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Ern1调控肿瘤免疫原性机制的初步探索
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作者 李莫寒 夏琳 马瑜婷 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期897-904,共8页
目的:探讨内质网跨膜蛋白IRE1(由Ern1编码)对肿瘤细胞免疫原性和成瘤性的影响与机制。方法:挖掘肿瘤公共数据库中ERN1表达水平和患者生存的关联性。利用CRISPR-Cas9技术敲除小鼠肿瘤细胞系MCA205和TC-1的Ern1基因,借助CCK-8、流式细胞术... 目的:探讨内质网跨膜蛋白IRE1(由Ern1编码)对肿瘤细胞免疫原性和成瘤性的影响与机制。方法:挖掘肿瘤公共数据库中ERN1表达水平和患者生存的关联性。利用CRISPR-Cas9技术敲除小鼠肿瘤细胞系MCA205和TC-1的Ern1基因,借助CCK-8、流式细胞术、ELISA、荧光素酶报告系统、皮下植瘤、预免疫-再刺激等实验分析Ern1对肿瘤细胞体外增殖和体内成瘤能力、浸润肿瘤的免疫细胞比例、衣霉素诱导免疫原性细胞死亡和抗肿瘤效应T细胞活化的影响,比较Ern1^(-/-)肿瘤在正常小鼠和Ifnar^(-/-)小鼠体内生长速度的差异。结果:对多个癌种而言,肿瘤组织ERN1的表达水平与患者总生存时间呈负相关。虽然敲除Ern1不影响肿瘤细胞的体外增殖能力,但其在正常小鼠皮下的成瘤能力大幅降低,甚至会自发消退。与野生型相比,Ern1^(-/-)肿瘤内中性粒细胞显著增多,CD4^(+)T细胞浸润减少。衣霉素诱导内质网应激后,Ern1^(-/-)细胞死亡更多,虽然其HMGB1释放和钙网蛋白暴露有所减少,但IFN-α/β分泌增多,能更强地激活效应T细胞分泌IFN-γ。与正常小鼠相比,Ifnar^(-/-)免疫缺陷小鼠体内Ern1^(-/-)肿瘤生长速度显著加快。结论:Ern1缺失可促进内质网应激肿瘤细胞的Ⅰ型干扰素应答,增强其免疫原性,促进抗肿瘤T细胞分泌IFN-γ,阻碍肿瘤生长。 展开更多
关键词 未折叠蛋白反应 肿瘤免疫原性 干扰素 内质网应激
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反义IGF-I基因对人7402肝癌细胞肿瘤免疫原性影响的研究 被引量:1
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作者 张力 王小宁 李树浓 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 1996年第4期285-288,共4页
本研究利用基因治疗方法中的反义技术,通过脂质体包裹反义胰岛素样生长因子-I(IGF-I)基因导入人7402肝癌细胞株,研究肿瘤细胞表面MHC分子的表达和其对LAK细胞杀伤的敏感性。结果表明,反义IGF-I基因转染的人7402肝癌细胞,经潮霉素筛选后,... 本研究利用基因治疗方法中的反义技术,通过脂质体包裹反义胰岛素样生长因子-I(IGF-I)基因导入人7402肝癌细胞株,研究肿瘤细胞表面MHC分子的表达和其对LAK细胞杀伤的敏感性。结果表明,反义IGF-I基因转染的人7402肝癌细胞,经潮霉素筛选后,Northern Blot分析显示反义IGF-I RNA表达阳性,MHC Ⅰ类和Ⅱ类抗原的表达水平高于亲本7402细胞。LAK细胞对反义IGF-I基因转染的人7402肝癌细胞的杀伤活性明显高于亲本7402细胞组(P<0.05)。说明反义IGF-I基因转移至该肝癌细胞,可提高肿瘤的MHC Ⅰ类和Ⅱ类分子的表达,显示肿瘤细胞的免疫原性增强,并可提高LAK细胞对其杀伤的敏感性。 展开更多
关键词 反义IGF-I基因 人7402肝癌细胞 肿瘤免疫原性 影响
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ATF6对骨肉瘤MCA205细胞免疫原性的调控作用及其机制的初步探索 被引量:1
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作者 黄恩厚 李莫寒 +2 位作者 李培培 夏琳 马瑜婷 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第8期714-723,共10页
