肾组织石蜡切片免疫荧光检测在诊断X连锁Alport综合征中的应用

目的:建立X连锁Alport综合征(XLAS)肾组织石蜡切片型胶原A5链免疫荧光检测方法,探讨其临床应用价值。方法:将对照组及XLAS患儿各4例肾组织,分别行石蜡切片及冰冻切片型胶原A5链间接免疫荧光染色,比较分析染色结果。石蜡切片分别采用微波修复、胃蛋白酶消化及微波修复+胃蛋白酶消化三种抗原修复方法进行修复,比较三者的修复效果。结果:单独微波修复、胃蛋白酶消化均不能修复肾组织型胶原A5链,微波修复+胃蛋白酶消化法可修复A5链。组织经微波修复10min,胃蛋白酶消化10min后,肾小球基底膜型胶原A5链免疫荧光染色在对照组患儿为连续线状阳性表达,在X连锁遗传型女性患儿为间断线状阳性,男性患儿为阴性。结果均与冰冻切片免疫荧光染色结果一致。结论:经微波修复+胃蛋白酶消化双抗原修复法的石蜡切片免疫荧光检测肾组织型胶原A5链能较好地应用于XLAS诊断,可对既往临床不典型XLAS病例进行回顾性诊断,为XLAS的诊断和研究提供了一种可靠的技术手段。