抑制miRNA-376c-3p对肾透明细胞癌生长的影响

目的探究miRNA-376c-3对肾透明细胞癌(ccRCC)中肿瘤细胞生长的影响。方法以实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测人ccRCC细胞系786-O、Caki-1、SN12-PM6、ACHN及正常人近段肾小管上皮细胞系HKC中miRNA-376c-3p的表达。体外培养786-O细胞,随机分为对照组、miR-376c-3p inhibitor组(转染miR-376c-3p inhibitor)、miR-376c-3p mimics组(转染miR-376c-3p mimics)、阴性对照组(转染miR-376c-3p阴性对照),分组转染后以RT-PCR检测4组细胞miRNA-376c-3p表达;以Ki67免疫荧光染色、集落生成实验检测4组786-O细胞增殖;以TUNEL染色检测4组786-O细胞凋亡;以免疫荧光染色检测4组786-O细胞凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2表达并比较其Bax/Bcl-2。于右腋窝皮下接种上述4组786-O细胞建立其裸鼠移植瘤模型,3周后测定其肿瘤体积与质量;以Ki67免疫荧光染色、TUNEL染色分别检测4组裸鼠肿瘤细胞增殖与凋亡。结果与HKC细胞比较,ccRCC细胞系786-O、Caki-1、SN12-PM6、ACHN中miR-376c-3p表达降低(P<0.05)。与对照组比较,miR-376c-3p inhibitor组细胞增殖率与集落形成率、肿瘤体积与质量、裸鼠肿瘤组织Ki67阳性比升高(P<0.05),细胞miR-376c-3p相对表达、Bax/Bcl-2与凋亡率、裸鼠肿瘤组织TUNEL阳性比降低(P<0.05);miR-376c-3p mimics组细胞增殖率与集落形成率、肿瘤体积与质量、裸鼠肿瘤组织Ki67阳性比降低(P<0.05),细胞miR-376c-3p相对表达、Bax/Bcl-2与凋亡率、裸鼠肿瘤组织TUNEL阳性比升高(P<0.05);阴性对照组各指标无明显变化(P>0.05)。结论抑制miRNA-376c-3p可削弱ccRCC细胞增殖及集落生成活性,促进其凋亡,并在裸鼠体内抑制其移植瘤生长。

CT扫描在肾透明细胞癌假包膜完整性评估中的应用

目的 分析CT扫描成像在肾透明细胞癌假包膜评估中的应用价值。方法 经病理检查确诊、肿瘤直径≤7 cm的肾透明细胞癌患者136例,采用腹部CT扫描和组织病理检查评价假包膜完整性。采用Kappa一致性检验评价病理检查与CT扫描评估假包膜的一致性。结果 136例CT扫描结果显示,假包膜完整96例,假包膜不完整36例,无明显假包膜4例。病理检查结果显示,假包膜完整97例,假包膜不完整32例,无明显假包膜7例。经Kappa检验,CT扫描与病理检查结果一致性高(Kappa=0.745)。结论 大多数肾透明细胞癌有明显的假包膜;CT扫描能够评估肿瘤边缘和假包膜的完整性,CT扫描与病理检查结果一致性良好。

术前老年营养风险指数联合内生肌酐清除率对老年肾透明细胞癌患者的预后价值

目的探讨术前老年营养风险指数(GNRI)联合内生肌酐清除率(Ccr)对老年肾透明细胞癌患者的预后价值。方法选取2016年1月至2017年12月广西医科大学第一附属医院泌尿外科收治住院的老年肾透明细胞癌患者148例,根据随访状况将患者分为存活组122例和死亡组26例。采用采用单因素和多因素Cox回归分析老年肾透明细胞癌患者预后的影响因素。采用Kaplan-Meier分析GNRI和Ccr与老年肾透明细胞癌患者总生存时间的相关性。绘制受试者工作特征曲线分析预测效能。结果两组患者一般资料中,性别、M分期、T分期、肿瘤坏死、白蛋白、GNRI差异有统计学意义(P<0.05);两组患者血清指标中,碱性磷酸酶、前白蛋白、Ccr差异有统计学意义(P<0.05)。Cox回归分析显示,GNRI升高(HR:0.803,95%CI:0.686~0.939)与Ccr升高(HR:0.971,95%CI:0.943~0.999)是老年肾透明细胞癌患者预后的保护因素(P<0.05),肿瘤M分期为M 1期(HR:5.132,95%CI:1.021~25.787)、T分期为T 3、T 4期(HR:5.179,95%CI:1.249~21.473)是老年肾透明细胞癌患者预后的危险因素(P<0.05)。Kaplan-Meier生存曲线显示,高GNRI组5年生存率高于低GNRI组(χ^(2)=15.446,P<0.001),高Ccr组5年生存率高于低Ccr组(χ^(2)=11.959,P=0.001)。受试者工作特征曲线曲线显示,GNRI联合Ccr对患者术后1年及3年预后不良预测效果好(曲线下面积分别为0.909、0.755)。结论术前GNRI和Ccr的降低与老年肾透明细胞癌患者预后不良密切相关,GNRI联合Ccr预测老年肾透明细胞癌患者疗效更佳。

