中医药治疗脓毒症急性肾损伤早期肾脏炎症反应进展

在简介急性肾损伤(acute kidney injury,SAAKI)的发病机制、SAAKI与肾脏炎症级联反应的基础上,综述中医药对脓毒症AKI肾脏炎症级联反应的治疗进展,包括大黄、黄芪、虎杖、积雪草、益母草、川芎等单味中药及其有效提取物的研究,及清瘟败毒饮、清营汤、血必净注射液等的中药复方制剂研究。

姜黄素抑制内毒素所致肾脏炎症的作用基因表达谱的分析研究

目的:肾脏的急慢性炎症与肾脏疾病的进展密切相关,本研究拟通过基因芯片技术及病理学方法探讨姜黄素对内毒素脂多糖(LPS)所致肾脏炎症的保护作用的机制。方法:SPF级昆明种小鼠9只,鼠龄6～8周,体重20～25 g。小鼠分为3组:(1)正常对照组:腹腔注射生理盐水;(2)模型组(LPS组):腹腔注射LPS(5 mg/kg);(3)治疗组(姜黄素+LPS):动物先腹腔注射姜黄素(5 mg/kg)3 d,然后腹腔注射LPS 5 mg/kg。于处理后6 h取材,切取部分肾组织用10%甲醛固定,HE,PAS染色及免疫组化,进行病理学观察;利用Affymetrix公司生产的mouse 430基因芯片分别检测正常对照组、模型组、姜黄素治疗组肾组织基因表达谱,并利用生物信息学方法对检测结果进行分析。结果:肾组织基因表达谱显示,符合LPS刺激后基因表达水平上升,并经姜黄素治疗后表达水平下降的共有148个Affy IDs(A组),而呈相反趋势的有133个Affy IDs(B组)。在前组的差异基因中,统计筛选得21个Gene Ontology(GO)的功能节点(P≤0.01)。在生物过程角度方面,其中富集量最高的为调节巨噬细胞活化和巨噬细胞活化相关基因。在细胞定位角度方面,有4个GO的功能节点(P≤0.01),在分子结构角度方面,有7个GO的功能节点(P≤0.01)。在B组中,在生物学过程角度方面,有2个GO的功能节点(P≤0.01);在细胞定位角度方面,有1个GO的功能节点(P≤0.01)。研究还发现了姜黄素抑制内毒素所致肾脏炎症作用机制的信号通路及可能的靶位基因。结论:利用基因芯片技术在阐明了炎症状态下肾脏基因的表达谱同时,证实姜黄素治疗可以改变其基因的表达谱,为进一步研究肾脏炎症纤维化的分子发病机制和姜黄素治疗的作用机制创造了条件。

醛固酮与肾脏炎症的研究进展

慢性肾脏病患病率逐年上升,已成为危害公共健康的问题之一。炎症是肾小球肾炎和小管间质疾病重要发病机制之一,炎性细胞积聚是许多肾脏疾病的重要特征。肾脏的急慢性炎症是肾脏疾病活动和进展的重要预兆,因此,研究介导肾脏炎症的机制对预防或治疗肾脏疾病进展至关重要。慢性肾脏病患者血浆中醛固酮的水平升高[1],慢性肾衰竭大鼠肾局部RAAS节律也发生改变[2]。

