竹节参皂苷调控核因子κB信号通路对肺癌大鼠的影响

目的:探究竹节参皂苷调控核因子κB(NF-κB)信号通路对肺癌大鼠脑神经损伤、微血管密度(MVD)及肿瘤坏死因子-β(TNF-β)表达的影响。方法:选取40只无特定病原体(SPF)级斯泼累格·多雷(SD)雄性大鼠,随机分为正常组、模型组、白术多糖组、竹节参皂苷组,每组10只,对模型组、白术多糖组、竹节参皂苷组采用肺叶支气管内灌注致癌碘化油进行肺癌建模,建模成功后,对白术多糖组灌胃80 mg/kg的白术多糖,对竹节参皂苷组灌胃40 mg/kg的竹节参皂苷,正常组不建模,正常组、模型组同期给予灌胃同体积生理盐水。采用苏木精-伊红(HE)染色法检测肺组织病理形态,TUNEL法检测大鼠脑神经损伤,ELISA法检测大鼠血清中TNF-β水平,免疫组织化学法检测肺组织MVD,蛋白质免疫印迹法检测大鼠肺组织核因子κB蛋白表达。结果:正常组肺组织结构、肺泡正常完整,模型组可见明显病理改变,与模型组比较,白术多糖组、竹节参皂苷组病理结构明显改善,且竹节参皂苷组比白术多糖组改善明显;与正常组比较,模型组海马组织细胞凋亡、MVD、核因子κB蛋白表达明显增多(P<0.05),血清中TNF-β表达明显降低(P<0.05),与模型组比较,白术多糖组、竹节参皂苷组大鼠海马组织细胞凋亡、MVD、核因子κB蛋白表达、肿瘤体积明显降低(P<0.05),血清中TNF-β表达明显升高(P<0.05),且竹节参皂苷组比白术多糖组变化显著(P<0.05)。结论:竹节参皂苷可能是通过负向调控NF-κB信号通路显著改善大鼠脑神经损伤及MVD,提高TNF-β表达水平。

吡格列酮通过下调Toll样受体/核因子-κB信号通路对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的研究过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)γ激动剂吡格列酮对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后脑组织中Toll样受体(TLR)4和核转录因子(NF)-κB及对血清中白细胞介素(IL)-6和肿瘤坏死因子(TNF)-α的影响,探讨吡格列酮对脑组织损伤的保护作用和机制。方法用线栓法制备大鼠中动脉脑缺血再灌注模型。随机将60只雄性SD大鼠分为假手术组、模型组、生理盐水干预组、吡格列酮(15 mg/kg)治疗组。脑缺血再灌注24 h后,采用神经功能缺损评分法,观察大鼠的行为学评分;氯化三苯基四氮唑(TTC)染色试验测定脑梗死体积;酶联免疫吸附(ELASA)技术测定血清中IL-6和TNF-α含量;免疫组化技术测定脑组织TLR4和NF-κB蛋白表达;逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术测定脑组织TLR4和NF-κB mRNA表达。结果与生理盐水干预组相比,吡格列酮治疗组神经功能评分显著降低(P<0.05),脑梗死体积显著减少(P<0.05),血清中IL-6和TNF-α含量显著降低(P<0.05),脑组织中TLR4和NF-κB蛋白和mRNA表达显著下调(P<0.05)。结论吡格列酮对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤有一定的保护作用,作用机制可能与其下调TLR4/NF-κB信号转导通路并降低血中炎症反应相关因子IL-6和TNF-α的含量有关。

B细胞刺激因子受体介导的核因子-κB信号通路对类风湿关节炎的B细胞的活化及表达的研究

B细胞刺激因子(BAFF)是肿瘤坏死因子(TNF)家族的成员,TALL-1,zTNF4,或THANK,BAFF是B细胞生长、发育和分化中关键的免疫调控因子[1]。BAFF主要由单核细胞、树突状细胞和T细胞分泌[1]。BAFF的刺激也会导致成熟静息的B细胞的长期存活[2]。将BAFF添加到B细胞中培养,可以促进B细胞从IgM型到IgG的类型转换[2]。

