冬虫夏草酸性多糖的结构初步鉴定及对肾细胞损伤的保护作用

目的:对麦角菌科虫草属冬虫夏草发酵菌丝体中分离得到的酸性多糖(CAPS)结构进行初步鉴定,并探讨其对顺铂诱导的肾细胞损伤的保护作用。方法:分离纯化得到CAPS,对其进行纯度及相对分子质量测定;通过紫外光谱、红外光谱、单糖组成及甲基化试验进行结构鉴定;结合血清药理学方法制备CAPS含药血清,用顺铂诱导的狗肾小管上皮细胞(MDCK)建立细胞模型。结果:纯度99%的CAPS相对分子质量为2.7×104,由甘露糖、葡萄糖、半乳糖及少量木糖、阿拉伯糖、鼠李糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸组成。对顺铂诱发的肾细胞损伤的保护作用在含药血清大于2.5%时,与顺铂模型组相比,有显著性差异(P<0.05);大于5%时,与模型组相比,有极显著性差异(P<0.01)。结论:CAPS具有显著的体外保护肾细胞损伤的作用。

1,2-二氯乙烷对非洲绿猴肾细胞损伤机理的离体试验研究

目的 了解 1,2 二氯乙烷对非洲绿猴肾细胞的损伤及其机理。方法 采用 0 5、1 0、2 0mmol/L 3个剂量 1,2 二氯乙烷处理非洲绿猴肾细胞 (Vero细胞 ) 2 4h,并运用显微荧光术测定处理后的Vero细胞内活性氧 (ROS)含量及游离Ca2 + 浓度 ,用比色法测定Vero细胞培养上清液乳酸脱氢酶(LDH)活力。设立对照组。结果 接触 1 0、2 0mmol/L 1,2 二氯乙烷的Vero细胞内游离Ca2 + 浓度及其上清液LDH活力均高于对照组 (P <0 0 1) ,而 0 5mmol/L染毒组的Vero细胞内游离Ca2 + 浓度及其上清液LDH活力与对照组比较差异均无显著性 (P >0 0 5 )。各剂量组的Vero细胞内ROS含量与对照组比较差异均无显著性 (P >0 0 5 )。结论 较高浓度的 1,2 二氯乙烷能损伤Vero细胞 ,其损伤的可能途径是通过增加细胞内游离Ca2 + 浓度。

罗汉果皂苷提取物通过调控miR-199a-3p对高糖诱导的肾小管上皮细胞损伤的影响

目的探究罗汉果皂苷提取物对高糖诱导的肾小管上皮细胞损伤的影响及潜在分子机制。方法体外培养人肾小管上皮细胞HK-2,采用高糖和罗汉果皂苷提取物干预HK-2细胞,细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞活力,流式细胞术分析细胞凋亡率,Western印迹分析B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白表达,实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测miR-199a-3p的表达,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-6和IL-8的表达。结果高糖能够抑制HK-2细胞活力,促进细胞凋亡和Bax的表达,抑制Bcl-2的表达,提高TNF-α、IL-6和IL-8的含量;罗汉果皂苷提取物能够抑制高糖诱导的HK-2细胞凋亡,提高细胞活力,促进miR-199a-3p的表达,降低TNF-α、IL-6和IL-8的含量;过表达miR-199a-3p能够抑制高糖诱导的HK-2细胞损伤,下调miR-199a-3p能够逆转罗汉果皂苷提取物对高糖诱导的HK-2细胞损伤保护作用。结论罗汉果皂苷提取物能够通过上调miR-199a-3p的表达对高糖诱导的HK-2细胞损伤起保护作用。

低分子量肝素对糖尿病肾病足细胞损伤的作用分析

本研究旨在探究低分子量肝素在糖尿病肾病肾小球足细胞损伤中的作用,从2022年1月至2022年12月,共纳入84名糖尿病肾病患者,随机分为对照组和观察组。对照组接受传统治疗,观察组在传统治疗基础上加用低分子量肝素。通过临床检测和生化指标监测,收集并分析数据,得出如下结论。评估低分子量肝素对糖尿病肾病肾小球足细胞损伤的影响。方法 将84例糖尿病肾病患者随机分为对照(n=42)和观察组(n=42)。对照组接受标准传统治疗,包括血糖控制、高血压管理等。观察组在传统治疗的基础上,每日皮下注射低分子量肝素。收集患者的临床特征、病史以及实验室检测数据,包括尿微量白蛋白、尿肌酐等。结果 在治疗结束后,观察组患者尿微量白蛋白水平显著低于对照组(观察组:127.5±15.3 mg/g vs.对照组:182.7±21.6 mg/g,p < 0.001)。此外,观察组患者的尿肌酐水平也明显降低(观察组:0.93±0.12 mg/dL vs. 对照组:1.15±0.14 mg/dL,p < 0.05)。结论 本研究结果表明,在糖尿病肾病肾小球足细胞损伤的治疗中,低分子量肝素的应用具有积极作用。低分子量肝素能够有效降低尿微量白蛋白和尿肌酐水平,表明其对足细胞损伤有保护作用。然而,仍需进一步深入研究其具体机制以及长期治疗效果。

