抗纤灵冲剂对肾脏急性缺血再灌注大鼠血流动力学的影响

为探讨抗纤灵冲剂对大鼠肾脏急性缺血再灌注(I-R)后血流动力学的干预作用,观察各组SD雄性大鼠在I-R血BUN、Scr,ET、TXB2和6-Keto-PGF1α,血NO、NOS及组织NO的变化情况。结果:抗纤灵冲剂明显降低I-R大鼠的血BUN、Scr(P<0.05),可调节TXA2和PGI2的合成比例,稳定血NO、NOS及组织NO。结论:抗纤灵冲剂对改善I-R后血流动力学的紊乱,保护肾功能有效。

Wistar大鼠急性肾脏缺血再灌注损伤动物模型的建立及意义

目的:建立一种简单、安全、高成功率的大鼠急性肾脏缺血再灌注损伤动物模型。方法:应用微型动脉夹夹闭Wistar大鼠双侧肾动脉50min后松开,于伤后第3、5、7天取肾,经一系列处理后进行HE染色及免疫组化染色,以观察在肾脏近曲小管上皮细胞中是否出现肾损伤分子-1(kidney injury molecule-1,Kim-1)抗原及该细胞形态学改变。结果:该法造模成功率达93.3%,实验组肾脏近曲小管上皮细胞Kim-1抗原表达率上升,同时该细胞有明显细胞形态学改变(P>0.05)。结论:应用微型动脉夹夹闭Wistar大鼠双侧肾动脉可制备急性肾脏缺血再灌注损伤模型,且成功率高、方法简单。

心肾综合征模型建立及肾素原受体信使核糖核酸表达的研究

目的:通过"腹主动脉缩窄(CAA)合并肾脏急性缺血再灌注损伤(RIRI)"建立大鼠心肾综合征(CRS)模型,并观察肾素原受体信使核糖核酸的表达。方法:将42只Wistar大鼠按照体重随机分成4组(每组10只,造模过程中死亡2只):假手术组、CAA组、RIRI组、CAA+RIRI组。术后观察16周。酶联免疫法测定血清B型利钠肽(BNP),苦味酸法测定血肌酐(Cr),酶偶联速率法测定血清尿素氮(BUN),放射免疫法测定血浆肾素活性、血管紧张素-Ⅰ(Ang-Ⅰ)和Ang-Ⅱ、醛固酮含量;小动物超声心动图监测大鼠心脏舒张末期室间隔厚度(IVS)、舒张末期左心室后壁厚度(LVPW)、左心室射血分数(LVEF);记录心室重量指数、全心重量指数、肾脏重量指数,苏木素-伊红(HE)染色观察心肌、肾脏组织病理变化;荧光定量聚合酶链式反应法测定心室肌、肾脏组织肾素原受体信使核糖核酸表达。结果:CAA、RIRI、CAA+RIRI三组血清BNP均较假手术组明显升高(P<0.05);CAA+RIRI组血清Cr、BUN较CAA组显著升高(P<0.01),血浆醛固酮含量较假手术组和RIRI组均明显升高(P均<0.05);CAA+RIRI组的肾素活性较CAA组明显升高(P<0.05),但三个术式组血浆Ang-Ⅰ、Ang-Ⅱ无明显升高(P>0.05)。CAA+RIRI组IVS和LVEF变化程度较CAA组更明显(P均<0.01),CAA+RIRI组心室肥厚较RIRI组明显(P<0.05)。CAA+RIRI组心室和全心重量明显高于RIRI组(P<0.05),HE染色可见心肌细胞束的间隙稍增宽;左肾指数减小程度最明显,肾小管重度萎缩,部分肾小球萎缩。荧光定量聚合酶链式反应结果显示,假手术组大鼠心室肌和肾脏组织中均有肾素原受体表达,CAA、RIRI、CAA+RIRI三组大鼠肾素原受体表达均较假手术组减弱。结论:CAA+RIRI复合术式对心肌和肾脏同时构成损伤,损伤程度较CAA或RIRI单一术式更严重,手术方法可控性好、一致性高。该方法为肾素原受体用于CRS的治疗新途径研究提供了方法学参考。

