枸杞多糖对力竭运动致大鼠肾脏氧化损伤的保护作用

本文将接受力竭运动后的大鼠作为研究对象,讨论枸杞多糖(LBP)能否在其肾脏氧化损伤方面起到保护作用。方法 本次实验选取30例健康雄性SD大鼠,将其随机等分为3组,其中A组不采取任何运动措施,保持安静状态,每日灌服适量生理盐水;B组大鼠按照规定计划进行力竭运动,其余措施同上;C组在B组力竭运动基础上使用LBP,即运动前灌服相同体积500mg/kgLBP溶液。3组均处理20d,记录B、C两组大鼠力竭运动时间,即刻将3组麻醉处死,取其肾脏测定超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性、丙二醛(MDA)含量,并分析枸杞多糖对3组大鼠肾脏组织iNOS、HO-1蛋白表达是否存在不同影响。结果 C组10例大鼠服用LBP后,平均力竭运动时间为(179.05±34.23)min,显著大于B组的(133.98±23.68)min,表明LBP干预后的大鼠能够坚持较长时间的高强度力竭运动。B组大鼠完成力竭运动后,SOD、GSH-Px活性明显低于正常情况(A组),MDA水平显著提升。尽管使用LBP干预后的C组大鼠SOD活性仍然与A组存在一定差异,但相较于B组得到明显改善,此外,其余两项生化指标与正常情况差异无统计学意义。相较于正常情况下的A组,B组所测得iNOS、HO-1蛋白表达均有不同程度的增加,差异显著;将C组与B组相比,其iNOS表达明显降低,HO-1表达明显提升,但均高于A组,差异具有统计学意义。结论 LBP可以改善大鼠的运动耐力情况,使其能够坚持更长时间的高强度力竭运动。其可以通过抑制ERK 1/2的活性来调节细胞内的氧化应激过程,减少自由基的生成,增强抗氧化酶的活性,在一定程度上保护大鼠肾脏细胞免受氧化损伤影响。此外,LBP还可以抑制iNOS的表达,减少NO的生成,从而改善细胞损伤,尽可能避免氧化应激;同时其还可以提升HO-1的表达,进一步发挥抗氧化作用。

二氢杨梅素对糖耐量异常大鼠肾脏氧化损伤的保护作用

目的研究二氢杨梅素(dihydromyricetin,DMY)对糖耐量异常大鼠肾脏氧化损伤的保护作用。方法以D-半乳糖为诱导剂,采用剂量递增全程腹腔注射法建立糖耐量异常动物模型,用DMY作为受试物,实验8周后,测定各实验组大鼠空腹及餐后2 h血糖、血清胰岛素含量;肾脏超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性、丙二醛(MDA)含量和肾脏细胞DNA拖尾率;尿微量白蛋白(mAlb)和血清尿素氮(BUN)含量。结果与糖耐量异常模型组相比,DMY餐后2 h血糖和胰岛素水平及抗性显著降低(P<0.05);肾脏SOD活性明显增高(P<0.05),但GSH-Px活性增高不明显(P>0.05);MDA含量、尿微量白蛋白(mAlb)水平、肾脏细胞DNA拖尾率均明显降低(P<0.05)。结论DMY可明显改善大鼠糖耐量异常状态,对肾脏早期损伤具有一定保护作用,其作用机制主要与DMY增强大鼠肾脏组织抗氧化能力有关。

牛磺酸对糖尿病大鼠肾脏氧化和抗氧化系统的影响

目的 :探讨牛磺酸对糖尿病大鼠肾脏氧化和抗氧化系统的影响。方法 :链脲佐菌素 (STZ)诱导糖尿病 (DM)大鼠模型 ,牛磺酸给予DM大鼠 4周后 ,检查肾皮质抗氧化指标超氧化物歧化酶 (SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶 (GSH -Px)和脂质过氧化物指标丙二醛 (MDA)水平 ,并检测血糖、尿酸及尿白蛋白排泄量。结果 :给予牛磺酸的DM大鼠与DM大鼠血糖水平无差别 ,DM大鼠血尿酸水平及尿白蛋白排泄量明显高于对照组 (P <0 .0 1 ) ,而给予牛磺酸的DM大鼠血尿酸水平下降 (P <0 .0 1 ) ,与正常对照无差别 ,尿白蛋白排泄量也减少 (P <0 .0 5 ) ,但仍高于正常对照 (P <0 .0 1 )。DM大鼠肾皮质SOD和GSH -Px活性均与对照组无明显差别 ,肾皮质MDA水平则明显高于对照组 (P <0 .0 1 ) ;给予牛磺酸的DM大鼠SOD和GSH -Px活性明显高于未处理的DM大鼠及对照组 (P <0 .0 5 ) ,肾皮质MDA水平则明显低于DM大鼠 (P <0 .0 5 ) ,但仍高于对照组 (P <0 .0 5 )。结论 :牛磺酸能增强DM大鼠肾皮质的抗氧化能力 ,减轻DM大鼠肾皮质氧化应激 (OS) ;降低DM大鼠血尿酸水平 。

