供放射免疫显像用荷瘤动物模型──家兔肾被膜下移植人肿瘤组织

为解决放射免疫显像研究中缺乏合适荷瘤动物模型的难题，参照用于药敏检测小鼠肾被膜下（ＳＲＣ）移植人肿瘤组织模型的实验方法及理论基础，建立家兔ＳＲＣ移植人肿瘤组织模型。结果发现肿瘤移植后第３天血管建立，第６天肿瘤细胞生长，免疫组化呈阳性结果。在肿瘤移植后第３天注入标记单抗，第６天显像即可得到肿瘤清晰影像。家兔ＳＲＣ肿瘤模型，具有方法简单、应用范围广、静脉注射容易，适于γ相机显像等优点。为放射免疫显像研究提供了较为理想的荷瘤动物模型。

成龄大鼠同种异体肾上腺包膜肾被膜下移植

目的 :为临床肾上腺同种异体移植提供一种简便有效的方法。方法 :切除大鼠双侧肾上腺 ,将同种异体肾上腺包膜移植于肾被膜下 (SRC) ,观察移植物再生情况。结果 :移植包膜可存活及再生 ,单纯移植组术后早期未见到淋巴细胞浸润 ,与加用硫唑嘌呤组组织学变化一致 ,两组各期血浆皮质酮无显著性差异 (P>0 .0 5) ;再加用 ACTH可促进移植体再生 ,且再生的肾上腺可长期存活 ,并能发挥正常的内分泌功能。结论 :SRC是良好的移植床且无排斥反应发生。

聚β-羟基丁酸酯为载体鼠肾上腺细胞肾被膜下移植研究

肾上腺皮质功能减退的患者可以应用激素替代治疗，但替代治疗时，患者需终身服药、剂量难于掌握。肾上腺细胞以其来源丰富、可长期保存和弱免疫原性，而有可能成为治疗肾上腺皮质功能不全的理想方法。我们以聚β-羟基丁酸酯（PHB）为载体将体外培养的肾上腺细胞进行肾被膜下移植，为临床上应用肾上腺细胞移植提供依据。

大鼠胰岛分离纯化及其小鼠肾被膜下移植排斥反应的研究

目的:探讨胰岛分离技术和异种胰岛移植排斥反应机制。方法:在控制不同条件的情况下,使用胰管内胶原酶灌注和不连续密度梯度纯化法获取大鼠胰岛,行小鼠肾被膜下移植,分别于术后当日和第3,5,7天取出移植物,分析排斥反应情况。结果:纯化后平均获取500+67个胰岛/胰腺,纯度约在70％～80％。统计学分析高糖和茶碱对胰岛刺激引起的胰岛索分泌,提示纯化后的胰岛功能良好。在未使用免疫抑制剂的情况下,植入的胰岛多在1周内完全排斥掉。术后5天,胰岛的形态已被破坏,淋巴细胞大量增多;术后第7天见不到完整的胰岛轮廓,仅见大量的淋巴细胞浸润。结论:严格控制各种实验条件,完善分离纯化技术,是优化胰岛获取的关键。大鼠胰岛小鼠肾被膜下移植中树突状巨噬细胞参与了排斥反应过程。

小鼠胰岛分离改良技术和肾被膜下移植的研究

目的改进小鼠胰岛分离技术，结合肾被膜下移植，探讨一套完整的小鼠胰岛移植模型方案。方法结扎小鼠胆总管末段，2g/L胶原酶V3ml灌注胰腺，100μm网筛过滤，显微镜下使用手检法获得胰岛，对胰岛的产量、纯度、体外分泌胰岛素的功能和移植效果进行评估，使用传统的Ficoll梯度离心纯化胰岛法所获得的胰岛作为对照。结果使用改良法平均每只小鼠可分离出110个胰岛，明显多于对照组（P〈0．01），但胰岛的纯度无明显差异，改良法所分离的胰岛体外分泌胰岛素的能力强于对照组（P〈0．01），且逆转高血糖移植胰岛的量少于对照组。结论使用小鼠胰岛分离改良法能够获得更大产量和胰岛素分泌功能更好的胰岛，其纯度没有受到影响，改良法较Ficoll法省时、省材，结合肾被膜下移植所构建的胰岛移植模型可以广泛用于小鼠胰岛移植的研究。

rhGH对人直肠癌小鼠肾包膜下移植瘤生长的影响

目的研究重组人生长激素(rHGH)对人直肠癌小鼠肾包膜下移植瘤生长的影响。方法雄性BALB/C小鼠45只术前24h一次性皮下注射环磷酰胺(CTX)100mg/kg,然后行人直肠癌小鼠肾被膜下移植术(SRCA),随机分成rhGH1组、rhGH2组每日皮下注射rhGH3IU/kg,联合组、化疗组和对照组连续用药7d。各组小鼠随机留3只待其自然死亡,观察其生存期,余小鼠术后10d处死,观察小鼠外周血细胞数、体重、移植瘤末初体积差(△TS)、抑瘤率(IR)及(HE染色)组织学变化。结果联合组及化疗组移植瘤△TS及IR比前三组差异有显著性(P<0.01);联合组和化疗组平均生存期显著高于对照组(P<0.05);联合组白细胞数值显著高于化疗组(P<0.05);对照组和rhGH各组的组织病理形态相似,而联合组和化疗组表现为实质细胞减少,间质增多。结论rhGH对人直肠癌小鼠肾包膜下移植瘤生长无明显促进作用;rhGH和化疗药联用对化疗药的抑瘤作用无明显影响、可减轻化疗药的骨髓抑制反应;二者联用可延长实验小鼠的生存期。

