肾衰Ⅱ号方颗粒联合西医一体化方案治疗原发性慢性肾脏病3~4期患者临床疗效及对血清自噬相关蛋白的影响

目的观察肾衰Ⅱ号方颗粒联合西医一体化方案治疗原发性慢性肾脏病(CKD)3~4期脾肾气虚证、湿浊瘀阻证患者临床疗效及对血清自噬相关蛋白的影响。方法采用随机数字表法将88例患者分为治疗组、对照组各44例。2组均予西医一体化方案治疗,治疗组在此基础上予肾衰Ⅱ号方颗粒,对照组予肾衰Ⅱ号方免煎安慰剂,每次1袋,每日2次,口服。2组均连续治疗24周。观察2组临床疗效,比较2组治疗前后中医症状评分、血肌酐(Scr)、血尿素氮(BUN)、尿酸(UA)、血钙(Ca^(2+))、血磷(P^(3-))、甲状旁腺激素(PTH)、24 h尿蛋白定量(24 UPro)水平;ELISA法检测2组治疗前后血清自噬相关蛋白Beclin-1、Atg7、LC3-Ⅱ水平;监测2组安全性指标。结果治疗过程中治疗组、对照组各脱落4例。治疗组总有效率为55%(22/40),对照组为30%(12/40),治疗组疗效优于对照组(P<0.01)。与本组治疗前比较,治疗组治疗后各项中医症状评分降低(P<0.01),Scr、BUN、UA、P3-、PTH和24 UPro水平下降(P<0.05,P<0.01),肾小球滤过率(e GFR)上升(P<0.01),对照组治疗后Scr上升(P<0.05),eGFR下降(P<0.01);2组治疗后比较,治疗组各项中医症状评分、Scr、BUN、UA、P^(3-)、PTH和24 UPro水平低于对照组(P<0.01,P<0.05),eGFR高于对照组(P<0.01)。与本组治疗前比较,治疗组治疗后血清Beclin-1、Atg7、LC3-Ⅱ水平上升(P<0.01,P<0.05),对照组治疗后血清Beclin-1水平下降(P<0.01);2组治疗后比较,治疗组上述指标改善均优于对照组(P<0.01,P<0.05)。相关性分析显示,Beclin-1、Atg7、LC3-Ⅱ与Scr、BUN呈负相关(P<0.05),与eGFR呈正相关(P<0.05)。2组治疗过程中均未见明显不良反应。结论肾衰Ⅱ号方颗粒联合西医一体化方案治疗原发性CKD 3~4期脾肾气虚证、湿浊瘀阻证患者疗效显著,可有效减轻临床症状,改善肾功能,延缓CKD进展,其作用机制可能与改善肾脏自噬水平有关。

肾衰Ⅱ号方对慢性肾功能衰竭大鼠肾组织AngⅡ及nNOS蛋白表达的影响

目的观察肾衰Ⅱ号方对5/6(ablation/infarction,A/I)肾切除慢性肾功能衰竭(chronic renal failure,CRF)大鼠残余肾组织纤维化及血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)和神经型一氧化氮合酶(nNOS)表达的影响,并初步探讨其作用机制。方法选取57只SD雄性大鼠按5/6(A/I)肾衰模型法制备大鼠模型。造模后随机分为模型组、肾衰Ⅱ号方组(中药组,肾衰Ⅱ号方浓煎液2mL灌胃)和西药组(氯沙坦钾合福辛普利钠混悬液,2mL灌胃),每组15只,另选取15只大鼠作为正常组,正常组和模型组予等量纯净水灌胃,各组均每天干预1次,连续干预60天。检测各组大鼠SCr、BUN、内生肌酐清除率(creatinine clearance rate,CCr),采用Western blot法测定大鼠残余肾皮质、髓质AngⅡ和nNOS蛋白表达,观察肾组织病理形态。结果与正常组比较,模型组SCr、BUN升高,CCr降低(P<0.01),提示造模成功。与本组干预前比较,中药组及西药组SCr、BUN水平下降,CCr水平升高(P<0.01)。与模型组比较,中药组及西药组SCr、BUN水平及髓质AngⅡ表达均降低(P<0.01,P<0.05),CCr水平及皮质、髓质nNOS表达明显升高(P<0.01,P<0.05)。肾组织病理显示,中药组病理变化明显减轻,优于模型组。结论肾衰Ⅱ号方可以改善5/6肾切除CRF大鼠的肾功能,减轻肾间质纤维化,其作用机制可能与调节肾内失衡的AngⅡ和nNOS信号转导途径有关。

