兔骨膜成骨细胞与肾血管内皮细胞间接共培养的体外实验研究

目的 探讨兔骨膜成骨细胞 (RPOB)和肾血管内皮细胞 (RRVEC)不同比例下间接共培养对成骨细胞增殖及功能的影响 ,优选细胞间接共培养的适宜比例。方法 取 RPOB和 RRVEC,采用细胞嵌盒培养系统 ,对照组、试验 1、2、3组分别以 RPOB和 RRVEC按 1∶ 0、2∶ 1、1∶ 1和 1∶ 2间接共培养 4天。通过细胞计数、碱性磷酸酶 (AL P)活性测定及 3H-脯氨酸掺入试验观察 RPOB和 RRVCE增殖分化能力及功能状态。结果 试验 1组 RPOB较对照组、试验2、3组增殖活跃 (P<0 .0 5 ) ,且 3H-脯氨酸掺入较高 (P<0 .0 5 ) ;试验 1组 AL P活性较对照组和试验 3组高 (P<0 .0 5 ) ,但与试验 2组无显著差异 (P>0 .0 5 )。结论 RPOB和 RRVEC以 2∶ 1进行间接共培养时 RPOB增殖能力强、功能活跃 。

血府逐瘀汤对大鼠肾小球微血管内皮细胞炎性因子MCP-1表达的影响

目的:观察血府逐淤汤和糖基化终末产物(advanced glycation end products,AGEs)对大鼠肾小球微血管内皮细胞(glomerula endothelial cells,GECs)单核细胞趋化因子(monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1)表达的影响,探讨其相关作用机制。方法:对大鼠GECs进行分离培养与鉴定;制备血府逐瘀汤含药血清;采用Western Blot法检测大鼠GECs炎性因子MCP-1蛋白的表达;采用免疫荧光法检测NF-κB活化。结果:与正常对照组比较,施加AGEs刺激因素后MCP-1表达量明显增高,呈剂量(100 mg/L,200 mg/L,400 mg/L)依赖效应;15%血府逐瘀汤含药血清可以抑制AGEs(200 mg/L)的作用,MCP-1的表达量下降;200 mg/L AGEs作用下,大鼠GECs的MCP-1表达量明显增加,成时间依赖效应,同时促进NF-κB活化。结论:AGEs通过促进NF-κB活化,使大鼠GECs的MCP-1蛋白表达量增加,血府逐瘀汤可抑制其作用。

血管紧张素Ⅱ对大鼠肾小球内皮细胞单核细胞趋化蛋白1表达的影响

目的观察血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)对大鼠肾小球内皮细胞(GEC)单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)表达的影响,探讨其相关作用机制。方法对大鼠GEC进行分离培养与鉴定;采用Western blot法检测大鼠GEC炎性因子MCP-1蛋白的表达;RT-PCR和Western blot法检测血管紧张素Ⅱ1型受体(AT1R)的mRNA和蛋白水平。结果与正常对照组比较,施加AngⅡ刺激因素后MCP-1表达量明显增高,呈剂量(10-7mol/L^10-5mol/L)依赖效应;10-5mol/L AngⅡ作用下,大鼠GEC的AT1R mRNA和蛋白水平明显增加,成时间依赖效应;10-6mol/L AT1R拮抗剂替米沙坦(TEL)可以抑制AngⅡ(10-5mol/L)的作用,MCP-1的表达量下降。结论 AngⅡ通过上调大鼠GEC的AT1R水平,使大鼠GEC的MCP-1表达量增加。

胰高血糖素样肽-1对高糖条件下肾小球血管内皮细胞损伤的调节作用及机制研究

目的研究胰高血糖素样肽-1(GLP-1)对高糖条件下肾小球血管内皮细胞损伤的调节作用及机制。方法培养人源肾小球微血管内皮细胞(HRGEC)并分为对照组、高糖组和GLP-1组,对照组用含有5.5 mol/L葡萄糖的DMEM处理、高糖组用含有30 mmol/L葡萄糖的DMEM处理、GLP-1组用含有30 mmol/L葡萄糖及30 nmol/L GLP-1的DMEM处理。检测细胞凋亡率、凋亡基因及SIRT1信号通路分子表达、氧化应激指标含量。结果高糖组的细胞凋亡率及细胞中FasL、Fas、Bax、Caspase-3、NOX4的mRNA表达水平及培养基中MDA的含量明显高于对照组(P<0.05),细胞中Bcl-2、SIRT1、eNOS的mRNA表达水平及培养基中SOD、GSH、NO的含量明显低于对照组(P<0.05);GLP-1组的细胞凋亡率及细胞中FasL、Fas、Bax、Caspase-3、NOX4的mRNA表达水平及培养基中MDA的含量明显低于高糖组(P<0.05),细胞中Bcl-2、SIRT1、eNOS的mRNA表达水平及培养基中SOD、GSH、NO的含量明显高于高糖组(P<0.05)。结论GLP-1能够减轻高糖条件下HRGEC的凋亡及氧化应激,其作用机制与SIRT1信号通路的增强有关。