目的:探讨活化转录因子6(ATF6)对骨肉瘤细胞MCA205免疫原性的影响,初步解析其调控机制。方法:利用CRISPR-Cas9技术敲除MCA205细胞的Atf6基因,借助CCK-8实验、细胞能量代谢检测、流式细胞术、ATP检测试剂盒、干扰素刺激响应元件(ISRE)-... 目的:探讨活化转录因子6(ATF6)对骨肉瘤细胞MCA205免疫原性的影响,初步解析其调控机制。方法:利用CRISPR-Cas9技术敲除MCA205细胞的Atf6基因,借助CCK-8实验、细胞能量代谢检测、流式细胞术、ATP检测试剂盒、干扰素刺激响应元件(ISRE)-荧光素酶报告细胞实验和qPCR法分别检测野生型(WT)和Atf6^(-/-)MCA205细胞在PBS或衣霉素(Tm)处理后的活力、线粒体耗氧速率(OCR)和胞外酸化速率(ECAR)、磷脂酰丝氨酸外翻和细胞膜通透性、胞内钙离子动员、胞内外ATP浓度、IFN-a/β分泌和干扰素刺激基因(ISG)的表达水平。在免疫系统健全的小鼠皮下接种WT或Atf6^(-/-)MCA205细胞,比较两者的成瘤速度、肿瘤组织基因转录图谱、局部抗肿瘤效应T细胞活化有无差异。将WT和Atf6^(-/-)MCA205细胞分别接种于nu/nu小鼠背部两侧皮下,或将Atf6^(-/-)MCA205细胞分别接种于免疫系统健全小鼠和Ifnar^(-/-)小鼠皮下,记录肿瘤生长曲线。分别用Tm预处理的WT和Atf6^(-/-)MCA205细胞对na?ve小鼠(未经免疫刺激的小鼠)进行初次免疫,使肿瘤抗原特异性T细胞发生初次活化(prime),随后收集引流淋巴结细胞并进行体外再刺激(boost),分析特异性T细胞再次活化有无差异。按照不同的效靶比,将NK细胞与染料标记的WT和Atf6^(-/-)MCA205细胞共培养,流式细胞术检测细胞杀伤情况。结果:PBS或Tm处理后,WT和Atf6骨肉瘤细胞活力和增殖、氧化磷酸化和糖酵解、离子霉素触发的胞内钙离子动员、胞内外ATP和IFN-a/β分泌均无显著差异。Tm处理后,Atf6细胞死亡比例低于WT细胞(P<0.01)。在免疫系统健全的小鼠体内,Atf6肿瘤的生长速度明显低于WT肿瘤(P<0.05)。然而,在缺乏T细胞的nu/nu小鼠体内,两种肿瘤生长速度的差异显著缩小。与免疫系统健全的小鼠相比,Ifnar^(-/-)小鼠体内Atf6肿瘤的生长速度略快(P<0.05)。Atf6肿瘤内免疫应答相关基因的表达、效应T细胞的活化均显著高于WT肿瘤(P<0.05)。与WT MCA205细胞相比,Atf6^(-/-)MCA205细胞与NK细胞共培养后死亡比例更高(P<0.05)。在Tm刺激后,Atf6^(-/-)MCA205细胞比WT细胞表达更多的Irf3和Irf7,前者在prime-boost实验中可刺激T细胞分泌更多的IFN-γ。结论:阻断ATF6信号通路能显著增强MCA205细胞的免疫原性,促进免疫监视,阻碍肿瘤进展。 展开更多
关键词 骨肉瘤 MCA205细胞 未折叠蛋白反应 肿瘤免疫原性 活化转录因子6 干扰素 T细胞 NK细胞
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免疫原性热休克蛋白-70在高度微卫星不稳定性结肠直肠癌中的过度表达
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作者 Banerjea A. Feakins R.M. +1 位作者 Nickols C.D. 王晓君 《世界核心医学期刊文摘(胃肠病学分册)》 2006年第5期25-26,共2页
PURPOSE: Colorectal cancers that display high-degree microsatellite instability are associated with an improved prognosis and evidence of an activated host immune response. Molecular analyses have suggested that heat ... PURPOSE: Colorectal cancers that display high-degree microsatellite instability are associated with an improved prognosis and evidence of an activated host immune response. Molecular analyses