肾衰Ⅱ号方对慢性肾脏病患者肾功能及炎症因子的影响

目的：观察肾衰Ⅱ号方对慢性肾脏病（CKD）3～4期患者肾功能及炎症因子的影响。方法采用随机数字表法将62例CKD3～4期患者随机分为治疗组（32例）和对照组（30例）。2组均予西医常规一体化治疗,治疗组同时予肾衰Ⅱ号方,治疗6个月。于治疗前后检测血红蛋白（Hb）、血肌酐（Scr）、尿素氮（BUN）、24 h尿蛋白定量（24 h UP）、白细胞介素（IL）-6、IL-8、肿瘤坏死因子（TNF）、估算肾小球滤过率（eGFR）,并对临床疗效进行评价。结果治疗组临床疗效总有效率为65.63%（21/32）,对照组为30.00%（9/30）,治疗组优于对照组（P＜0.01）；治疗组中医证候疗效总有效率为96.88%（31/32）,对照组为53.33%（16/30）,治疗组优于对照组（P＜0.01）。除口干咽燥、大便不实外,治疗组证候改善较对照组明显（P＜0.01）。治疗组可升高eGFR水平,降低Scr、BUN、24 h UP水平（P＜0.05,P＜0.01）,2组比较差异有统计学意义（P＜0.01）。对照组可升高eGFR水平,降低Scr水平（P＜0.01）。2组均可升高Hb水平,降低IL-6、IL-8、TNF水平（P＜0.05,P＜0.01）,2组比较差异无统计学意义（P＞0.05）。结论肾衰Ⅱ号方可能通过降低炎症因子水平抑制 CKD3～4期微炎症状态,从而改善临床证候及肾功能。

肾衰Ⅱ号方对慢性肾功能衰竭大鼠肾组织NF-κB/TNF-α信号通路表达的影响

目的观察肾衰Ⅱ号方对慢性肾功能衰竭大鼠肾组织NF-κB/TNF-α信号通路表达的影响,探讨其改善慢性肾功能衰竭微炎症状态、延缓慢性肾脏病进展的作用机制。方法采用5/6(ablation/infarction,A/I)肾切除法制作慢性肾功能衰竭动物模型。实验大鼠随机分为模型组、西药对照组、肾衰Ⅱ号方组,每组14只,另设假手术组14只,各给药组给予相应药物。测定大鼠血肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)、内生肌酐清除率(CCr),采用Western blot测定磷酸化核因子-κB(p-NF-κB)p65、NF-κB p65、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)蛋白表达,RT-PCR测定TNF-αm RNA表达。结果与假手术组比较,模型组SCr、BUN水平明显升高,CCr明显降低(P<0.01),左肾质量/体质量明显增加(P<0.05),肾脏皮质、髓质p-NF-κB p65、NF-κB p65及TNF-α表达均明显升高(P<0.01);与模型组比较,肾衰Ⅱ号方组、西药对照组SCr、BUN水平明显降低(P<0.05,P<0.01),CCr明显升高(P<0.01),左肾质量/体质量明显降低(P<0.05),肾衰Ⅱ号方组在改善肾功能方面优于西药对照组(P<0.05);肾衰Ⅱ号方组、西药对照组肾脏皮质、髓质p-NF-κB p65、NF-κB p65及TNF-α表达均明显降低(P<0.01),肾衰Ⅱ号方组下调NF-κB/TNF-α信号通路表达作用优于西药对照组(P<0.01)。结论肾衰Ⅱ号方可能通过下调NF-κB/TNF-α信号通路的表达,改善慢性肾功能衰竭微炎症状态,减轻肾间质纤维化,达到延缓肾功能减退的作用。

