增生性瘢痕的形成与组织中肿瘤坏死因子含量相关性的研究

目的为了解肿瘤坏子因子-α(TNF-α)在不同时期增生性瘢痕组织中的含量及分布情况,探讨TNF-α在增生性瘢痕发生、发展过程中的作用。方法利用TNF-α、巨噬细胞和T淋巴细胞的单克隆抗体对实验收集的不同时期增生性瘢痕组织(33例)、正常瘢痕(5例)的石蜡切片进行免疫组织化学染色。结果随着增生性瘢痕组织的逐渐成熟,TNF-α的阳性细胞的百分比呈阶段性递增趋势。结论生性瘢痕的形成可能与TNF-α在组织中的含量降低有关。

细胞因子和低氧对胰腺癌细胞表达血管内皮生长因子A、C的调节

目的：探讨细胞因子白细胞介素（IL）-1α、IL-6、肿瘤坏死因子（TNF）α、SNAP（S-nitroso—nacetyl—penicillamine）（在培养细胞中可释放N0，使细胞处于低氧状态）对胰腺癌细胞产生和分泌血管内皮生长因子（VEGF）-A、C的调节。方法：用northernblot和western blot法分别分析人胰腺癌细胞株中VEGF-A、VEGF-C基因和蛋白的表达；以IL-1α（10μg／L）、IL-6（100μg／L）、TNFα（50μg／L）或SNAP（25mg／L）刺激细胞株后用逆转录-聚合酶链式反应技术（RT—PCR）分析其VEGF-A、VEGF-C基因的表达。结果：Northern blot法显示6种胰腺癌细胞株均有4．1 kb VEGF—A基因和2．4 kb VEGF—C基因的表达；Western blot法显示这6种胰腺癌细胞株均有相对分子质量为43×10^3的VEGF-A蛋白和相对分子质量为55×10^3的VEGF-C蛋白表达。RT-PCR分析法显示：IL-1α使细胞株COL0-357产生VEGF-A、VEGF-CmRNA分别增加1～2倍、1倍；IL-6刺激细胞株CAPAN-1产生VEGF-A、VEGF-CmRNA分别增加2～5倍、1倍；TNF-α使细胞株COL0-357产生VEGF-A、VEGF-CmRNA分别减少1～2．5倍、1～2倍，使细胞株CAPAN-1产生VEGF-A、VEGF-CmRNA分别减少1倍、1．6～2．5倍；而SNAP刺激细胞株COL0-357产生VEGF-A mRNA增加5倍，刺激细胞株CAPAN-1产生VEGF-Am RNA增加4倍。结论：细胞因子IL-1α、IL-6、TNFα和SNAP通过调节血管内皮生长因子A、C的表达而影响胰腺癌细胞的生物学特性。

正清风痛宁对偏头痛模型大鼠无菌性神经源性炎症反应的抑制作用

目的:观察偏头痛模型大鼠脑干中肿瘤坏子因子α(TNF-α)和白细胞介素1β(IL-1β)的表达及脑干蛛网膜下腔炎性细胞数的变化,探讨正清风痛宁对偏头痛无菌性神经源性炎症(ANI)的抑制作用。方法:60只健康Wistar大鼠随机分为空白对照组、模型组、舒马普坦组(6mg·kg-1·d-1)、正清风痛宁低剂量组(100mg·kg-1·d-1)、正清风痛宁中剂量组(150 mg·kg-1·d-1)和正清风痛宁高剂量组(200mg·kg-1·d-1),每组10只。大鼠皮下注射硝酸甘油复制实验性偏头痛动物模型,药物干预4h后断头取脑干及其脑膜。免疫组织化学法检测大鼠脑干中TNF-α和IL-1β的表达情况,显微镜下计数阳性细胞数;HE染色观察脑干蛛网膜下腔炎性细胞数,显微镜下计数蛛网膜下腔单位面积(以视野为单位)炎性细胞数。结果:与空白对照组比较,模型组大鼠脑干中TNF-α和IL-1β表达阳性细胞数明显增多,差异有统计学意义(P<0.01);与模型组比较,正清风痛宁中、高剂量组和舒马普坦组大鼠脑干中TNF-α和IL-1β表达阳性细胞数明显减少,差异有统计学意义(P<0.05)。与空白对照组比较,模型组大鼠脑干蛛网膜下腔炎性细胞(以淋巴细胞、单核细胞为主)数明显增多,差异有统计学意义(P<0.01)。与模型组比较,正清风痛宁低、中、高剂量组和舒马普坦组大鼠脑干蛛网膜下腔炎性细胞数明显减少,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:正清风痛宁可抑制偏头痛模型大鼠的ANI,其在偏头痛治疗中有抗炎和镇痛作用。