黄芪甲苷对肥胖糖尿病大鼠肾脏氧化应激、Nrf2蛋白表达和胰岛β细胞的影响

目的观察黄芪甲苷(AS-IV)对肥胖糖尿病(DM)大鼠肾脏氧化应激、Nrf2蛋白表达和胰岛β细胞的影响。方法 2018年1-6月于武汉大学人民医院动物实验室进行实验。最终纳入健康雄性Wistar大鼠24只,随机数字表法分为对照组(n=8)、DM组(n=8)、AS-Ⅳ组(n=8),DM组给予链脲佐菌素(STZ)60 mg/kg一次性单剂量腹腔注射建立DM模型,AS-Ⅳ组在DM组基础上给予AS-Ⅳ80 mg·kg^(-1)·d^(-1)灌胃给药,8周后处死大鼠,检测各组.血尿相关指标、体质量及肾脏氧化应激指标,并观察胰岛细胞病理改变与胰岛细胞凋亡情况,采用Western免疫印迹检测Nrf 2蛋白。结果 (1)DM组及AS-Ⅳ组空腹血糖(FPG)、24h尿白蛋白排泄率(UAER)及体质量显著高于对照组,空腹胰岛素(FINS)显著低于对照组(F=59. 526、69. 342、19. 272、37. 934,P均=0. 000); AS-Ⅳ组FPG、UAER及体质量显著低于DM组,FINS显著高于DM组(P<0. 01)。(2) DM组及AS-Ⅳ组丙二醛(MDA)含量显著高于对照组,总超氧化物歧化酶(T-SOD)活性显著低于对照组(F=29. 581、53. 546,P <0. 01); AS-Ⅳ组MDA含量显著低于DM组,T-SOD活性显著高于DM组(P <0.01)。(3)与对照组比较,DM组胰岛细胞数目显著减少,且出现肿胀、坏死及空泡变性,呈不规则排列,AS-Ⅳ组胰岛细胞较DM组显著改善;DM组及AS-Ⅳ组大鼠胰岛细胞凋亡率显著高于对照组(t=9.991、5.987,P均=0.000),AS-Ⅳ组大鼠胰岛细胞凋亡率显著低于DM组,差异均有统计学意义(t=6.952,P=0. 000)。(4) Western免疫印迹结果显示,DM组大鼠肾组织总Nrf 2、核Nrf 2蛋白表达显著低于对照组及AS-Ⅳ组(t=2.542、3.881、2.642、2.267,P=0.024、0.002、0.019、0.040),AS-Ⅳ组大鼠肾组织总Nrf 2、核Nrf 2蛋白表达显著高于DM组,差异均有统计学意义(t=2.985、2.928,P=0.010、0.011)。结论 AS-Ⅳ可有效减轻肥胖DM大鼠肾脏氧化应激反应,上调Nrf2蛋白表达,并延缓胰岛β细胞凋亡,其作用机制可能与Nrf2-ARE通路被激活相关。

