恶性肿瘤患者化疗前后免疫功能状况及胸腺五肽等的调节作用

目的:研究恶性肿瘤患者的免疫功能状态和调节免疫功能的治疗方法。方法:分别用免疫细胞化学法和生化法检测95例恶性肿瘤患者和18名健康人的细胞免疫功能(CD3、CD4、CD8和CD56)和体液免疫功能(C3、C4、IgA、IgM和IgG);比较不同治疗方法对患者免疫指标的影响。结果:38例初诊和47例化疗后恶性肿瘤患者与18名健康人的细胞免疫功能比较,肿瘤患者的CD3、CD4和CD4/CD8明显低于健康人,CD8(除生物治疗后)和CD56明显高于健康人,但初诊和化疗后患者间差异无统计学意义,P<0·05。经胸腺五肽(欧宁)治疗后的22例患者,CD3比例略有上升,CD4和CD4/CD8明显上升,CD8明显下降,CD56略有下降。经中药治疗的16例患者,CD4略有上升,CD8比例明显降低,CD4/CD8明显增高。肿瘤患者与健康人比较,IgG明显高于健康人;经胸腺五肽和中药治疗后,体液免疫功能无明显变化。结论:恶性肿瘤患者细胞免疫功能低下,体液免疫功能基本正常;胸腺五肽和中药治疗后均明显改善了患者的细胞免疫功能,但仍达不到健康人水平;两种治疗方法对体液免疫功能影响不大。

白细胞介素12基因修饰的Lewis肺癌瘤苗的抗肿瘤免疫作用

目的：研究白细胞介紊12（IL-12）基因修饰的Lewis肺癌瘤苗的抗肿瘤免疫作用。方法：用含IL-12基因的腺病毒载体，在体外以不同感染系数感染Lewis肺癌细胞，并分别接种于C57BL／6小鼠皮下，观察其致瘤性的变化；并用Lewis肺癌细胞及B16黑色索瘤细胞再次攻击免疫后的C57BL／6小鼠，观察肿瘤发生情况。结果：以各种感染系数AdcMVIL-12制备的瘤苗，接种于小鼠皮下后，无肿瘤生长，完全消除了Lewis肺癌细胞的致瘤性；瘤菌注射6d后，用Lewis肺癌细胞再次攻击，仍无肿瘤生长，抑瘤率达100％；用B16黑色索瘤细胞攻击，10-12d均有肿瘤生长，说明此瘤苗具有肿瘤特异性。结论：AdCMVIL-12能消除Lewis肺癌细胞的致瘤性，并能诱导显著的抗肿瘤免疫反应，对肿瘤的复发及转移有较好疗效。

小鼠肠癌HSP70多肽复合物的纯化及其抗肿瘤免疫效应

目的:应用AKTA-purifier100液相层析系统,建立分离和纯化热休克蛋白70(HSP70)多肽复合物的方法,并观察其抗肿瘤免疫保护效应。方法:采用DE-AE-Sepharose离子交换层析和ADP-Ag-arose亲和层析,从热处理的BALB/c鼠源性结肠癌细胞(CT26)制备裂解液中分离、纯化HSP70多肽复合物,并通过主动免疫保护实验观察其抗肿瘤免疫效应。结果:纯化蛋白经鉴定为相对分子质量70×103左右的HSP70多肽复合物;平均1g湿重肿瘤细胞可获得63.63μgHSP70多肽复合物;HSP70主动免疫的小鼠可抵抗CT26细胞的攻击。结论:用此层析法可分离纯度较高的HSP70,并可诱导明显的抗肿瘤免疫保护效应。

健脾为主中药对人胃癌移植瘤裸鼠肿瘤生长与转移及红细胞免疫功能影响的实验研究

目的观察健脾为主中药(胃肠安)对人胃癌移植瘤裸小鼠肿瘤生长、转移和红细胞免疫功能的影响。方法采用人胃癌细胞SGC-7901裸小鼠脾包膜下移植,实验动物32只,随机分为3组。中药组10只,予胃肠安煎剂灌胃,1次/d;西药组10只,予5-FU腹腔注射,1次/周;对照组12只,予生理盐水灌胃,共治疗12周。观察肿瘤形态学改变并应用郭峰法测定红细胞C3b受体花环率(RCR)和免疫复合物花环率(RICR)。结果中药组、西药组的瘤质量、瘤块体积和肿瘤转移与对照组差异有统计学意义,P<0.05;中药组RCR,RICR均显著高于其他两组,P<0.05,与接种前差异无统计学意义,P>0.05。经多元回归分析,瘤质量、瘤块体积与肿瘤转移数量与红细胞免疫关系有显著关系。结论健脾中药能显著调节红细胞免疫功能,其抑瘤作用与增强C3b受体活性,减少体内免疫复合物堆积,改变红细胞免疫功能紊乱有关。

