桑白皮水煎总提物及拆分组分对肾阴虚水肿模型大鼠的影响

目的:研究桑白皮水煎总提物及拆分组分对肾阴虚水肿模型的影响,为桑白皮的药性研究提供参考。方法:采用尾静脉注射阿霉素结合甲状腺片灌胃法建立大鼠肾阴虚水肿模型,造模结束后灌胃给予桑白皮水煎总提物及各拆分组分4周,检测血清环磷酸腺苷(cAMP)、环磷酸鸟苷(cGMP)、睾酮(T)、雌二醇(E_2)、三碘甲状腺原氨酸(T_3)、甲状腺素(T_4)、肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)及尿蛋白等指标,考察桑白皮水煎总提物及各拆分组分对肾阴虚水肿模型大鼠的影响。结果:桑白皮水煎总提物、桑白皮多糖拆分组分和脂肪油拆分组分能显著降低血清cAMP、E_2、T_3、T_4、Cr、BUN、TG、TC及尿蛋白水平(P<0.05或P<0.01),升高血清cGMP、T的水平(P<0.05或P<0.01)。结论:中医临床认为,气为阳,血为阴,阴虚生内热,阳虚生外寒,而肾阴虚水肿病症本在肾,标在肺。桑白皮水煎总提物及其拆分组分能显著改善肾阴虚水肿模型大鼠的病理状况,提示这可能与桑白皮"味甘,性寒,归肺经""泻肺平喘,利水消肿""补虚"的性能功效有关。

葶苈子对肾阴虚水肿模型干预作用的代谢组学研究

目的:运用代谢组学方法研究肾阴虚水肿大鼠尿液代谢组学的变化及葶苈子的干预作用。方法:通过UPLC-Q-TOF-MS检测各组大鼠尿液中代谢产物的变化;运用主成分分析(PCA)、正交偏最小二乘判别分析(OPLSDA)等方法分析和筛选潜在生物标志物;应用MeV软件对生物标志物进行热度图绘制和聚类分析。结果:由40个与模型相关的生物标志物富集得到了4条显著受到干扰的代谢途径:苯丙氨酸、色氨酸、组氨酸和嘧啶代谢途径。经葶苈子干预后,模型大鼠体内多数生物标志物的水平被回调至正常水平,代谢紊乱得以纠正。结论:代谢组学可从整体代谢水平上阐释肾阴虚水肿模型以及葶苈子对其干预机制,为中医证候和中药作用机制研究提供了一种新的研究思路和方法。

基于物质与能量代谢探讨玄参水提物治疗肾阴虚水肿大鼠的“滋阴、利水”功效内涵

目的探索玄参水提物(SNAE)对肾阴虚水肿大鼠的治疗作用及对体内物质与能量代谢的影响。方法将48只雄性SD大鼠随机分为对照组、阴虚组、阴虚恢复组、阴虚水肿模型组、SNAE(2.7 g·kg^(−1))组和呋塞米(阳性药,3.6 mg·kg^(−1))组,每组8只。除对照组ig 0.9%氯化钠溶液外,其余各组均ig给予甲状腺素和利血平注射液混合物,连续10 d,制备大鼠肾阴虚模型;于第11天ip给予阴虚水肿模型组、SNAE组和呋塞米组氨基核苷嘌呤霉素(PAN)溶液,制备肾源性水肿模型,阴虚恢复组和对照组ip给予0.9%氯化钠溶液;于12 d起ig给药,每天1次。于取材的前1天禁食、不禁水12 h,阴虚组于第11天、其他组于第18天取材。取肾组织进行苏木素-伊红(HE)染色后光镜下观察、透射电镜下肾脏超微病理学观察;全自动生化仪检测血清肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、总蛋白(TP)、血浆白蛋白(ALB)以及尿液中尿蛋白(UP)水平,试剂盒法检测血清睾酮(T)、雌二醇(E_(2))、三碘甲状腺原氨酸(T_(3))、甲状腺素(T_(4))水平以及环磷酸腺苷(cAMP)/环磷酸鸟苷(cGMP);应用UPLC-Q-TOF-MS技术对各组大鼠尿液进行分析,通过多变量统计分析筛选潜在生物标志物,结合人类代谢组学数据库(HMDB)和Metlin在线数据库鉴定重要生物标志物,并将鉴定到的生物标志物导入京都基因与基因组百科全书数据库(KEGG)推测其可能的代谢通路。结果病理学结果显示,与对照组、阴虚组、阴虚恢复组相比,阴虚水肿模型组肾脏病理损伤较明显;与阴虚水肿组比较,SNAE、呋塞米对模型大鼠病理损伤程度有明显改善作用;在药效学指标上,与阴虚水肿模型组比较,SNAE能显著下调Scr、BUN、T_(4)水平(P<0.05),显著上调T、E_(2)、cAMP/cGMP、TP、ALB水平(P<0.05、0.01);代谢组学结果显示,SNAE可改善各阴虚组大鼠代谢轨迹的偏离。通过对大鼠尿液代谢产物变化的预测,得到符合要求的生物标志物共14个,包括柠檬酸、磷酸烯醇式丙酮酸、6-磷酸葡萄糖酸、尿酸、庚二酸、2-异丙基苹果酸等;涉及15条相关代谢通路,关键代谢途径主要富集于三羧酸(TCA)循环。结论SNAE通过调节能量代谢相关通路发挥“滋阴、利水”等功效,从而对肾阴虚水肿发挥治疗作用。