骨髓间充质干细胞经肾动脉移植对阿霉素慢性肾病大鼠肾脏炎症的影响

目的分析经肾动脉移植骨髓间充质干细胞(BMSC)对慢性肾病(CKD)大鼠肾脏炎症的影响。方法取37只雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠,其中2只4周龄用作体外分离BMSC,8只为正常对照组(N组),27只制作CKD模型。建模中3只死亡,24只建模成功后,随机分为CKD组(n=8)、经肾动脉移植BMSC组(A组,n=8)和经尾静脉移植BMSC组(V组,n=8)。BMSC移植后7、14 d,检测各组大鼠肾功能指标,制作肾脏病理切片,苏木精-伊红(HE)染色观察肾脏病理形态学变化,免疫组化染色分析肾组织炎性细胞表达。结果CKD组、A组、V组与N组相比,BMSC移植后血肌酐、血尿素氮和24 h尿蛋白均显著升高(P<0.01)。移植后7、14 d,V组、A组血肌酐均较CKD组降低(P<0.01),A组在7 d时下降更为显著(P<0.01);移植后7 d,V组、A组血尿素氮较CKD组均显著下降(P<0.01),A组变化更为显著(P<0.01),移植后14 d,V组、A组较CKD组稍降低,A组变化更为显著(P<0.01);移植后7、14 d,V组、A组24 h尿蛋白较CKD组均显著降低(P<0.01),A组下降更为显著(P<0.01)。HE染色病理结果显示A组、V组炎性浸润均较CKD组减轻,A组仅有少量肾间质炎性细胞浸润,萎缩肾小球数目减少,肾小管扩张情况有不同程度改善。免疫组化结果显示CKD组大鼠CD3、CD20呈强阳性或阳性表达,A组、V组大鼠肾间质CD3、CD20表达较CKD组减轻,但A组较V组减轻更为明显。结论BMSC通过抑制免疫介导性炎症修复受损肾脏组织。经肾动脉移植效果优于经尾静脉移植。

亚麻木酚素通过抑制TXNIP和激活NLRP3炎症小体减轻慢性间歇性低氧小鼠肾脏炎症损伤

目的:探讨亚麻木酚素/开环异落叶松脂素二葡萄糖苷(SDG)对慢性间歇性低氧(CIH)小鼠肾脏炎症损伤的改善作用及潜在机制。方法:将SPF及雄性C57BL/6N小鼠分为正常组、CIH组和SDG治疗组。记录小鼠体重变化;HE染色观察肾脏组织形态;生化检测血清肌酐和血尿素氮的含量;羟胺法和硫代巴比妥酸比色法测定肾脏组织超氧化物歧化酶(SOD)的活性和丙二醛(MDA)的含量;免疫组织化学检测硫氧还蛋白结合蛋白(TXNIP)和核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)的蛋白表达情况;ELISA法测定肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)和IL-1β等促炎因子的含量;Western blot检测TXNIP、NLRP3炎症小体相关蛋白[NLRP3、含CARD的凋亡相关斑点样蛋白(ASC)和caspase-1]、IL-1β和IL-18的蛋白表达情况。结果:3组小鼠的体重和肾脏指数无显著差异(P>0.05)。HE染色显示,CIH组肾小球形态不规则,肾小管上皮细胞肿胀,胞浆模糊,出现轻微的水泡变性,经SDG治疗后有所改善。与正常组相比,CIH组小鼠血清肌酐及炎症因子TNF-α、IL-6和IL-1β的含量显著升高(P<0.05),免疫组织化学染色显示,CIH组肾小管上皮细胞胞浆内NLRP3和TXNIP的表达显著升高(P<0.05),SDG治疗后均显著下降(P<0.05)。与正常组相比,CIH组肾脏组织的SOD活性降低,MDA含量增多(P<0.05),TXNIP、NLRP3、ASC、caspase-1、IL-1β和IL-18的蛋白水平上调,且经过SDG治疗后均显著下降(P<0.05)。结论:亚麻木酚素可减轻CIH小鼠的肾脏炎症损伤,其机制可能与抑制氧化应激和NLRP3炎症小体的激活有关。

