缬沙坦下调糖尿病大鼠肾皮质葡萄糖转运蛋白1和TGFβ_1 mRNA的表达

观察血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂缬沙坦对实验性糖尿病大鼠肾脏皮质葡萄糖转运蛋白 1(GLUT1 )和转化生长因子 β1 (TGFβ1 )mRNA表达的影响 ,以探讨其保护肾功能的机理。用链尿佐菌素腹腔注射法复制糖尿病大鼠模型 ,动物随机分为糖尿病组、缬沙坦治疗组及对照组 ;分别于实验第 4、6周末测定大鼠平均动脉压、血糖、血肌酐、尿肌酐、肾重 体重、尿白蛋白排泄率及平均肾小球面积和平均肾小球体积。用逆转录 PCR(RT PCR)法对肾皮质GLUT1及TGFβ1 mRNA表达进行半定量分析。在第 4周及第 6周末 ,各组大鼠平均动脉压无差异 ,治疗组肌酐清除率、肾重 体重、尿白蛋白排泄率及肾小球平均面积和平均体积均显著低于同时期的糖尿病组。糖尿病组GLUT1 及TGFβ1mRNA表达较正常组显著增高 ,治疗组二者表达均有所下降。缬沙坦能够下调糖尿病大鼠肾皮质GLUT1 及TGFβ1mRNA表达 ,具有保护肾脏的作用。

肝纤维化大鼠TGF-β_1与TIMP-1 mRNA的表达及补肾柔肝方的治疗作用

目的 :探讨中药复方补肾柔肝方对二甲基亚硝胺 (dimethylnitrosamine ,DMN)诱导大鼠肝纤维化后肝脏组织金属蛋白酶抑制因子 1(tissueinhibitorofmetalloproteinase 1,TIMP 1)和转化生长因子β1(transforminggrowthfactor beta 1,TGF β1)的影响 ,以了解其对肝纤维化的治疗作用和分子机制。方法 :雄性Wistar大鼠 4 0只 ,随机分为正常对照组、模型组和治疗组 ,对模型组和治疗组运用DMN诱导大鼠肝纤维化。治疗组在造模 4周后给予补肾柔肝方灌胃 ,剂量 10 g·kg 1·d 1,共治疗 4周。第 8周末处死全部大鼠 ,对肝组织进行HE和天狼猩红染色观察 ,并采用RT PCR半定量方法 ,检测大鼠肝组织TIMP 1及TGF β1mRNA的表达水平。结果 :肝组织病理学研究结果显示DMN可以成功诱导大鼠肝纤维化 ,模型组肝组织TIMP 1和TGF β1mRNA表达明显增强 ,中药复方治疗组与模型组相比明显减弱 ,而正常对照组表达较少。结论 :TIMP 1与TGF β1mRNA的表达与肝纤维化的发生密切相关 ,中药复方补肾柔肝方对肝纤维化大鼠肝组织TIMP 1及TGF β1具有明显的抑制作用 。

益肾胶囊对大鼠肾小球系膜细胞增殖和凋亡及TGF-β_1 mRNA表达的影响

目的:观察益肾胶囊对大鼠肾小球系膜细胞(glomerular mesangial cell,GMC)增殖、凋亡及TGF-β1 mRNA表达的影响。方法:以体外培养肾小球系膜细胞为研究对象,应用血清药理学方法,分别采用甲基噻唑基四唑(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)比色法、荧光倒置显微镜及RT-PCR技术检测系膜细胞增殖、凋亡及TGF-β1 mRNA表达情况。结果:与正常对照组比较,其他各组MC均有不同程度的增殖、凋亡及TGF-β1 mRNA表达上调(P<0.05或P<0.01);与脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)组比较,益肾胶囊可明显抑制MC增殖及TGF-β1 mRNA表达,并诱导MC凋亡(P<0.01)。结论:益肾胶囊抑制MC增殖并诱导其凋亡可能与下调TGF-β1 mRNA表达有关。