地昔帕明对小鼠内毒素急性肺损伤的影响

目的探讨地昔帕明(DP)对脂多糖(LPS)引起的急性肺损伤的作用并初步探讨其作用机制。方法昆明种小鼠随机分为生理盐水对照组(NS组)、地昔帕明对照组(DP组)、模型组(LPS组)及地昔帕明处理组(DP+LPS组)。腹腔注射LPS建立小鼠急性肺损伤模型。造模6h后测定肺湿/干重比值(W/D)、肺泡灌洗液(BALF)中白细胞数和蛋白含量、肺组织匀浆中髓过氧化物酶(MPO)活性和丙二醛(MDA)水平,同时用ELISA法检测肺匀浆中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量。结果LPS可提高小鼠肺W/D、BALF中白细胞数和蛋白含量、肺匀浆MPO活性、MDA和TNF-α含量(P<0.01),DP处理组可有效减轻LPS所引起的上述变化(P<0.05)。结论DP对LPS导致的小鼠急性肺损伤有保护作用,其保护机制可能与抑制肺TNF-α的产生,进而减轻中性粒细胞的肺部扣押和肺组织脂质过氧化损伤的程度有关。

大黄灵仙方对胆汁IL-6及TNF-α水平的影响研究

目的探讨中药大黄灵仙方对胆石症患者胆汁白介素-6(IL-6)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达的影响。方法采集2017年12月—2019年12月在我科住院行“胆总管切开取石+T型管外流术”的胆石症患者90例,其中观察组60例,对照组30例,两组均在术后1周左右出院并嘱正常饮食并适当休息,观察组在术后第7 d时开始服用大黄灵仙方1个疗程(14 d)。两组T型管留置21 d后经造影检查确认无结石残留后拔除,若有残留者留置T管待术后第8周经T管窦道行胆道镜并钬激光碎石及取石治疗。两组均在无菌操作下分别采集患者术后第1 d、7 d、14 d、21 d清晨的空腹新鲜胆汁样本5 ml,应用酶联免疫方法检测两组胆汁标本中IL-6、TNF-α的蛋白浓度。结果术后第1 d、7 d、14 d、21 d IL-6观察组分别为(155.81±10.80)pg/ml、(122.27±6.64)pg/ml、(73.36±5.71)pg/ml、(18.15±3.27)pg/ml,对照组分别为(157.42±13.16)pg/ml、(121.52±6.21)pg/ml、(106.10±7.96)pg/ml、(38.40±3.71)pg/ml,第1 d、7 d两组比较差异无统计学意义(P>0.05);第14 d、21 d两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。术后第1 d、7 d、14 d、21 d TNF-α,观察组分别为(81.45±4.67)pg/ml、(63.25±5.08)pg/ml、(40.71±2.52)pg/ml、(8.07±0.51)pg/ml,对照组分别为(80.28±4.12)pg/ml、(61.19±5.45)pg/ml、(52.50±5.07)pg/ml、(19.93±2.00)pg/ml,第1 d、7 d两组比较差异无统计学意义(P>0.05);第14 d、21 d两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论大黄灵仙方降低胆石症患者胆汁IL-6、TNF-α的浓度。

