骨髓干细胞移植对急性缺血性肾损伤大鼠肾小管细胞活性的影响

目的观察和分析骨髓干细胞(BMSCs)移植对大鼠急性缺血性肾损伤后肾小管上皮细胞坏死、变性及增殖的影响。方法 Percoll密度梯度离心法分离获取BMSCs。制作大鼠急性缺血性肾损伤模型,通过下腔静脉进行BMSCs移植。分别于缺血再灌注后24h、48h、7d、14d获取肾脏标本,HE染色作肾组织学观察,免疫组织化学染色检测增殖细胞核抗原(PCNA)的表达。结果缺血再灌注后24h、48h,BMSCs移植组肾小管上皮细胞未见坏死及明显变性,而对照组细胞坏死及变性明显;缺血再灌注后7d、14d,BMSCs移植组和对照组肾小管上皮均无细胞坏死,但对照组可见部分细胞胞浆肿胀及间质内少许红细胞;BMSCs移植组较对照组肾小管上皮PCNA阳性细胞数增多,组间差异具统计学意义。结论 BMSCs移植可减少急性缺血性肾损伤的肾小管上皮细胞变性、坏死,而促进肾小管上皮细胞的增殖。

粉防己碱在急性缺血性肾损伤中的作用及与磷脂酶A_2的关系

采用双肾完全缺血45分钟大鼠模型，观察粉防已碱在急性缺血性肾损伤中的保护性作用及其与磷脂酶A2的关系。结果表明：肾损伤治疗组血清磷脂酶A2（PLA2）、肌酐（Cr）、尿素氮（BUN）水平均明显低于缺血肾损伤组，肾小球滤过率（GFR）及肾血浆流量（RPF）则明显高于缺血肾损伤组；且PLA2与BUN、Cr呈正相关，而与GFR、RPF呈负相关。提示：粉防已碱可通过抑制PLA2活性的机制对急性缺血性肾损伤产生保护性作用。

MR弥散加权成像评估大鼠缺血性肾脏结构及功能损伤的实验研究

目的与SPECT肾功能成像及病理学、MRI平扫及增强检査对照,探讨MR弥散加权成像(diffusion weighted imaging,DWI)评估大鼠缺血性肾脏结构及功能损伤的价值。材料与方法选取24只雄性SD大鼠制作左侧肾动脉狭窄摸型,分別行双肾^(99)Tc^m-DTPA肾显像测量肾小球滤过率(giomendar filtration rate,GFR)及3.0 T磁共振DWI、T1WI、T2WI及MRI增强检查并进行图像分析。DWI的b值分别采用0、800、1000、1200、1500 s/mm^2扫描,并测量表观弥散系数值(apparent diffusion coefficient,ADC),分别测量三次取平均值,比较双侧肾脏实质ADC值差异,分析ADC值与SPECT肾显像GFR相关性。统计学方法分別采用配对样本t检验及非参数相关分析。结果肾实质(ROI包括皮、髓质)ADC值与GFR呈正相关(F=0.001、r=0.584);双肾皮质ADC值比较t=4.626,F=0.001;双肾髓质ADC值比较t=2.699,P=0.019,均有明显差异性。DWI可显示肾脏局灶性缺血损伤及重度缺血损伤肾萎縮。结论MR DWI作为肾脏的无创影像学检查方法、对评估肾功能及结构损伤有一定价值,有助于中晚期肾损伤评估,对喊少潜在对比剂肾损伤有较大价值。