虫草多糖的分离提纯及对体外肾细胞损伤和急性肾衰动物模型的保护与治疗作用

目的:探讨从虫草头孢菌粉中提取活性多糖组分,考察其对体外顺铂诱导大鼠肾细胞损伤和肌注甘油诱导急性肾衰大鼠模型的保护与治疗作用。方法:采用水提醇沉法从虫草头孢菌粉中提取分离多糖组分,同时通过MTT实验体外考察各组分对顺铂诱导MDCK和Vero细胞损伤的保护作用;根据体外活性筛选结果,选定活性虫草多糖组分,用于动物模型实验灌胃给药,进一步考察其对肌注甘油诱导急性肾衰大鼠模型的治疗作用,考察指标包括血液和尿液生化指标、24 h尿量、肾脏指数以及肾脏组织切片病理学检查。结果:从虫草头孢菌粉中提取分离得到组分A～H;经MTT实验体外筛选出其中活性较好的虫草多糖组分G,其灌胃给予肌注甘油诱导急性肾衰模型大鼠后,可显著降低模型大鼠血清总蛋白、尿素氮、肌酐和K+水平以及尿蛋白、尿酮体、尿红细胞和白细胞水平与肾脏指数,显著提高模型大鼠血清Na+水平和24 h尿量,并使模型大鼠肾脏病理学损伤明显改善。结论:采用水提醇沉法可从虫草头孢菌粉中有效分离提纯活性多糖组分,其中65%乙醇醇沉得到的虫草多糖组分为虫草中具肾脏保护作用的活性部位,对急性肾损伤有防治作用。

肾足细胞损伤中西医治疗的国内研究进展

肾足细胞损伤是一些肾脏疾病发生蛋白尿的主要病理基础,它的损伤可影响肾脏疾病的发生发展和预后。近年来,国内众多研究都从分子蛋白水平上阐述了中、西药对肾足细胞的影响,文章就此做一归纳。

肾小管细胞损伤机制的研究进展

The nature of renal tubular cell injury in ischemic acute renal failure includes not only cell death (necrosis or apoptosis) but also sublethal injury causing cell dysfunction. The role of intracellu- lar calcium, calcium - dependent enzymes calpain, nitric oxide, phospholipase A2, loss of tubule cell polarity and tubular obstruction in the pathophysiology of the renal tubular cell injury during hypoxia/ischemia is described. The effects of vascular factors, infiltrating activited leukocytes, apoptosis and growth factors on renal tubular cell injury are discussed. Potential mechanisms that tubular injury leads to a profound fall in glomerular filtration rate are proposed.

血必净注射液在内皮祖细胞修复脂多糖诱导的肾内皮细胞损伤中的作用及机制

目的探究血必净注射液在内皮祖细胞修复脂多糖诱导的肾内皮细胞损伤中的作用及机制。方法提取并鉴定大鼠内皮祖细胞和肾脏微血管内皮细胞(RMEC),收集内皮祖细胞的培养上清作为条件培养基(CM)。取肾脏微血管内皮细胞,分为6组,空白组正常培养,模型组给予脂多糖(LPS)培养,CM+LPS组、CM+LPS+血必净12.5 mg/mL组、CM+LPS+血必净25 mg/mL组、CM+LPS+血必净50 mg/mL组给予相应干预。MTT法检测各组细胞增殖情况,Transwell小室法检测细胞迁移能力,小管形成实验检测体外血管新生能力,流式细胞术检测细胞凋亡情况,qRT-PCR法检测血管内皮生长因子(VEGF)和碱性成纤维生长因子(bFGF)表达情况,Western blot法检测NF-κB表达情况。结果模型组细胞增殖检测OD值及VEGF、bFGF相对表达量均明显低于空白组,细胞迁移数、小管形成数均明显少于空白组,细胞凋亡率及NF-κB相对表达量明显高于空白组,差异均有统计学意义(P均<0.05);CM+LPS组及血必净各组细胞增殖检测OD值及VEGF、bFGF相对表达量均明显高于模型组,细胞迁移数、小管形成数均明显多于模型组,细胞凋亡率及NF-κB相对表达量明显低于模型组,且血必净各组上述指标改善情况均明显优于CM+LPS组(P均<0.05)。结论血必净注射液可通过抑制NF-κB信号通路而促进内皮祖细胞修复脂多糖诱导的肾内皮细胞损伤。