基于NF-κB信号通路探讨类风湿性关节炎炎性反应的研究进展

核转录因子κB(NF-κB)信号通路是典型的促炎信号通路,通过在炎性反应中诱导促炎细胞因子表达以发挥促炎作用。过氧化物酶体增殖物激活受体-γ(PPAR-γ)是炎性反应的重要调节因子,可通过直接或间接的竞争性抑制作用,抑制NF-κB的信号通路,从而抑制促炎细胞因子产生。类风湿性关节炎(RA)是一种慢性炎症性疾病,炎性反应是其发病的核心环节。该文基于NF-κB信号通路探讨RA炎性反应机制。

TRAF5通过调控IL-17A/NF-κB信号通路减轻氧-糖剥夺/再灌注引起的心肌细胞炎症和细胞凋亡

目的 探讨肿瘤坏死因子受体相关因子5(tumor necrosis factor receptor-associated factor 5,TRAF5)对氧-葡萄糖剥夺/再灌注(oxygen-glucose deprivation/reperfusion,OGD/R)引起的心肌细胞炎症和细胞凋亡的影响及相关分子机制。方法 体外培养大鼠心肌细胞系H9c2细胞,构建OGD/R诱导的H9c2细胞模型,以脂质体转染法将TRAF5过表达质粒(pcDNA-TRAF5)和空载质粒(pcDNA-NC)转染至OGD/R诱导的H9c2细胞。采用实时定量聚合酶链反应(quantitative real time polymerase chain reaction,qRT-PCR)法检测细胞中TRAF5基因表达,CCK-8法测定细胞活力,试剂盒法检测细胞中乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)、心肌肌钙蛋白T(cardiac troponin T,cTnT)和炎性因子水平,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot法检测细胞中相关蛋白表达。结果 与对照组比较,OGD/R组H9c2细胞中TRAF5 mRNA和蛋白表达量降低,细胞活力降低,细胞中LDH、cTnT、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1)浓度升高,细胞凋亡率升高,细胞中B淋巴细胞瘤2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)蛋白表达量降低,Bcl-2相关蛋白(B-cell-lymphoma-2 related protein,Bax)、切割型半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-3(cleaved cysteine aspartate proteolytic enzyme-3,cleaved caspase-3)、白细胞介素-17A(interleukin-17A,IL-17A)蛋白表达量及磷酸化核转录因子-κB(phosphorylated nuclear factor-κB,p-NF-κB)/NF-κB比值升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。与OGD/R组比较,OGD/R+pcDNA-TRAF5组H9c2细胞中TRAF5 mRNA和蛋白表达量升高,细胞活力升高,细胞中LDH、c TnT、TNF-α、IL-6、IL-1β、MCP-1浓度降低,细胞凋亡率降低,细胞中Bcl-2蛋白表达量升高,Bax、cleaved caspase-3、IL-17A蛋白表达量及p-NF-κB/NF-κB比值降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 TRAF5可减轻OGD/R引起的心肌细胞炎症和细胞凋亡,其作用机制可能与调控IL-17A/NF-κB信号通路有关。

基于NF-κB通路探讨痛风汤对急性痛风性关节炎模型大鼠炎症的影响机制

目的:研究痛风汤通过调控核因子-κB(NF-κB)信号通路对急性痛风性关节炎(AGA)大鼠炎症的影响。方法:将60只Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、秋水仙碱组、痛风汤H组、痛风汤M组、痛风汤L组,每组各10只。正常组和模型组每天灌胃蒸馏水,秋水仙碱组、痛风汤H组、痛风汤M组、痛风汤L组每天灌胃相应药物,共7 d,除正常组外均于灌胃第4天通过右踝关节注射尿酸钠(MSU)溶液诱导造模;检测大鼠关节肿胀体积、步态及关节炎症指数;ELISA法检测大鼠血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)、IL-1β炎症因子水平;HE染色观察大鼠踝关节滑膜组织病理学变化;Western blot检测大鼠踝关节滑膜组织NF-κB通路相关蛋白表达情况。结果:与正常组比较,模型组大鼠关节肿胀体积、步态级别、关节炎症指数、血清炎症因子水平、组织病理学程度、NF-κB通路相关蛋白水平显著升高(P<0.05)。与模型组相比,痛风汤各组大鼠关节肿胀体积、步态级别、关节炎症指数显著降低(P<0.05),且痛风汤各组剂量依赖性地降低大鼠血清炎症因子水平和踝关节炎性细胞浸润程度,下调NF-κB通路蛋白表达(P<0.05)。结论:痛风汤可能通过介导NF-κB通路来改善AGA大鼠炎症状态。