血府逐瘀汤对大鼠肾小球内皮细胞增殖和凋亡作用研究

目的观察血府逐瘀汤和糖基化终末产物(advanced glycation end products,AGEs)对大鼠肾小球微血管内皮细胞(glomerula endothelial cells,GECs)增殖和凋亡的影响,探讨其相关作用机制。方法对大鼠GECs进行分离培养与鉴定;制备糖基化白蛋白(AGE-BSA)和血府逐瘀汤含药血清;通过MTT法及AV/PI法检测不同浓度AGE对大鼠肾小球内皮细胞增殖、凋亡的影响,同时研究应用血府逐瘀汤含药血清对AGE-BSA上述作用的影响。结果与正常对照组比较,AGEs组RGECs的增殖率降低,细胞凋亡率升高,其作用呈浓度依赖趋势;AGEs可以抑制大鼠肾小球内皮细胞管腔形成;血府逐瘀汤组RGECs的凋亡率较AGEs组下降,可促进内皮细胞的管腔形成。结论 AGEs促进大鼠肾小球内皮细胞的凋亡,抑制内皮细胞的增殖和管腔形成,血府逐瘀汤可抑制AGEs的相关作用。

血府逐瘀汤抑制大鼠肾小球内皮细胞炎症反应相关机制的研究

目的：探讨血府逐瘀汤和血管紧张素（angiotension Ⅱ，AngⅡ）对大鼠肾小球内皮细胞（glomerula endothelial cells，GECs）单核细胞趋化因子（monocyte chemoattractant protein -1，MCP -1）表达的影响及其相关作用机制。方法：对大鼠GECs 进行分离培养与鉴定；制备血府逐瘀汤含药血清；采用 Western Blot 法检测大鼠 GECs 炎性因子 MCP -1和 NADPH 氧化酶 p47phox 蛋白的表达。结果：与正常对照组比较，施加 AngⅡ刺激因素后 MCP -1表达量明显增高，呈剂量（10^-7-10^-5 mol/ L）依赖效应；15%血府逐瘀汤含药血清可以抑制 AngⅡ（10^-5 mol/ L，12 h）的作用，MCP -1的表达量下降；同时10^-5 mol/ L AngⅡ作用下 NADPH 氧化酶 p47phox 蛋白的表达也增加，呈时间（6-24 h）依赖效应；15%血府逐瘀汤含药血清抑制 p47phox蛋白的表达。结论：AngⅡ通过活化 NADPH 氧化酶通路，促进大鼠 GECs 炎症因子 MCP -1的表达；血府逐瘀汤可抑制其作用。

中介素对大鼠单侧输尿管梗阻模型肾小球血管内皮间充质转分化的影响

目的观察中介素(IMD)对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠模型肾小球血管内皮细胞间充质转分化的影响。方法雄性Wistar大鼠72只,分为假手术组24只、UUO 24只和IMD组24只。各组大鼠分别于术后7、14、21和28 d随机选取6只,留取梗阻侧肾组织;免疫组织化学法检测血小板内皮细胞黏附分子CD31、氨肽酶P(JG-l2)、血管内皮生长因子(VEGF)、VEGF受体-2(VEGFR2)、血管内皮钙黏蛋白(VE-cadherin)、α-平滑肌肌动蛋白(SMA)、转化生长因子(TGF)-β_2、骨形态发生蛋白质(BMP)-7表达;实时荧光定量聚合酶链反应(RTPCR)法检测上述相关因子m RNA表达并进行半定量分析。结果与假手术组相比不同时间点各组大鼠TGF-β_2、α-SMA相对表达量及蛋白含量增多(P<0.05),CD31、JG-12、BMP-7、VE-cadherin及VEGF、VEGFR2减少(P<0.05);与UUO组相比,IMD组TGF-β_2、α-SMA m RNA相对表达量及蛋白含量减少(P<0.05),CD31、JG-12、BMP-7、VE-cadherin及VEGF、VEGFR2增多(P<0.05)。结论 IMD在肾脏纤维化进程中可保护肾功能,减轻肾小球纤维化,与抑制肾小球血管内皮细胞间充质转分化有关。

反义寡核苷酸抑制缺氧/再给氧时内皮细胞细胞间粘附分子-1的表达

目的 :探讨反义寡核苷酸 (AS -ODN)对缺氧 /再给氧 (H/R)时内皮细胞细胞间粘附分子 - 1(ICAM- 1)表达的影响。方法 :流式细胞仪测定肾小球血管内皮细胞在缺氧、再给氧及加入AS -ODN后ICAM - 1表达的阳性百分率。结果 :缺氧 10h ,肾小球血管内皮细胞ICAM - 1的表达与对照组无显著性差异 ,再给氧 6hICAM- 1的表达明显高于正常 ,加入AS -ODN后 ,ICAM - 1阳性细胞的百分率下降 40 6 %。结论 :AS -ODN可以降低H/R时内皮细胞ICAM -

