当归红芪超滤膜提取物调控肾脏缺氧介导的HIF⁃1α信号通路改善DKD大鼠肾脏纤维化的机制

通过当归红芪超滤膜提取物干预糖尿病肾病(diabetic kidneydisease,DKD)模型大鼠,观察DKD大鼠肾脏缺氧介导的缺氧诱导因子⁃1α(hypoxia inducible factor⁃1α,HIF⁃1α)/血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和HIF⁃1α/血小板源性生长因子(platelet⁃derived growth factor,PDGF)/血小板源性生长因子受体(platelet derived growth factor receptor,PDGFR)信号通路的表达,探讨当归红芪超滤膜提取物改善DKD大鼠肾脏纤维化的作用机制。将50只SPF级雄性Wistar大鼠适应性喂养1周后,随机分为空白组7只及造模组,造模组禁食24 h后一次性腹腔注射链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)联合高糖高脂饲料喂养制备DKD模型,造模成功后,将造模组随机分为模型组,当归红芪超滤膜提取物低、中剂量组,各7只,厄贝沙坦组和当归红芪超滤膜提取物高剂量组各8只。给予药物干预12周,观察大鼠一般情况,每周检测大鼠的体质量及血糖,于灌胃第6、12周检测大鼠24 h尿蛋白(urinary protein,UP);末次给药后,检测大鼠肾功能相关指标;Masson染色观察肾组织病理变化;免疫组化法(immunohistochemistry,IHC)检测肾组织脯胺酰羟化酶2(prolyl hydroxylase domain 2,PHD2)、HIF⁃1α蛋白表达;实时荧光定量聚合酶链式反应(real⁃time qPCR)检测肾组织PHD2、VEGF、PDGF、PDGFR mRNA表达;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测肾组织HIF⁃1α、VEGF、PDGF、PDGFR蛋白的表达。结果显示,与模型组比较,各给药组大鼠血清中糖化血清蛋白(glycosylated serum protein,GSP)、血肌酐(serum creatinine,Scr)、尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)水平不同程度降低(P<0.05或P<0.01),呈剂量相关性;大鼠肾脏病理明显改善;大鼠肾脏中PHD2 mRNA表达显著上调(P<0.05或P<0.01),VEGF、PDGF、PDGFR mRNA表达显著下调(P<0.05或P<0.01);大鼠肾脏中HIF⁃1α、VEGF、PDGF、PDGFR蛋白表达水平显著降低(P<0.01);PHD2阳性细胞率表达上升(P<0.01)。综上,当归红芪超滤膜提取物能改善DKD大鼠肾脏纤维化,其机制与抑制肾脏缺氧介导的HIF⁃1α信号通路上关键蛋白的表达并减少细胞外基质(extracellular matrix,ECM)沉积有关。

肾脏缺氧分数评价慢性肾脏疾病的应用价值

目的探究在慢性肾脏疾病（CKD）患者的血氧水平依赖磁共振成像（BOLD-MRI）图像分析中运用肾脏缺氧分数方法的应用价值。方法对13名健康志愿者及32例CKD患者（CKD 1、2期及3-5期各16例,分为两组）行BOLD-MRI扫描。两名研究者各自独立运用传统ROI法及肾脏缺氧分数方法,进行图像分析及数据测算,并对两种方法进行对比分析。结果传统ROI法：正常对照组与CKD轻、中重度组MR2＊值及CKD轻、中重度组CR2＊值差异有统计学意义（P〈0.05）,而CKD轻度组与正常对照组间CR2＊值差异无显著性统计学意义（P=0.348）。CKD程度的加重伴随MR2＊值的升高。肾脏缺氧分数：各组间差异均有显著性统计学意义（P〈0.05）,且肾脏缺氧分数随CKD程度的加重而升高。绘制ROC曲线分析,肾脏缺氧分数曲线下面积大于MR2＊值方法,显示肾脏缺氧分数方法拥有更高的敏感性和特异性。运用信度分析可重复性显示肾脏缺氧分数方法有明显优势。结论肾脏缺氧分数方法在BOLD图像分析中更有优势,更适用于评估CKD患者的肾脏组织内缺氧水平。

肾脏缺氧分数联合血清VEGF对肾脏组织内缺氧的临床意义

目的探讨肾脏缺氧分数联合血清血管内皮生长因子(VEGF)对肾脏组织内缺氧的临床意义。方法选取该院2017年1月至2018年1月收治的慢性肾脏疾病患者56例,按照《KDIGO慢性肾脏病评价及管理临床实践指南》分为轻度组(Ⅰ~Ⅱ期,27例)、中重度组(Ⅲ~Ⅳ期,29例),选择同期到该院体检为健康者26例作为对照组;所有入选者采用核磁共振成像检查,检测血清VEGF水平变化,采用感兴趣区域(ROI)法与肾脏缺氧分数方法计算图像数据,同时比较ROI法与肾脏缺氧分数联合血清VEGF的效能。结果对照组、轻度组及中重度组患者髓质R2*值显著高于皮质R2*(P<0.05);对照组与轻度组皮质R2*值差异无统计学意义(P>0.05);对照组与中重度组、轻度组与中重度组比较差异有统计学意义(P<0.05);与对照组比较,轻度组、中重度组髓质R2*不断升高,各组间差异具有统计学意义(P<0.05);与对照组比较,轻度组、中重度组肾脏缺氧分数、血清VEGF明显升高(P<0.05);与轻度组比较,中重度组肾脏缺氧分数、血清VEGF明显升高(P<0.05);经受试者工作特征(ROC)曲线分析,肾脏缺氧分数联合血清VEGF的AUC为0.961,其灵敏度与特异度均高于髓质R2*;采用Alpha信度系数法,肾脏缺氧分数联合血清VEGF的灵敏度(0.959)大于髓质R2*(0.857)。结论肾脏缺氧分数联合血清VEGF对肾脏组织内缺氧检测的灵敏度更高,可重复性更高,可有效评估肾脏的氧化情况。