血浆纤维蛋白原、全身炎症反应指数对非转移性肾透明细胞癌患者的预后判断价值

目的 探讨血浆纤维蛋白原(fibrinogen, FIB)、全身炎症反应指数(Systemic inflammatory response index, SIRI)对非转移性肾透明细胞癌(Non-metastatic renal cell carcinoma, nmRCC)患者的预后判断价值。方法 选择2018年1月-2022年12月苏州大学附属第二医院收治的146例nmRCC患者为研究对象,采用受试者工作特征曲线(Receiver operating characteristic,ROC)曲线确定FIB、SIRI诊断高Fuhrman分级(Ⅲ~Ⅳ级)的最佳截断值,并根据最佳截断值将患者分为高、低FIB组和高、低SIRI组。比较不同FIB、SIRI水平患者临床病理参数与生存预后的差异。用多因素Cox风险模型分析影响患者总体生存时间(Overall survival, OS)、肿瘤特异生存时间(Cancer specific survival, CSS)、无复发生存时间(Disease free survival, DFS)的独立危险因素。ROC曲线分析FIB、SIRI单独及联合检测对患者预后不良的预测效能。结果 患者FIB、SIRI水平越高,肿瘤直径越大,TNM分期及Fuhrman分级越高(P<0.05)。与低FIB组相比,高FIB组患者的总体生存率显著较低(χ^(2)=8.385,P=0.003);与低SIRI组相比,高SIRI组患者的总体生存率显著较低(χ^(2)=10.029,P<0.001)。Cox多因素分析显示,FIB水平、SIRI水平、肿瘤直径、Fuhrman分级、TNM分期均是影响患者OS、CSS、DFS的独立性危险因素(P<0.05)。ROC曲线分析显示,FIB、SIRI预测肾透明细胞癌患者预后不良的曲线下面积(Area under curve,AUC)分别为0.735、0.799,敏感性分别为62.6%、67.4%,特异性分别为659%、72.3%,二者联合检测的AUC为0.852,敏感性为71.2%,特异性为76.6%。结论 高FIB与高SIRI是nmRCC患者不良生存预后的危险因素,二者联合检测对患者预后不良的预测效能更高。

代谢综合征对肾透明细胞癌分级分期及围手术期相关指标的影响

目的探讨代谢综合征(metabolic syndrome,MS)对肾透明细胞癌(clear cell renal cell carcinoma,ccRCC)的病理分级、分期及围手术期相关指标的影响。方法选取2020年1月至2022年12月在苏州大学附属第一医院接受手术治疗的226例ccRCC患者的临床资料进行回顾性分析,根据是否合并MS分为MS组(n=67)与非MS组(n=159)。比较两组患者的病理分级、分期以及围手术期相关指标,主要包括美国麻醉医师协会分级(American society of anesthesiologists,ASA)评分、术前准备时间、手术时间、肾动脉阻断时间、术中出血量、术中输血率,术后肠道功能恢复、拔出导尿管时间、拔出腹膜后引流管时间、术后发热情况、术后住院时间等。结果高血压、糖尿病、高血脂与ccRCC病理分级、分期相关,差异均有统计学意义(P<0.05)。多因素logistic回归分析结果显示,高血压、糖尿病、高血脂是ccRCC分级的独立危险因素(P<0.05),高血脂是ccRCC分期的独立危险因素(P<0.05)。在腹腔镜下肾部分切除术(laparoscopic partial nephrectomy,LPN)与腹腔镜下肾根治切除术(laparoscopic radial nephrectomy,LRN)围手术期,MS组术前准备、手术、拔出腹膜后引流管、术后住院时间均长于非MS组,ASA分级≥Ⅲ级比例与术后发热比例高于非MS组,术中出血量大于非MS组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论MS与ccRCC病理分级、分期及围手术期相关指标均有相关性。因此,在ccRCC诊疗过程中,应重视MS,加强围手术期管理,帮助患者取得良好预后。