中药对肾小球硬化大鼠MMP-9、TIMP-1及TGF-β_1mRNA表达的影响

目的探讨肾络癥积中药复方对肾小球硬化大鼠细胞外基质降解调控系统MMP-9、TIMP-1及TGF-β1mRNA的影响。方法采用切除单侧肾脏同时尾静脉注射阿霉素的方法 ,建立肾小球硬化大鼠模型,检测各组大鼠24小时尿蛋白定量,ELISA法检测基质金属蛋白酶(MMP-9)、基质金属蛋白酶抑制物(TIMP-1)的表达,计算MMP-9/TIMP-1比值,荧光定量PCR法检测细胞TGF-β1mRNA。结果各中药组大鼠24小时尿蛋白均小于模型组(P<0.05),与模型组比较,各中药组均能抑制TIMP-1的表达(P<0.05),上调MMP-9(P<0.05),提高MMP-9/TIMP-1的比值(P<0.05),并下调细胞中TGF-β1mRNA表达(P<0.05)。结论祛瘀化痰、散结消癥中药复方,可抑制TIMP-1,上调MMP-9,下调TGF-β1mRNA的表达,其机制可能是通过增强细胞外基质降解,对肾小球硬化大鼠肾功能产生保护作用。

高糖对人肾小球系膜细胞TGF-β_1mRNA表达的影响及茶多酚对其干预作用

目的 :探讨高糖对人肾小球系膜细胞转化生长因子 β1 (TGF β1 )mRNA表达的影响及茶多酚的干预作用。方法 :运用RT PCR法检测 ,TGF β1 在空白对照组、高糖组、茶多酚干预组和茶多酚对照组中 0、12、3 6h的表达情况。结果 :高糖组TGF β1mRNA在 3个时间点的吸光度值分别为 0 .3 3 0± 0 .0 14、0 .5 49± 0 .0 2 7、0 .761± 0 .0 3 2 ,与对照组相比有显著差异 (均P <0 .0 1) ,且3 6h比 12h变化显著 (P <0 .0 1) ;茶多酚干预组分别为 0 .3 3 0± 0 .0 14、0 .3 85± 0 .0 45、0 .5 41± 0 .0 44 ,各时点均低于高糖组 (均P<0 .0 1) ,而与对照组无明显差异 (均P >0 .0 5 )。结论 :高糖可导致人肾小球系膜细胞TGF β1 mRNA表达的增加 ,而茶多酚可有效干预此效应。

肾癌患者外周血中TGF-β_1mRNA表达及其意义

目的探讨肾癌外周血TGF-β1mRNA表达水平的高低对肾癌发病的作用及其诊断和鉴别价值。方法采用RT-PCR方法检测80例肾癌患者和80例正常对照者外周血中TGF-β1mRNA的表达水平。结果肾癌患者组与健康对照组TGF-β1mRNA水平差异有统计学意义(P0.05),肾细胞癌组与其他类型肝癌的TGF-β1mRNA水平比较无显著性差异(P0.05),不同分期的TGF-β1mRNA水平比较有统计学意义(P0.05)。结论 TGF-β1mRNA表达水平升高与肾癌的发病相关,且随病程发展会逐渐升高。

带蒂大网膜包肾术对肾小球硬化大鼠肾皮质TGF-β_1基因表达的影响

目的 :探讨带蒂大网膜包肾术 (POT)对肾小球硬化大鼠肾皮质转化生长因子 (TGF - β1 )基因表达的影响。方法 :采用单侧肾切除加2次注射阿霉素制备肾小球硬化大鼠模型 ,观察带蒂大网膜包肾术对肾小球硬化大鼠肾皮质TGF - β1 基因表达的影响。结果 :带蒂大网膜包肾术使肾小球硬化大鼠肾皮质TGF - β1 基因表达明显上调 ,肾小球硬化减轻。结论 :带蒂大网膜包肾术能上调肾小球硬化大鼠肾皮质TGF - β1 基因表达 。

透析对糖尿病肾衰竭病人外周血单个核细胞TGF-β_1 mRNA表达的影响

1目的 探讨透析对糖尿病肾衰竭病人转化生长因子 (TGF- β1 )表达的影响。2方法 采用逆转录聚合酶链反应 (RT- PCR)半定量技术 ,对糖尿病肾衰竭不同治疗组病人外周血单个核细胞 (PBMC) TGF- β1 m RNA的表达进行检测。 3结果 糖尿病肾衰竭透析病人 TGF- β1 m RNA的表达明显高于对照组 (t=12 .5 30 ,P<0 .0 1) ,且血液透析病人 TGF- β1 m RNA的表达较腹膜透析病人高 (t=2 .134 ,P<0 .0 5 )。 4结论 血液透析可使糖尿病肾衰竭病人 TGF- β1