恶性瘤细胞在小鼠肾内侵袭过程的研究——肾被膜囊下移植后的光镜和电镜观察

本实验用小鼠前胃癌细胞(FC)移植于615近交系小鼠肾被膜囊下,观察其侵袭过程的形态学改变。共用52只小鼠,实验分为1、3、5、7天4个实验组及1个对照组。瘤细胞移植于肾被膜囊下第1天后,瘤细胞增殖活跃,出现核分裂象,瘤细胞紧贴于肾实质组织。3天后,瘤细胞核分裂象增加,瘤细胞以单个或成组的向肾实质侵入,有的肾小管开始呈萎缩样改变。5天后,瘤细胞已侵入肾实质的深部,可达肾小球周围。7天后,肾实质大部分受到瘤细胞侵袭,肾小管和肾小球变性、萎缩及消失。同时,瘤组织有的可沿肾被膜外生长,有的可见与别的内脏粘连现象。扫描电镜下所见结果与光镜观察相似,并发现癌细胞有吞噬迹象,似吞噬红细胞等。本文对以上现象进行了讨论。

微孔滤膜诱导SD大鼠牙乳头形成牙本质样结构的实验研究

目的:观察复合有TGF-β1的微孔滤膜对SD大鼠牙乳头形成牙本质样结构的诱导作用。方法:获取出生后4d的SD大鼠磨牙牙胚,体视显微镜下从牙胚中分离牙乳头,将牙乳头置于结合有TGF-β1的微孔滤膜之上,体外培养7d或移植入SD大鼠肾被膜下2周,观察牙乳头细胞在微孔滤膜上的生长分化情况以及硬组织的生成情况。结果:组织学观察可见培养物位于牙乳头与微孔滤膜结合处细胞发生分化,DSP和DMP-1表达阳性;体内移植物形成了硬组织,镜下为厚度均匀的牙本质样矿化物。结论:结合有TGF-β1的微孔滤膜能够诱导牙乳头细胞分化为成熟的成牙本质细胞,并进一步分泌矿化基质,形成结构规则的矿化组织。

小鼠卵巢玻璃化冻存中FSH干预对移植卵巢VEGF和VEGFR-2表达的影响

目的通过在玻璃化冻存液中给予重组人促卵泡刺激素(rhFSH),观察冻存卵巢异体异位移植后VEGF和VEGFR-2表达的变化,探索卵巢玻璃化冻存中的FSH干预对移植卵巢血流重建相关因子的影响。方法对4周龄C57BL/6J小鼠卵巢进行异体肾被膜下移植,实验分为新鲜移植组(FCG)、单纯玻璃化冻存移植组(VCG)和0.3IU·mL-1FSH干预玻璃化冻存移植组(VG-FSH)。通过监测受体小鼠动情周期的变化、卵巢组织切片中正常卵泡百分比、移植后2、7、14、28d卵巢VEGF及其受体VEGFR-2的表达,判断FSH干预效果。结果 FSH干预冻存组的正常卵泡数、VEGF及VEGFR-2的表达均高于单纯玻璃化冻存组(P<0.05),且均低于新鲜移植组;FSH干预冻存组动情周期恢复所需时间明显低于冻存组(P<0.05),而明显长于新鲜移植组(P<0.05)。结论玻璃化冻存全程添加FSH干预,有利于冻存卵巢移植后的卵泡存活及功能恢复,可能与上调促血管生成的VEGF、VEGFR-2蛋白的表达有关。

重组人生长激素联合5-Fu对人直肠癌小鼠移植瘤生长的影响

[目的]研究重组人生长激素(RHGH)及其联合氟尿嘧啶(5-Fu)对人直肠癌移植瘤生长的影响。[方法]雄性BALB/c小鼠45只建立CTX免疫抑制模型,行人直肠癌小鼠肾被膜下移植术(SRCA),随机分成5组:对照组、RHGH1组、RHGH2组、联合组(RHGH1+5-Fu组)及化疗组(5-Fu组),连续用药7d。各组小鼠随机留3只待其自然死亡,观察其生存期,余6只小鼠术后10d处死,观察小鼠移植瘤末初体积差(△TS)、抑瘤率(IR)、组织学变化(HE染色)及PCNA、cyclinD1和p16蛋白表达的变化。[结果]对照组与RHGH两亚组、联合组与化疗组间移植瘤△TS和IR比较差异均无统计学意义(P>0.05),联合组、化疗组与其他各组比较均有显著性差异(P<0.01)。对照组和RHGH两亚组的组织病理形态相似,差异不大;联合组和化疗组表现为实质细胞减少,间质增多。对照组与RHGH两亚组、联合租与化疗组间PCNA、cy-clinD1及p16蛋白表达无显著性差异(P>0.05)。联合组及化疗组表达率与其他各组比较均有显著性差异(P<0.05)。[结论]RHGH对人直肠癌小鼠肾包膜下移植瘤生长无明显促进作用,且RHGH和5-Fu联用对5-Fu的抑瘤作用无明显影响。