RNA干扰受体相互作用蛋白激酶1基因表达对肾透明细胞癌生物活性的影响

目的探讨受体相互作用蛋白激酶1(RIPK1)对肾透明细胞癌(ccRCC)生物功能的影响及机制。方法通过RNA干扰技术降低RIPK1在ccRCC中的表达后,光镜观察细胞形态变化,CCK-8法检测细胞增殖变化情况,Transwell细胞迁移实验检测细胞迁移能力的变化,流式细胞仪检测细胞发生凋亡、坏死水平,Western blot法检测cleaved caspase-3、混合谱系蛋白激酶样结构域(MLKL)和RIPK3表达变化。结果小干扰RNA(siRNA)干扰48 h后,RIPK1-siRNA组细胞增殖吸光度值(0.563±0.042)低于NC-siRNA组(0.944±0.039;t=11.550,P=0.003);siRNA干扰72 h后,RIPK1-siRNA组吸光度值(0.408±0.019)低于NC-siRNA组(1.717±0.108;t=20.620,P<0.001)。与NC-siRNA组(72.000±12.120)比较,RIPK1-siRNA组(31.660±10.020)ccRCC细胞的迁移数量明显减少(t=4.442,P=0.011)。与NC-siRNA组(0.360±0.090、0.510±0.060、0.880±0.070)比较,RIPK1-siRNA组ccRCC细胞内cleaved caspase3、MLKL、RIPK3表达明显增加(0.780±0.070、1.490±0.100、1.680±0.130;t=6.380,P=0.003;t=8.656,P=0.001;t=14.150,P=0.001)。结论RIPK1是ccRCC内调控细胞增殖、死亡及迁移能力的重要基因,抑制RIPK1能够促进ccRCC发生凋亡及坏死性凋亡。

控制营养状态评分和相关炎性指标在肾透明细胞癌预后预测中的价值:一项多中心回顾性研究

目的探讨控制营养状态(CONUT)评分和相关炎性指标在肾透明细胞癌(ccRCC)患者预后预测中的价值,为临床更好地评估病情及制定个体化治疗方案提供参考。方法回顾性分析2010—2018年宜宾市4所综合性医院收治的132例ccRCC患者的病历资料和生存情况,采用受试者工作特征曲线(ROC)分析CONUT评分及炎性指标中性粒细胞和淋巴细胞比值(NLR)、血小板和淋巴细胞比值(PLR)以及淋巴细胞和单核细胞比值(LMR)预测患者预后的曲线下面积和最佳截断值,Kaplan-Meier法绘制生存曲线,采用Log-rank检验和Cox回归分析影响预后的因素。结果患者中位随访时间62(53,71)个月,随访期内死亡37例(28.03%),疾病特异性生存期(DSS)和无进展生存时间(PFS)分别为51(41,58)个月和46(35,56)个月,患者3、5年DSS分别为84.09%和71.97%,3、5年PFS分别为75.00%和71.97%。CONUT评分、NLR、PLR以及LMR预测患者预后的ROC曲线下面积(AUC)分别为0.980、0.905、0.899和0.884,最佳截断值分别为3.50分、3.19、89.07和3.56。多因素Cox回归分析显示:CONUT评分和PLR与患者DSS有关,其HR(95%CI)分别为0.042(0.013~0.140)和0.182(0.045~0.744);CONUT评分和LMR与患者PFS有关,其HR(95%CI)分别为0.029(0.010~0.086)和2.984(1.227~7.258)。结论ccRCC患者预后与机体营养、免疫和炎症状况有关,CONUT评分和炎症相关指标(PLR、LMR)可能是患者DSS和PFS的重要预测因子。