泽泻及其炮制品对肾阴虚水肿模型大鼠的作用机制

目的:通过研究泽泻及其炮制品对肾阴虚水肿模型大鼠的药效作用,探讨泽泻及其炮制品改善肾阴虚水肿的作用机制。方法:将42只SPF级雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、阳性药六味地黄丸组、泽泻低、高剂量组,盐泽泻低、高剂量组,每组6只。除正常组外,其余各组大鼠均通过尾静脉注射阿霉素和灌胃甲状腺素复制肾阴虚水肿模型,正常组和模型组给予等体积蒸馏水,阳性药组给予六味地黄丸(1.4 g·kg^(-1)),药物治疗组分别给予泽泻低、高剂量(1、4 g·kg^(-1)),盐泽泻低、高剂量(1、4 g·kg^(-1)),连续给药4周。末次给药后取大鼠肾脏,通过苏木素-伊红(HE)染色观察大鼠肾脏组织病理变化,放射免疫法检测血清中三碘甲状腺原氨酸(T_(3))、甲状腺素(T_(4))、促卵泡生成激素(FSH)、睾酮(T)的含量,全自动生化分析仪测定血清中肌酐(CREA)、尿素(UREA)、胆固醇(CHOL)、甘油三酯(TG)的含量;酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清中促性腺激素释放激素(GnRH),血浆中环磷酸腺苷(cAMP)、环磷酸鸟苷(cGMP)的含量,分别用免疫组织化学法和实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测肾脏中水通道蛋白(AQP)-1、AQP-2的表达和mRNA的转录水平。结果:与正常组比较,模型组大鼠体质量、尿量显著降低(P<0.01),饮水量明显增加(P<0.05),肾脏有大量炎症细胞浸润及纤维组织增生;T_(3)、T_(4)、cAMP/cGMP、CREA、FSH、AQP-1、AQP-2表达及转录水平显著上升(P<0.01),CHOL、TG含量明显升高(P<0.05),GnRH和T的含量显著降低(P<0.01)。与模型组比较,泽泻和盐泽泻低、高剂量组体质量均有所增加,其中泽泻低剂量组和盐泽泻低剂量组显著增加(P<0.01),各组大鼠尿量均有所增加,但差异无统计学意义,肾脏组织炎症细胞浸润减少;明显降低T_(4)、cAMP/cGMP、UREA、CREA、FSH、CHOL、TG的含量(P<0.05,P<0.01),升高GnRH的水平(P<0.01),其中泽泻高剂量组和盐泽泻低、高剂量组大鼠肾脏AQP-1、AQP-2 mRNA的转录水平显著下降(P<0.01)。结论:泽泻及其炮制品对肾阴虚水肿模型大鼠均有改善作用,其机制可能与下调AQP-1、AQP-2表达和纠正下丘脑-垂体-性腺(HPG)轴紊乱有关。

基于"利水消肿"功效考察麻黄水煎液对肾性水肿病症结合模型的影响

目的:基于麻黄具有"利水消肿"功效,评价麻黄对肾性水肿病症结合模型的影响,初步探讨中药性味理论。方法:采用注射用盐酸多柔比星(阿霉素)建立大鼠肾水肿模型、阿霉素以及甲状腺片建立大鼠肾阴虚水肿模型。造模成功后,模型鼠连续灌胃麻黄水煎液1. 17 g/kg、2. 34 g/kg、4. 68 g/kg 4 w。观察大鼠一般行为学、24 h尿量、24 h尿蛋白、尿素(Urea)、血浆中环磷酸腺苷(c AMP)、环磷酸鸟苷(c GMP)、血清中睾酮(T)、雌二醇(E2)、三碘甲状腺原氨酸(T3)、甲状腺素(T4)、总三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、白蛋白(Alb)、总蛋白(STP)的含量来考察麻黄对肾性水肿病症结合模型的影响。结果:造模期间,大鼠出现脱毛现象且毛发光泽度较差,饮水量增多且尿量减少,尿蛋白含量增高、肾脏系数增大、血清STP、Alb含量降低,Urea、TG、TC含量升高。肾阴虚水肿组大鼠还出现大便干结,小便赤黄,狂躁易怒,E2、T3、T4含量、c AMP/c GMP值升高,T含量降低。持续给药4w后,麻黄水煎液2. 34 g/kg、4. 68 g/kg可以显著增加肾水肿模型大鼠24 h尿量、降低24 h尿蛋白以及Urea含量、增加Alb以及STP的含量、降低TG的含量和肾脏系数。麻黄水煎液各剂量显著增加肾阴虚水肿模型大鼠24 h尿量、降低24 h尿蛋白、降低血清TC、TG的含量,使T、T4含量降至更低,反而会加重肾水肿模型大鼠的狂躁易怒现象。结论:麻黄具有明显的利尿作用,对肾水肿模型大鼠有一定的治疗效果;对肾阴虚水肿模型大鼠无治疗效果,甚至会使肾阴虚的病症加重,推测其可能与麻黄的味苦辛,性温的性味功效相关。