菊苣对高尿酸血症鹌鹑肾脏有机阴离子转运体OAT3-LIKE的影响

目的从肾脏转运蛋白角度探究中药菊苣降尿酸的药效机制。方法将40只雄性迪法克鹌鹑按体质量随机分为5组,正常组给予普通饲料,其余各组均给予含酵母饲料(15 g·kg-1·d-1)建立高尿酸血症模型,同时给药组分别给予菊苣5,7.5 g·kg-1·d-1,苯溴马隆20 mg·kg-1·d-1,实验第35天处死。检测鹌鹑血清尿酸(Uric Acid,UA)、尿素氮(Urea Nitrogen,BUN)水平,并用Real-time RT-PCR(Real-time Reverse TranscriptionPolymerase Chain Reaction)方法检测其肾脏有机阴离子转运体OAT3-LIKE(Organic Anion Transporter3-LIKE)的mRNA表达水平,同时测定肝脏尿酸代谢相关酶活性。结果与正常组比较,实验第21天、28天、35天模型组鹌鹑血尿酸升高,第35天肾脏OAT3-LIKE m RNA表达水平下降。与模型组比较,实验第35天,菊苣可以降低鹌鹑血尿酸水平,上调其肾脏OAT3-LIKE mRNA表达水平并降低肝脏腺苷脱氨酶(ADA)活性。结论高嘌呤食饵可以成功诱导鹌鹑高尿酸血症;菊苣具有抑制高尿酸血症鹌鹑尿酸生成和促进尿酸排泄的双重作用;菊苣药效机制可能与降低ADA活性及上调OAT3-LIKE表达水平相关。

肾脏尿酸盐转运体的研究进展

近年来研究证实通过肾皮质细胞膜的尿酸转运通过两种转运体 ,即电中性的阴离子转运体和产电的尿酸盐转运体。人们发现 4种蛋白参与了尿酸盐的转运过程 ,尿酸盐阴离子交换器参与了尿酸盐的重吸收过程 ,有机阴离子转运体 (OAT) 1和OAT3可能介导尿酸盐由细胞入血 ,尿酸盐单向转运体参与分泌过程。对这些蛋白的研究可以揭示痛风及高尿酸血症的分子机制 ,对疾病防治有重要意义。文中介绍了尿酸盐转运体的基因定位、组织分布及结构功能的研究现状。

尿酸盐转运体研究现状及其药物研发

尿酸盐是体内嘌呤代谢的终产物,其合成和排泄决定血尿酸水平。无论血尿酸水平过高或过低都将导致严重并发症。本文主要对尿酸转运体及降尿酸药物进行综述。

褐藻多糖硫酸酯对尿酸性肾病大鼠相关肾脏转运体的影响

目的:探讨褐藻多糖硫酸酯(FPS)对尿酸性肾病(UAN)大鼠肾组织相关肾脏转运体的影响。方法:60只雄性SD大鼠随机分成6组:正常对照组、模型组、苯溴马隆阳性对照组及FPS低、中、高剂量组。采用10%高酵母饲料联合腺嘌呤100 mg/(kg·d)灌胃,制造UAN模型。造模开始后第22天,药物治疗组分别给予苯溴马隆片20 mg/(kg·d)及FPS 100、200、400 mg/(kg·d),共28 d。实验第49天,处死大鼠,测定血清UA、BUN、Cr水平;HE染色观察肾脏组织病理变化;免疫组化法观察肾脏组织尿酸盐阴离子交换器1(URAT1)、有机阴离子转运子1(OAT1)、有机阳离子转运体2(OCT2)的表达。结果:FPS能显著降低UAN大鼠血清UA、BUN、Cr水平,具有保护肾功能作用;并显著下调UAN大鼠肾脏URAT1的表达,同时上调OAT1、OCT2的表达。结论:FPS可能通过下调URAT1的表达,同时上调OAT1、OCT2的表达而达到促进UAN大鼠尿酸排泄以降低血清尿酸水平,改善肾功能。