多糖的抗肿瘤作用及对免疫功能的影响

目的:研究多糖成分的抗肿瘤作用及对小鼠免疫功能的影响。方法:观察多糖对小鼠移植性S180实体瘤生长对免疫低下小鼠溶血素生成及小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响。结果:多糖对小鼠移植性S180实体瘤具有明显的抑制作用,多糖具有拮抗环磷酰胺对小鼠血清溶血素生成的抑制作用,明显增强免疫低下小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬功能。结论:多糖对小鼠移植性S180实体瘤具有明显的抑制作用,多糖具有拮抗环磷酰胺对小鼠血清溶血素生成的抑制作用,明显增强免疫低下小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬功能。

鱼油脂肪乳与中长链脂肪乳对胃肠道肿瘤患者肠外营养术后细胞免疫及炎症反应的影响

【目的】探讨鱼油脂肪乳与中长链脂肪乳肠外营养对胃肠道肿瘤患者术后细胞免疫及炎症反应的影响。【方法】选取本院2013年10月至2014年10月收治的胃肠道肿瘤术后行肠外营养患者70例，随机分为对照组和观察组，每组各35例。两组患者均接受等氮、等热量的全肠外营养支持：对照组患者术后24h内、7d补充中长链脂肪乳；观察组患者术后24h内、7d补充中长链脂肪乳联合鱼油脂肪乳。检测两组患者术后d。及d8静脉血中T淋巴细胞亚群（CD3、CD4、CD8细胞）百分比及CD4／CD8比值、单核细胞数目、单核细胞人类白细胞DR抗原（HLA_DR）表达百分比、白细胞介素-1β（IL-1β）、白细胞介素-6（IL-6）以及C反应蛋白（C reactive protein，CRP）含量，并统计两组患者术后并发症的发生情况。【结果】术后d1，两组患者细胞免疫功能指标及炎症反应指标相比较，差异无统计学意义（P〉0.05）；术后d8，观察组患者CD3、CD4细胞百分比、CD4／CD8比值、单核细胞数目和HLA-DR表达百分比显著高于对照组，差异具有统计学意义（P〈0．05）；观察组患者IL-18、IL-6以及CRP含量均显著低于对照组，差异具有统计学意义（P〈0.05）；观察组并发症的发生率显著低于对照组，差异具有统计学意义（P〈0.05）。【结论】胃肠道肿瘤患者术后以鱼油脂肪乳营养支持能够提高患者细胞免疫功能，减轻患者术后的炎症反应，降低术后并发症的发生率，值得临床推广应用。

生物免疫疗法治疗腹部恶性肿瘤13例分析

目的：探讨生物学治疗在腹部恶性肿瘤中的作用。方法：对13例腹部恶性肿瘤患者经手术、生物免疫（DC、CIK、Tal）等方法治疗。结果：13例经手术均获成功。在生物免疫治疗方法下观察6～8个月,13例除1例死于多器官功能衰竭外,其余均良好生存,血液中免疫细胞大幅增加,肿瘤标记物下降（P〈0.05）,复查未发现肿瘤复发及转移情况。结论：生物免疫治疗作为恶性肿瘤新兴疗法,在腹部恶性肿瘤患者的治疗方面发挥了优越的作用。

hMIP-1β基因修饰瘤苗体内诱导抗肿瘤免疫效应的研究

目的:探讨人巨噬细胞炎性蛋白-1β(hMIP-1β)基因修饰瘤苗体内诱导的抗肿瘤免疫效应。方法:通过重组腺病毒载体介导将hMIP-1β基因导入CT26细胞中,X-gal染色法检测基因转染效率;ELISA法检测hMIP-1β基因修饰CT26细胞培养上清中hMIP-1β的含量;Boyden趋化小室法检测培养上清对CD4+T细胞、CD8+T细胞、NK细胞及未成熟树突状细胞(imDCs)的趋化作用;制备hMIP-1β基因修饰的CT26细胞瘤苗并免疫BALB/c小鼠,观察其诱导免疫细胞的杀伤活性和保护性免疫反应。结果:腺病毒载体可介导hMIP-1β基因转染CT26细胞和表达(X-gal染色的阳性率>95%),培养上清中hMIP-1β水平为980pg/mL,并对CD4+T细胞、CD8+T细胞、NK细胞及im-DCs有显著的趋化作用,与转染对照基因LacZ的CT26细胞及野生型CT26细胞比较差异均有统计学意义,P<0.01。hMIP-1β基因修饰的CT26细胞瘤苗免疫小鼠能有效诱导肿瘤特异性CTL活性和非特异性NK活性,产生明显的免疫保护作用,可抵抗肿瘤细胞的再攻击,成瘤率降低,肿瘤生长速度减慢,小鼠生存期延长。结论:hMIP-1β基因修饰瘤苗可诱导产生有效的抗肿瘤免疫保护作用,有希望成为预防肿瘤转移与复发的有效手段。