扶正活血方对5/6肾切除大鼠肾组织Fn和TGF-β1mRNA表达的影响

目的:探讨扶正活血方对慢性肾功能衰竭(CRF)大鼠肾组织纤维连接蛋白(Fn)和转化生长因子β1(TGF-β1)mRNA表达的影响。方法:采用5/6肾切除制作大鼠 CRF 模型。模型制作成功后随机将模型大鼠分为模型组、扶正活血方组、黄芪组、丹参组、依那普利组,并与正常组对照。治疗2个月后,观察各组 CRF 大鼠肾组织 Fn 和 TGF-β1 mRNA 表达情况。结果:模型组血肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)、24小时尿蛋白定量(24hpro)明显高于正常组,肾组织 Fn 和 TGF-β1 mRNA 表达明显强于正常组。经过扶正活血方治疗后,肾组织 Fn 和 TGF-β1 mRNA 表达明显减弱,蛋白尿水平明显降低。结论:扶正活血方可改善CRF 大鼠肾功能,延缓 CRF 进展,其机制可能与降低 CRF 大鼠肾组织 Fn 和 TGF-β1 mRNA 表达有关。

糖肾宁对高糖培养肾近端小管上皮细胞FN分泌及TGF-β1 mRNA表达作用

目的研究中药复方糖肾宁对高糖诱导的肾近端小管上皮细胞转化生长因子β1（TGF-β1）表达和分泌纤维连接蛋白（FN）的影响，探讨其治疗糖尿病肾病（DN）的机制。方法分别采用RT-PCR和ELISA方法检测不同时间下高糖对肾近端小管上皮细胞TGF-β1 mRNA表达和分泌FN的作用，及糖肾宁药物血清对上述指标的影响。结果高糖呈时间依赖性增加肾小管上皮细胞TGF-β1 mRNA表达，高糖培养24h后细胞分泌FN也明显增多，加入糖肾宁药物血清后上述指标均有下降（P〈0．05）。结论糖肾宁抑制高糖诱导的肾小管上皮细胞TGF-β1和FN表达可能是其治疗DN的分子机制之一。

高糖环境下肾小球细胞间相互作用对TGF-β_1表达的影响及茶多酚的干预作用

目的 :探讨在高糖环境下人肾小球系膜细胞与内皮细胞间相互作用对TGF β1 mRNA表达的影响和茶多酚的干预作用。方法 :建立系膜细胞和内皮细胞共培养模型 ,分空白对照组、高糖组、茶多酚干预组和茶多酚对照组 ,培养 0、12、3 6h后 ,应用RT PCR法检测模型中两种细胞转化生长因子 β1 (TGF β1 )的表达情况。结果 :高糖可上调共培养模型中系膜细胞和内皮细胞TGF β1 mRNA表达 ,其作用显著强于单独培养的系膜细胞和内皮细胞 ,茶多酚可降低共培养模型中细胞TGF β1 mRNA表达 ,且效果优于单独培养。结论 :(1)高糖环境下系膜细胞和内皮细胞间存在相互作用 ,这种作用能促进两种细胞TGF β1 mRNA高表达。 (2 )茶多酚通过对TGF β1 mRNA表达的抑制影响细胞间相互作用。

TGF-β_1在Dahl高血压大鼠肾小管中的表达

目的 :探讨 TGF- β1在高血压所致肾损伤过程中的表达规律及意义。方法 :选用 Dahl高血压大鼠 ,5周龄时喂 8%食盐饲料 ,尾套法每周测一次收缩期血压 ,分别取 10周、11周、12周龄大鼠肾脏 ,常规石蜡包埋 ,连续切片 ,SP免疫组织化学法染色检测 TGF- β1的表达 ,免疫组化半定量计数 ,方差分析。结果 :Dahl盐敏感型高血压大鼠皮质肾小管有广泛的 TGF-β1的表达阳性细胞 ,而且随着血压增高TGF- β1的表达增强 ,结论 :TGF-