厚朴酚通过调节SDF-1/CXCR4信号通路减轻LPS诱导的肾小球血管内皮细胞损伤

目的:研究厚朴酚对脂多糖(LPS)诱导的肾小球血管内皮细胞(GECs)损伤的影响以及基质细胞衍生因子-1(SDF-1)/趋化因子受体-4(CXCR4)信号通路的作用。方法:体外培养人肾小球血管内皮细胞(HRGEC),将HRGEC分为正常组,模型组,厚朴酚-L、M、H组,厚朴酚+NUCC-390组共6组。除正常组外,其余组均用LPS诱导建立HRGEC损伤模型;CCK8法检测各组HRGEC增殖情况;流式细胞术检测各组HRGEC凋亡情况;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组HRGEC上清液白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测各组HRGEC中SDF-1、CXCR4 mRNA水平;Western blot检测各组HRGEC的SDF-1、CXCR4、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl2相关X蛋白(Bax)蛋白水平。结果:与正常组比较,模型组HRGEC存活率降低、凋亡率升高,IL-6、TNF-α水平显著升高,SDF-1mRNA、CXCR4 mRNA、SDF-1蛋白、CXCR4蛋白、Bax蛋白表达水平显著升高,Bcl-2蛋白表达水平显著降低,差异均有统计学意义(均P<0.05)。与模型组比较,厚朴酚-L、M、H组HRGEC存活率升高、凋亡率降低,IL-6、TNF-α水平显著降低,SDF-1mRNA、CXCR4 mRNA、SDF-1蛋白、CXCR4蛋白、Bax蛋白表达水平显著降低,Bcl-2蛋白表达水平显著升高,且呈剂量依赖性,差异均有统计学意义(均P<0.05)。与厚朴酚-H组比较,厚朴酚+NUCC-390组HRGEC存活率降低、凋亡率升高,IL-6、TNF-α水平显著升高,SDF-1mRNA、CXCR4 mRNA、SDF-1蛋白、CXCR4蛋白、Bax蛋白表达水平显著升高,Bcl-2蛋白表达水平显著降低,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论:厚朴酚可能通过抑制SDF-1/CXCR4信号通路和HRGEC炎症反应、凋亡,而减轻LPS诱导的HRGEC损伤。

共刺激分子在免疫性肾病中的作用机制及其信号干预在肾病治疗中的意义

肾病的发生发展都与免疫分子密切相关 ,因此共刺激分子及其信号调节在其中的作用及其作用机制的探讨具有理论意义和临床应用价值。

血管紧张素Ⅱ对肾小球血管内皮细胞损伤机制的研究

整理和分析血管紧张素Ⅱ对肾小球血管内皮细胞损伤机制的相关文献。以血管紧张素Ⅱ,肾小球血管内皮细胞、内皮细胞损伤等为主题词检索近10年来国内外有关肾小球内皮细胞损伤机制的研究文献,并进行分析。结果发现血管紧张素Ⅱ通过激活炎症反应、氧化应激、诱导细胞凋亡、损伤肾小球血管内皮结构、内分泌功能以及改变肾脏血流动力等途径损伤肾小球血管内皮细胞。本研究对于进一步明确血管紧张素Ⅱ损伤肾小球血管内皮细胞的机制,寻找有效的防治方法具有重要意义。

抗内皮细胞抗体介导移植肾排斥反应的研究进展

血管内皮细胞是移植受者免疫系统接触供者抗原并发生免疫反应的“第一战场”，移植肾血管内皮细胞的损伤可导致移植物功能丧失。抗内皮细胞抗体（AECA）是针对内皮细胞表面非HLA抗原决定簇的抗体。近年来大量的临床研究表明，AECA与移植肾排斥反应的发生密切相关，可能成为今后评估肾移植受者的病情及判断预后的新的血清学指标。研究AECA及其抗原在移植免疫反应中的作用，有着重要的临床价值。

肾脏纤维化的细胞学基础及中医药防治研究进展

各种原发性和继发性肾脏疾病的最终结果将导致肾脏纤维化。文章从肾脏纤维化的细胞学基础方面入手,就系膜细胞、肾小球毛细血管内皮细胞、足细胞、肾小管上皮细胞、成纤维细胞在肾间质纤维化中的病理学机制及中医药防治有关的研究进展及现状进行综述。

肾小管周围毛细血管与急性肾损伤

本文综述了肾小管周围毛细血管(peritubular capillary,PTC)、肾小管周围毛细血管内皮细胞(renal peritubular capillary endothelial cells,RPECs)与急性肾损伤(acute kidney injury,AKI)的相关研究结果,从PTC血流量减少、RPECs损伤以及PTC稀疏等方面分析PTC与AKI发病的可能关系。相关的研究结果显示,PTC在AKI的发生发展与转归中起着至关重要的作用,PTC的损伤甚至可能是某些AKI的始动因素。研究RPECs损伤及其保护机制可能为预防AKI发生、延缓AKI向慢性肾脏病(CKD)转化提供潜在的、新的治疗思路。