SLC基因修饰对肿瘤细胞疫苗免疫效果的初步研究

目的:构建次级淋巴组织趋化因子(secondary lymphoid-tissue chemokine,SLC)基因修饰的趋化型恶性黑色素瘤疫苗,并初步研究其免疫效果。方法:SLC基因转染小鼠黑色素瘤细胞B16,并用适当条件的丝裂霉素处理,制备趋化型肿瘤细胞疫苗。在体外,利用趋化小室法检测趋化型疫苗培养上清对小鼠脾淋巴细胞的趋化活性。在体内,用趋化型疫苗免疫小鼠,检测脾淋巴细胞的CTL活性,并观察疫苗免疫对B16移植瘤生长的影响。结果:筛选获得了SLC基因转染的小鼠黑色素瘤B16细胞,以100μg/mL丝裂霉素处理1.5h,制备趋化型肿瘤细胞疫苗。趋化型疫苗在体外培养48h后,其培养上清对淋巴细胞具有明显的趋化活性。与野生型疫苗相比,用趋化型疫苗免疫后,小鼠脾淋巴细胞的CTL活性更强,小鼠免疫后再次接种B16细胞,肿瘤的生长受到更明显的抑制。结论:成功构建了SLC基因修饰的趋化型黑色素瘤疫苗,并在体内外初步检测到该疫苗对抗肿瘤免疫的影响和对移植瘤生长的抑制,该疫苗有可能被应用于恶性黑色素瘤的免疫治疗。

肿瘤病人机体免疫状态与化疗效果的临床研究

目的观察低免疫状态下的恶性肿瘤病人．经使用不同剂量的免疫调节剂改善机体免疫状态后再行化疗与未使用免疫调节剂化疗二者的疗效，为提高化疗效果及白介素-2的用量提供依据。方法将156例病人随机分为3组：1．单纯化疗组。2.小剂量免疫调节剂＋化疗组。3．低剂量免疫调节剂＋化疗组。第1组病人不使用免疫调节剂直接化疗，第2组和第3组在分别肌注IL－250万单位和100万单位7日后再用相同化疗方案化疗，两个疗程后进行疗效评价。结果第二组和第三组在使用不同剂量的IL－2后，机体的免疫状态均有所改善，二者之间无明显差别。第一级化疗的有效率为26．6％，第二组和第三组的有效率分别为36.7％和34．4％，第二、三组间的有效率无明显差别，但与第一组之间有显著差异。仅在使用IL－2的费用上，第二组比第三组每个化疗疗程节约RMB约700元以上。结论小剂量免疫调节剂与低剂量免疫调节剂均可改善病人的机体免疫状态，二者无明显差异，且化疗效果好于单纯化疗组。

肿瘤相关成纤维细胞对肿瘤免疫调控作用的研究进展

肿瘤相关成纤维细胞(CAF)是肿瘤微环境中的重要组分,它通过分泌多种生长因子、趋化因子以及蛋白酶,调控肿瘤微环境中固有免疫细胞和适应性免疫细胞的募集和功能的发挥。此外,CAF分泌的胞外基质在塑造肿瘤微环境免疫抑制特性以及低氧形成的过程中也发挥着重要的促进作用。本文综述了肿瘤微环境中CAF对固有免疫细胞和适应性免疫细胞的浸润以及功能发挥的调控机制,同时针对以CAF为靶细胞进行药物开发的相关问题进行了展望,为进一步研究CAF的功能和临床应用提供科学依据。

中药汤剂对晚期恶性肿瘤患者免疫功能的影响

目的：观察中药汤剂对恶性肿瘤化疗患者免疫功能的影响。方法：191例Ⅲ～Ⅳ期恶性肿瘤患者随机分为：化疗＋中药组（治疗组）113例,单纯化疗组（对照组）78例。治疗组在第1周期化疗同时开始服用中药汤剂,并连续服用2～3个月。结果：治疗组的CD3、CD4、CD4/CD8及NK活性与对照组差异显著（P〈0.05）。结论：中药汤剂配合化疗对提高患者机体抗肿瘤免疫能力有一定的疗效。