木犀草素通过抑制URAT1与调节Nrf2/HO-1通路改善尿酸诱导的肾脏损伤

为了探讨木犀草素改善尿酸性肾病(hyperuricemic nephropathy,HN)的可能机制,通过14C尿酸摄取实验测定木犀草素对尿酸转运体1(uric acid transporter 1,URAT1)尿酸转运活性的影响;采用MTT法评价木犀草素对高尿酸诱导的小鼠肾小管上皮细胞损伤的保护作用;采用氧嗪酸钾联合腺嘌呤制备小鼠HN模型,测定血清尿酸、肌酐(creatinine,CR)、尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)与谷胱甘肽(glutathione,GSH)的水平;借助H&E染色与Masson染色分别观察小鼠肾组织的病理学变化与纤维化情况;通过qRT-PCR检测肾脏URAT1、转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)、α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、E-cadherin、核因子E2-相关因子2(nuclear factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2)和血红素加氧酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)的mRNA表达水平;通过蛋白质免疫印迹法检测肾脏URAT1、Nrf2和HO-1的蛋白质表达水平。^(14)C尿酸摄取实验结果显示,木犀草素能剂量依赖性地抑制URAT1转运14C尿酸,其IC50值为23.42μmol/L;MTT实验结果显示,木犀草素能明显改善高尿酸诱导的细胞损伤;体内实验中,与模型组相比,木犀草素能降低模型小鼠血清尿酸、CR、BUN水平,下调肾脏URAT1的mRNA与蛋白质表达水平,并通过影响TGF-β、α-SMA、E-cadherin改善肾脏纤维化,通过上调Nrf2/HO-1通路降低肾脏氧化应激水平。总之,木犀草素可通过抑制URAT1降低血清尿酸,并通过Nrf2/HO-1通路依赖的抗氧化应激反应显著改善肾损伤和纤维化。

水蛭素对高尿酸血症大鼠尿酸盐转运体OAT1、URAT1、GLUT9表达的影响

目的探究水蛭素对高尿酸血症大鼠的作用及机制。方法雄性Wistar大鼠随机分为对照组、模型组、别嘌醇(30mg/kg)组和水蛭素低、中、高剂量(0.2、0.4、0.8 g/kg)组。大鼠ig氧嗪酸钾(0.75 g/kg),1次/d,连续5周,建立高尿酸血症模型;同时各给药组分别ig相应剂量的药物,1次/d,连续5周。采用生化法检测大鼠血清和尿液中的尿酸水平;免疫组化法测定肾组织中有机阴离子转运蛋白1(organic anion transporter 1,OAT1)水平;Western blotting法测定肾组织中葡萄糖转运体9(glucose transporter 9,GLUT9)、OAT1、尿酸盐转运体1(urate transporter 1,URAT1)蛋白表达;q RT-PCR检测肾组织中GLUT9、OAT1、URAT1 mRNA表达。结果模型组大鼠血清和尿液中尿酸水平显著升高(P<0.01),GLUT9、URAT1 mRNA和蛋白表达水平明显升高(P<0.01),OAT1 mRNA和蛋白表达水平明显降低(P<0.01);与模型组比较,水蛭素可显著降低大鼠血清和尿液中尿酸水平(P<0.01),显著下调GLUT9、URAT1 mRNA和蛋白表达水平(P<0.01),显著上调OAT1 mRNA和蛋白表达水平(P<0.01)。结论水蛭素可通过调控高尿酸血症大鼠肾脏尿酸盐转运体OAT1、URAT1、GLUT9的表达,从而发挥降尿酸作用。

茯苓水提物对高尿酸血症大鼠rURAT1 rOAT1和rOCT2表达的影响

目的考察茯苓水提物对高尿酸血症大鼠肾脏组织中尿酸转运体1(rURAT1)、有机阴离子转运体1(rOAT1)和有机阳离子转运体2(rOCT2)表达的影响,探讨茯苓降低血尿酸水平的机制。方法将右侧肾脏摘除的48只大鼠随机分为6组:手术对照组、模型组、别嘌呤醇阳性对照组,茯苓水提物高、中、低剂量组。药物干预28d,实验期间定期检测血尿酸和血清肌酐水平,采用免疫印迹法检测各组大鼠肾脏组织中rURAT1、rOAT1和rOCT2的表达。结果茯苓水提物高、中、低剂量组的血尿酸水平均较模型组大鼠明显降低;肾脏组织中rOAT1和rOCT2的表达均较模型组大鼠明显升高,而其rURAT较模型组大鼠显著下降,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论茯苓水提物通过调节肾脏组织中rURAT1、rOAT1和rOCT2的表达,从而发挥促进高尿酸血症大鼠尿酸的排泄作用。