基于自噬和铁死亡基因的肾透明细胞癌预后模型的建立和验证

目的:建立基于自噬和铁死亡相关基因的预后模型,并基于肾透明细胞癌(ccrCC)的自噬基因(autophagy related genes,ARGs)和铁死亡基因(ferroptosis related genes,FRGs)模型评估预后。方法:通过癌症基因组图谱(TCGA)数据库中的ccRCC数据集识别与风险相关的ARGs和FRGs,进行功能富集和肿瘤分型分析,通过单变量和多变量Cox回归建立537例患者的预后风险模型。多指标ROC用于评估模型的准确性。最后使用GSE29609数据集验证。结果:共发现37个差异表达的基因。单变量和多变量Cox回归确定了8个与OS相关的风险相关基因:CASP4、PRKCQ、BNIP3、BAG1、BIRC5、CHAC1、ATG16L2、EIF4EBP1。Kaplan-Meier生存分析显示,高危组患者生存率较低,多指标ROC曲线下面积>0.75,说明模型预测准确率较高。然后基于CIBERSORT算法进行免疫细胞浸润评估。结论:基于8个ARGs和FRGs的肾透明细胞癌相关基因预后模型具有一定的准确性,可更准确地指导临床治疗。

山奈酚靶向B细胞淋巴瘤2相关蛋白A1抑制肾透明细胞癌细胞生物行为

目的 探讨山奈酚(Kaempferol)靶向B淋巴细胞瘤2相关蛋白(BCL2)A1抑制肾透明细胞癌(ccRCC)细胞的作用机制。方法 将ccRCC细胞(ACHN和769-P)分成Vector组(转染空载质粒)或Control组(正常培养)、Kaempferol组(Kaempferol处理细胞)和Kaempferol+BCL2A1组(转染BCL2A1并用Kaempferol处理)。生物信息学预测Kaempferol靶点并分析其与临床不良表型之间关系。噻唑蓝(MTT)检测不同浓度Kaempferol处理细胞的活力。CCK-8试剂盒和克隆形成检测细胞增殖能力。Transwell实验检测细胞迁移、侵袭能力。裸鼠移植瘤实验检测Kaempferol体内抑制细胞增殖能力。免疫组化检测增殖细胞抗原Ki67。Western印迹检测BCL2A1及上皮细胞间质转化(EMT)相关蛋白表达。结果 生物信息学数据库和软件分析显示,Kaempferol靶向BCL2A1,BCL2A1在ccRCC组织中表达上调且与临床不良表型有关。Kaempferol浓度和时间依赖性明显抑制ccRCC细胞BCL2A1蛋白表达(P<0.05)。以120或150μmol/L浓度分别作用ACHN、769-P细胞后,细胞活力明显下降(P<0.05)。以相应浓度Kaempferol作用细胞后,ccRCC细胞增殖、迁移和侵袭能力明显下降(P<0.05)。Kaempferol组移植瘤体积、重量、Ki67相对表达量和BCL2A1蛋白表达明显小于Control组(P<0.05)。与Vector组相比,BCL2A1组中BCL2A1蛋白表达明显增加(P<0.05)。与Control组相比,Kaempferol组中BCL2A1蛋白表达、增殖细胞、克隆细胞、迁移和侵袭细胞数明显减少(P<0.05);与Kaempferol组相比,Kaempferol+BCL2A1组上述指标明显增多(P<0.05)。细胞经Kaempferol干预后,E-cadherin蛋白表达明显增加,N-cadherin和Vimentin蛋白表达明显减少,而BCL2A1可明显逆转Kaempferol对EMT相关蛋白表达的影响(P<0.05)。结论 Kaempferol可抑制细胞增殖、迁移和侵袭能力,其可能是通过靶向调节BCL2A1蛋白表达,影响EMT相关蛋白表达实现的。

胰腺转移性肾透明细胞癌一例

1 病例介绍。患者,女,56岁,因“体检发现胰腺占位8 d”于2022年7月21日入院。患者8 d前于当地医院体检查B超发现胰头部低回声团,考虑实质性占位。患者无腹痛腹胀,无发热、寒战,无腹泻,无恶心、呕吐等不适,当时未予特殊诊治。患者2006年因“肾透明细胞癌”于广西壮族自治区人民医院行右肾切除术,术后恢复良好,定期复查。无胰腺炎病史。近期体重无下降。专科查体:全身皮肤及巩膜无黄染,无出血点,未见肝掌,未见蜘蛛痣,可见腹部陈旧手术瘢痕,上腹部轻压痛,大小便正常。