电针对类风湿性关节炎大鼠膝关节滑膜组织肿瘤坏死因子-α转换酶/核转录因子-κB信号通路的影响

目的:观察电针对类风湿性关节炎(RA)大鼠膝关节滑膜组织肿瘤坏死因子-α转换酶/核转录因子-κB(TACE/NF-κB)的影响,探讨电针抗RA的可能机制。方法 :SD大鼠随机分为正常组、模型组、电针组和非穴位组,每组10只,采用皮内注射牛Ⅱ型胶原诱发RA模型。电针组电针"足三里""悬钟"和"肾俞"穴,1次/d,共19d。非穴位组取穴位外侧旁开5mm进行针刺,方法与电针组相同。Westergren法检测血浆红细胞沉降率(ESR),速率散射比浊法检测血清C反应蛋白(CRP)和类风湿因子(RF),免疫印迹法检测膝关节滑膜组织TACE及NF-κB蛋白含量。结果:与正常组相比,模型组大鼠血浆ESR、血清CRP和RF显著升高,膝关节滑膜组织中TACE及NF-κB蛋白表达增加(P<0.01);与模型组相比,电针组大鼠ESR、CRP和RF显著降低,膝关节滑膜组织中TACE及NF-κB蛋白表达均降低(P<0.05);非穴位组与模型组比较,各项指标的差异无统计学意义(P>0.05)。结论:电针能有效调节RA大鼠关节炎性损伤状况,降低RA大鼠膝关节滑膜组织中的TACE及NF-κB蛋白表达,这可能是电针通过调节TACE/NF-κB改善RA的信号调节机制之一。

川芎嗪对溃疡性结肠炎肠粘膜过氧化物酶体增殖物激活受体γ及核因子κB的影响

目的:通过观测经川芎嗪治疗前后过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)、核因子κB(NF-κB)和肿瘤坏死因子(TNF)-α的变化,探讨川芎嗪治疗溃疡性结肠炎(UC)的作用机制。方法:以噁唑酮诱导小鼠UC模型,并随机分为实验对照组(CN)、模型组(OXZ)、川芎嗪治疗组(TMP)和0.9%氯化钠治疗对照组(NS)。观察UC炎症评价指标(DAI,大体、组织学损伤评分,MPO值);采用荧光定量PCR法检测各组肠粘膜PPARγ、NF-κBp65、TNF-αmRNA的表达量;免疫组化法检测PPARγ、NF-κBp65蛋白的表达。结果:与CN组比较,OXZ组的炎症评价指标均明显增高(P<0.01),PPARγ表达量明显下降(P<0.01)、NF-κBp65及TNF-α表达量均显著升高(P<0.01)。应用川芎嗪后,UC的炎症评价指标均较NS组明显降低(P<0.01),PPARγ表达量明显升高(P<0.01)、NF-κBp6及TNF-α表达量均下降(P<0.01)。结论:川芎嗪对UC的结肠粘膜有保护作用,其机制可能与PPARγ的激活,NF-κB的抑制,TNF-α等炎症因子表达的减低有关。