尿酸相关疾病及尿酸转运蛋白功能研究进展

尿酸是嘌呤代谢的产物，也是高尿酸血症（HUA）发生的物质基础。HUA是一种由嘌呤代谢紊乱导致的疾病，目前在全球范围内HUA的发病率越来越高。因此本文就HUA的物质基础——尿酸以及与其相关的转运蛋白的研究进展做一综述，以期加深对尿酸和HUA的认识。

尿酸转运蛋白功能的研究进展

尿酸在肾脏的代谢需要依赖转运蛋白。有机阴离子转运蛋白(OATs)主要位于肾近曲小管,其介导众多带负电的代谢产物(包括尿酸、酸性神经递质、甾体激素、前列腺素等)和药物的跨膜转运,对药物排泄和药代动力学有重要影响。尿酸阴离子转运体1(URAT1)是有机阴离子转运家族的新成员,表达于近端肾小管上皮细胞刷状缘,主要负责尿酸在肾小管的重吸收和人类遗传性疾病的产生。该文将对OATs和URAT1的生理特性、功能调节及其在疾病中的作用等进行综述。

以hURAT1为靶点的排尿酸药物体外细胞筛选模型的建立和应用

人尿酸盐阴离子转运体1(human urate anion transporter 1,hURAT1)是人肾小管重吸收尿酸的主要转运蛋白,以hURAT1为靶点,筛选hURAT1抑制剂是近年来降尿酸药物开发的热点,因此建立hURAT1抑制剂体外细胞筛选模型具有重要的意义与实用价值。本实验首先构建了表达SLC22A1 2(hURAT1编码基因)的慢病毒载体,感染MDCK细胞后,通过G41 8筛选出稳转细胞株(稳转株);随后采用W estern-blot及免疫荧光方法检测目的蛋白的表达,并通过液闪计数仪检测hURAT1稳转株对[^(14)C]尿酸的摄取作用及hURAT1抑制剂苯溴马隆、丙磺舒对[^(14)C]尿酸摄取的抑制效果。实验结果显示,hURAT1稳转株目的蛋白表达量为对照稳转株的两倍,并且吸收尿酸的量明显大于对照细胞(P>0.001)。此外,实验中测得hURAT1稳转株对尿酸吸收的Km值为365.4μmol/L,苯溴马隆及丙磺舒对尿酸吸收的IC_(50)分别为0.1 8μmol/L和66.82μmol/L。以上结果表明,本实验成功构建了稳定表达hURAT1的MDCK细胞株,并建立了一套hURAT1抑制剂体外准确筛选和评价的方法体系。