人LIGHT和HSV-TK-EGFP基因共转染的MSCs体外抗肿瘤免疫研究

目的研究与单纯疱疹病毒的糖蛋白D竞争结合单纯疱疹病毒进入介导物(herpes virus entry mediator,HVEM)的淋巴毒素类似物(homologous to lymphotoxins,exhibits inducible expression,and competes with HSV glycoprotein D for HVEM,a receptor expressed by T lymphocytes,LIGHT)基因和单纯疱疹病毒胸苷激酶(herpes simplex virus thymidine kinase,HSV-TK)基因共转染的骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)在体外的抗肿瘤免疫功能。方法将p IRES2-LIGHT基因和HSV-TK-EGFP基因共转染小鼠骨髓间充质干细胞(MSCs/LT组),以转染空载体(MSCs/mock组)和转染HSV-TK-EGFP基因(MSCs/T组)的骨髓间充质干细胞作对照。流式细胞仪检测LIGHT分子和HSV-TK-EGFP分子在稳定转染的骨髓间充质干细胞上的表达。MTT法和ELISA法检测3组骨髓间充质干细胞在体外对T淋巴细胞的增殖以及其分泌细胞因子白介素-2(interleukin-2,IL-2)、干扰素-γ(interferon-gamma,IFN-γ)和IL-10的影响,并进一步观察3组细胞在体外向乳腺癌细胞株TUBO的迁移情况。结果流式细胞仪检测发现,MSCs/LT能稳定高表达LIGHT分子和HSV-TK-EGFP分子,在加入20μmol/L更昔洛韦诱导3天后99.6%细胞发生凋亡。体外细胞共培养实验表明,与MSCs/mock和MSCs/T组比较,MSCs/LT组骨髓间充质干细胞能显著地促进抗人CD3单抗刺激的T细胞增殖(P<0.05);同时能明显促进T细胞分泌IL-2、IFN-γ和IL-10(均P<0.05)。体外迁移实验结果表明,MSCs/LT、MSCs/mock和MSCs/T组细胞均有向乳腺癌细胞株迁移的特性,3组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论共转染人LIGHT和HSV-TK-EGFP基因的骨髓间充质干细胞稳定高表达LIGHT和HSV-TK-EGFP分子,通过促进T淋巴细胞增殖和IL-2、IFN-γ和IL-10等细胞因子的分泌而发挥抗肿瘤免疫功能。

肿瘤免疫检查点抑制剂免疫相关不良反应影响因素及其与临床疗效关系的研究进展

近年来,免疫治疗在多种肿瘤治疗中取得显著疗效,免疫治疗相关的单克隆抗体迅速发展,与此同时免疫相关不良反应也逐渐引起临床重视。多项研究发现免疫相关不良反应的发生可能与免疫检查点抑制剂疗效相关。药物类型、剂量、肿瘤类型、性别、联合用药、肠道微生物群、自身免疫性疾病史、一些生物标志物以及体质量指数、年龄、吸烟史、体力状况等个人风险因素、乙型或丙型肝炎病毒感染、一些常见基础疾病等都可能会影响免疫相关不良反应的严重程度。免疫治疗相关不良反应与疗效可能有一定的相关性,但似乎并不呈正相关,并且仅与部分不良反应有关。本文将报道肿瘤免疫检查点抑制剂治疗中免疫相关不良反应的影响因素及其与临床疗效关系的研究进展。

L-精氨酸联合整蛋白复方制剂对食管癌根治术后患者免疫功能及肿瘤标志物水平的影响

【目的】探讨L-精氨酸联合整蛋白复方制剂对食管癌根治术后患者免疫功能及肿瘤标志物水平的影响。【方法】在本院行食管癌根治术的98例患者,随机分为观察组与对照组,每组各49例。观察组患者在术后接受L-精氨酸联合整蛋白复方制剂治疗,对照组患者在术后给予葡萄糖盐水肠内营养。比较两组患者治疗前后的T淋巴细胞亚群(CD4^(+)、CD8^(+)、CD4^(+)/CD8^(+))、癌胚抗原(CEA)、糖类抗原19-9(CA19-9)、糖类抗原125(CA125)、细胞角蛋白19血清片段21-1(CYFRA21-1)、白蛋白(ALB)、前白蛋白(PA)、转铁蛋白(TRF)、尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)、丙氨酰氨基转移酶(ALT)、门冬氨酸转移酶(AST)水平。【结果】两组治疗后CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)显著高于治疗前,CD8^(+)显著低于治疗前(P<0.05),观察组治疗后CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)显著高于对照组,CD8^(+)显著低于对照组(P<0.05);两组治疗后CEA、CA19-9、CYFRA21-1、CA125显著低于治疗前,且观察组显著低于对照组(P<0.05);两组治疗后ALB、PA、TRF显著高于治疗前,且观察组显著高于对照组(P<0.05);两组治疗前、治疗后及治疗前后BUN、Scr、ALT、AST比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。【结论】L-精氨酸联合整蛋白复方制剂可改善食管癌根治术后患者的营养状态和免疫功能,降低肿瘤标志物水平。