不同干预方法对肥胖大鼠血清FFA、TNFα-的影响

目的探讨肥胖对大鼠血清游离脂肪酸(FFA)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的影响,并观察二甲双胍及游泳运动对肥胖大鼠血清FFA、TNF-α的影响。方法 SD大鼠70只随机分为正常饲养(NC)组和高脂饲养(HF)组,16周后HF组成功建立肥胖模型后,再随机分为:肥胖对照(OB)组、二甲双胍(MET)组、游泳运动(SWI)组、二甲双胍+游泳运动(MAS)组。检测干预前及干预后各组体重(BW)、空腹血糖(FPG)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TCH)、极低密度脂蛋白胆固醇(VLDL-C)、空腹胰岛素(FINS)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、血清FFA和TNF-α。结果与NC组比较,HF组大鼠BW、FPG、TG、TCH、VLDL-C、FINS、HOMA-IR、血清FFA和TNF-α水平均显著增高(P<0.05);与OB组比较,MET、SWI和MAS组大鼠BW、HOMA-IR、FFA、TNF-α均显著降低(P<0.05);大鼠血清FFA水平以及TNF-α水平与HOMA-IR呈正相关(P<0.05),血清FFA水平与TNF-α水平呈正相关(P<0.05)。结论二甲双胍和游泳运动可显著降低肥胖大鼠血清FFA、TNF-α水平,减轻肥胖大鼠机体炎症状态,改善胰岛素抵抗,血清FFA与TNF-α对胰岛素抵抗可能有协同作用。

阿魏酸钠缺血后处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用的研究

目的:探讨阿魏酸钠(SF)对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用及可能的机制。方法:40只Sprague-Dawley大鼠随机分为四组,A组:假手术组;B组:缺血/再灌注损伤组;C组:缺血后处理组;D组:SF后处理组。建立缺血后处理模型,实验结束后取出心脏,测定心肌梗死面积,TNF-α,IL-10的含量及核因子-κB的活性。结果:(1)心肌梗死面积的测定:与缺血/再灌注损伤组相比,SF后处理组明显减小了心肌梗死面积(P<0.05)。(2)心肌中TNF-α和IL-10含量的测定:TNF-α、IL-10在缺血再灌注组均升高,SF后处理组同缺血再灌注组比较TNF-α水平明显减低(P<0.05),IL-10含量则明显增高(P<0.05)。(3)NF-κB活性的测定:NF-κB活性在缺血再灌注组显著提高,与缺血再灌注组相比,SF后处理组显著阻止NF-κB活性的升高(P<0.05)。结论:适当剂量SF后处理可以减弱心肌缺血再灌注损伤,可能与其减轻NF-κB的活性,从而减弱肿瘤坏死因子-α的表达,减低由缺血再灌注损伤引起的炎症反应所致。

糖尿病肾病患者血清CTRP3、CTRP9水平及与血管钙化的关系

目的研究C1q/肿瘤坏子因子相关蛋白3(CTRP3)、C1q/肿瘤坏子因子相关蛋白9(CTRP9)水平及血管钙化率在糖尿病肾病患者中的表达情况,并探讨三者之间的关系以及对疾病发展程度影响。方法选取糖尿病肾病患者135例(患者组)为研究对象,同时另选取60例健康志愿者为对照组,通过实验室常规指标检查及X线片检查,分析受试者的基本临床资料与血管钙化情况,酶联免疫法测定糖尿病肾病患者血清CTRP3、CTRP9水平,分析糖尿病肾病患者血清CTRP3、CTRP9水平与血管钙化的关系。结果患者组Alb值显著低于对照组,患者组FPG值、CRP值、血磷值及血钙磷乘积值显著高于对照组(P<0.05)。患者组的血管钙化率显著高于对照组(P<0.05)。患者组血清CTRP3水平和血管钙化率显著高于对照组(P<0.05),CTRP9水平显著低于对照组(P<0.05)。CTRP3水平与患者年龄、病程长短、临床分期、24 h尿微量清蛋白排泄率及血管钙化率显著相关(P<0.05);CTRP9水平与患者病程长短、临床分期、24 h尿微量清蛋白排泄率及血管钙化率显著相关(P<0.05)。血清CTRP3、CTRP9水平是影响糖尿病肾病患者血管钙化的独立危险因素(P<0.05)。结论CTRP3在糖尿病肾病患者血清中高表达,CTRP9低表达,与病程、临床分期、24 h尿微量清蛋白排泄率及血管钙化有关,是影响血管钙化的独立危险因素。