肾小球足细胞损伤在脂质肾损害发病中的作用

目的 :探讨肾小球足细胞损伤在脂质肾损害发病中的可能作用。方法 :用含 4 %胆固醇和 1%胆酸钠的高脂饲料饲喂大鼠建立高脂模型 ,观察高脂组和正常组大鼠血脂、尿蛋白、肾功能及肾脏病理学改变 ,运用免疫组化技术检测肾小球足细胞损伤标志蛋白 -结蛋白表达 ,并进行相关分析。结果 :高脂组大鼠总胆固醇、低密度脂蛋白、血肌酐和尿蛋白均显著升高 (P <0 .0 1) ,肾小球系膜基质增生明显 (P <0 .0 1) ,肾小球内结蛋白表达上调 ,透射电镜下可观察到肾小球足细胞损伤表现。结蛋白表达与血脂、血肌酐、尿蛋白、肾小球系膜基质增生之间存在显著正相关性。结论

尿白蛋白诱导肾小管上皮细胞损伤的作用机制研究

目的 :研究尿白蛋白诱导肾小管上皮细胞损伤的机制。方法 :用去脂的小牛血清白蛋白 (BSA) 2 0mg/mL加入肾小管上皮细胞内 ,EMSA、RT PCR及流式细胞仪分别检测不同时限核转录因子 κB(NF κB)活性、骨桥蛋白mRNA表达及细胞凋亡的情况。体外培养的肾小管上皮细胞作为空白对照。结果 :去脂的小牛血清白蛋白可刺激肾小管上皮细胞内NF κB活性增加 ,骨桥蛋白mRNA表达上调 ,细胞凋亡率增加。结论 :尿白蛋白诱导小管上皮细胞损伤与诱导肾小管上皮细胞内NF κB活性增加 ,导致骨桥蛋白mRNA转录上调及细胞凋亡有关。

LncRNA H19调控肾小球足细胞焦亡中作用

目的探讨lncRNA H19在高糖调控肾小球足细胞焦亡中的作用。方法qRT-PCR方法检测高糖中lncRNA H19本底表达;Western blot检测高糖中肾足细胞结构性相关蛋白Nephrin、Podocin表达;Western blot及免疫荧光方法检测细胞焦亡相关蛋白NLRP3、Caspase-1、IL-1β表达水平;qRT-PCR检测转染Ad lncRNA H19及si lncRNA H19后lncRNA H19的mRNA表达,细胞转染分别设置:(1)对照组(不做处理)、lncRNA H19过表达阴性对照组、lncRNA H19过表达组;(2)对照组(不做处理)、lncRNA H19干扰阴性对照组和lncRNA H19干扰组(si-lncRNA H19-1、si-lncRNA H19-2、si-lncRNA H19-3);Western blot检测转染Ad lncRNA H19及si lncRNA H19后NLRP3、Caspase-1、IL-1β蛋白表达水平,细胞转染分别设置:(1)对照组(不做处理)、高糖组、lncRNA H19过表达对照+高糖组、lncRNA H19过表达+高糖组;(2)对照组(不做处理)、高糖组、lncRNA H19干扰对照+高糖组、lncRNA H19干扰+高糖组。结果(1)与对照组(不做处理)相比,lncRNA H19在高糖诱导肾足细胞损伤过程中呈低表达(P<0.05),而lncRNA H19低表达可调控细胞焦亡相关蛋白NLRP3、Caspase-1、IL-1β表达增高(P<0.05),lncRNA H19表达与细胞焦亡相关蛋白表达两者呈负相关;(2)与对照组(不做处理)相比,在高糖诱导肾足细胞损伤过程中,肾足细胞结构蛋白Nephrin、Podocin表达水平降低(P<0.05);(3)与lncRNA H19过表达对照+高糖组相比,过表达lncRNA H19后,缓解高糖诱导肾足细胞焦亡,细胞焦亡相关蛋白NLRP3、Caspase-1、IL-1β呈低表达(P<0.05);(4)与lncRNA H19干扰对照+高糖组相比,干扰lncRNA H19后,促进高糖诱导足细胞焦亡,而焦亡相关蛋白NLRP3、Caspase-1、IL-1β呈高表达(P<0.05)。结论在高糖诱导足细胞焦亡过程中lncRNA H19具有可调控细胞焦亡相关蛋白表达,为未来治疗糖尿病肾病提供一定的理论依据。