楮实子对肝星状细胞增殖、凋亡及TLR4/NF-κB/TNF-α信号通路的影响

目的 探究楮实子对肝星状细胞(HSC)增殖、凋亡及Toll样受体4(TLR4)/核因子-κB(NF-κB)/肿瘤坏死因子-α(TNF-α)信号通路的影响。方法 体外培养大鼠肝星状细胞系(HSC-T6),正常培养细胞作为空白组;使用转化生长因子-β1(TGF-β1)刺激细胞24 h后,分别添加不同质量浓度(0、1、5、10 g/L)的楮实子培养细胞,依次作为对照组、低剂量组、中剂量组、高剂量组。MTT法、Annexin V-FITC/PI双染法检测楮实子对HSC-T6细胞增殖、凋亡的影响;ELISA法检测HSC-T6细胞上清液中TNF-α、白细胞介素-6(IL-6)含量;Western blotting法检测HSC-T6细胞中TLR4、NF-κB、TNF-α蛋白表达。结果 楮实子可抑制活化的HSC-T6细胞增殖,促进其凋亡,且呈质量浓度依赖性(P<0.05);楮实子可降低活化的HSC-T6细胞上清液中TNF-α、IL-6水平,下调细胞中TLR4、NF-κB、TNF-α蛋白水平,并均呈质量浓度依赖性(P<0.05)。结论 楮实子可抑制HSC-T6细胞增殖,促进HSC-T6细胞凋亡,其机制可能与抑制TLR4/NF-κB/TNF-α信号通路激活有关。

清热解毒中药通过NF-κB信号通路治疗肿瘤的研究进展

热毒是肿瘤常见的病因之一,清热解毒中药在恶性肿瘤中医治疗中起着重要作用。研究表明,清热解毒中药可通过调节核转录因子-κB(nuclear factor kappa-B,NF-κB)信号转导通路对肿瘤起到治疗效果。本文现以NF-κB为靶标,按不同癌种分类,将清热解毒中药对肿瘤的抑制作用进行综述,包括:乳腺癌、非小细胞肺癌、结直肠癌、胰腺癌、肝癌和卵巢癌。以期为中医药开发具有靶向调控NF-κB的药物奠定基础,为中医药治疗肿瘤提供临床新思路。

丹参多酚酸对心房颤动大鼠心肌组织中VCAM-1和ICAM-1水平及ERK1/2-NF-κB信号通路的影响

目的:研究丹参多酚酸对心房颤动(房颤)大鼠心肌组织中血管细胞黏附分子1(VCAM-1)和细胞间黏附分子1(ICAM-1)水平及细胞外信号调节酶1/2-核转录因子-κB(ERK1/2-NF-κB)信号通路的影响,探讨丹参多酚酸防治房颤的可能机制。方法:48只SD大鼠随机分为对照组、房颤组和丹参多酚酸组,每组16只。舌下静脉注射氯化钙-乙酰胆碱混合液建立房颤大鼠模型。丹参多酚酸组大鼠用丹参多酚酸(4 mg·kg^-1·d^-1)灌胃,对照组和房颤组大鼠用等量生理盐水灌胃,每天1次,共4周。采用苏木精-伊红(HE)染色观察大鼠心肌组织病理形态表现,Masson染色观察心肌纤维化情况,免疫组织化学染色检测各组大鼠心肌组织中基质金属蛋白酶2(MMP-2)和基质金属蛋白酶9(MMP-9)蛋白表达水平,Western blotting法检测各组大鼠心肌组织中VCAM-1、ICAM-1、ERK1/2、磷酸化细胞外调节蛋白激酶1/2(p-ERK1/2)、NF-κB和磷酸化核转录因子κB(p-NF-κB)蛋白表达水平。结果:HE染色,对照组大鼠心肌细胞未见明显异常;房颤组大鼠心肌组织间质增多,可见炎性细胞浸润;与房颤组比较,丹参多酚酸组大鼠心肌组织间质稍多,炎性细胞浸润不明显。Masson染色,对照组大鼠心肌间质胶原纤维正常;房颤组大鼠心肌间质胶原纤维明显增多;与房颤组比较,丹参多酚酸组大鼠心肌间质胶原纤维较房颤组明显减少。与对照组比较,房颤组和丹参多酚酸组大鼠心肌组织中MMP-2、MMP-9、VCAM-1、ICAM-1、p-ERK1/2和p-NF-κB蛋白表达水平升高(P<0.05);与房颤组比较,丹参多酚酸组大鼠心肌组织中MMP-2、MMP-9、VCAM-1、ICAM-1、p-ERK1/2和p-NF-κB蛋白表达水平降低(P<0.05)。房颤组大鼠心肌组织中MMP-2和MMP-9蛋白表达水平与VCAM-1(r=0.435,P<0.01;r=0.512,P<0.01)和ICAM-1(r=0.486,P<0.01;r=0.579,P<0.01)蛋白表达水平呈正相关关系。结论:丹参多酚酸可通过抑制房颤大鼠心房组织ERK1/2-NF-κB信号通路激活,降低VCAM-1和ICAM-1水平,抑制心肌纤维化,从而发挥对房颤的治疗作用。