ANLN在肾透明细胞癌中的表达及其与预后和免疫浸润相关性的生物信息学分析

目的:探讨肌动蛋白结合蛋白ANLN在肾透明细胞癌(ccRCC)中的诊断和预后价值及其与肿瘤微环境的关系。方法:从癌症基因组图谱(TCGA)数据库下载ccRCC基因表达数据和临床数据。Wilcoxon秩和检验和Logistic回归评估ANLN表达与临床病理特征的关系。受试者工作特征(ROC)曲线评估ANLN表达在ccRCC中的诊断价值。Kaplan-Meier和Cox回归分析研究ANLN表达对总生存期的影响。基因集富集分析(GSEA)识别ccRCC中ANLN相关信号通路。ESTIMATE算法、肿瘤免疫估计资源(TIMER)数据库和CIBERSORT算法分析ANLN表达与免疫浸润的关系。CellMiner数据库计算ANLN与药物敏感性的关系。结果:ANLN在ccRCC组织中表达明显上调。ccRCC中ANLN表达与临床病理特征显著相关。ROC分析显示,ANLN在ccRCC中具有较高的诊断价值。ANLN高表达与预后不良显著相关。多变量Cox回归分析显示ANLN高表达是ccRCC患者总生存期的独立危险因素。GSEA显示ANLN与多种信号通路有关。在免疫方面,ANLN与ccRCC肿瘤微环境、免疫浸润和免疫检查点分子密切相关。ANLN表达与多数抗肿瘤药物敏感性呈负相关。结论:ANLN是ccRCC潜在的诊断和预后生物标志物和免疫治疗靶点。

基于MRI-DWI不同指数模型构建的列线图模型对肾透明细胞癌与肾错构瘤的鉴别诊断价值

目的:基于磁共振-弥散加权成像(MRI-DWI)不同指数构建列线图模型,探讨其对肾透明细胞癌(ccRCC)与肾错构瘤的鉴别诊断价值。方法:回顾性选择医院经病理确诊的85例ccRCC或肾错构瘤患者作为建模组,其中肾错构瘤54例,ccRCC 31例;选择经病理确诊的105例ccRCC或肾错构瘤患者作为验证组,其中肾错构瘤59例,ccRCC 46例。基于建模组数据比较肾错构瘤与ccRCC组MRI-DWI不同指数模型参数,采用多因素Logistic回归分析筛选鉴别诊断ccRCC与肾错构瘤的影响因子,并建立列线图模型进行内部验证及外部验证。结果:ccRCC组MRI-DWI参数微循环灌注相关快速表观弥散系数(ADC)(Dt)、扩散异质性指数(α)值高于肾错构瘤组,表观弥散系数(ADC)值、单纯扩散相关慢速表观弥散系数值(Dp)、灌注分数(fp)、扩散分布指数(DDC)值低于肾错构瘤组(P<0.05)。经Logistic回归分析显示,Dt、α值是鉴别诊断ccRCC与肾错构瘤的危险因子(OR>1,P<0.05),ADC值、Dp、fp、DDC值是保护因子(OR<1,P<0.05)。根据以上参数建立的列线图模型在建模组与验证组C指数分别为0.941、0.903,校准曲线与理想曲线接近;ROC曲线显示,建模组与验证组的ROC曲线下面积(AUC)分别为0.962(95%CI为0.921~1.000)、0.903(95%CI为0.846~0.961),敏感度分别为0.907、0.898,特异度分别为0.935、0.804,约登指数分别为0.842、0.702。结论:基于MRI-DWI不同模型参数构建的列线图模型具有良好的区分度、准确性,对ccRCC与肾错构瘤具有较高的鉴别诊断价值。