整合素β_1在新生猪肾小管上皮细胞缺氧损伤中的变化

目的 探讨新生儿窒息所致肾脏损害机制。方法 运用抗霉素 ( antimycin) A无糖血清的培养基 ,建立 3 0、60、90和 12 0 min肾小管上皮 ( RTE)细胞缺氧模型 ,检测 RTE细胞中三磷酸腺苷 ( ATP)含量 ,采用流式细胞技术测定 RTE细胞整合素β1 数量的变化。结果 成功建立了 3 0、60、90、12 0 min低 ATP管上皮细胞模型。各时段( 3 0、60、90和 12 0 m in)组 ATP含量较正常组明显降低 ( P<0 .0 0 1)。随缺氧时间的延长 ,整合素 β1 水平有逐渐下降趋势 ,3 0、60、90和 12 0 min组较正常组明显降低 ( P均 <0 .0 0 1) ,各组间比较 ,P均 <0 .0 0 1。结论 整合素β1 在缺氧新生猪 RTE细胞的减少 。

肾小管上皮细胞损伤在慢性肾脏疾病进展中的作用

肾小管间质病变程度是决定各种肾脏疾病预后的重要因素 ,而肾小管上皮细胞的损伤和损伤反应可进一步加重肾间质病变。疾病状态时在缺氧、蛋白尿及多种炎症 /细胞因子作用下 ,肾小管上皮细胞可活化、增殖 ,并分泌多种炎症因子、趋化因子和血管活性因子进入肾间质 ,加重肾间质的炎症和纤维化进程。受损的肾小管上皮细胞除了发生坏死或凋亡外 ,还可能发生表型转化为肌纤维母细胞进入间质 ,直接参与肾间质纤维化。提示肾小管上皮细胞损伤和损伤后的反应是加重肾间质炎症。

参麦对缺血再灌注性鼠肾小管细胞损伤的作用

目的 :参麦注射液对缺血再灌注小鼠肾小管细胞损伤作用的观察。方法 :采用离体培养的鼠肾小管细胞株 ,复制缺血再灌注损伤模型 ,用MTT法测定细胞增殖活性 ,酶组化法观察细胞膜和线粒体中ATP酶和LDH含量的变化 ,用生化法检测小管细胞内SOD活性和MDA含量 ,结果 :不同浓度的SMI对肾小管细胞有明显的促增殖作用 ,在SMI浓度为 5 0 μg·ml 1时 ,促增殖作用最强 ;SMI能显著提高IR后小管细胞的增殖活性和细胞存活率 ;缺血培养 4小时后 ,MDA含量明显增高 ,ATP酶、LDH含量明显降低 ,SMI降低IR培养的小管细胞MDA含量 ,增强SOD活性 ,ATP酶、LDH含量。结论 :SMI具有促进鼠肾小管细胞增殖和减轻肾小管细胞IR损伤的作用 ,其机制可能与增强SOD的活性、加速OFR的清除 ,增强细胞抗氧化的能力 ,减轻膜的脂质过氧化 ,抑制ATP酶含量的减少 ,进而维持生物膜的结构和功能的完整性有关。

倒心盾翅藤对肾小管上皮细胞损伤的保护作用

目的考察傣药倒心盾翅藤不同极性部位在体外对草酸钠致肾小管上皮细胞(HK-2)损伤的保护作用,研究其治疗尿石症的物质基础。方法以草酸钠损伤HK-2细胞模型体外活性筛选为导向,MTT法检测倒心盾翅藤不同极性部位对草酸钠致HK-2细胞损伤的保护作用,初步确定活性部位。结果倒心盾翅藤不同溶剂提取液可不同程度提高草酸钠损伤后细胞活力,0.5和1 mg·mL-1水提液组细胞活力分别上升至86.17%和95.42%;0.5和1 mg·mL-150%醇提液组细胞活力分别上升至93.59%和84.77%;95%醇提液各剂量组细胞活力均上升至81.56%以上,与模型对照组比较,均差异有统计学意义;0.5和1 mg·mL-195%醇提乙酸乙酯部位组细胞活力分别上升至82.53%和91.58%;0.5和1 mg·mL-195%醇提正丁醇部位组细胞活力分别上升至77.24%和87.22%;0.5和1 mg·mL-1水部位组细胞活力分别上升至95.46%和81.36%,与模型对照组比较,均差异有统计学意义,其余部位各剂量组细胞活力与模型对照组比较,差异无统计学意义。结论倒心盾翅藤水提液和醇提液对草酸钠导致的HK-2细胞损伤有明显保护作用,其中乙酸乙酯部位、正丁醇部位以及水部位作用显著,可能是其体外抗结石活性的有效部位。