肿瘤过继T细胞免疫治疗应用进展

肿瘤过继T细胞免疫治疗是指利用肿瘤患者自身或供者的T淋巴细胞,经体外诱导筛选或基因修饰使其获得肿瘤杀伤活性,再通过体外扩增后回输患者体内,从而发挥肿瘤杀伤效应的一种治疗方法。从最早的淋巴因子激活的杀伤细胞,肿瘤浸润淋巴细胞,到后来的基因修饰T淋巴细胞和肿瘤抗原特异性T细胞,过继T细胞免疫治疗正朝着更为精准的肿瘤靶向性和更强的肿瘤细胞杀伤力方向发展。本文概述了三十年来肿瘤过继T细胞免疫治疗应用进展。

消化系统恶性肿瘤伴发2型糖尿病患者的细胞免疫功能检测

目的:探讨2型糖尿病(T2DM)合并消化系统恶性肿瘤患者的细胞免疫功能状态。方法:采用流式细胞学技术对比检测21例健康志愿者,37例单纯T2DM患者和23例T2DM伴消化道恶性肿瘤患者的T淋巴细胞亚群和自然杀伤细胞(NK)计数。结果:单纯组和伴发组的CD4+T细胞计数和CD4+/CD8+比率明显低于对照组(P<0.05),伴发组NK细胞计数低于对照组和单纯组(P<0.05)。结论:T2DM伴消化系统恶性肿瘤患者比单纯T2DM患者有更为严重的细胞免疫功能下降状态。

清热解毒和补益中药对小鼠腹水肝癌H_(22)细胞的作用及免疫学机制比较

【目的】比较清热解毒中药和补益类中药对小鼠腹水肝癌H22细胞的作用及免疫学机制。【方法】选择冬凌草、半枝莲为清热解毒中药代表药,并与补益代表药黄芪进行比较;将50只KM小鼠随机分为模型组、冬凌草组、半枝莲组、黄芪组和热休克处理对照组(热休克组)。在活体肝癌H22腹水细胞腹腔接种后当天,冬凌草组、半枝莲组和黄芪组分别以30、 15、15 g·kg-1·d-1的剂量灌胃给药,连续12 d;热休克组小鼠以43℃热处理20 min,每4天1次,共3次;模型组不予任何处理。12 d后处死小鼠,分别抽取腹水制片,光镜下观察细胞形态,并采用免疫组化法检测腹水CD4+、CD8+T细胞表达。【结果】冬凌草组、半枝莲组和热休克组见腹水肝癌H22细胞大量坏死和凋亡,黄芪组对肿瘤细胞形态无明显影响;冬凌草组和半枝莲组腹水中CD4+、CD8+表达均升高,而热休克组则主要是CD8+表达升高,黄芪组以CD4+表达升高为主。【结论】清热解毒中药可致小鼠腹水肝癌H22细胞坏死和凋亡,机制可能与其提高细胞免疫功能,从而增强机体对肿瘤细胞的免疫杀伤能力有关。黄芪未见有直接杀伤肿瘤细胞的作用,其抗肿瘤作用可能主要是通过提高CD4+的表达而实现的。

早期肠内营养对胃癌行全胃切除术后患者免疫功能的影响

目的探讨早期肠内营养对全胃切除术后患者免疫功能的影响。方法46例全胃切除手术患者,随机分为肠外营养(PN)组(24例)、肠内营养(EN)组(22例)。EN组术后第1天起经鼻饲管输注能全力。分别于术前1 d及术后1 d、8 d取外周血检测B淋巴细胞、IgA、IgG、IgM、淋巴细胞总数、CD3、CD4、CD8、CD4/CD8、NK细胞活性等免疫指标。结果术后8 d两组B淋巴细胞数均无明显改变,EN组IgA、IgG、IgM、淋巴细胞总数、CD3、CD4、及CD4/CD8及NK细胞活性明显回升,CD8则回落正常水平,而PN组CD8仍处高水平,其余指标处于低水平,两组间差异有显著性(P<0.05)。结论早期肠内营养可增强胃癌术后免疫功能。