p38 MAPK通路调控自噬-内质网应激途径介导草酸钙肾结石形成的机制研究

目的 探究p38 MAPK通路对大鼠草酸钙(CaOx)肾结石形成的影响及其作用机制,为肾结石的治疗选择提供新的思路。方法 将40只大鼠分为对照组、SB203580组、CaOx组、SB203580+CaOx组,每组10只,CaOx组和SB203580+CaOx组以1%乙二醇与1%氯化铵配制的混合液灌胃建立CaOx肾结石模型,对照组和SB203580组以饮用水灌胃;造模后,SB203580组和SB203580+CaOx组腹腔注入剂量为5 mg/kg的SB203580,1次/d,连续注射14 d,对照组和CaOx组腹腔注入等体积生理盐水。称量大鼠肾脏质量并计算肾脏系数,全自动生化分析仪检测血清中血清尿素氮(BUN)和血肌酐(SCr)水平,酶联免疫吸附法(ELISA)测定尿液中中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)和肾损伤分子-1(KIM-1)水平,钙盐染色(Von Kossa)观察黑色晶体沉积及组织损伤情况,原位末端标记法(TUNEL)观察肾小管细胞凋亡情况,免疫组化染色检测自噬标记物表达,实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)与蛋白质印迹(Western blotting)测定自噬及内质网应激途径相关分子表达。结果 与CaOx组比较,SB203580+CaOx组大鼠造模后体质量较高(P<0.05),肾脏质量、肾脏系数、BUN、SCr、NGAL、KIM-1水平均较低(P<0.05),肾脏组织病理损伤减轻且黑色结晶明显减少,TUNEL阳性细胞比例、LC3B与Beclin-1阳性表达面积占比、LC3B、Beclin-1、CHOP、GRP78 mRNA表达、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ蛋白比值、Beclin-1、CHOP、GRP78蛋白表达均下调(P<0.05),p62 mRNA和蛋白表达上调(P<0.05)。结论 p38 MAPK通路参与大鼠CaOx肾结石形成,抑制该通路能够减少肾结石形成,该作用可能与其调控自噬-内质网应激有关。