龙胆苦苷基于尿酸转运蛋白和NLRP3炎性小体信号通路改善小鼠高尿酸血症和肾脏炎症

目的探讨龙胆苦苷对高尿酸血症(HUA)小鼠的治疗作用及其潜在机制。方法对昆明小鼠腹腔注射氧嗪酸钾构建HUA模型,并给予不同剂量的龙胆苦苷进行干预。通过酶联免疫吸附检测小鼠尿酸、肌酐和黄嘌呤氧化酶的含量。利用实时荧光定量PCR和蛋白免疫印迹检测尿酸转运相关蛋白尿酸盐阴离子转运体1(URAT1)、葡萄糖转运蛋白9(GLUT9)、有机阴离子转运蛋白1(OAT1)和有机阴离子转运蛋白3(OAT3)。分析小鼠肾中白介素-1β(IL-1β)和白介素-18(IL-18)的含量,并检测NLRP3炎性小体信号通路的表达。结果与对照组相比,氧嗪酸钾构建的HUA模型尿酸、肌酐和黄嘌呤氧化酶的含量显著上调(P<0.01),尿酸转运相关蛋白GLUT9和URAT1的表达显著上升(P<0.01),OAT1和OAT3的表达明显下降(P<0.01),NLRP3炎性小体信号通路相关蛋白NLRP3、ASC和Caspase-1及通路相关炎症因子IL-1β和IL-18表达明显增加(P<0.01)。与模型组相比,动物给药龙胆苦苷干预后,尿酸、肌酐和黄嘌呤氧化酶含量显著下降(P<0.05,P<0.01),尿酸转运相关蛋白GLUT9和URAT1的表达显著下调(P<0.01),OAT1和OAT3的表达明显上升(P<0.01),NLRP3炎性小体信号通路相关蛋白NLRP3、ASC和Caspase-1及通路分泌的相关炎症因子IL-1β和IL-18表达明显降低(P<0.01)。结论龙胆苦苷可通过调控尿酸转运相关蛋白表达和抑制NLRP3炎性小体信号通路的激活,降低小鼠体内尿酸水平和缓解肾脏炎症反应,从而发挥对HUA小鼠的治疗作用。

经肾动脉移植不同剂量骨髓间充质干细胞对阿霉素肾病大鼠肾脏炎症的影响

目的观察经肾动脉移植骨髓间充质干细胞(BMSCs)对阿霉素慢性肾脏病(CKD)大鼠的治疗效果,评估不同移植剂量对肾脏炎症的影响。方法雄性SD大鼠62只,2只4周龄大鼠用于体外分离培养BMSCs;48只6周龄大鼠造模(小剂量多次尾静脉注射阿霉素),成功后随机分组:模型组(M组)、低、中、高剂量组(A、B、C组),每组12只;A、B、C组经肾动脉移植BMSCs 0.5 mL,浓度分别为1×10^(6)个/mL、2×10^(6)个/mL、3×10^(6)个/mL;M组经肾动脉输注等量PBS,正常对照组(N组,12只),尾静脉输注等量0.9%NaCl。移植BMSCs后第7、14天检测血肌酐、尿素氮、24 h尿蛋白水平;制作肾脏病理切片行HE染色观察肾脏病理形态学改变,行免疫组化染色观察肾组织中炎症因子表达情况。结果与N组相比,M组、A组、B组、C组血肌酐、尿素氮、24 h尿蛋白均显著升高(P<0.05)。BMSCs移植7、14 d后,A组、B组、C组与M组比较血肌酐、尿素氮、24 h尿蛋白降低(P<0.05),且B、C组低于A组,但两组之间差异无统计学意义(P>0.05)。HE染色结果示:A组、B组、C组较M组萎缩肾小球数量减少,肾小管扩张情况得到改善,其中B、C组病理学形态较A组轻微;免疫组化结果示:A组、B组、C组大鼠肾间质CD3、CD20表达较M组表达减轻,其中B、C组减轻程度优于A组。结论经肾动脉移植BMSCs可抑制或延缓CKD大鼠肾脏炎症进展,且一定范围内,较大剂量效果优于小剂量。

硫酸软骨素二糖对疲劳致小鼠肾脏炎症的改善作用

目的:研究硫酸软骨素二糖对疲劳诱发的肾脏炎症的改善作用。方法:24只Balb/c小鼠随机分成四组:正常组(N组)、疲劳应激组(M组)、正常小鼠干预硫酸软骨素二糖组(150 mg/kg·bw)(CS组)和疲劳应激小鼠干预硫酸软骨素二糖的(150 mg/kg·bw)组(S组)。将M组和S组小鼠置于电动轮跑步机上,速度为20r/min,跑步时间为3 h,持续运动2 d后休息5 d。实验周期为16 d,共运动6 d。随后测定各组小鼠肾脏中超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量以及转化生长因子(TGF-β1)、核转录因子(NF-κB)、白介-6(IL-6)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)的m RNA表达量和NF-κB、IL-6、MCP-1的蛋白质表达量。结果:与N组相比,M组小鼠肾脏中SOD活性降低,MDA含量、TGF-β1的m RNA表达量以及NF-κB、IL-6、MCP-1的m RNA和蛋白质的表达量均极显著升高(p<0.01)。与N组相比,CS组小鼠肾脏SOD活性极显著提高(p<0.01)。与M组相比,S组小鼠肾脏SOD活性显著升高(p<0.05),MDA含量、IL-6以及MCP-1的m RNA表达量均极显著降低(p<0.01),IL-6以及MCP-1的蛋白质表达量均显著降低(p<0.05)。结论:硫酸软骨素二糖对疲劳引发的小鼠肾脏炎症具有显著的改善作用,且其机理可能与其改善肾脏氧化应激状态有关。

