小鼠肾脏失神经支配后局部时钟基因及NRF2基因节律性表达的变化

目的:研究小鼠肾脏核心时钟基因和NRF2基因表达的昼夜节律性,及其在肾脏失神经支配(RDN)后昼夜节律性的变化。方法:将72只SPF级成年雄性C57BL/6小鼠随机分为两组(n=36):假手术组(Sham组)和去肾脏神经组(RDN组)。小鼠在12 h/12 h明暗交替的环境中饲养2周,早8:00开灯(时间记为ZT0)。苯酚溶液毁损双侧肾脏神经制备RDN模型,10 d后,分别间隔4 h(ZT0、4、8、12、16和20)收集血液、肾动脉、下丘脑视交叉上核(SCN)和肾脏组织标本。采用HE染色观察肾动脉周围神经毁损程度;ELISA法检测肾脏去甲肾上腺素(NE)水平;全自动生化分析仪检测血清肌酐(Scr)和尿素氮(BUN)水平;qRT-PCR和Western Blot法分别检测SCN和肾脏组织中BMAL1、CLOCK和NRF2基因mRNA转录及蛋白表达水平;免疫荧光法观察昼夜时点肾脏NRF2蛋白表达及核转位情况。通过尾静脉注射3种载有BMAL1短发卡RNA(shRNA1、2、3)的自互补腺相关病毒(pscAAV9-Arntl-EGFP)干扰小鼠体内BMAL1基因表达,探究肾脏组织中BMAL1基因与NRF2基因的相关性。结果:与Sham组比较,RDN组可见肾神经细胞空泡样变性,同时肾脏组织NE水平显著下降(P<0.05);血清Scr和BUN水平无明显变化(P>0.05);SCN中BMAL1基因mRNA表达的昼夜节律性无明显变化;而肾脏BMAL1、CLOCK和NRF2基因的mRNA转录和蛋白表达节律性消失,表现为24 h表达量中值下降、振幅减弱和峰值时间变化。免疫荧光进一步佐证RDN后肾脏NRF2蛋白表达的昼夜差异性消失,但各组均未观察到NRF2蛋白有明显的核转位。scAAV实验中,与对照组(NC_sh组)比较,BMAL1_sh1组肾脏BMAL1蛋白和NRF2蛋白表达均无明显变化(P>0.05);BMAL1_sh2和BMAL1_sh3组肾脏BMAL1蛋白表达明显下降,NRF2蛋白表达也相应下降(P<0.05)。结论:RDN后SCN失去了对肾脏生物钟的同步化调控,导致肾脏局部时钟基因BMAL1与CLOCK表达节律性消失。同时肾脏BMAL1基因可能通过对NRF2基因的调控,使得RDN后肾脏NRF2基因转录及蛋白表达的昼夜节律性亦消失,且呈现持续的低水平表达。

去肾神经术在肾脏疾病治疗中的应用进展

肾脏全部或部分失去、中断、切除或移除传出神经的状态被称为肾脏失神经支配。去肾神经术是一种非药物治疗技术,通过破坏肾脏交感传入和传出神经,使肾脏出现失神经支配状态,以减弱肾脏和全身交感神经活性。通过经皮穿刺肾动脉行去肾神经术的方法包括使用射频消融、超声波或透过肾动脉壁向血管周围间隙注射药物。肾脏疾病为肾脏本身疾病,以及由全身系统性疾病累及肾脏引起的疾病,包括慢性肾脏病、肾小球疾病、高血压肾损等。去肾神经术可通过调节交感神经活动、神经—体液免疫,减轻肾脏疾病炎症损伤反应,控制血压,减少抗高血压药使用,改善肾小球滤过率,延缓疾病发展,降低并发症发生风险,减轻不适症状,改善患者预后,提高生存质量。

失神经支配在心血管疾病中的研究进展

失神经支配与心肌梗死、心肌缺血再灌注损伤、高血压、心律失常、心力衰竭、动脉粥样硬化以及心室重塑等多种心血管疾病密切相关。失神经支配在心脏移植早期影响患者的静息心率和对运动的反应性。因此,本文就失神经支配在心血管疾病领域的研究进展进行综述,阐述失神经支配在治疗心血管疾病中的作用机制,以期为心血管疾病治疗提供新的补充治疗手段。