肾衰Ⅱ号方对肾功能衰竭大鼠肠通透性及微炎症的影响

目的观察肾衰Ⅱ号方对肾功能衰竭大鼠肠通透性及微炎症的影响,探讨其作用机制。方法采用5/6肾切除法制备大鼠肾功能衰竭模型。40只SD雄性大鼠,随机分为假手术组、模型组、肾衰Ⅱ号方组和阳性对照组。各给药组给予相应药物,假手术组和模型组给予等量生理盐水,共60 d,处死前3.5 h均给予内毒素10 mg/kg灌胃。测试盒分析仪检测血清肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)含量,HE染色观察肾脏、肠道病理变化,鳌试剂法检测下腔静脉血浆内毒素含量,ELISA检测相关炎症因子水平,免疫组化和RT-PCR分别检测肠紧密连接蛋白Claudin-1、Occludin蛋白和mRNA的表达。结果与假手术组比较,模型组大鼠肾组织结构紊乱,Cr和BUN、内毒素及炎症因子水平明显升高(P<0.05),Claudin-1、Occludin蛋白和mRNA表达明显降低(P<0.05);与模型组比较,肾衰Ⅱ号方组大鼠肾组织病理变化减轻,肾功能改善,内毒素及炎症因子水平明显降低(P<0.05),Claudin-1、Occludin蛋白表达明显升高(P<0.05),mRNA表达无明显变化。结论肾衰Ⅱ号方可改善5/6肾切除大鼠肾功能水平,调整肠道通透性,减少肠源性内毒素入血,从而改善模型大鼠微炎症状态。

肾衰Ⅱ号方对5/6肾切除大鼠肾组织形态及肿瘤坏死因子-α表达的影响

目的观察肾衰Ⅱ号方对5/6(A/I)肾切除慢性肾功能衰竭(CRF)大鼠残肾组织病理形态及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达的影响,探讨其可能的作用机制。方法制备5/6(A/I)肾切除CRF大鼠模型,随机分为假手术组、模型组、西药组和中药组,各给药组给予相应药物。给药60 d后,测定大鼠血肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)、血红蛋白(Hb)、内生肌酐清除率(Ccr),观察残肾组织病理形态,免疫组化检测残肾组织TNF-α的表达。结果与模型组比较,各给药组大鼠SCr和BUN水平显著降低、Hb和Ccr显著升高(P<0.05,P<0.01),各给药组大鼠残肾组织病理改变均有改善,各给药组大鼠TNF-α水平显著降低(P<0.01),且中药组均优于西药组。结论肾衰Ⅱ号方可改善CRF大鼠肾功能及肾组织病理改变,其抗肾间质纤维化机制可能与其改善肾组织缺血缺氧、调节TNF-α的表达有关。

肾衰Ⅱ号方对5/6肾切除大鼠肾血流量和肾内氧耗影响及其作用机制

目的:观察肾衰Ⅱ号方对于5/6(A/I)肾切除慢性肾衰竭大鼠模型的肾血流量和肾内氧耗影响及其作用机制。方法:采用经典5/6(Ablation/Infarction,A/I)肾切除慢性肾衰竭(CRF)模型法制作CRF动物模型,随机分为模型组(B组)、肾衰组(肾衰Ⅱ号方)(C组)、西药组(氯沙坦钾合蒙诺)(D组),每组15只,另设假手术组(A组)15只。给予相应干预,60d后检测肌酐、尿素氮等生化指标,测定肾内血流量,计算残余肾内氧耗。结果:(1)造模后与A组相比,模型组尾动脉收缩压明显升高(P<0.01),舒张压升高(P<0.05)。(2)干预结束后,与B组相比,C、D组的尿素氮、血肌酐下降(P<0.05),内生肌酐清除率上升(P<0.05),左肾静脉压升高(P<0.05),肾血流量升高(P<0.05),肾内氧耗明显降低(P<0.01),血红蛋白值上升(P<0.05),体重增加(P<0.05),左肾与体重比值下降(P<0.05);C组与D组比较,肾血流量、肾内氧耗组间差异有统计学差异(P<0.05),肾衰Ⅱ号方在提高肾血流量、降低肾内氧耗方面优于氯沙坦钾合蒙诺。干预前后比较,C组和D组治疗前后各组血肌酐、尿素氮的差异有统计学意义(P<0.05),肾衰Ⅱ号方在降血肌酐、尿素氮方面好于氯沙坦钾合蒙诺,在改善内生肌酐清除率方面两组治疗内生肌酐清除率的差异无统计学意义(P>0.05)。结论:肾衰Ⅱ号方可以提高残余肾组织的肾血流量,降低肾内氧耗,改善肾功能,可能通过能量代谢变化延缓慢性肾脏病进程。