肾小球足细胞损伤与糖尿病性肾病相关性研究

目的探讨糖尿病性肾病 (diabeticnephropathy ,DIA)病人肾小球足细胞形态及数量的改变与肾功能[主要以血清肌酐浓度 (serumcreatinineconcentration ,SCC)来反应 ]的关系。 方法对 2 2例DIA病人活检标本肾小球足细胞面积与数量的改变作形态定量测定 ;5例因镜下血尿而作肾活检 ,但电镜观察排除其他肾病的标本作为阴性对照(NC)。测定参数 :足细胞面积 ,足细胞面积与肾小球面积比 ,肾小球单位面积足细胞数量 ,肾小球平均面积 ,系膜面积与肾小球面积比 ,肾皮质间质面积比。 结果DIA病人肾小球足细胞面积与数量的定量改变与SCC及肾皮质间质面积比显著相关 ,而对照组无这种关系。 结论在DIA病人 ,肾小球系膜面积的增加与肾间质纤维化的严重程度成正比 ;足细胞相对面积及相对数量的减少与血清肌酐浓度的升高及肾间质纤维化的严重程度成正比。说明在DIA病人 ,不仅肾小球系膜面积的增加与病程的进展密切相关 ,而且足细胞的损伤和丢失也可能起着重要的作用。

线粒体功能障碍与肾小球足细胞损伤的研究进展

随着2型糖尿病在全球的蔓延，糖尿病的防治工作已成为世界公共卫生的巨大挑战。据国际糖尿病联盟预测，2030年全世界的糖尿病患病人数将达到5．52亿。随着糖尿病群体的迅猛扩增，糖尿病肾病（diabeticnephropathy，DN）的发生率也逐年增加，业已成为导致终末期肾病最常见的原因。

参麦注射液对鼠肾小管细胞株NRKSIE氧化性损伤影响的实验研究

通过H2 O2 致鼠肾小管细胞损伤模型建立 ,研究参麦注射液 (SMI)对H2 O2 所致的小管细胞氧化性损伤的影响。实验结果表明 ,SMI对H2 O2 致的小管细胞氧化性损伤具有明显的保护和治疗作用 ,其疗效略优于辅酶Q10 (CoQ10 ) ,证实SMI能明显提高受损的小管细胞有氧代谢功能 ,并能保护未受损小管细胞 。

参麦对缺血再灌注鼠肾小管细胞损伤的作用

目的 :观察参麦注射液对缺血再灌注性鼠肾小管细胞损伤的作用。方法 :用传代培养的肾小管细胞复制缺血再灌注模型 ,MTT法测定细胞增殖活性 ,酶组化法测定细胞膜和线粒体中ATP酶和LDH含量的变化 ,用生化法检测小管细胞内SOD活性和MDA含量 ,观察参麦注射液 (SMI)对培养的鼠肾小管细胞的增殖和对缺血再灌注性小管细胞损伤的作用。结果 :不同浓度的SMI对肾小管细胞有明显的促增殖作用 ,在SMI浓度为 5 0 μg .ml- 1 时 ,促增殖作用最强 ;SMI能显著提高IR后小管细胞的增殖活性和增加细胞的存活率。缺血培养 4小时后 ,MDA含量明显增高 ,ATP酶、LDH含量明显降低 ,SMI降低IR培养的小管细胞MDA含量 ,增强SOD活性 ,ATP酶、LDH含量。结论 :本实验提示SMI具有促进鼠肾小管细胞增殖和减轻肾小管细胞IR损伤的作用 ,其机制可能与增强SOD的活性、加速OFR的清除 ,增强细胞抗氧化的能力 ,减轻膜的脂质过氧化 ,抑制ATP酶含量减少 ,进而持续生物膜的结构和功能的完整性有关。

细胞内Ca^2＋及Na^＋/Ca^2＋交换体在对比剂急性肾损伤中的作用

对比剂急性肾损伤（contrast induced-acute kidney injury,CI-AKI）的发病机制到目前为止尚未完全明确.有观点认为,细胞内Ca^2＋超载是CI-AKI发生的一个关键因素,在病理条件下电压依赖性钙离子通道（voltage dependence calcium channel,VDC）和Na^＋/Ca^2＋交换体（Na^＋/Ca^2＋ exchange,NCX）是引起细胞内Ca^2＋超载的主要途径.本文将对细胞内NCX介导的Ca^2＋超载引起肾小管上皮细胞损伤及血流动力学改变在CI-AKI发病机制中的作用做一综述.