小檗碱对大鼠慢性缺血性肾损伤的影响

目的观察小檗碱(BBR)对大鼠慢性缺血性肾损伤的影响,并探讨相关作用机制。方法 Wistar大鼠30只,随机分为对照组、模型组和BBR组。模型组和BBR组大鼠均行左侧肾动脉缩窄术造成左侧肾脏慢性缺血。建模12周后,BBR组大鼠给予小檗碱100 mg/kg灌胃6周,模型组及对照组给予等剂量生理盐水灌胃6周。实验结束时,留取血液、尿液;快速分离大鼠左侧肾脏,行HE染色、Masson三色染色;采用免疫组化、RT-PCR、Western blot方法检测肾组织转化生长因子β1(TGF-β1)。结果与对照组比较,模型组大鼠肾组织发生严重形态学改变及组织重构,表现为明显的肾间质纤维化,血肌酐、尿肌酐水平升高(P均<0.05);与模型组比较,BBR组肾间质纤维化减弱,肾组织重构缓解,血肌酐、尿肌酐水平降低(P均<0.05)。与对照组比较,模型组TGF-β1mRNA及蛋白表达均增加(P均<0.05);与模型组比较,BBR组TGF-β1mRNA及蛋白表达均降低(P均<0.05)。结论 BBR能够有效抑制慢性肾缺血造成的肾组织损伤,改善肾功能;此保护作用可能与其降低TGF-β1表达,延缓肾组织纤维化重构有关。

免疫炎性反应在急性缺血性肾损伤中的作用机制

免疫炎性反应是急性。肾损伤（acute kidney injury，AKI）发生和进展的重要机制之一。免疫炎性反应过程可以加重肾小管上皮细胞损伤、微循环障碍及肾内低氧，影响肾脏的及时修复，使肾脏慢性纤维化，甚至导致尿毒症的发生。与抗感染免疫及抗肿瘤免疫等不同，AKI的免疫炎性反应过程有其自身固有特点。

2型糖尿病合并IgA肾病伴缺血性肾损伤一例报告

患者女，44岁，因血压升高10年，血糖升高1个月于2006年10月13日入院。患者10年前无意中发现血压升高，收缩压最高达180mmHg（1mmHg=0．133kPa），舒张压不详。自服牛黄降压丸、降压0号等药治疗，未监测血压。2年来出现夜尿增多，1个月前出现多饮、多食，体重减轻51（g，伴双下肢乏力，于当地医院检查发现血糖升高，空腹血糖10mmol／L。尿蛋白（＋），自服消渴丸10粒，3次／d，空腹血糖控制在6mmol／L。家族中其父母及姐妹均有高血压病史。查体：体温37．8℃，脉搏96次／min，呼吸20次／min，血压180／82mmHg，心界向左下扩大，余未发现阳性体征。尿常规：潜血（＋＋＋），白蛋白（＋＋＋），尿沉渣镜检：形态异常红细胞占82％。

炎症与急性缺血性肾损伤

近年来研究发现细胞间黏附分子-1和单核细胞趋化蛋白-1等炎症因子、核因子-κB及中性粒细胞、单核/巨噬细胞等炎症细胞参与了急性缺血性肾损伤的发生发展,抑制急性缺血性肾损伤时肾脏的炎症反应具有保护肾脏作用。

大黄素对骨髓间充质干细胞移植治疗缺血性再灌注肾损伤的影响

背景:已有研究表明大黄素通过抑制炎症因子释放对肠缺血再灌注损伤具有保护作用。目的:探讨大黄素对骨髓间充质干细胞移植治疗缺血性再灌注肾损伤的作用。方法:40只SD大鼠随机分为5组(n=8):假手术组、缺血再灌注组、骨髓间充质干细胞组、大黄素低剂量干预组、大黄素高剂量干预组。除假手术组外,其余4组建立大鼠肾缺血再灌注损伤模型。造模后骨髓间充质干细胞组下腔静脉注射1 mL骨髓间充质干细胞悬液,大黄素低剂量干预组与高剂量干预组术前7 d内每天灌胃大黄素30 mg/kg和60 mg/kg,后续处理与骨髓间充质干细胞组一致。再灌注6 h后,苏木精-伊红染色法检测肾组织病理改变,实时荧光定量PCR检测肿瘤坏死因子α,白细胞介素6和白细胞介素18以及TLR2和TLR4 mR NA表达水平,免疫印迹法检测COX-2,ICAM-1,i NOS蛋白表达水平。结果与结论:(1)缺血再灌注后可见大量小管上皮脱落,间质有炎性细胞浸润;骨髓间充质干细胞组可见部分小管上皮细胞脱落,部分间质有炎细胞浸润;药物低剂量干预组与高剂量干预组肾小管管腔几乎完整,少量间质有炎细胞浸润;(2)与假手术组相比,缺血再灌注组肿瘤坏死因子α,白细胞介素6,白细胞介素18以及TLR2,TLR4 m RNA表达水平显著升高(P<0.05),COX-2,ICAM-1,iN OS蛋白表达水平也显著升高(P<0.05);骨髓间充质干细胞组上述各因子表达明显低于缺血再灌注组(P<0.05);大黄素低剂量干预组与高剂量干预组的降低程度更为显著,且与大黄素剂量相关;(3)结果表明,大黄素具有促进骨髓间充质干细胞改善大鼠缺血性再灌注肾损伤的作用。