肾素(原)受体在肾脏炎症中的作用研究进展

肾素(原)受体(PRR)是肾素与肾素原的一种单跨膜受体。许多器官有自己的局部或组织肾素-血管紧张素系统(RAS),PRR可在RAS中发挥特异性的局部效应。肾素和肾素原可通过与PRR结合分别激活血管紧张素依赖通路和血管紧张素独立通路,从而导致一系列生理病理效应。PRR上调可促进高血压的发生以及糖尿病、肾小球损伤、肾脏疾病和炎症的进展。可溶性PRR(sPRR)是由蛋白酶切割全长PRR而产生,sPRR在各种生理病理过程中均具有关键的生物学功能,并可能成为疾病诊断的新型生物标志物,因此未来应进一步深入研究sPRR以确定其诊断价值。

达格列净联合复方α-酮酸口服治疗慢性肾脏病临床观察

目的 观察达格列净联合复方α-酮酸治疗慢性肾脏病(CKD)患者的临床效果。方法 选取CKD患者142例,按随机数字表法分为观察组及对照组。观察组给予达格列净口服,每次10 mg,每天1次;复方α-酮酸随餐口服,每次5片(0.63 g/片),每天3次。对照组给予复方α-酮酸随餐口服,剂量、用法同观察组。两组均连续治疗3个月后评估治疗效果。比较两组治疗前、治疗3个月的肾功能[血肌酐(Cr)、肾小球滤过率(GFR)、尿素氮(BUN)、白蛋白(Alb),24 h尿蛋白定量(24 h Up)]、肾脏微循环[血清内皮素-1(ET-1)、血管性血友病因子(vWF)]、肾脏炎症[血清白介素-6(IL-6)、白介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)]、肾间质纤维化[血清同型半胱氨酸(Hcy)、血管内皮生长因子(VEGF)、肝细胞生长因子(HGF)]指标及不良反应。结果 观察组治疗总有效率高于对照组(P<0.05)。治疗3个月后,与对照组比较,观察组血Cr、BUN、24 h Up水平低,GFR、Alb水平高(P均<0.05);血清ET-1、vWF水平低(P均<0.05);血清IL-6、IL-1β、TNF-α、hs-CRP水平低(P均<0.05);血清Hcy、VEGF水平低,HGF水平高(P均<0.05)。两组不良反应发生率比较,P>0.05。结论 达格列净联合复方α-酮酸口服治疗CKD效果显著,患者肾功能、微循环均得到改善,肾脏炎症和纤维化程度减轻。

肾小球纤维蛋白沉积对肾脏炎症反应的影响及机制研究

目的探讨调控纤维蛋白沉积水平对肾脏炎症反应的影响及其机制。方法实验分脂多糖诱导大鼠肾小球纤维蛋白沉积(LPS组);氨甲环酸增加纤维蛋白沉积(TL组);尿激酶减少纤维蛋白沉积(UT组)。肾组织单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)及血管内皮钙黏附蛋白(VE-Cad)mRNA和蛋白质表达分别用RT-PCR和免疫组织化学检测。结果(1)TL组与LPS,UT组纤维蛋白沉积、炎细胞数目差异有统计学意义(P<0.05);(2)TL组与LPS,UT组的MCP-1、VE-CadmRNA及蛋白质表达水平差异亦有统计学意义(P<0.05)。结论肾小球纤维蛋白沉积具有促炎症作用;纤维蛋白沉积的促炎症作用与其调节MCP-1、VE-Cad表达有关。