肾损伤分子-1在急性缺血缺氧再灌注大鼠肾组织中的表达及意义

目的 观察肾损伤分子-1（kidney injury molecule-1，KIM-1）在急性缺血缺氧再灌注肾损伤（acute ischemia reperfusion kidney injury，AIKI）大鼠肾组织中的表达及分布规律，探讨其在诊断急性肾损伤（acute kidney injury，AKI）中的价值。方法 采用清洁级SD大鼠128只，随机分为对照组和模型组，模型组按国际标准建立大鼠AIKI模型，分别于2 h、6 h、24 h、48 h、72 h、1周、2周、4周处死（n＝8），取肾组织，常规HE染色，参照Sayhan等标准对肾小管间质损伤进行半定量评分；免疫组织化学、Western blot法检测KIM-1蛋白的表达及分布；生化法测定血清肌酐（serum creatinine，Scr）水平。结果 （1）大鼠缺血再灌注后2 h即出现明显肾小管间质损伤，随着再灌注时间延长损伤加重，48 h达高峰后逐渐减轻，但仍高于对照组（P〈0.01）；（2）Western blot和免疫组织化学检测发现，缺血再灌注后2 h肾组织KIM-1的表达明显升高，KIM-1表达水平与肾小管间质损伤评分呈显著正相关（r＝0.887，P＝0.003）；（3）大鼠缺血再灌注后2 h Scr明显升高，48 h达到最高值后降至正常，其升高与肾小管间质损伤评分无相关性（r＝0.280，P＝0.502）。结论 AIKI模型中大鼠肾组织KIM-1蛋白表达水平显著增加，其表达水平与肾小管间质损伤评分呈正相关，与Scr相比，KIM-1可能为更准确地反映肾损伤情况的指标。

参附强心丸调控肾素原受体介导MAPK信号通路抑制心肾细胞凋亡

目的:基于肾素原受体(PRR)介导的丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路,研究参附强心丸对心肾综合征大鼠心肾凋亡的保护作用机制。方法:Wistar大鼠经肾脏急性缺血再灌注损伤合并腹主动脉缩窄术,制备大鼠心肾综合征(CRS)模型。将CRS大鼠随机分成CRS模型组(ig 10 m L·kg-1纯净水),CRS+参附强心丸组(SFQX组,ig参附强心丸13.2g·kg-1),CRS+柄区肽(HRP)组(iv HRP 10 mg·kg-1),假手术组(ig等体积纯净水)。术后8周给药,1次/d,持续4周。实验结束后,测定血清脑钠肽(BNP),尿素氮(BUN)和肌酐(Cr),小动物超声心动仪测定小动物超声监测舒张末室间隔厚度(IVS),舒张末期左心室后壁厚度(LVPW),左心室射血分数(LVEF),实时荧光PCR测定左心室和肾脏PRR mRNA表达,免疫印迹法(Western blot)测定丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路,包括细胞外信号调控的蛋白激酶(ERK1/2),c-Jun氨基末端激酶(JNK),P38蛋白表达,原位末端标记法(TUNEL)测定左心室和肾脏组织细胞凋亡。结果:与假手术组比较,CRS大鼠血清BNP,BUN,Cr明显升高(P<0.05),IVS,LVPW显著增加(P<0.01),LVEF显著降低(P<0.01),左心室质量指数显著增加(P<0.01),左肾脏质量指数显著减小(P<0.01),组织PRR mRNA高表达(P<0.01),ERK1/2,p38,JNK蛋白表达升高(P<0.01),心肌和肾脏细胞凋亡率达32.5%,63.2%。参附强心丸13.2 g·kg-1可明显减轻CRS大鼠心肌肥厚,抑制IVS,LVPW肥厚,增加EF,血清BUN,Cr明显降低,降低受损组织PRR mRNA表达和ERK1/2,p38蛋白表达,降低心肌和肾脏细胞凋亡率。结论:参附强心丸可增强CRS大鼠心肾功能,通过降低心肾组织PRR mRNA表达,抑制MAPK信号通路ERK1/2,JNK,P38磷酸化,降低心肾细胞凋亡。