肾透明细胞癌VSIG4表达及其与免疫细胞浸润的相关性研究

目的:探究VSIG4在肾透明细胞癌(ccRCC)中的表达及其与免疫细胞浸润和预后的关系。方法:从癌症基因组图谱(TCGA)数据库中下载ccRCC的RNA-seq数据和患者相应的临床数据;通过Wilcoxon秩和检验分析ccRCC及正常肾组织中VSIG4 mRNA表达水平;Wilcoxon秩和或Kruskal-Wallis秩和检验分析VSIG4表达与临床病理参数的相关性;Kaplan-Meier法分析VSIG4表达与患者预后的相关性;基因集富集分析(GSEA)探究VSIG4在ccRCC中参与的信号通路;使用R软件运行CIBERSORT算法分析VSIG4表达与肿瘤浸润免疫细胞的相关性;Western blotting检测人正常肾上皮细胞系293T和人肾癌细胞系ACHN、A-498、786-O、OS-RC-2中VSIG4蛋白表达。结果:VSIG4在ccRCC中的表达水平显著高于正常组织(P<0.05);VSIG4的表达与患者远处转移分期和淋巴结转移分期显著相关(P<0.05);生存分析显示,VSIG4高表达组患者总体生存率显著低于低表达组患者(P<0.05);GSEA富集分析结果显示,VSIG4主要在凋亡、趋化因子信号通路、细胞黏附分子等信号通路富集;VSIG4表达与M1巨噬细胞呈负相关(r<0,P<0.05),而与M2巨噬细胞呈正相关(r>0,P<0.05);免疫印迹结果表明,肾癌细胞中VSIG4蛋白表达均高于人正常肾上皮细胞系。结论:VSIG4在ccRCC中高表达,且与预后呈负相关,可能成为ccRCC患者预后的生物标志物。

伴血管母细胞瘤成分透明细胞肾细胞癌1例

伴血管母细胞瘤成分透明细胞肾细胞癌(clear cell renal cell carcinoma with hemangioblastoma like features,cc RCC-HBc)是一种罕见的特殊肾细胞癌类型,单纯从影像学表现无法与透明细胞肾细胞癌鉴别,诊断主要依靠病理学。本文报告1例cc RCC-HBc患者,女,56岁,外院上腹部CT发现右肾占位10 d入院,实验室检查示:天冬氨酸氨基转移酶为53.8 U/L,血糖为8.62 mmol/L。肾磁共振平扫影像表现为右肾下极内见结节状长T1、长T_(2)异常信号,磁共振高分辨率T_(2)WI抑制序列(fat saturation T_(2)-weighted imaging,FS-T_(2)WI)呈高信号,磁共振弥散加权成像(diffusion weighted imaging,DWI)呈略高信号,病灶边界清,直径约为1.5 cm,患者于泌尿外科接受手术切除肿物。低倍镜下肿瘤有2种区域,即透明细胞肾细胞癌(clear cell renal cell carcinoma,cc RCC)区域和血管母细胞瘤(hemangioblastoma,HB)区域。免疫组织化学染色示:配对盒基因8抗体(paired box protein 8,Pax-8)(+),碳酸酐酶IX(carbonic anhydrase IX,CAIX)(+),琥珀酸脱氢酶复合物铁硫亚基B(succinate dehydrogenase complex iron-sulfur subunit B,SDHB)(+),上皮膜抗原(epithelial membrane antigen,EMA)(个别+),证实为cc RCC?HBc。通过对其临床病理特征的分析,可加强临床医师对该类肾罕见肿瘤的认识。

基于EPSTI1表达的临床病理特征列线图预测肾透明细胞癌预后

目的:构建基于上皮间质相互作用蛋白1(epithelial-stromal interaction protein 1,EPSTI1)预后列线图预测肾透明细胞癌的预后。方法:回顾性分析2012年1月至2015年12月于福建医科大学附属第一医院221例接受手术治疗的肾透明细胞癌患者和TCGA数据库中533例肾透明细胞癌患者数据,对癌旁正常组织和癌组织标本进行免疫组织化学(immunohistochemistry,IHC)染色,分析EPSTI1的表达差异及与临床病理特征的相关性。对EPSTI1高表达与低表达患者的总生存期(overall survival,OS)和无病生存期(disease-free survival,DFS)进行Kaplan-Meier生存分析,采用单因素和多因素Cox比例风险模型分析OS的预后因素,进一步构建列线图模型并验证。结果:与癌旁正常肾组织比较,肾透明细胞癌组织中EPSTI1的IHC评分和m RNA表达水平均显著高于正常组织(均P<0.001),且在高T分期的癌组织中表达更高(P=0.036,P=0.006);EPSTI1蛋白表达与肿瘤最大径、TNM分期相关(P=0.002,P=0.032);EPSTI1低表达组OS、DFS均优于高表达组(P=0.046,P=0.003,P=0.001);单因素和多因素Cox回归分析结果显示,EPSTI1蛋白高表达、WHO/ISUP分级、AJCC/TNM分期是影响肾透明细胞癌患者预后不良的独立危险因素(P=0.009,P=0.039,P<0.001);基于上述变量构建的预后列线图模型对患者5年OS预测能力优于AJCC/TNM分期,校准曲线显示模型预测值与实际值间具有良好的一致性。结论:基于EPSTI1、AJCC/TNM分期和WHO/ISUP分级建立的列线图模型对肾透明细胞癌预后具有较强的预测能力。