肾癌肿瘤浸润淋巴细胞的增殖能力与转化生长因子-β_1 mRNA的表达

目的：研究肾癌来源的肿瘤浸润淋巴细胞体外增殖能力与转化生长因子表达之间的关系。方法：自13例肾癌组织标本中分离新鲜的肿瘤浸润淋巴细胞，在含不同浓度的重组人白细胞介素-2的完全培养液中培养3周，了解其体外扩增能力。同时对肾癌组织标本作石蜡切片后，应用原位杂交技术检测肾癌组织中转化生长因子-β1mRNA的表达，对部分液氮冻存的肾癌组织，抽提其RNA，利用Slot印迹技术检测TGF－β1mRNA的表达。结果：在rhuIL－2浓度为100IU／ml和1000IU／ml的培养液中培养3周，TIL的扩增值数分别为x=112±117（范围：12～409）和x＝694±524（范围：59～1748）。其中TGF－β1mNA表达组，TIL的扩增值数分别为x＝30±11（范围：12～49）和x=221±128（范围：59～350），而TGF－β1mRNA不表达组，TIL的扩增值数分别为x＝183±121（范围：37～409）和x＝913±524（范围：91～1748）。结论：TIL随着培养液中IL－2的浓度增加，其扩增能力增强。TIL的扩增能力与肿瘤组织中TGF-β1mRNA的关系呈反向关系。

糖毒清对糖尿病肾病大鼠肾组织TGF-β1mRNA及PAI-1表达的影响

目的通过检测正常及以不同药物治疗的各组糖尿病肾病肾功能不全(DRI)大鼠肾组织转化生长因子-β,mRNA(TGF-β1mRNA)和纤溶酶原激活物抑制物-1(PAI-1)的表达情况,探讨糖毒清治疗DRI的可能机制。方法采用5/6肾切除合中等剂量的STZ腹腔注射方法建立DRI大鼠模型,将造模成功的50只大鼠随机分为五组:模型组(生理盐水2ml/d灌胃);糖毒清高剂量组(糖毒清6.75g/(kg·d)灌胃);糖毒清中剂量组(糖毒清4.5g/(kg·d)灌胃);糖毒清低剂量组(糖毒清2.25g/(kg·d)灌胃);尿毒清组(尿毒清2.25g/(kg·d)灌胃)。另外10只正常对照组大鼠予生理盐水2ml/d灌胃;治疗10周后,通过原位杂交和免疫组化的方法检测各组大鼠肾组织TGF-β1mRNA和PAI-1的表达情况。结果模型组大鼠肾组织TGF-β1mRNA和PAI-1呈高表达,而糖毒清各治疗组的表达明显减少。结论糖毒清可以减少DRI大鼠肾组织TGF-β1mRNA和PAI-1的过度表达,从而达到控制或延缓糖尿病肾病肾功能恶化的作用。

苯那普利对糖尿病大鼠肾皮质JAK/STAT信号蛋白磷酸化的影响

目的:探讨血管紧张素Ⅱ转换酶抑制剂苯那普利对糖尿病大鼠肾皮质p-JAK2、p-STAT1和p-STAT3信号蛋白表达的影响。方法:雄性Wistar大鼠随机分为对照组、糖尿病组和苯那普利治疗组。腹腔注射STZ诱发糖尿病大鼠模型,治疗组每日灌胃给予苯那普利10mg/kg,共2周。采用免疫沉淀和Western blotting检测JAK2磷酸化,Western blotting检测肾皮质p-STAT1、p-STAT3和TGF-β1蛋白的表达,半定量RT-PCR检测肾皮质细胞TGF-β1 mRNA的表达。结果:糖尿病组肾皮质p-JAK2、p-STAT1、p-STAT3及其TGF-β1表达明显高于对照组,同时TGF-β1 mRNA表达亦明显强于对照组;苯那普利治疗组p-JAK2、p-STAT1和p-STAT3表达低于糖尿病组,同时TGF-β1蛋白及其mRNA表达亦低于糖尿病组。结论:JAK/STAT信号途径可能参与糖尿病早期肾脏变化的过程,苯那普利的肾脏保护作用可能部分是通过影响JAK/STAT信号途径的激活而实现。