间歇有氧运动激活心梗大鼠肾脏miR-21/TLR4/NF-κB通路抑制肾脏炎症反应

目的:探讨间歇有氧运动激活心梗(MI)大鼠肾脏miR-21及下游通路TLR4/NF-κB,抑制肾脏炎症反应的作用。方法:3月龄雄性SD大鼠40只,随机选取12只为假手术组(Sham),Sham组大鼠实施假手术;28只大鼠结扎心脏左冠状动脉前降支(LAD),构建MI模型,术后存活24只,随机分为心肌梗死组(MI)和心梗+间歇有氧运动组(ME),每组12只。ME组术后1周进行跑台适应性训练:15 m/min,30min/d,共5 d。正式训练以10 m/min速度运动10 min,之后以25 m/min×7 min和15 m/min×3 min依次交替进行,最后以10 m/min速度运动1 min,运动总时间为60 min。以上训练方案每周5 d,训练至8周结束。训练结束后次日腹腔麻醉,血流动力学测定各组大鼠心功能,ELISA法测定尿液NAG和KIM-1和肾脏IL-6和IL-10表达,RT-q PCR检测肾脏miR-21表达,Western blot检测肾脏TLR4和磷酸化NF-κBp65蛋白表达。结果:MI大鼠肾脏功能受损,肾脏炎症因子IL-6增多,抗炎因子IL-10减少,尿液NAG和KIM-1水平升高;间歇运动可显著改善MI大鼠肾脏功能,降低肾脏IL-6水平,增加IL-10水平,降低尿液NAG和KIM-1水平,上调肾脏miR-21的表达水平,抑制TLR4和NF-κB磷酸化水平。结论:间歇运动可显著增加MI大鼠肾脏局部miR-21表达,抑制其下游TLR4/NF-κB信号通路,抑制肾脏炎症反应,改善肾功能。

肥胖与慢性肾脏疾病：脂肪组织与肾脏炎症及纤维化的关系

肥胖症（obesity）指体内脂肪堆积过多和（或）分布异常、体重增加，是遗传因素、环境因素等多种因素相互作用所引起的慢性代谢性疾病。当今，肥胖在全球的流行是缩短人类预期寿命、危及健康的主要因素。

EPHX2 rs751141变异位点对肾脏微炎症的影响及其分子机制研究

目的研究EPHX2 rs751141基因多态性(G860A,R287Q)对可溶性环氧化物水解酶(soluble epoxide hydrolase,sEH)活性的影响及其参与肾脏微炎症的分子机制。方法以人的肾小管上皮细胞(HK2)cDNA为模板,利用p-UCT DNA连接试剂盒、点突变技术及亚克隆技术,分别构建包含EPHX2基因rs751141位点等位基因G和A的重组质粒pcDNA3.1/V5-His-G(野生型:WT)和pcDNA3.1/V5-His-A(突变型:R287Q)。以Lipofectamine 2000转染试剂分别将上述重组质粒转染至HK2细胞,给予足量的11,12-环氧二十碳三烯酸(11,12-epoxyeicosatrienoic acid,11,12-EET);共培养后,利用ELISA试剂盒检测11,12-二羟基二十碳三烯酸(11,12-dihydroxyeicosatrienoic acid,11,12-DHET),采用t检验分析R287Q突变对sEH水解酶活性的影响;利用流式细胞术检测细胞上清中炎症因子浓度白细胞介素-17A(interleukin-17A,IL-17A)和IL-1的浓度;RT-PCR检测IL-17A和IL-1β等mRNA表达水平;Western blotting方法检测PI3K/AKT信号通路相关蛋白表达。结果与WT组相比,R287Q突变型重组质粒组水解活性明显降低(P<0.01),细胞上清中IL-17A浓度以及IL-1等炎症因子浓度显著下降(P<0.05)。与单纯WT组相比,WT+EET组的炎症因子浓度显著降低,但仍明显高于R287Q+EET组(P<0.05)。RT-PCR结果显示R287Q突变组中IL-17A和IL-1β等的mRNA表达明显低于WT组;与单纯WT组相比,WT+EET组IL-17A以及IL-1β等炎症因子mRNA表达降低,但仍明显高于R287Q+EET组(P<0.05)。Western blotting结果表明R287Q组可能通过调控PI3K/AKT信号通路减轻肾小管上皮细胞炎症水平。结论R287Q突变型重组质粒对11,12-EET的水解能力降低,炎症水平显著下降;外源性11,12-EET可降低WT组炎症水平。EPHX2 rs751141位点等位基因A的肾脏保护作用可能通过调控PI3K/AKT信号通路参与减缓炎症的分子机制。