高尿酸对小鼠肾脏尿酸盐重吸收转运体基因表达的影响

目的:研究高尿酸条件下尿酸盐阴离子转运体1(Urate anion exchanger 1,URAT1)、葡萄糖转运体9(glucose transporter 9,GLUT9)、有机阴离子转运体10(Organic Anion Transporter 10,OAT10)基因表达的动态变化。方法:(1)研究不同剂量尿酸对小鼠血尿酸水平的影响:遵循随机化原则将50只雄性昆明种小鼠分为5组(每组10只):分别为正常组、尿酸每天100、200、300、400mg/kg剂量组。每天2次腹腔注射尿酸磷酸盐溶液,共造模14天,确定最佳剂量。(2)确定最佳剂量后,小鼠腹腔注射最佳剂量尿酸每天300 mg/kg,复制高尿酸血症模型。在给予尿酸1、3、7、14天处死小鼠,用磷钨酸法测定小鼠血清尿酸水平和肝尿酸含量,用RT-PCR检测小鼠肾脏尿酸盐重吸收转运体URAT1、GLUT9、OAT10基因表达水平。结果:(1)腹腔注射尿酸每天300 mg/kg及400mg/kg能有效升高小鼠血尿酸水平(P<0.01),但400 mg/kg组小鼠死亡率高。而尿酸100、200 mg/kg组与正常组相比无统计学差异,300 mg/kg为最佳剂量;(2)与正常组相比,模型组血尿酸水平在造模1、3、7、14天均升高(P<0.05),造模成功;与正常组相比,模型组肝匀浆尿酸含量在造模1天显著升高(P<0.01);而造模3天、7天及14天均无统计学差异;与正常对照组相比,模型组小鼠肾脏GLUT9基因表达水平在1、3、14天均增加(P<0.05);与正常对照组相比,模型组小鼠肾脏URAT1和OAT10基因表达水平在各时间点均无显著变化(P>0.05)。结论:在尿酸诱导的高尿酸血症小鼠模型上,模型组GLUT9基因在给予尿酸1、3、14天后表达均上调,但URAT1、OAT10的基因表达均无显著变化。

猫须草水提物对痛风性肾病大鼠肾脏URAT1、OAT1及病理的影响

目的探讨猫须草水提物对痛风性肾病大鼠肾脏尿酸盐转运体1(URAT1),有机阴离子转运蛋白1(OAT1)及病理的影响。方法采用酵母粉+腺嘌呤法建立大鼠痛风性肾病模型,测定其血尿酸、血肌酐、血尿素氮、尿尿酸、尿肌酐、24 h尿液排泄量及尿酸分级排泄率,光镜下观察肾组织病理变化,免疫组化法检测肾组织URAT1、OAT1蛋白表达。结果与模型组比较,猫须草水提物高、中剂量组大鼠血尿酸、血肌酐、血尿素氮水平及URAT1蛋白表达降低,而尿尿酸、尿肌酐水平,尿酸分级排泄率,OAT1蛋白表达升高;高、中、低剂量组大鼠24 h尿液排泄量升高程度无明显变化。结论猫须草水提物可能通过上调OAT1蛋白表达促进尿酸排泄、下调URAT1蛋白表达抑制尿酸重吸收的双重调节功能来促进尿酸在肾脏中的排泄,并减轻尿酸对肾脏的病理损伤。

痛风宁对高尿酸血症模型大鼠肾脏尿酸盐转运体表达的影响

目的:通过观察痛风宁对高尿酸血症(HUA)模型大鼠肾脏尿酸盐转运体蛋白及mRNA表达的影响,探讨该方促进尿酸排泄的机制。方法:将80只SD大鼠随机分为空白组20只和造模组60只。造模组行腹腔注射氧嗪酸钾(OAPS)联合盐酸乙胺丁醇(EMB)灌胃造模,于第21天时鉴定模型,确定造模成功后将60只造模大鼠随机分为模型组、痛风宁组和苯溴马隆组,每组20只。痛风宁组和苯溴马隆组分别予15. 3 g·kg^-1·d^-1痛风宁药液及5. 2 mg·kg^-1·d^-1苯溴马隆混悬液灌胃,空白组和模型组予等量生理盐水灌胃,于干预第14,21天分批采集大鼠尿液、血液、肾脏组织。采用酶比色法检测血尿酸(SUA),尿尿酸(UUA)含量,脲酶法检测血尿素氮(BUN)含量,肌氨酸氧化酶法检测血肌酐(CRE)含量;蛋白免疫印迹法(Western blot)及实时荧光定量PCR(Real-time PCR)检测肾脏尿酸盐转运体蛋白和mRNA表达。结果:药物干预第14,21天,与空白组比较,模型组SUA,CRE,BUN升高,UUA显著降低(P<0. 01),尿酸盐转运体1(URAT1),葡萄糖转运体9(GLUT9)蛋白与mRNA表达明显升高(P<0. 05),三磷酸腺苷结合盒转运蛋白G2(ABCG2),有机阴离子1(OAT1),有机阴离子3(OAT3)蛋白与mRNA表达明显下降(P<0. 05);与模型组比较,痛风宁组及苯溴马隆组SUA,CRE,BUN明显降低,UUA明显升高(P<0. 05),URAT1,GLUT9蛋白与mRNA表达明显下降(P<0. 05),ABCG2,OAT1,OAT3蛋白与mRNA表达明显升高(P<0. 05),痛风宁组CRE,BUN明显降低(P<0. 05,P<0. 01),且明显优于苯溴马隆组(P<0. 05);干预第21天痛风宁组,除BUN外,其余指标改善趋势均更明显。结论:腹腔注射OAPS联合EMB灌胃可致HUA,并伴有肾功能异常;痛风宁可促进尿酸排泄,降低血尿酸,并下调肾脏URAT1,GLUT9表达,上调ABCG2,OAT1,OAT3表达,这可能是其促进尿酸排泄而降尿酸的作用机制之一;痛风宁对肾功能具有一定的保护作用。