不同运动方式对T2DM大鼠形成过程中肾脏氧化应激及细胞凋亡表达的影响

目的探讨不同运动方式对2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus, T2DM)大鼠形成过程中肾重指数、血浆及肾组织超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)活性、丙二醛(malondialdehyde, MDA)含量变化及肾组织细胞凋亡水平积分光密度(integral optical density, IOD)值的影响,为预防T2DM不同运动干预方案的构建提供理论支撑。方法随机将50只SD大鼠分成正常对照组、糖尿病造模组、中等强度运动组、高强度间歇运动组。采取高糖高脂膳食结合腹腔注射小剂量链脲佐菌素(streptozotocin, STZ)作为T2DM大鼠模型制备方法。中等强度运动组和高强度间歇运动组在造模过程中采用8周的跑台训练。测量并计算每组大鼠肾重指数;检测血浆及肾组织SOD活性、MDA含量变化;原位末端转移标记酶(terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated dUTP-biotin nick end labeling assay, TUNEL)法检测分析肾组织细胞凋亡水平IOD值。结果与正常对照组和糖尿病造模组相比,中等强度运动组和高强度间歇运动组肾重指数均极显著增加(P<0.01);血浆中,与正常对照组组相比,中等强度运动组SOD活性降低(P<0.01)、MDA含量升高(P<0.01),高强度间歇运动组MDA含量增加(P<0.05)、SOD活性无显著变化(P>0.05);肾组织中,与正常对照组相比,中等强度运动组和高强度间歇运动组SOD活性下降(P<0.05),同时,高强度间歇运动组MDA含量显著低于正常对照组组、糖尿病造模组和中等强度运动组(P<0.05)。TUNEL法检测各组大鼠肾组织细胞凋亡水平IOD值均无统计学差异。结论中等强度运动和高强度间歇运动均可提高T2DM形成过程中大鼠肾重指数,促进肾脏功能性肥大;两种运动形式均可影响T2DM形成过程中大鼠机体氧化应激水平;高强度间歇运动可显著降低T2DM形成过程中大鼠肾脏脂质过氧化反应产物MDA的含量,减轻T2DM形成过程中大鼠肾脏氧化应激水平;正常对照组组、糖尿病造模组、中等强度运动组及高强度间歇运动组其肾组织IOD值均无统计学差异,在糖尿病形成初期,高糖高脂环境及两种运动方式未使肾组织细胞凋亡水平发生明显变化,未来应通过延长干预期来进一步验证。

褪黑素对糖尿病大鼠肾脏抗氧化物酶的影响

与正常大鼠比较,STZ诱发的糖尿病大鼠肾与血清的丙二醛水平升高,以及抗氧化物酶活性降低,在褪黑素治疗后均见明显改善,同时伴随出现尿白蛋白排泄率、血尿酸、血脂谱以及肾重对体重的比值等的降低。

全氟辛烷磺酸钾对小鼠肾脏的氧化性损伤

目的:以小鼠肾脏细胞中的活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)含量和超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)活力为指标,探讨全氟辛烷磺酸钾(PFOS-K)对小鼠肾脏的氧化性损伤作用。方法:以剂量为6mg/kg·bw、12 mg/kg·bw、24 mg/kg·bw 3个浓度的PFOS-K混悬液,每天分别给小鼠经口灌胃一次,连续染毒20天后检测肾脏脏器系数,以及肾脏中ROS、MDA、GSH含量的变化和SOD、GSH-Px、CAT活性的改变。结果:与阴性对照组相比,在6-24 mg/kg·bw剂量范围内,PFOS-K使小鼠体重下降、肾脏重量增加、肾脏脏器系数增大,且表现出一定的剂量-效应关系(r小鼠体重=-0.905,r肾脏湿重=0.938,r脏器系数=0.936)。PFOS-K使小鼠肾脏内活性氧(ROS)及丙二醛(MDA)含量增多(rROS=0.990,rMDA=0.997)、谷胱甘肽(GSH)含量减少(rGSH=-0.994),超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)活力降低(rSOD=-0.917,rGSH-Px=-0.986,rCAT=-0.991)。结论:本试验条件下,PFOS-K致使小鼠肾脏肿大,影响了肾脏的发育;造成了肾脏的氧化性损伤,肾组织内抗氧化酶系统遭到破坏,氧化应激反应增强,具有氧化损伤作用。