透明细胞肾细胞癌中ENO2的表达及临床意义

目的探讨烯醇化酶2(enolase 2,ENO2)在透明细胞肾细胞癌(clear cell renal cell cancer,CCRCC)中的表达及临床意义。方法采用免疫组化MaxVision法检测ENO2蛋白在97例CCRCC及配对正常肾组织中的表达,并分析ENO2表达与临床病理特征的关系。分析TCGA数据库中542例CCRCC和72例正常肾组织中ENO2 mRNA的表达水平。利用ROC曲线分析CCRCC和正常肾组织中ENO2 mRNA和蛋白表达的敏感性和特异性。通过GEPIA在线网站分析ENO2与CCRCC患者预后的关系。TIMER在线数据分析ENO2表达与糖代谢路径关键基因HK2、ALDOA、PGK1、PKM2及LDHA的相关性。结果ENO2蛋白在CCRCC中的高表达率为71.13%,而在正常肾组织中几乎不表达,ENO2表达与ISUP/WHO分级(P=0.019)、有无肾周脂肪侵犯(P=0.028)明显相关。TCGA-CCRCC数据库中,CCRCC组的ENO2 mRNA表达均显著上调(P<0.001)。ROC曲线分析结果显示,CCRCC中ENO2 mRNA(AUC=0.959,P<0.001)和蛋白水平(AUC=0.964,P<0.001)均具有较高的特异性和敏感性。ENO2与糖代谢路径相关基因HK2、ALDOA、PGK1、PKM2和LDHA的表达呈正相关。GEPIA在线网站分析ENO2与CCRCC患者预后的关系结果提示,ENO2 mRNA高表达组的总生存期显著短于低表达组。结论ENO2在CCRCC中过表达,有助于评估ISUP/WHO分级,可辅助CCRCC的病理诊断,并可能与糖代谢异常相关。

肾透明细胞癌组织中微小RNA-3680-3p、FOX蛋白家族因子1在肾透明细胞癌中的表达及其与预后相关性分析

目的:探讨肾透明细胞癌组织中微小RNA-3680-3p(miR-3680-3p)、FOX蛋白家族因子1(FOXD1)基因表达的特点及与患者预后结局的关系。方法:采取自身病例对照研究方法,选择80例肾透明细胞癌患者的原发病灶组织及其癌旁组织进行实时荧光定量(qRT-PCR)检测,比较两组患者的miR-3680-3p、FOXD1 mRNA表达情况,并按照患者的临床病理学特点分别进行比较分析,采用生存分析方法分析miR-3680-3p、FOXD1 mRNA高表达与低表达患者的生存时间差异。结果:肾透明细胞癌患者癌组织miR-3680-3p表达低于癌旁组织,癌组织FOXD1 mRNA表达高于癌旁组织,有统计学差异(均P<0.05);在不同肿瘤直径、是否发生肿瘤病灶坏死、不同TNM分期、是否发生淋巴结转移、不同Fuhrman分级的肾透明细胞癌组织miR-3680-3p表达水平比较有统计学差异(均P<0.05);不同TNM分期、是否发生淋巴结转移、不同Fuhrman分级的肾透明细胞癌组织FOXD1 mRNA表达水平相比较有统计学差异(均P<0.05)。miR-3680-3p高表达肾透明细胞癌患者5年生存率77.14%与低表达组的62.22%比较,差异无统计学意义(P>0.05);miR-3680-3p高表达肾透明细胞癌患者生存时间长于低表达组,相比较有统计学差异(χ^(2)=4.771,P<0.05)。FOXD1 mRNA高表达肾透明细胞癌患者5年生存率59.57%低于低表达组81.82%,有统计学差异(P<0.05);miR-3680-3p高表达肾透明细胞癌患者的生存时间短于低表达组,有统计学差异(χ^(2)=5.155,P<0.05)。结论:肾透明细胞癌组织中miR-3680-3p低表达、FOXD1 mRNA高表达,并且与疾病进展、患者预后结局有关。