藏药二十五味儿茶丸降尿酸作用及对尿酸转运蛋白表达水平的影响

目的研究藏药二十五味儿茶丸对氧嗪酸钾联合次黄嘌呤诱导的大鼠高尿酸血症的防治作用。方法 60只大鼠随机分为空白组、模型组、别嘌醇组(10 mg/kg)和二十五味儿茶丸高、中、低剂量组(1、0. 5、0. 25 g/kg),除空白组外,其余各组皮下注射氧嗪酸钾(200 mg/kg)联合灌胃次黄嘌呤(300 mg/kg)建立高尿酸血症模型,1 h后灌胃给予相应药物,连续7 d。生化法测定血清尿酸(UA)、肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)水平,血清及肝组织中黄嘌呤氧化酶(XOD)活性; HE染色观察肾脏组织病理变化;免疫组化法测定肾脏有机阴离子转运蛋白1 (OAT1)、有机阴离子转运蛋白3 (OAT3)及尿酸盐阴离子转运体1 (URAT1)的表达。结果与空白组比较,模型组血尿酸水平、血清及肝脏组织XOD水平显著升高,肾脏组织出现病理损伤,肾脏组织OAT1及OAT3表达显著降低,URAT1表达显著升高。与模型组比较,二十五味儿茶丸高剂量组能明显降低血尿酸水平,抑制XOD活性,改善肾脏病理损伤,升高OAT1及OAT3的表达,抑制URAT1的表达。结论二十五味儿茶丸可以有效治疗高尿酸血症并对肾脏有一定的保护作用,其降尿酸机制可能与抑制XOD活性,提高OAT1、OAT3的表达,抑制URAT1的表达有关。

健脾渗湿解毒汤对高尿酸血症大鼠的作用及机制探讨

目的 通过观察健脾渗湿解毒汤对高尿酸血症(hyperuricemia,HUA)模型大鼠尿酸盐转运蛋白表达的影响,探讨该方治疗HUA的作用机制。方法 取健康雄性SD大鼠60只,随机分为空白对照组、模型组、苯溴马隆组和健脾渗湿解毒汤低、中、高剂量组。除空白对照组大鼠给予灌胃蒸馏水外,其他各组大鼠分别灌胃氧嗪酸钾和腺嘌呤建立HUA模型,各药物治疗组大鼠在造模1 h后予相应药物灌胃,持续给药21 d后处死,检测各组大鼠血尿酸(serum uric acid,SUA)、血肌酐(serum creatinine,SCR)、尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)、谷草转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)、谷丙转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)含量;苏木素-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色观察肾脏及肝脏组织病理学变化;Western blot和实时荧光定量PCR法检测肾脏组织尿酸盐转运蛋白(urate transporter,URAT)1、有机阴离子转运蛋白(organic anion transporter,OAT)3的表达。结果 与空白对照组比较,模型组大鼠血清SUA、SCR含量明显升高(P<0.05),肾脏组织中URAT1蛋白和m RNA的表达水平明显升高(P<0.01)、OAT3蛋白和m RNA的表达水平明显降低(P<0.01)。与模型组比较,健脾渗湿解毒汤低剂量组大鼠SUA含量明显降低(P<0.01),健脾渗湿解毒汤中剂量和高剂量组大鼠SUA、SCR、BUN含量均明显降低(P<0.05)。此外,高剂量健脾渗湿解毒汤能够明显降低URAT1蛋白及m RNA(P<0.05)、升高OAT3蛋白及m RNA的表达水平(P<0.05),减轻肾脏损伤。结论 健脾渗湿解毒汤有显著的降尿酸效果,具体机制可能与其抑制尿酸重吸收蛋白URAT1、上调尿酸分泌蛋白OAT3的表达相关。