慢性缺血性肾损伤的病理学研究进展

慢性缺血性损伤系指一种慢性、持续性、非致死性的组织缺血性损伤形式，原发或继发性因素所导致的血管损伤在局部组织缺血性损伤的主要原因。血管损伤既可以在一定的条件下逐渐痊愈，也可以在某些条件下与局部组织损伤形成恶性循环而使损伤不断加重，终至不可逆性损伤。慢性肾缺血导致肾损伤的病理学研究也取得了一定的进展。慢性缺血性肾损伤主要指由于肾动脉、肾动脉主要分支及肾内肾小球毛细血管前各级动脉血管损伤所导致的肾组织慢性缺血性损伤。其主要病理改变表现为肾内各组织成分的萎缩、硬化＾［１］。

干细胞救治缺血性肾损伤：基质细胞衍生因子1-CXCR4／CXCR7轴功效特征

背景:干细胞移植救治缺血性肾损伤是目前的研究热点之一,但是移植细胞向受损组织体内定居不足和在受损组织内的存活能力低下是影响其最佳治疗学潜力的两大障碍。大量研究结果显示,基质细胞衍生因子1-CXCR4/CXCR7轴在干细胞的动员、迁移和存活中发挥着重要作用。目的:综述近年国内外关于基质细胞衍生因子1-CXCR4/CXCR7轴在低氧条件、干细胞定居和缺血性肾损伤救治中的研究进展。方法:第一作者应用计算机检索2000年1月至2012年12月PubMed数据库、中国学术期刊全文数据库(CNKI)有关基质细胞衍生因子1-CXCR4/CXCR7轴在干细胞移植治疗缺血性肾损伤中作用的文章,英文检索词"stromal cell-derived factor-1,CXCR4,CXCR7,stem cells,ischemia,kidney injury";中文检索词"基质细胞衍生因子,CXCR4,CXCR7,干细胞,缺血,肾损伤"。初检索到187篇相关文献,52篇文献符合纳入标准。结果与结论:CXCR4和CXCR7是基质细胞衍生因子1的两个天然受体,体外和体内低氧均可以诱导其在干细胞的表达增加。基质细胞衍生因子1-CXCR4/CXCR7轴在干细胞动员、迁移、黏附、增殖、存活和旁分泌等方面发挥重要作用。基质细胞衍生因子1高表达于缺血的脏器(包括肾脏),从而促使高表达其受体CXCR4的细胞向缺血脏器迁移参与修复。研究证实,CXCR7在调控缺血缺氧下干细胞黏附和存活能力方面发挥作用。因此,进一步深入研究基质细胞衍生因子1-CXCR4/CXCR7轴在干细胞及靶组织常驻细胞的生物学行为(例如细胞增殖、凋亡、迁移、黏附、旁分泌等),将有助于提高干细胞基础治疗的有效性,对于缺血性肾损伤治疗具有重要价值。

