肾衰灵方作用于SHH信号通路对UUO大鼠肾间质纤维化的影响

目的探讨当代名医国医大师郑新经验方—肾衰灵方对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾间质纤维化的抑制作用。方法1.50只雄性SD大鼠随机分为五组:假手术组、模型组、肾衰灵方低剂量组、肾衰灵方中剂量组、肾衰灵方高剂量组。除假手术组,其余各组结扎单侧输尿管建立肾间质纤维化动物模型,肾衰灵方低中高剂量组予肾衰灵方(5、15、25 mg·kg-1)连续灌胃14天。检测各组大鼠血清肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)、谷丙转氨酶(ALT),谷草转氨酶(AST),碱性磷酸酶(ALP),乳酸脱氢酶(LDH)。采用real-time PCR检测结缔生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)核酸水平,采用Masson染色方法检测肾组织观察肾小管和间质病理形态变化。2.根据结果选择肾衰灵中剂量组为治疗组,再将30只雄性SD大鼠分为假手术组、模型组、肾衰灵方治疗组共3组。用Western blot方法检测音猬因子(Sonic hedgehog,SHH)、神经胶质瘤相关癌基因同源蛋白-1(Glioma related cancer gene homologous proteins 1,Gli1)、锌指转录因子(Snail Family Zinc Finger 1,Snail)蛋白的表达。结果与模型组相比,模型组和肾衰灵各剂量组大鼠血清SCr和BUN的表达水平均明显下调,其中肾衰灵中剂量组疗效最佳(P<0.05);Masson染色发现相较模型组,肾衰灵方各剂量组肾间质纤维化明显减轻,其中肾衰灵中剂量组疗效最佳(P<0.05);real-time PCR结果发现肾衰灵各剂量组CTGF核酸水平均较模型组下调,其中肾衰灵中剂量组核酸水平最低(P<0.05)。相较假手术组,模型组与肾衰灵方组SHH、Gli1、Snai1蛋白的表达均升高(P<0.05);与模型组相比,肾衰灵方组SHH、Gli1、Snai1蛋白水平明显降低(P<0.05)。结论单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠模型中,肾衰灵方可以通过抑制肾间质纤维化改善大鼠肾功能,其作用可能与其阻断SHH信号通路相关。