苯并呋喃羧酸类特异性尿酸盐转运体抑制剂的设计、合成及活性研究

目的:设计合成新型的、具有一定特异性的苯并呋喃类人尿酸盐转运体(human urate anion transporter-1,h URAT1)抑制剂,并对其进行活性测试。方法:以苯并呋喃为骨架,引入羧基,设计合成3个新化合物。将所得目标化合物分别对稳定转染h URAT1基因或人有机阴离子转运体(human organic anion transporter-1,h OAT1)基因的MDCK细胞进行[^(14)C]尿酸摄取抑制试验或6-羧基荧光素(6-carboxyfluorescein,6-CFL)试验,探究化合物抑制细胞尿酸或6-CFL摄取能力。结果:成功合成了目标化合物B-1,B-2,B-3,并经过1H-NMR,MS的结构确证。体外h URAT1和h OAT1抑制活性筛选的结果显示,单羧酸化合物B-1,B-2具有较强的抑制h URAT1[14C]尿酸摄取活性,且化合物B-1表现出良好的h URAT1选择性。结论:设计合成了新型的具有一定h URAT1特异性的降尿酸化合物,化合物B-1的抑制活性及选择性均优于阳性对照药丙磺舒。

抗高尿酸血症药物作用靶点研究进展

高尿酸血症表现为血清尿酸浓度过高,其产生的主要原因为两方面:一是尿酸生成过多。黄嘌呤氧化酶是负责尿酸生成的关键酶,是控制尿酸浓度的主要靶点;另一方面是尿酸排泄减少。负责尿酸转运的是固定在肾小管上皮细胞上的各种转运蛋白,这些蛋白的基因突变或缺失是引发血液尿酸浓度异常的主要原因,相关药物对这些蛋白表达的调控是控制尿酸排泄量的主要手段。该文主要从这两个角度对高尿酸血症的主要治疗靶点的研究进展进行综述。

稳定表达hOAT1的HEK293细胞系的建立及鉴定

目的构建人肾脏近曲小管阴离子转运体1(human organic anion transporter 1,hOAT1)-增强型绿色荧光蛋白(EGFP)质粒,获得稳定表达pEGFP-hOAT1的HEK-293细胞系。方法构建EGFP与hOAT1的融合基因表达载体pEGFP-hOAT1,并利用FuGENE 6转染试剂将其转染至HEK293细胞中,用荧光显微镜观察绿色荧光蛋白表达情况,经G418抗性筛选获得稳定转染细胞株。用RT-PCR法、qRT-PCR法和Western blot技术,检测稳定转染细胞及正常细胞hOAT1 mRNA和蛋白的表达情况,并进一步用超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS/MS)考察稳定转染细胞的对氨基马尿酸摄取能力,以及丙磺舒对hOAT1的抑制作用。结果使用该文的方法,细胞转染率可达90%。RT-PCR、qRT-PCR、Western blot,以及对氨基马尿酸摄取、丙磺舒抑制实验结果显示,相对于正常组,转染细胞在荧光显微镜下呈绿色荧光,其hOAT1表达均呈阳性(P<0.01);稳定转染细胞的对氨基马尿酸摄取能力明显升高(P<0.05),且丙磺舒对hOAT1有明显的抑制作用(P<0.05)。结论高效快速地建立了稳定高表达hOAT1的HEK293细胞系,为核苷类膦酸类似物这类药物引起的临床剂量依赖性肾毒性的机制研究奠定了模型基础,也为体外研究hOAT1底物或抑制剂的筛选提供了一个便利的工具。