have suggested that heat shock proteins, a family of proteins that have key immunologic functions, are upregulated in these cancers. We aimed to explore the expression of heat shock proteins 70 and 110 and their relationship to microsatellite instability, survival, and other clinicopathologic parameters. METHODS: Twenty-six colorectal cancers that displayed microsatellite instability were matched by age, stage, and site in the colorectum to 26 microsatellite-stable cancers. Immunohistochemistry was used to detect expression of both markers. RESULTS: The microsatellite-unstable group showed significantly higher expression of heat shock protein 70 than the microsatellite-stable group (P = 0.006), and patients undergoing curative resections for unstable cancers had improved prognosis compared with their stable counterparts (P = 0.026). Significantly, in a multivariate survival analysis, low or absent heat shock protein 70 expression was independently associated with a poor outcome (P = 0.001). CONCLUSIONS:Heat shock protein 70 has known functions that promote antitumor immune responses. Its overexpression in colorectal cancers with microsatellite instability may be pivotal to explaining these tumors’ enhanced immunogenicity and improved prognosis. 展开更多
关键词 热休克蛋白-70 微卫星不稳定性 结肠直肠癌 肿瘤免疫原性 过度表达 HSP-70 直肠癌患者 免疫组化法检测 肿瘤免疫反应 预后不良
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低免疫原性肿瘤可诱导调节性T细胞增生 被引量:3
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作者 王艳 周乐 +2 位作者 耿宜平 司履生 王一理 《中华病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第9期583-587,共5页
目的以小鼠低免疫原性瘤细胞和高免疫原性瘤细胞与同系脾细胞混合培养为肿瘤免疫体外模型,研究培养后的脾细胞中CD4(+)CD25(+)调节性T细胞(TR)的分布,揭示肿瘤免疫逃逸的机制。方法3种不同高低免疫原性瘤细胞与同系脾细胞混合培养,建立... 目的以小鼠低免疫原性瘤细胞和高免疫原性瘤细胞与同系脾细胞混合培养为肿瘤免疫体外模型,研究培养后的脾细胞中CD4(+)CD25(+)调节性T细胞(TR)的分布,揭示肿瘤免疫逃逸的机制。方法3种不同高低免疫原性瘤细胞与同系脾细胞混合培养,建立模拟肿瘤免疫的体外模型,以放射性核素掺入法检测混合培养后的脾细胞的增殖,流式细胞术分析TR、CD4(+)干扰素(IFN)γ(+)以及CD4(+)白细胞介素(IL)10(+)T细胞分布状况,ELISA法检测混合脾细胞和肿瘤细胞培养上清液中IFNγ和IL10水平。