淋巴毒素β受体在肾脏炎症中研究进展

在人慢性肾脏疾病中可以发现肾小管间质中有淋巴细胞浸润,对人肾脏活检组织中的淋巴毒素(LT)、淋巴毒素-β受体(LT-βR)的表达情况,以及抑制LT-βR信号在肾脏炎症模型中的保护作用进行综述。LT-βR的活化可以发挥明显的促炎作用,并且抑制LT-βR信号通路,可以改善肾功能和减轻肾脏病理改变。因此,抑制LT-βR信号通路将成为治疗肾脏疾病的新靶点。

金黄霉素A对脂多糖诱导小鼠急性肾脏炎症的作用及其可能机制

目的研究金黄霉素A(chrysomycin A,Chr-A)对脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)诱导小鼠急性肾脏炎症反应的作用及机制。方法BALB/c小鼠随机分为正常对照组、LPS模型组、Chr-A 3 mg·kg^(-1)和10 mg·kg^(-1)给药组。Chr-A连续给药7 d后,LPS模型组和各Chr-A给药组腹腔注射5 mg·kg^(-1)的LPS,6 h后取血清和肾脏组织进行检测。检测血清尿素氮(BUN)评价肾功能;ELISA法检测肾组织中白细胞介素1β(Interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素6(Interleukin-6,IL-6)、单核细胞趋化蛋白1(monocyte chemoattractant protein,MCP-1)以及肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factorα,TNF-α)水平;Western blot检测炎症相关蛋白环氧合酶2(cyclooxygenase 2,COX2)、NLRP3炎性小体及嘌呤能离子通道型受体7(P2X7)的表达。结果Chr-A剂量依赖性降低LPS刺激引起的血清BUN水平升高;此外,Chr-A剂量依赖性降低LPS刺激引起的肾脏组织中IL-β,IL-6,TNF-α,MCP-1及COX2炎症因子的升高;进一步研究发现,Chr-A显著下调炎症通路相关蛋白P2X7和NLRP3的表达。结论Chr-A具有抗LPS诱导的小鼠急性肾脏炎症反应作用,机制可能与下调炎症蛋白P2X7和NLRP3相关。

基于NF-κB通路研究清眩降压汤对自发性高血压大鼠的肾脏保护作用

目的研究清眩降压汤(QXJYD)通过调控NF-κB通路对自发性高血压大鼠(SHR)的肾脏保护作用。方法将20只自发性高血压大鼠(SHR)随机分为SHR组和QXJYD组,另取10只Wistar大鼠作为WKY组。QXJYD组给予QXJYD灌胃,SHR组和WKY组给予等体积生理盐水灌胃,连续干预8周。8周后,腹主动脉取血,ELISA法检测血清中IL-6、IL-1β、TNF-α的表达,Western bolt法检测肾脏组织NF-κB(p65)和p-NF-κB(p-p65)的蛋白表达。采用血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导建立NRK52E细胞损伤模型,分别给予50、100μg/mL的QXJYD干预12 h,Western bolt法检测NRK52E细胞中NF-κB(p65)和p-NF-κB(p-p65)的蛋白表达。结果QXJYD可降低SHR大鼠炎症因子的分泌和p65的磷酸化水平,还可降低NRK52E细胞模型中p65的磷酸化水平。结论QXJYD可减少SHR炎症因子的分泌,并具有一定的肾脏保护作用,其可能机制是通过抑制NF-κB的磷酸化。

黄色肉芽肿性肾盂肾炎8例临床分析

黄色肉芽肿性肾盂肾炎是一种罕见的、严重的慢性肾脏炎症，可产生弥漫性肾实质破坏，临床少见且表现与肾癌、肾结核及肾结石伴肾积水等疾病相似，易引起误诊。本文就所诊治的病例结合文献复习，以进一步提高对本病的认识，