急性脑梗死患者中医辨证分型与hs-CRP TNF-α水平的相关性研究

目的:探讨急性脑梗死患者中医辨证分型与超敏C反应蛋白(hs-CRP)、肿瘤坏死因子(TNF-α)水平的相关性。方法:选取85例急性脑梗死患者为研究对象,根据中医辨证分为3型:阴虚风动型、气虚血瘀型和风痰瘀阻型,同时选取40例体检健康者作为正常对照组,测定所有纳入对象的血清hsCRP、TNF-α水平,并进行组间比较分析。结果:与正常组比较,急性脑梗死患者血清hs-CRP含量和TNF-α水平明显升高,2组间比较具有极显著性差异(t=7.862,38.092;P<0.01)。血清hs-CRP含量和TNF-α水平在急性脑梗死3组中医证型中比较差异均具有统计学意义(F=4.365,8.071;P<0.05);急性脑梗死3组证型的血清hs-CRP含量从低到高的次序为:阴虚风动型、气虚血瘀型、风痰瘀阻型,两两间比较差异均有统计学意义(P<0.01);血清TNF-α水平从低到高的次序为:气虚血瘀型、阴虚风动型、风痰瘀阻型,两两间比较差异均有统计学意义(P<0.01)。结论:血清hs-CRP含量和TNF-α水平升高能反映患者的炎症反应程度,是急性脑梗死的重要危险因素,可作为中医辨证分型的客观依据。

肿瘤细胞TRAIL耐受与其受体的关系

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（TRAIL）能与含有死亡域的死亡受体DR4、DR5相结合，诱导多种肿瘤细胞发生凋亡而对正常细胞无明显毒性。但肿瘤细胞对TRAIL的耐受限制了其广泛应用于临床。受体与配体的结合是凋亡信号启动的起始及关键环节，因此肿瘤细胞发生TRAIL耐受的机制与受体的表达、定位、分布、功能等密切相关。联合其他治疗手段针对受体靶点，实现个体化治疗，有望最终克服肿瘤细胞的TRAIL耐受。

灵仙新苷对高脂血症大鼠早期动脉粥样硬化的干预作用

目的:研究灵仙新苷(clematichinenoside AR)调节血脂及抗动脉粥样硬化的作用。方法:采用高脂饲料喂饲和腹腔注射维生素D3结合腹腔注射LPS建立大鼠动脉粥样硬化模型,造模成功后灌胃给予高、中、低剂量的AR(32,16,8 mg.kg-1.d-1),8周后测定大鼠血清胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白-胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白-胆固醇(LDL-C)、肿瘤坏死因子(TNF-α)、一氧化氮(NO)及诱导型一氧化氮合酶(iNOS);取其胸主动脉进行油红O染色,观察大鼠胸主动脉内膜脂质沉积情况;取肝脏进行常规HE染色,观察肝脏病变。结果:AR高、中剂量组能显著降低高血脂症大鼠血清TC,TG,LDL-C,TNF-α,NO水平和iNOS活力,升高HDL-C水平,差异具有统计学意义(P<0.05)。同时,AR能减少主动脉内皮脂质沉积,改善肝脏的脂肪变性和炎症细胞浸润。结论:AR具有调节血脂,减轻动脉粥样硬化发生和发展的作用,该作用与其调节NO及其合酶的形成和表达相关。

辛润苦泄法对胰岛素抵抗大鼠TNF-α和PPAR-γ表达的影响

目的:研究辛润苦泄法对胰岛素抵抗大鼠肝脏和脂肪组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和过氧化物酶体增殖物激活受体-γ(PPAR-γ)表达的影响。方法:采用高糖高脂饲料喂养制作胰岛素抵抗大鼠模型,将成功造模的30只大鼠随机分为模型组、唐旨宁组和文迪雅组,每组10只。药物干预6周后,用ELISA方法定量测定血清中TNF-α水平;免疫组织化学方法检测肝脏和脂肪组织中PPAR-γ蛋白表达;RT-PCR法检测肝脏和脂肪组织中TNF-αmRNA及PPAR-γmRNA的表达。结果:高糖高脂饲料喂养6周后,模型组大鼠空腹血糖(FBG)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)和血清胰岛素(FIN)s均明显高于对照组(P<0.01),胰岛素敏感性指数(ISI)明显低于对照组(P<0.01);药物干预6周后,与模型组比较,唐旨宁组和文迪雅组大鼠血清TNF-α显著降低(P<0.01),肝脏和脂肪组织中PPAR-γ蛋白的表达均显著增高(P<0.01,P<0.05),TNF-αmRNA表达明显减少(P<0.05,P<0.01),PPAR-γmRNA表达显著增加(P<0.01)。结论:唐旨宁能明显改善胰岛素抵抗大鼠的糖脂毒性,其作用机制可能是通过下调TNF-α、上调PPAR-γ的表达而实现的。