结果高免疫原性瘤细胞FBL3或H22刺激的同系脾细胞增殖指数较低免疫原性瘤细胞D5刺激的同系脾细胞要高,分别高3倍(D5∶FBL3=4.94∶12.20)和10倍(D5∶H22=4.94∶44.60),而3种瘤细胞刺激的同种脾细胞其增殖指数均较相应的肿瘤免疫组要高(D51.9倍,FBL32.1倍,H221.1倍)。在与低免疫原性瘤细胞D5混合培养的同系脾细胞中,与高免疫原性瘤细胞FBL3或H22相比,含更多的TR(D5∶H22P<0.05)和CD4+IL10+细胞(D5∶FBL3P<0.01,D5∶H22P<0.01),上清液中含更高水平的IL10(P<0.01,P<0.01),而IFNγ水平很低(P<0.01,P<0.01)。结论低免疫原性肿瘤可诱导TR细胞的增生,TR细胞在肿瘤免疫逃逸中有重要作用。 展开更多
关键词 免疫原性肿瘤 调节性T细胞 细胞增生 肿瘤逃逸 免疫
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B7基因转导非免疫原性肿瘤B16并联合应用IFN-γ的抗肿瘤研究 被引量:3
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作者 郑述凌 张叔人 +4 位作者 王冬梅 马文波 周春霞 曲平 张友会 《中华肿瘤杂志》 CAS CSCD 北大核心 1998年第5期333-336,共4页
目的探索非免疫原性肿瘤的免疫基因治疗。方法将B71基因导入非免疫原性肿瘤细胞B16,在体外经IFNγ处理后,观察细胞表面分子的表达变化,以及肿瘤细胞在小鼠体内的成瘤性。结果单独B7基因转导的B7+B16在小鼠体内... 目的探索非免疫原性肿瘤的免疫基因治疗。方法将B71基因导入非免疫原性肿瘤细胞B16,在体外经IFNγ处理后,观察细胞表面分子的表达变化,以及肿瘤细胞在小鼠体内的成瘤性。结果单独B7基因转导的B7+B16在小鼠体内持续生长。体外用IFNγ处理肿瘤细胞,可明显增加细胞表面MHCI类分子的表达,与B7-B16比较,B7+B16在小鼠体内的成瘤性明显降低。结论单独B7基因导入并表达,不能改变B16在体内恶性增殖的特性。同时提高细胞表面B7与MHCI分子的表达,两者可协同发挥作用,诱发肿瘤排斥。 展开更多
关键词 肿瘤 免疫原性肿瘤 B7-1基因 干扰素γ
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肾癌PD-1/PD-L1的作用及抗体治疗的研究现状 被引量:2
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作者 张冰 张建军 瞿海龙 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2016年第11期1885-1887,共3页
肾细胞癌虽具有肿瘤免疫原性,但其可诱导树突状细胞分化,并诱导T细胞产生耐受肿瘤的相关基因,从而使得免疫细胞的抗肿瘤功能受损。新型的免疫调节剂,如PD-1抗体,能显著增强抗肿瘤免疫功能。PD-1(程序性死亡受体-1)是ISHIDA等在1... 肾细胞癌虽具有肿瘤免疫原性,但其可诱导树突状细胞分化,并诱导T细胞产生耐受肿瘤的相关基因,从而使得免疫细胞的抗肿瘤功能受损。新型的免疫调节剂,如PD-1抗体,能显著增强抗肿瘤免疫功能。PD-1(程序性死亡受体-1)是ISHIDA等在1992年发现的一种免疫抑制性受体,属于CD28/CTLA-4家族,可调节抑制性信号,在肿瘤微环境中T细胞活化的效应阶段发挥其抑制活性。 展开更多
关键词 PD-1 CD28/CTLA-4 抗体 肿瘤免疫功能 免疫抑制性受体 肿瘤免疫原性 T细胞活化 治疗
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华蟾毒精对B16及RMA-S细胞主要组织相容性复合体Ⅰ类分子及其相关基因表达的影响
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作者 张瑾 史祺云 +3 位作者 程莎 曹淑芳 常豪 宋宇 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2014年第4期71-75,共5页