染色质调节因子相关的lncRNA肾透明细胞癌预后模型的构建和验证

目的构建染色质调节因子(CR)相关长链非编码RNA(lncRNA)的肾透明细胞癌(ccRCC)预后模型,提高ccRCC的预后管理。方法从TCGA数据库下载ccRCC的转录组数据和临床数据,并通过“caret”R包将ccRCC样本以7∶3的比例分为训练集(166例)和验证集(71例)。基于“DESeq2”R包筛选出差异表达的CR及相关的lncRNA。构建CR与lncRNA的共表达网络,并筛选出相关系数|rs|>0.3且P<0.05的差异lncRNA。利用单因素Cox、Lasso和多因素逐步Cox回归分析,构建CR相关的lncRNA预后模型。计算训练集和验证集样本的风险评分,根据风险评分的中位数将ccRCC患者分为高、低风险组。K-M曲线和受试者操作特征(ROC)曲线评价模型,单因素和多因素Cox回归分析评估风险评分的独立预测性能。“DynNom”和“shiny”R包开发在线预测工具。单样本基因集富集分析探索风险评分与免疫微环境及免疫检查点的关系。结果本研究最终纳入237个肿瘤样本和72个癌旁正常组织样本,鉴定了1025个CR相关的lncRNA,最终筛选得到7个CR相关lncRNA(DUXAP8、AC026462.3、LINC01460、AL592494.1、AL353804.2、AC012462.1、AC009518.1)构建预后模型,并将其开发成在线工具(https://xzlmodelshiny.shinyapps.io/DynNomapp/)。高危组患者的生存率低于低危组(P<0.05),ROC曲线表明模型预测效能较好,单因素分析和多因素分析中风险评分的HR值分别为4.058(95%CI:2.530~6.508,P<0.001)和3.096(95%CI:1.887~5.080,P<0.001)。高风险组MDSC和Tregs细胞等免疫抑制细胞的浸润比例高于低风险组,趋化因子、免疫检查点及副炎症等通路的富集水平高于低风险组(P<0.05)。此外,风险评分与免疫检查点TNFRSF25和TNFSF14呈正相关(r>0.3,P<0.05)。结论本研究构建的CR相关的lncRNA风险模型可独立有效地预测ccRCC患者的预后。

EBP50和EGFR在透明细胞性肾细胞癌组织中的表达及其临床意义

目的:探究ERM结合磷酸化蛋白50(ERM-binding phosphoprotein-50,EBP50)和表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)在透明细胞性肾细胞癌(clear cell renal cell carcinoma,ccRCC)及正常肾组织中的表达及相关性,并分析二者与患者临床病理特征之间的关系。方法:用免疫组化检测原发ccRCC、转移ccRCC和正常肾组织中EBP50及EGFR的表达,并在原发ccRCC中检测EBP50和EGFR的相关性及两者与ccRCC临床病理特征的关系。结果:EBP50在原发和转移ccRCC中的阳性表达率低于正常肾组织,EGFR在原发和转移ccRCC中的阳性表达率高于正常肾组织;原发ccRCC中,EBP50的表达差异在年龄、Fuhrman分级中具有统计学意义,EGFR的表达差异在肿瘤最大径、Fuhrman分级中具有统计学意义;EBP50与EGFR的表达在原发ccRCC中呈负相关。结论:在ccRCC中,EBP50低表达,EGFR高表达,EBP50可能发挥抑癌作用,EGFR可能发挥致癌作用;EBP50可能通过抑制EGFR的表达和功能来发挥作用;EBP50和EGFR可辅助病理医师判断ccRCC的分级。

透明细胞肾细胞癌的不常见组织学形态及诊断思路

透明细胞肾细胞癌(clear cell renal cell carcinoma,CCRCC)是肾脏最常见的恶性上皮源性肿瘤,占肾细胞癌的60%~75%[1],与其他恶性肿瘤一样,具有生物异质性的普遍特征,即组织学形态异质性。CCRCC经典型组织学形态为肿瘤细胞呈巢状、腺泡状或管状结构,胞质透明,偶尔嗜酸性,伴有丰富的毛细血管网,与VHL双等位基因失活相关[2]。肿瘤细胞核级别与胞质颜色相匹配,当细胞核级别较低时(WHO/ISUP 1~2级),细胞质透明;当细胞核级别较高时,细胞质偏向嗜酸性。