缺血性急性肾损伤大鼠miR-214介导的HIF1α、KIM1信号通路作用机制

目的探讨缺血性急性肾损伤(IAKI)大鼠miR-214介导的缺氧诱导因子l(HIFlα)、肾损伤分子1(KIMl)信号通路作用机制。方法将48只大鼠分为假手术组、IAKI组和miR-214组,建立IAKI组和miR-214组IAKI大鼠模型,48 h后抽取3组大鼠眼眶静脉血并收集尿液,检测生化指标及KIM1表达,采用Masson’s Trichrome、TUNEL、免疫印迹及PCR检测肾组织病理、肾小管细胞凋亡及肾组织中HIF1α、KIM1蛋白及mRNA表达。结果IAKI组大鼠血清中血清肌酸酐(Scr)、血尿素氮(BUN)和尿24 h三磷酸尿苷(UTP)表达高于假手术组(P<0.05),miR-214组大鼠血清中Scr、BUN、24 h UTP含量高于IAKI组(P<0.05);假手术组肾脏组织结构完整,肾小管和肾小球形态良好;IAKI组肾小球间质增多,肾间质增宽,炎症浸润严重,肾小管严重萎缩;miR-214组与IAKI组相比,肾小球硬度增加,肾小管周围组织炎症浸润更加严重。IAKI组大鼠肾小管细胞凋亡最为严重,凋亡程度明显高于假手术组;miR-214组与IAKI组相比肾小管细胞凋亡程度增加;IAKI组大鼠肾组织中HIF1α、KIM1蛋白以及mRNA表达高于假手术组(P<0.05),miR-214组与IAKI组相比肾组织HIF1α、KIM1蛋白及mRNA表达升高(P<0.05)。结论miR-214升高会加快肾小管细胞凋亡,加重肾组织损伤,增加HIF1α、KIM1表达,进一步加重IAKI大鼠病情。

缺血性急性肾损伤病理生理研究进展

急性肾损伤（acute kidney injury,AKI）为临床常见重症,尽管治疗措施有了明显改善,其发病率与死亡率仍然很高[1,2]。缺血性肾损伤为AKI常见病因,可引起组织多种病理生理改变。深入研究AKI病理生理对启动更具针对性的治疗具有重要意义。本文对近年来缺血性AKI病理生理研究进展进行综述。

大鼠缺血性急性肾损伤对海马CA1区的形态学影响

目的观察大鼠缺血性急性肾损伤对海马CA1区神经元的形态学影响。方法成功制造缺血性急性肾损伤大鼠模型后应用光镜电镜技术观察海马CA1区形态学变化,应用免疫组织化学及免疫印迹技术对海马组织中聚二磷酸腺苷核糖聚合酶-1(PARP-1)和caspase-3的表达进行定位观察和定量检测分析。结果肾缺血60 min再灌注24 h后光镜下海马CA1区锥体细胞层出现了固缩性神经元,经电子显微镜观察发现细胞萎缩,基质电子密度增高,细胞核萎缩但无染色质固缩表现,内质网扩张、线粒体肿胀变性。免疫组化染色及免疫印迹结果显示缺血性急性肾损伤的海马caspase-3阴性表达,而PARP-1表达明显增强。结论大鼠缺血性急性肾损伤可引起海马CA1区锥体细胞层神经元固缩性损伤,即细胞质性死亡,推测这种损伤可能属于PARP-1介导的细胞死亡。