PI3K/Akt信号通路在慢性肾衰竭大鼠肾组织的表达及肾衰Ⅱ号方的干预作用

目的:研究肾衰Ⅱ号方对于5/6(ablation/infarction,A/I)肾切除法制备的慢性肾衰竭大鼠肾功能及PI3K/Akt信号通路表达的影响。方法:从SD雄性大鼠中随机抽取14只为假手术组(A组),其余采用5/6(ablation/infarction,A/I)肾切除法制备慢性肾衰竭大鼠模型,随机分为模型组(B组)、西药组(氯沙坦钾+福辛普利)(C组)、中药组(肾衰Ⅱ号方)。给予相应干预,60 d后检测大鼠肾功能[肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)]、内生肌酐清除率(Ccr)、血常规(Hb)、左肾重/体重,HE病理染色观察肾组织形态,Western blot法检测组织磷酸化Akt(p-Akt)、总Akt(pan Akt)蛋白表达。结果:(1)造模手术后,与A组比较,各手术组的BUN、Scr明显升高(P<0.01),Ccr明显降低(P<0.01),提示造模成功;(2)与B组比较,C、D组Scr均明显下降(P<0.01,P<0.01)、BUN水平下降(P<0.05,P<0.01),Ccr、Hb均明显升高(P<0.01,P<0.01),左肾重/体重降低(P<0.05);C组与D组比较,在降低Scr和BUN,改善Ccr和Hb,两种药物差异有统计学意义(P<0.05),而在左肾重/体重比值方面两组差别无统计学意义(P>0.05);干预前后比较,C组和D组治疗前后Scr、BUN、Ccr差异有统计学意义(P<0.05),且肾衰Ⅱ号方在降低Scr、BUN,改善Ccr方面优于氯沙坦钾合蒙诺(P<0.05)。(3)肾组织病理显示,两个治疗组病理变化明显减轻,优于模型组。(4)与B组比较,两治疗组皮质、髓质p-Akt/pan Akt比值明显降低(P<0.01,P<0.01);两组间降低p-Akt/pan Akt比值的作用差异有统计学意义(P<0.01),肾衰Ⅱ号方在下调p-Akt/pan Akt比值方面优于氯沙坦钾合蒙诺。结论:肾衰Ⅱ号方可以改善5/6肾切除慢性肾衰竭大鼠的肾脏功能,减轻肾间质纤维化,其作用机制可能是通过下调PI3K/Akt信号通路的表达实现。

肾衰Ⅱ号方联合西医一体化治疗方案治疗CKD3-4期肾性贫血32例临床研究

目的:观察在西医一体化治疗方案基础上加用肾衰Ⅱ号方对慢性肾脏病(CKD)3-4期肾性贫血患者血细胞、肾功能及炎症因子的影响。方法:选择CKD3-4期肾性贫血患者62例,随机分为治疗组(32例)和对照组(30例)。2组患者均采用西医一体化治疗方案,治疗组在上述治疗基础上加用肾衰Ⅱ号方,2组均治疗8周。于治疗前后检测2组患者红细胞计数(RBC)、血红蛋白(Hb)、红细胞压积(HCT)、肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、肾小球滤过率(GFR)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的变化情况。结果:治疗后治疗组患者Scr、BUN较治疗前明显降低(P<0.05),GFR较治疗前明显升高(P<0.05),而对照组上述指标与治疗前比较差异无统计学意义(P>0.05),治疗组改善效果明显优于对照组(P<0.05)。治疗后2组患者RBC、Hb、HCT均较治疗前明显升高(P<0.05),治疗组较对照组疗效更佳(P<0.05)。治疗后治疗组患者TNF-α显著降低(P<0.01),亦明显低于对照组治疗后(P<0.01),对照组TNF-α与治疗前比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:肾衰Ⅱ号方可以通过下调CKD3-4期肾性贫血患者炎症因子TNF-α,改善炎症状态,纠正贫血,延缓CKD进展。