苓泽合剂对痛风性肾病大鼠模型ABCG2、GluT9及URAT1蛋白表达影响

目的考察苓泽合剂对痛风性肾病模型大鼠ATP结合盒转运蛋白G2(ATP-binding cassette protein2,ABCG2)、葡萄糖转运蛋白9(Facilitated glucose transporter 9,GluT9)及尿酸转运体1(Urate Transporter1,URAT1)蛋白表达的影响,探讨其治疗痛风性肾病的机理。方法 SD大鼠随机分为7组,分别为空白组,模型组,苯溴马隆片组(西药阳性对照),痛风定胶囊组(中药阳性对照药),苓泽合剂高、中、低剂量组(66.6、33.3、16.7 g·kg-1)。利用酵母粉联合腺嘌呤制备大鼠痛风性肾病模型,28 d后,测定其24 h尿量及尿蛋白、肾系数、血清尿酸、肌酐、尿素氮、尿激酶、β2-微球蛋白、胱抑素(Cys C)、尿N-乙酰-β-D葡萄糖苷酶(NAG)含量,蛋白质印迹(Western blot)法检测肾病组织中ABCG2、GluT9及URAT1蛋白表达。结果与模型组比较,苓泽合剂各组尿量、尿蛋白、肾系数、尿酸、肌酐、尿素氮、β2-微球蛋白、CysC及NAG减少,尿激酶增加,肾组织病理改变均有一定减轻,ABCG2蛋白的表达明显增加,GluT9及URAT1蛋白的表达明显降低。结论苓泽合剂对痛风性肾病大鼠具有较好肾保护作用,可能与其上调肾组织中ABCG2,下调GluT9及URAT1蛋白表达有关。

蠲痹历节清方对高尿酸血症大鼠肾脏中部分尿酸转运蛋白的影响

目的:探讨肾脏尿酸盐转运子1(Urate Transporter 1,URAT1)、三磷酸腺苷结合盒转运蛋白G2(ATP-binding Cassette Superfamily G Member 2,ABCG2)、葡萄糖转运蛋白9(Glucose Transporter 9,GLUT9)等尿酸转运蛋白在蠲痹历节清方降低血尿酸(Serum Uric Acid,SUA)中的机制。方法:将雄性SD大鼠随机分为空白组、模型组、苯溴马隆组(5 mg/kg)及蠲痹历节清方低、中、高剂量组(11,22,44 g/kg)。除空白组外,其余各组均建立高尿酸血症模型;苯溴马隆组和蠲痹历节清方组分别予相应浓度混悬液进行灌胃干预。最后收集大鼠腹主动脉血和双肾组织,采用全自动生化仪检测各组大鼠腹主动脉中血尿酸含量,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)和蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测各组大鼠肾脏中URAT1、GLUT9、ABCG2 mRNA和蛋白的表达。结果:与空白组相比,模型组血尿酸水平明显增加,差异有统计学意义(P<0.05);空白组与模型组血尿酸水平存在明显差异,提示造模成功。与空白组比较,模型组URAT1及GLUT9的mRNA和蛋白表达均显著升高,差异有统计学意义(P<0.05);ABCG2的mRNA和蛋白的表达则显著下降,差异有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,蠲痹历节清方各剂量组和苯溴马隆组URAT1及GLUT9的mRNA和蛋白表达均明显下降,差异有统计学意义(P<0.05);ABCG2的mRNA和蛋白的表达则显著升高,差异有统计学意义(P<0.05)。与蠲痹历节清方高剂量组比较,中、低剂量组URAT1及GLUT9的mRNA和蛋白表达均明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);ABCG2的mRNA和蛋白的表达则明显下降,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:蠲痹历节清方可通过抑制肾脏中URAT1、GLUT9 mRNA及蛋白表达,促进ABCG2的mRNA和蛋白的表达,来调节尿酸的分泌,减少尿酸的重吸收,增加尿酸的排泄,进而降低血尿酸水平,且随着剂量的升高,其降尿酸的作用逐渐增强。