γ射线辐照外周血单个核细胞对肿瘤细胞杀伤作用的研究

目的:观察γ射线辐照外周血单个核细胞对培养人前列腺癌细胞系PC-3细胞的杀伤作用。方法:实验设PC-3P肿瘤细胞对照组、单纯外周血单个核细胞对照组、照射和未照射的外周血单个核细胞与肿瘤细胞共培养组,照射剂量为1Gy,吸收剂量率为17Gy/min。利用吖啶橙/溴化乙锭(AO/EB)荧光双染色法和MTT比色法,观察外周血单个核细胞对PC-3细胞的杀伤情况。结果:外周血单个核细胞在照射后体外培养至144h有大量细胞死亡,存活细胞明显少于未照射组,培养至240h时,照射与非照射组中存活的外周血单个核细胞均减少,但是在照射的各组中减少更为明显。在外周血单个核细胞与PC-3肿瘤细胞共培养时,照射组在培养至96h时,γ射线照射外周血单个核细胞对前列腺癌细胞的杀伤作用明显增强,杀伤活性明显增加。结论:γ射线辐照对某些外周血单个核细胞有损伤作用,但是γ射线辐照的外周血单个核细胞其杀伤肿瘤细胞活性增强。

^(103)钯胆管放射性支架释放的γ射线诱导胆管癌细胞凋亡的研究

目的探讨103钯(103Pd)释放的γ射线治疗胆管癌的作用机制。方法用MTT法分析103Pd释放的γ射线对胆管癌细胞生长的影响,用电镜、DNA凝胶电泳和流式细胞仪观察细胞形态和凋亡率的变化。结果103Pd释放的γ射线明显抑制胆管癌细胞生长。5.333 mci剂量的γ射线诱导出典型的细胞凋亡特征,如凋亡小体、特征性亚G1峰等。6.645 mci以上剂量的γ射线导致细胞坏死。结论γ射线诱导胆管癌细胞凋亡可能是放射治疗胆管癌的重要机制之一,103Pd释放的γ射线诱导胆管癌细胞凋亡与照射剂量有密切关系。

X射线照射对人鼻咽癌细胞株MDR1及P-gp表达影响的研究

目的:探讨X射线照射前后鼻咽癌CNE-1细胞多药耐药基因(MDR1)及其糖蛋白(P-gp)的表达随时间变化情况,及其照射与鼻咽癌细胞多药耐药的关系。方法:对CNE-1细胞进行X射线照射。利用RT-PCR检测照射前后细胞MDR1的表达;Western blotting检测照射前后P-gp的表达;MTT法检测照射前后顺铂对细胞的半数抑制率。结果:MTT法检测照射前CNE-1细胞的IC50值为(1.11±0.05)μg/mL,照射后第7、14、21、28和35天的IC50值均比照射前增高,其值分别为(1.56±0.10)、(2.41±0.11)、(3.24±0.13)、(2.65±0.09)和(1.83±0.15)μg/mL;RT-PCR检测照射前CNE-1细胞MDR1的半定量值为0.47±0.02,照射后第7、14、21、28和35天MDR1的表达比照射前明显增高,其值分别为0.63±0.02、0.86±0.05、0.75±0.07、0.57±0.03和0.58±0.04;Westernblotting检测照射前CNE-1细胞P-gp的半定量值为15.55±1.02,照射后第14、21天比照射前明显增高,其值分别为23.29±1.83、28.98±2.14。结论:X射线照射可引起CNE-1细胞MDR1及P-gp表达增强,同时CNE-1细胞对顺铂产生抵抗。

极低频电磁场诱导人骨肉瘤细胞凋亡及其机制研究

目的：探索极低频电磁场对人骨肉瘤细胞增殖凋亡的影响及其分子机制。方法：采用50 Hz、1 mT 的极低频电磁场作用于人骨肉瘤细胞MG－63，通过MTT法检测MG－63细胞的存活率，通过流式细胞术检测MG－63细胞的凋亡率及活性氧水平，并检测 MG－63细胞给予活性氧抑制剂 N－乙酰半胱氨酸（ NAC ）及p38 MAPK抑制剂SB203580作用后细胞凋亡率的变化；通过蛋白质印迹法检测极低频电磁场处理及NAC干预后MG－63细胞p38 MAPK蛋白水平。结果：极低频电磁场能够显著抑制MG－63细胞的存活率，诱导MG－63细胞凋亡及活性氧生成；给予2．5 mmol／L NAC或SB203580干预后MG－63细胞凋亡率显著下降；极低频电磁场处理MG－63细胞后胞内p38 MAPK表达增多，而NAC干预后磷酸化p38 MAPK减少。结论：极低频电磁场可诱导人骨肉瘤细胞MG－63凋亡，其机制可能与活性氧生成增加、p38 MAPK激活有关。

汉防己甲素增加乳腺癌细胞放射敏感性的实验研究

目的:研究汉防己甲素(tetrandrine,Tet)是否增加人乳腺癌细胞对γ射线敏感性,并研究其作用机制及p53基因的作用。方法:采用克隆形成分析法检测Tet和γ射线对人乳腺癌细胞的作用,使用流式细胞术检测细胞在Tet及γ射线作用后各周期的分布情况,Westernblotting检测Tet及γ射线对CyclinB1和Cdc2的影响,应用分裂指数法检测细胞进入有丝分裂期的情况。结果:突变型MCF7ADR细胞在受到γ射线照射后,明显阻滞于G2期;Tet可以降低这种阻滞,显著增加γ射线的杀伤作用,其增敏比为1.51。p53野生型MCF7细胞在γ射线照射后,阻滞于G1期和G2期;加入Tet,阻滞作用降低不明显,增敏比为1.10,表明细胞受照射后诱导的周期阻滞与p53基因功能有密切关系,Tet增加γ射线的杀伤作用与p53基因功能有关;进一步研究显示,细胞在受到γ射线照射后,其CyclinB1与Cdc2蛋白表达水平明显降低,分裂指数也明显降低;在用γ射线处理后,CyclinB1与Cdc2蛋白的表达水平明显增高,分裂指数明显增高。结论:Tet是一种G2期阻滞清除剂,能显著增加γ射线对人乳腺癌细胞的杀伤作用,这种作用与细胞的p53基因功能有关。

拓扑替康联合放射线对人肺腺癌细胞的作用

目的:探讨拓扑替康(TPT)对人肺腺癌细胞的放射增敏作用及机制。方法: 用克隆形成试验检测TPT对人肺腺癌细胞放射效应的影响;用流式细胞技术检测TPT联合放射线作用后人肺腺癌细胞的周期分布。结果:按照多靶单击模型拟合单纯照射组及加药照射组的细胞放射存活曲线,两组的D0、Dq 及N 值分别为1. 605、1 .734 和2 .946;1 .340、0. 587 和1.550。放射增敏比(SERD0)为1 .2。流式细胞仪分析显示,单纯照射组的S期细胞比例较空白对照组明显增高,加药照射组细胞S期堆积被消除。结论:TPT对人肺腺癌细胞具有放射增敏作用。其机制与TPT抑制人肺腺癌细胞放射损伤的修复并杀伤对放射线不敏感的S期细胞有关。