肾衰Ⅱ号方对慢性肾脏病3-4期轻中度蛋白尿患者影响的临床研究

目的观察肾衰Ⅱ号方对慢性肾脏病(CKD)3-4期轻中度蛋白尿患者的影响。方法将88例CKD3-4期轻中度蛋白尿患者,随机分为治疗组和对照组,每组44例。两组均予基础治疗,对照组加用尿毒清颗粒,治疗组加用肾衰Ⅱ号方。两组疗程均为6个月,观察临床疗效,比较两组中医症状积分、血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、肾小球滤过率(eGFR)、24h尿蛋白定量(24hUpro)、尿视黄醇结合蛋白(RBP)、尿α1微球蛋白(α1-MG)、尿β2-微球蛋白(β2-MG)的变化情况。结果(1)治疗组、对照组临床总有效率分别为86.36%、61.36%;组间临床疗效比较,治疗组优于对照组(P<0.05)。(2)治疗前后组内比较,治疗组中医症状各分项积分及总分均较治疗前明显下降(P<0.05),对照组除面色晦暗、恶心呕吐外,其余症状各分项积分及总分明显下降(P<0.05);组间治疗后比较,除口干口苦外,治疗组症状各分项积分及总分均低于对照组(P<0.05)。(3)治疗前后组内比较,治疗组Scr、BUN明显下降(P<0.05),eGFR明显上升(P<0.05),对照组Scr明显下降(P<0.05);组间治疗后比较,治疗组BUN较对照组明显下降(P<0.05)。(4)治疗前后组内比较,治疗组24hUpro、尿β2-MG、尿α1-MG、尿RBP均明显下降(P<0.05),对照组24hUpro、尿α1-MG明显下降(P<0.05);组间治疗后比较,治疗组尿β2-MG、尿α1-MG、尿RBP明显低于对照组(P<0.05)。结论肾衰Ⅱ号方治疗CKD3-4期轻中度蛋白尿的临床疗效优于尿毒清颗粒,能显著改善患者的中医症状、肾功能及肾小管性尿蛋白水平,延缓慢性肾脏病的进展。

肾衰Ⅱ号方抑制慢性肾功能衰竭大鼠肾小管高代谢状态的实验研究

本文旨在寻找延缓慢性肾功能衰竭进展的有效药物,观察了以温阳益阴,活血泻浊法组方的肾衰Ⅱ号方对CRF模型大鼠肾小管高代谢状态的抑制作用。结果表明该方可明显降低CRF模型大鼠血清BuN、Scr水平,与模型组比较有显著差异(P<0.05～0.01);给药50d时,6h尿量与正常组比较无明显差异;且肾衰Ⅱ号方可明显增强红细胞SOD活性及对体外O_-自由基的生成有很强清除作用;具有明显改善肾组织损害的作用及改善CRF肾组织化学紊乱作用,由此推断肾衰Ⅱ号方具有抑制CRF肾小管高代谢状态的作用,可明显延缓CRF进程。

肾衰Ⅱ号胶囊治疗慢性肾衰临床观察

[目的]观察肾衰Ⅱ号胶囊治疗慢性肾衰的临床疗效。[方法]采取随机分为肾衰Ⅱ号胶囊治疗组40例,西药依纳普利对照组20例。治疗组予肾衰Ⅱ号胶囊,60d为1个疗程;西药对照组给予依那普利,60d为1个疗程。每周测血肌酐、尿素氮、血红蛋白。[结果]初步证实肾衰Ⅱ号胶囊对肾功能不全代偿期和失代偿期患者有确切的治疗作用,能明显降低血清肌酐、尿素氮水平,并能增加血红蛋白含量,改善患者的临床症状,肾功能有所恢复。[结论]肾衰Ⅱ号胶囊治疗慢性肾衰疗效优于依那普利。

肾衰Ⅱ号方对CKD3~5期非透析育龄期女性患者肾功能及性激素影响的临床研究

目的:观察肾衰Ⅱ号方对慢性肾脏病(CKD)3~5期非透析育龄期女性患者肾功能与性激素的影响及临床疗效。方法:收集2019年07月—2020年03月就诊的CKD3~5期、非透析期、月经正常的育龄期女性患者67例,随机分为对照组33例和治疗组34例;另收集30例健康人群作为空白对照组。对照组予以西医一体化治疗加用益肾止衰颗粒,治疗组予以西医一体化治疗加用肾衰Ⅱ号方,疗程12周,观察两组治疗前后性激素、肾功能、中医证候积分、有效率等变化。结果:(1)CKD3~5期非透析育龄期女性患者肌酐(Scr)与雌二醇(E2)存在负相关,肾小球滤过率(eGFR)与E2存在正相关,Scr、eGFR与睾酮(T)、卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、泌乳素(PRL)之间不存在相关性;(2)治疗后,对照组和治疗组Scr、血尿酸(UA)、胱抑素C(Cys-C)均较治疗前下降(P<0.05),eGFR较治疗前升高(P<0.05);治疗后两组中医证候积分均有所改善(P<0.05);(3)治疗后,对照组和治疗组E2均较治疗前升高(P<0.05);PRL、FSH、LH均较治疗前下降(P<0.05);T较治疗前无明显改变(P>0.05)。结论:肾衰Ⅱ号方可以改善CKD3~5期非透析育龄期女性患者肾功能,显著减轻患者的临床症状。Scr与E2之间存在负相关,eGFR与E2之间存在正相关,肾衰Ⅱ号方具有上调E2的水平,下调PRL、FSH、LH的水平,调节性激素代谢的作用。