2型糖尿病KKA^y模型小鼠肾脏中TGF-β及其受体和细胞外基质蛋白表达的关系

探讨 2型糖尿病动物模型KKAy 小鼠肾脏细胞外基质蓄积的原因和TGF β及其受体的关系。 15只KKAy 小鼠和 18只C5 7BL J小鼠 ,分成 3组 ,分别于 16、2 0和 2 4周处死动物 ,常规测体重、肾功能、血脂和尿蛋白 ,取肾皮质常规切片、染色 ,观察肾脏病理改变。用免疫组化和免疫印迹法检测不同周龄的KKAy 小鼠及参照组C5 7BL J小鼠肾皮质TGF β1及TGF βⅠ、Ⅱ型受体的表达 ,并用RT PCR方法检测肾皮质细胞外基质Ⅳ型胶原和纤维连接蛋白(fibronectin ,FN)mRNA水平。KKAy 小鼠 16周龄以后便开始出现明显的肥胖、高血糖、高胰岛素血症和蛋白尿 ,符合2型糖尿病早期肾病特点。其FN和Ⅳ型胶原mRNA表达都比同龄参照组C5 7BL J小鼠高 2～ 4倍 ,其中以 16周时最为显著 ,FN为 1 5 3± 0 4 6比较 0 6 3± 0 16 (P <0 0 0 1) ;Ⅳ型胶原为 5 0 8± 1 92比较 1 2 1± 0 2 5 (P <0 0 1)。KKAy 小鼠肾小球内TGF β1及TGF βⅠ型受体的水平明显低于C5 7BL J小鼠 ,而Ⅱ型受体表达却高于C5 7BL J小鼠。2型糖尿病KKAy 小鼠早期肾病时 ,肾皮质细胞外基质合成增加 ,与TGF βⅡ型受体表达增加有关。

磷酸化的cAMP反应元件结合蛋白_1在糖尿病大鼠肾小球中表达增强

目的探讨磷酸化的cAMP反应元件结合蛋白1(P CREB1)在糖尿病大鼠肾组织中的表达特征及与细胞外基质积聚的关系。方法雄性Wistar大鼠切除右肾2周后随机分为对照组和糖尿病组,用链脲佐菌素复制糖尿病模型。分别于1、2、4、8和12周用免疫组化检测纤维黏连蛋白(FN)、层黏连蛋白(LN)及P CREB1的表达,Western印迹和RT PCR检测肾皮质CREB1磷酸化(活性)及mRNA的表达。结果糖尿病组FN与LN在4周时开始升高,并持续到12周。CREB1的活性及其mRNA在2、4和8周增高,在12周时降至正常。结论CREB1可能在糖尿病肾病细胞外基质积聚中发挥一定作用。

火把花根对大鼠抗Thy-1肾炎肾脏转化生长因子-β1表达的影响

目的观察中药火把花根对抗-Thy-1肾炎大鼠的治疗作用，并通过观察其肾组织转化生长因子-β1(TGF-β1)基因表达变化，探讨火把花根的作用机制。方法应用兔抗大鼠胸腺细胞免疫血清(ATS)复制大鼠抗Thy-1肾炎模型，将大鼠分为对照组(A组)、模型组(B组)、火把花根治疗组(C组)，分别于治疗第1、2、4周末各组动物留尿并取肾皮质进行尿蛋白测定及常规病理检查。采用免疫组织化学及RT-PCR方法测定系膜区TGF-β1蛋白及肾皮质mRNA表达变化。结果模型组尿蛋白显著增加，PAS染色阳性系膜区面积与肾小球毛细血管丛面积的比值(ECM／GA)显著高于对照组，系膜区TGF-β1蛋白表达及肾皮质TGF-β1mRNA表达增高。火把花根治疗组尿蛋白定量、ECM／GA比值，系膜区TGF-β1蛋白表达及肾皮质TGF-β1mRNA表达均较模型组显著降低(P<0．01)。结论火把花根可减少抗Thy-1肾炎大鼠的蛋白尿，减轻肾小球系膜及基质增生，其作用机制可能是通过抑制TGF-β1的基因表达。

吡格列酮对糖尿病大鼠肾皮质TGF-β_1基因表达的抑制作用

SD大鼠以链脲佐菌素腹腔注射诱发成糖尿病模型。吡格列酮治疗明显降低糖尿病大鼠肾皮质转化生长因子β_1(TGF-β_1)mRNA水平,结果提示吡格列酮对糖尿病肾病的保护作用可能与其降低肾皮质TGF-β_1基因表达有关。