牛蒡子苷对糖尿病肾病模型小鼠的改善作用

目的探讨牛蒡子苷对糖尿病肾病(DN)模型小鼠的改善作用。方法予小鼠高脂高糖14 d后,腹腔注射链脲佐菌素溶液(STZ)70 mg/kg,以建立DN小鼠模型。另取10只小鼠为对照组(A组,等体积生理盐水);将模型小鼠分为模型组(B组,等体积生理盐水),卡托普利组(C组,卡托普利25 mg/kg),牛蒡子苷低、中、高剂量组(D1组、D2组、D3组,牛蒡子苷80,160,320 mg/kg),各10只。各组小鼠灌胃相应药物,每日1次,连续56 d。检测小鼠的体质量、平均日饮水量和尿量,评估脏器系数。采用全自动血液细胞分析仪检测小鼠血清肌酐(Cr)和尿素氮(BUN)水平,采用酶联免疫吸附(ELISA)法测定小鼠肾脏匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、总抗氧化能力(T-AOC)、脂质过氧化物(LPO)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平,分别采用苏木精-伊红(HE)染色、Masson染色和六胺银染色于光镜下观察肾脏组织病理变化。结果与A组比较,B组小鼠体质量,SOD,GSH-Px和T-AOC的水平均显著下降,脏器系数,平均日饮水量,平均日尿量,血糖,24 h尿蛋白/Cr,Cr,BUN,MDA和LPO的水平均显著上升(P<0.01);与B组比较,C组、D1组、D2组、D3组小鼠体质量,SOD,GSH-Px和T-AOC的水平均显著上升,脏器系数,平均日饮水量,平均日尿量,血糖,24 h尿蛋白/Cr,BUN,Cr,MDA和LPO的水平均显著降低(P<0.05)。B组小鼠肾小球萎缩,肾纤维化严重;C组、D1组、D2组、D3组小鼠肾小球较饱满,肾纤维化较少。结论牛蒡子苷剂量在80~320 mg/kg范围内对DN有一定改善作用,可为牛蒡子苷治疗DN提供理论和实验基础。

缺氧诱导因子在大鼠肾缺血再灌注损伤中的表达和意义

目的:探讨缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)和氧自由基在肾脏缺血再灌注损伤中的表达情况。方法:SD大鼠随机分为假手术组、缺血组、缺血再灌注组、RNAi阴性对照缺血组及HIF-1αRNAi预处理后的缺血组和预处理后缺血再灌注组,利用RT-PCR和westernblot技术检测各组大鼠肾脏中HIF-1α和bcl-2的表达情况。检测细胞超氧化物歧化酶(SOD)的活性和丙二醛(MDA)的含量,间接反应氧自由基的生成量。测定各组大鼠肾功能。取各组大鼠肾组织切片并做HE染色。结果:缺血组HIF-1α的表达在5组中最高(P<0.05)。与缺血组对比,缺血再灌注后HIF-1α和bcl-2的表达降低,同时氧自由基的生成增加(P<0.05),肾功能明显降低,但经HIF-1αRNAi预处理后上述指标与假手术组相比改变甚微,肾功能得到明显改善。HE染色可见缺血及再灌注组排列紊乱,胞浆萎缩,纹状缘消失,细胞间质增宽,经HIF-1αsiRNA预处理后,接近假手术组水平。结论:HIF-1α的过度表达可能导致氧自由基生成增加,肾功能受损,从而加重缺血再灌注肾脏的损伤,而HIF-1αRNAi可以减轻并改善这一状况,其机制可能与上调凋亡抑制基因有关。

Mg^2＋对减轻环孢素A肾毒性的作用

目的研究口服补镁防治环孢素A(CsA)慢性肾毒性的作用机理。方法给予低盐饮食的雄性Wistar大鼠分为3组：对照组、CsA组(皮下注射CsA，15mg·kg^-1·d^-1)、口服补镁组(0．6％Mg^2+饮食，皮下注射CsA)，处理28d后检测血镁浓度、血肌酐、肾脏一氧化氮合酶(NOS)活性(通过测定NOS催化L-精氨酸转化为L-胍氨酸的量来计算NOS活性)及一氧化氮(NO)含量(硝酸还原酶法)。用免疫组化方法检测肾脏内皮型NOS(eNOS)和诱导型NOS(iNOS)的表达。结果单独使用CsA后大鼠肾脏见明显病理损害(小动脉病变、肾小管上皮萎缩、间质纤维化等)，透射电镜下见线粒体肿胀等损害，与对照组相比肾脏结构型NOS(cNOS)活性明显增强(P<0．05)，同时NO含量显著减少(P<0．05)；口服补镁后，CsA引起的肾脏损害明显减轻，与CsA组相比，肾脏cNOS活性降低(P<0．05)，接近正常水平，同时NO合成增加(P<0．05)。各组间肾脏iNOS活性无显著差异。结论口服补镁可能通过纠正CsA引起的cNOS活性异常增高，调节NO的生成，从而减轻肾脏损害。