肾衰Ⅱ号方对5/6肾切除大鼠残余肾组织凋亡相关蛋白表达的影响

目的观察肾衰Ⅱ号方对5/6(ablation/infarction,A/I)肾切除慢性肾衰竭(CRF)大鼠残余肾组织凋亡相关蛋白表达的影响。方法 SD雄性大鼠采用5/6(A/I)肾切除术制备CRF大鼠模型,随机分为模型组、肾衰Ⅱ号方组、西药组,每组15只,另取15只大鼠作为假手术组。各组给予相应干预,60 d后Western blot检测凋亡相关蛋白p53、Bax、Cleaved-parp的表达,免疫组化检测p53、Bax蛋白的表达,透射电镜观察肾组织超微结构。结果与假手术组比较,模型组大鼠肾皮质和肾髓质p53、Bax、Cleaved-parp蛋白表达明显升高(P<0.05);与模型组比较,各给药组大鼠肾皮质和肾髓质p53、Bax、Cleaved-parp蛋白表达明显降低(P<0.05)。免疫组化结果显示,p53、Bax蛋白表达主要位于肾小管,模型组大鼠炎性细胞浸润明显,蛋白表达较假手术组明显升高,各给药组较模型组炎性细胞浸润减轻,p53和Bax蛋白表达降低。透射电镜结果显示,假手术组大鼠肾皮质和肾髓质未见细胞凋亡,超微结构正常,模型组大鼠核固缩,细胞凋亡出现,超微结构紊乱,各给药组较模型组超微结构改善,少见细胞凋亡发生。结论肾衰Ⅱ号方可抑制5/6(A/I)肾切除CRF大鼠细胞凋亡,其作用机制可能与下调p53、Bax、Cleaved-parp蛋白表达相关。

肾衰Ⅱ号方对慢性肾衰竭大鼠有氧糖酵解及肾间质纤维化的影响

目的观察肾衰Ⅱ号方对慢性肾衰竭大鼠有氧糖酵解及肾间质纤维化的影响,探讨其抗肾间质纤维化的作用机制。方法体内实验以5/6(A/I)手术构建慢性肾衰竭大鼠模型,随机分为假手术组、模型组、中药组、西药组,进行相应干预8周后,取肾组织行PAS染色观察肾脏病理变化,Western blot检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)蛋白表达,免疫组化检测α-SMA、己糖激酶(HK)2蛋白定位,紫外法检测肾组织HK活性,比色法检测肾组织乳酸、丙酮酸浓度;体外实验以白细胞介素(IL)-1β刺激大鼠肾成纤维细胞NRK-49F构建NRK-49F增殖活化模型,细胞分为空白组、IL-1β组、IL-1β+肾衰Ⅱ号方低剂量组(200μg/mL)、IL-1β+肾衰Ⅱ号方高剂量组(400μg/mL)、IL-1β+2-脱氧-D-葡萄糖组(10 mmol/L),Western blot检测NRK-49F细胞α-SMA、增殖细胞核抗原(PCNA)、纤维连接蛋白(FN)、HK2蛋白表达,比色法检测细胞培养基乳酸浓度,葡萄糖氧化酶法检测细胞培养基葡萄糖浓度,免疫荧光检测HK2蛋白表达。结果体内实验:与假手术组比较,模型组PAS染色提示肾间质糖原含量增加,肾小球、肾小管形态异常;α-SMA蛋白表达明显升高(P<0.01),肾组织乳酸浓度、乳酸/丙酮酸、HK活性、HK2蛋白表达均明显升高(P<0.01)。与模型组比较,中药组和西药组肾组织病理变化改善,α-SMA蛋白表达、乳酸浓度、乳酸/丙酮酸、HK活性、HK2蛋白表达均明显降低(P<0.05,P<0.01)。体外实验:与空白组比较,IL-1β组NRK-49F细胞FN、α-SMA、PCNA、HK2蛋白表达明显升高(P<0.05,P<0.01);细胞培养基pH值、葡萄糖浓度明显降低(P<0.05),乳酸浓度明显升高(P<0.01);与IL-1β组比较,各干预组NRK-49F细胞FN、α-SMA、PCNA、HK2蛋白表达明显降低(P<0.05,P<0.01);细胞培养基pH值、葡萄糖浓度升高(P<0.05,P<0.01),乳酸浓度明显降低(P<0.01)。结论肾衰Ⅱ号方可通过抑制NRK-49F细胞有氧糖酵解反应,从而阻止成纤维细胞增殖活化,实现其抗肾间质纤维化的作用。