试验旨在考察华蟾毒精(CBG)单体对B16和RMA-S细胞MHC-Ⅰ类分子及其相关基因表达的影响。通过MTT法检测CBG对B16和RMA-S细胞生长的影响;流式细胞术检测CBG对B16和RMA-S细胞表面MHC-Ⅰ分子表达的影响;荧光定量PCR检测CBG对B16和RMA-S细胞... 试验旨在考察华蟾毒精(CBG)单体对B16和RMA-S细胞MHC-Ⅰ类分子及其相关基因表达的影响。通过MTT法检测CBG对B16和RMA-S细胞生长的影响;流式细胞术检测CBG对B16和RMA-S细胞表面MHC-Ⅰ分子表达的影响;荧光定量PCR检测CBG对B16和RMA-S细胞蛋白酶体相关基因(LMP2、LMP7)和ATP结合盒(ATP-binding cassette,ABC)转运蛋白(TAP1、TAP2)基因mRNA表达的影响。结果显示,CBG对B16和RMA-S细胞MHC-Ⅰ表达的影响均不显著(P>0.05),但高浓度CBG可不同程度提高LMP2、LMP7、TAP1、TAP2基因mRNA表达水平。结果表明,CBG可能具有通过上调LMP2、LMP7、TAP1、TAP2基因表达水平来增强肿瘤自身免疫原性的潜能。 展开更多
关键词 华蟾毒精 主要组织相容性复合体I类分子 肿瘤免疫原性
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microRNAs在肿瘤免疫中的调控作用 被引量:1
9
作者 刘荣花 储以微 《生命科学》 CSCD 2012年第5期415-420,共6页
microRNAs(miRNAs)是一类转录后调控基因表达的内源性非编码微小RNA。愈来愈多的研究显示,miRNAs在肿瘤免疫应答中发挥重要调控作用。一方面,miRNAs通过转录后调控ICAM(intercellularadhesion molecule)、B7(CD80/86)和HLA-G(human leuc... microRNAs(miRNAs)是一类转录后调控基因表达的内源性非编码微小RNA。愈来愈多的研究显示,miRNAs在肿瘤免疫应答中发挥重要调控作用。一方面,miRNAs通过转录后调控ICAM(intercellularadhesion molecule)、B7(CD80/86)和HLA-G(human leucocyte antigen-G)等肿瘤表面分子的表达,影响肿瘤的免疫原性;另一方面,miRNAs通过平衡肿瘤局部的细胞因子微环境或调控肿瘤免疫相关细胞的分化、发育及功能发挥,调节机体抗肿瘤免疫应答。为后续深入研究肿瘤与宿主的相互作用机制,以及发展更有效的肿瘤生物治疗手段,就目前miRNAs在肿瘤免疫中的调控作用的研究进展做一综述。 展开更多
关键词 MICRORNAS 肿瘤免疫 肿瘤免疫原性 肿瘤微环境
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带叠氮基连接臂的二糖的合成
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作者 刘振东 李青 +2 位作者 王佳宁 蔡孟深 李中军 《厦门大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 1999年第S1期40-40,共1页
关键词 叠氮基 连接臂 北京医科大学 药学院 二糖 肿瘤免疫原性 细胞粘附 肿瘤抗原 癌细胞转移 寡糖
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热休克蛋白70在赛来昔布联合热疗治疗胰腺癌中的作用
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作者 刘丽燕 王兴鹏 +2 位作者 姜立新 吴恺 杨佳芳 《中华胰腺病杂志》 CAS 2009年第2期126-127,共2页
热休克蛋白(HSP)又被称为是“伴侣蛋白”,它在细胞生长、发育、分化、基因转录等功能方面发挥重要作用,在多种肿瘤细胞表面都有它过度表达的现象。近年来的研究发现,HSP参与机体特异的抗肿瘤免疫反应,且HSP表达量与肿瘤免疫原性... 热休克蛋白(HSP)又被称为是“伴侣蛋白”,它在细胞生长、发育、分化、基因转录等功能方面发挥重要作用,在多种肿瘤细胞表面都有它过度表达的现象。近年来的研究发现,HSP参与机体特异的抗肿瘤免疫反应,且HSP表达量与肿瘤免疫原性强弱密切相关,与肿瘤的恶性程度及患者的预后密切相关。 展开更多
关键词 热休克蛋白70 赛来昔布 胰腺癌 肿瘤细胞表面 肿瘤免疫反应 治疗 热疗 肿瘤免疫原性
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