫组化及RT-PCR的方法检测术后7d、14d、21d的TIMP-1表达量并观察肾脏病理改变。结果与假手术组相比,UUO组及螺内酯组的TIMP-1mRNA和TIMP-1蛋白表达水平均明显增高(P<0.01),且UUO组显著高于螺内酯组(P<0.01)。结论螺内酯可通过下调TIMP-1减轻UUO术后肾组织间质纤维化。

肾移植受者巨细胞病毒感染与慢性移植物肾病

目的 探讨肾移植术后早期巨细胞病毒 (CMV)感染与慢性移植物肾病 (CAN)的关系。 方法 1999年 8月至 2 0 0 0年 12月行肾移植并随访 3年的患者 77例 ,根据术后 6个月内外周血CMV pp6 5 ( + )白细胞计数的数量和持续时间 ,将其分为 :非活动性 (A组 ,n =15 )、低活动性 (B组 ,n=32 )、短期高活动性 (C组 ,n =18)和长期高活动性 (D组 ,n =12 )CMV感染 4组。 6个月后行移植肾穿剌活检 ,通过免疫荧光和逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)比较 4组患者肾组织中转移生长因子β1(TGF β1)蛋白和mRNA的表达量 ;3年后比较 4组患者肾功能不全 (血肌酐持续 >114 μmol/L)的发生率和肌酐清除率 (Ccr)减损量 ;对肾功能不全的患者通过活检明确是否为CAN。 结果 肾移植 6个月后A、B、C组TGF β1蛋白表达量分别为 :( 5 .82± 1.32 )× 10 6、( 6 .34± 1.4 7)× 10 6和 ( 6 .5 8± 1.4 4 )× 10 6,TGF β1mRNA分别为 :0 .84± 0 .17、0 .78± 0 .15和 0 .82± 0 .16 ;D组TGF β1蛋白和mRNA表达量分别为 ( 10 .4 7± 2 .12 )× 10 6和 1.37± 0 .2 5 ,均明显高于前 3组 (P <0 .0 1)。前 3组 3年内Ccr减损量分别为 :( 5 .6± 5 .2 )、( 6 .2± 6 .4 )和 ( 5 .9± 4 .7)ml/min ;D组为 ( 15 .8± 9.6 )ml/min ,明显高于前