肾衰Ⅱ号方颗粒联合恩格列净对慢性肾脏病2~3期患者蛋白尿和肾功能的影响

目的:观察肾衰Ⅱ号方颗粒联合恩格列净对慢性肾脏病(CKD)2~3期患者蛋白尿和肾功能的影响。方法:纳入脾肾两虚、湿浊瘀阻证CKD 2~3期患者60例,随机分为对照组30例和治疗组30例。两组患者均予西医一体化治疗,在此基础上,对照组患者予安慰剂颗粒联合恩格列净治疗,治疗组患者予肾衰Ⅱ号方颗粒联合恩格列净治疗,疗程为3个月。治疗后,评价并比较两组患者的临床疗效及中医证候疗效;治疗前后,检测并比较两组患者的血肌酐(Scr)、血尿酸(UA)、血尿素氮(BUN)、肾小球滤过率估计值(eGFR)及24 h尿蛋白定量(24 h UPro)水平。结果:(1)治疗后,对照组的临床疗效总有效率为56.67%,治疗组为86.67%,治疗组的疗效显著优于对照组(P<0.05)。(2)治疗后,对照组的中医证候疗效总有效率为56.67%,治疗组为83.33%,治疗组的中医证候疗效显著优于对照组(P<0.05)。(3)治疗后,两组患者的Scr、UA、24 h UPro水平较治疗前均明显降低(P<0.05),eGFR水平明显升高(P<0.05),治疗组患者的BUN水平亦明显降低(P<0.05),且治疗组患者的Scr水平显著低于对照组(P<0.05)、eGFR水平显著高于对照组(P<0.05)。结论:肾衰Ⅱ号方颗粒联合恩格列净可更好地改善脾肾两虚、湿浊瘀阻证CKD 2~3期患者的中医证候和肾功能,提高临床疗效,具有较好的肾脏保护作用。

血氧水平依赖磁共振评估肾衰Ⅱ号方对原发性慢性肾脏病3-4期患者肾组织氧合水平的影响

目的:运用血氧水平依赖磁共振(BOLD-MRI)评估肾衰Ⅱ号方对原发性肾小球肾炎(PGN)引起的慢性肾脏病(CKD)3-4期脾肾两虚、湿热瘀阻型患者肾组织氧合水平的影响。方法:78例PGN(CKD3-4期)患者随机分为对照组与治疗组,每组39例。两组均给予西医基础治疗,治疗组加用肾衰Ⅱ号方,对照组加用尿毒清颗粒,疗程6个月。两组治疗前后检测双肾皮、髓质的有效横向弛豫时间(T2^(*))、血肌酐(SCr)、血尿素氮(BUN)、肾小球滤过率(eGFR)、血浆白蛋白(Alb)、24 h尿蛋白定量(24 h UP)和血红蛋白(Hb),观察治疗前后中医证候及临床疗效。结果:治疗组临床疗效总有效率为82.35%(28/34),显著高于对照组的55.88%(19/34)(P<0.01)。治疗组倦怠乏力、气短懒言、食少纳呆等中医证候疗效总有效率显著高于对照组(P<0.01,P<0.05)。治疗组治疗后SCr、BUN、24 hUP均较治疗前显著降低(P<0.01,P<0.05),且SCr、BUN显著低于对照组(P<0.01,P<0.05);治疗组治疗后Alb、eGFR均较治疗前显著升高(P<0.05,P<0.01),且eGFR显著高于对照组(P<0.01)。治疗组治疗后双侧肾皮质、髓质T2^(*)均较治疗前显著升高(P<0.01),且均显著高于对照组(P<0.05)。治疗组治疗前、后双侧肾皮质及髓质T2^(*)与eGFR存在显著正相关(P<0.01,P<0.05)。结论:肾衰Ⅱ号方联合西药治疗能显著改善PGN(CKD3-4期)脾肾两虚、湿热瘀阻型患者的临床症状、肾功能和肾组织氧合水平,并且其肾功能改善可能与肾组织氧合水平的提高有关。