缺血性急性肾损伤大鼠肾小管细胞凋亡及caspase-3表达

目的观察缺血性急性肾损伤(IAKI)大鼠肾小管细胞凋亡微细结构及caspase-3表达变化。方法应用光学和透射电镜技术、免疫组织化学和免疫印迹技术对缺血性急性肾损伤大鼠肾小管的细胞凋亡进行系统观察,并对caspase-3表达变化进行分析。结果肾缺血60 min再灌注24 h后,近髓质和髓质外带的近端小管出现了大量散在的凋亡细胞;凋亡细胞皱缩,核染色质固缩边聚,多数凋亡细胞脱落到小管腔内随尿液排除,小部分形成凋亡小体被邻近细胞所吞噬,在凋亡细胞内可见较多的自噬小体和自噬溶酶体。应用caspase-3免疫组化染色观察和免疫印迹分析结果显示,经caspase家族激活途径的细胞凋亡构成了IAKI诱导的近端小管细胞凋亡。结论大鼠肾缺血60 min再灌注24 h部分近端小管细胞发生了凋亡,推测这种细胞凋亡可能属于caspase依赖的细胞死亡;自噬作用参与了凋亡细胞处理细胞器的过程。

线粒体靶向肽可加速ATP的再生并减轻缺血性肾损伤

缺血组织再灌注期间活性氧（ROS）的大量产生可以引发线粒体膜通透性转换（MPT）孔的开放，导致线粒体去极化，减少ATP的合成，并增加ROS产生。再灌注时ATP的快速恢复是肾小管上皮细胞存活的关键，而且抑制氧化损伤可以减少炎症的发生。SS-31是一种线粒体靶向肽，其可以清除线粒体的ROS并抑制MPT，提示可能对缺血性肾损伤有保护作用。本研究在缺血再灌注（IR）大鼠损伤模型，用SS-31处理，在灌注早期保护了线粒体结构及呼吸链，加速了ATP的再生，

缺氧复氧肾损伤信号传导机制研究进展

缺氧缺血性肾损伤是新生儿窒息、肺炎、休克及肾移植、肾切开取石术等临床共同面临的问题，严重时可发展为多器官功能障碍综合症甚至死亡。核因子κB（nuclear factor-kappa B，NF-κB）参与多种细胞因子及炎症介质基因的转录调控，在炎症反应网络调节中起重要作用。

大鼠缺血再灌流后肾小管细胞凋亡与增殖的研究

目的：研究缺血性肾小管损伤与修复过程中细胞的增殖与凋亡。方法：暂时夹闭大鼠左肾动静脉４５分钟制备肾缺血再灌流动物模型，应用ＨＥ染色、ＴＵＮＥＬ法、ＰＣＮＡ免疫组化及透射电镜观察。结果：肾缺血再灌流６小时至 １周出现肾小管上皮细胞凋亡，缺血 ４５分钟增殖指数（ＰＩ）显著降低，缺血再灌流 １２至 ７２小时 ＰＩ显著升高。细胞凋亡的高峰出现在缺血再潜流１２小时，而ＰＩ的峰值在２４小时。结论：缺血引起的细胞增殖水平下降和细胞凋亡均是引起肾小管上皮细胞丧失的原因。

大鼠双侧肾切除后肝细胞的损伤方式

目的:观察大鼠双侧肾切除[非缺血性急性肾损伤(non ischemic acute kidney injury,NIAKI)]引起肝细胞损伤方式。方法:应用Western blot、免疫组织化学染色方法和光学、电子显微镜技术对双侧肾切除24 h后的大鼠肝脏进行了观察。结果:双侧肾切除24 h后的大鼠发生了急性肝功能受损,肝脏出现了大小不等坏死灶以及大面积区域性肝细胞的空泡样改变。光、电镜观察结果证明前者以细胞坏死为主,后者以细胞内出现大量空泡为主要表现。此外尚可见少许肝细胞凋亡的表现。Western blot的结果说明双侧肾切除后肝脏内多聚ADP核糖聚合酶(polyADP-ribose polymerase,PARP)-1过度激活,肿瘤坏死因子受体1和caspase-3蛋白表达均增强。免疫组化染色结果可见双侧肾切除后肝脏内出现了PARP-1阳性和caspase-3阳性的肝细胞。结论:形态学上NIAKI可引起肝细胞坏死,肝细胞空泡化与细胞凋亡,以前2种损伤为明显。从生物化学角度可以看出PARP-1介导的细胞死亡与caspase依赖的细胞死亡参与了NIAKI引起的急性肝损伤。