肾衰Ⅱ号方对慢性肾功能衰竭模型大鼠肠道紧密连接蛋白的影响

目的探讨肾衰Ⅱ号方治疗慢性肾功能衰竭的可能作用机制。方法SD大鼠采用5/6肾切除方法制备慢性肾功能衰竭大鼠模型,将造模成功的30只大鼠随机分为模型组、肾衰Ⅱ号方组及双歧三联活菌组各10只,另设空白组大鼠10只。肾衰Ⅱ号方组给予浓度为6.09g/ml肾衰Ⅱ号方药液10ml/kg灌胃,双歧三联活菌组大鼠给予双歧三联活菌17.86mg/(kg·d)灌胃,空白组、模型组大鼠给予2ml生理盐水灌胃,均每日1次,连续60天。取材前实验大鼠禁食5h后灌服内毒素(LPS)10mg/kg,3.5h后大鼠腹腔麻醉取血分离血清,10%甲醛固定小肠。检测血肌酐、尿素氮及LPS含量,肠组织采用HE染色观察病理结构,检测肠组织闭锁蛋白(Occludin)、闭锁小带蛋白1(ZO-1)、肌球蛋白轻链激酶(MLCK)、肌球蛋白轻链(MLC)蛋白及其mRNA表达,磷酸化肌球蛋白轻链(p-MLC)蛋白表达。结果与空白组比较,模型组大鼠血肌酐、尿素氮、LPS水平升高,MLCK、p-MLC蛋白及MLCK mRNA表达亦升高,ZO-1、Occludin蛋白及mRNA表达降低(P<0.05),病理显示小肠绒毛变短变宽,局部隐窝拉长,腺体增殖不活跃。与模型组比较,肾衰Ⅱ号方组血肌酐、尿素氮、LPS水平降低,MLCK蛋白及mRNA、p-MLC蛋白表达降低,ZO-1、Occludin蛋白升高(P<0.05),肠道病理变化减轻。结论肾衰Ⅱ号方可能通过下调肠组织MLCK的转录与表达,降低MLC磷酸化水平修复紧密连接结构,从而调整肠道屏障功能减少肠源性内毒素入血,达到治疗慢性肾功能衰竭的目的。

肾衰Ⅱ号方治疗CKD 3-4期患者的临床疗效观察

目的:观察肾衰Ⅱ号方治疗脾肾两虚、湿浊瘀阻型CKD 3-4期患者的临床疗效。方法:67例CKD 3-4期患者随机分为治疗组(n=33)和对照组(n=34),两组患者均采用西医一体化治疗方案,治疗组在上述治疗基础上加用肾衰Ⅱ号方治疗,疗程均为4个月。观察并比较两组患者治疗前后的血常规指标、肾功能指标及血清钙、血清磷、24 h尿蛋白定量等的变化。同时对两组患者的临床疗效进行评价,并比较两组患者慢性肾脏病分期的变化。结果:治疗组患者的疾病疗效及中医证候疗效均明显优于对照组(P<0.05)。在改善肾功能方面,治疗后,治疗组Scr较治疗前有降低趋势,但无统计学差异(P>0.05),而对照组Scr水平较治疗前明显升高(P<0.01);治疗组UA水平较治疗前明显降低(P<0.05),而对照组较治疗前无明显改善(P>0.05),且两组UA水平比较有统计学差异(P<0.05);治疗组GFR有升高趋势,但无统计学意义(P>0.05),而对照组GFR较治疗前明显降低(P<0.05),且治疗组GFR较对照组明显升高(P<0.05)。在纠正贫血方面,两组治疗前后的红细胞及血红蛋白水平均无明显升高(P>0.05)。在改善电解质紊乱及24 h尿蛋白定量方面,治疗后,治疗组血Ca2+水平明显升高(P<0.05),血P3-水平明显降低(P<0.05),而对照组血Ca2+水平无显著变化(P>0.05),血P3-水平明显升高(P<0.05),且两组血Ca2+及血P3-水平比较均具有统计学差异(P<0.05);治疗组24 h尿蛋白定量较治疗前无统计学差异(P>0.05),对照组较治疗前则明显升高(P<0.05),且治疗组24 h尿蛋白定量较对照组亦明显降低(P<0.05)。在改善CKD分期方面,治疗组CKD分期的改善明显优于对照组(P<0.05)。结论:在西医一体化治疗方案的基础上加用肾衰Ⅱ号方治疗CKD 3-4期患者,对保护残余肾功能、延缓肾功能恶化、逆转或延缓CKD进程具有一定的治疗作用。