NF-κB及其相关因子与糖尿病认知功能障碍关系的研究进展

糖尿病认知功能障碍(cognitive impairment in diabetes,CID)是糖尿病的慢性并发症之一,临床表现主要为轻、中度认知功能障碍,学习和记忆能力下降,其发病机理尚不明确。NF-κB是原始的信号激活因子,可导致细胞机能紊乱和损伤的其他通路激活。在高糖及氧化应激等环境下,NF-κB表达增强导致NOS、MMP-9、TNF-α等因子的表达也发生改变,继而引起一系列的病理变化,导致海马神经元细胞凋亡。文中以NF-κB为切入点,探讨NF-κB及其相关因子NOS、MMP-9、TNF-α与CID的关系,为进一步深入研究CID打下基础。

TNF-α通过NF-κB信号通路对人牙周膜干细胞成骨分化调控作用的研究

目的:探讨肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)通过激活核转录因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)信号通路调控其对人牙周膜干细胞(periodontal ligament stem cells,PDLSCs)成骨分化的影响。方法:通过组织块法体外分离培养健康牙周膜来源的PDLSCs;在h PDLSCs的正常培养液、成骨诱导培养液中分别加入10 ng/m L的TNF-α,通过碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)和茜素红染色定量检测其成骨分化功能的改变,采用实时定量RT-PCR和Western bolt检测成骨相关基因的表达和NF-κB信号通路相关因子表达差异。将NF-κB信号通路抑制剂BAY 11-7082加入含有TNF-α的h PDLSCs成骨诱导培养液中,检测h PDLSCs生物学特性改变。结果:在一定浓度TNF-α刺激下,h PDLSCs的成骨分化能力减弱;同时,TNF-α能激活NF-κB信号通路,从而抑制h PDLSCs的成骨分化作用,而BAY 11-7082能逆转其抑制成骨作用。结论:炎症因子TNF-α能通过调控NF-κB信号通路调节h PDLSCs的成骨分化作用。

肿瘤坏死因子α诱导核转录因子κB信号通路在特发性肺纤维化中的作用机制

特发性肺纤维化（idiopathic pulmonary fibrosis,IPF）是一种由多种原因导致的、以弥漫性肺泡炎和肺泡结构紊乱、最终导致肺间质纤维化为特征的疾病.肿瘤坏死因子α（TNF-α）是一种细胞毒性因子,在肺纤维化的发病中起着关键作用.核转录因子κB（NF-κB）是一种多功能的核转录因子,近来研究表明,TNF-α可以通过激活NF-κB信号通路,参与肺纤维化的发生、发展.现对TNF-α介导NF-κB信号通路在IPF中的作用作一综述.

党参对慢性阻塞性肺疾病小鼠肿瘤坏死因子-α与核转录因子-κB信号通路的影响

目的研究党参对慢性阻塞性肺疾病(COPD)的治疗作用及对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)/核转录因子-κB(NF-κB)信号通路的影响。方法将70只小鼠用完全随机法分为空白组、模型组、地塞米松组(0.5 mg·kg^(-1))、补中益气丸组(3.6 g·kg^(-1))和低、中、高剂量实验组(2.6,5.2和10.4 g·kg^(-1)党参),每组10只。用经鼻滴注COPD造模液的方法复制COPD小鼠模型,造模的同时按20 mL·kg^(-1)的剂量灌胃给予相应的药物,其中空白组与模型组灌胃20 mL·kg^(-1)纯净水。各组每天给药1次,连续28 d。用肺功能测定系统检测小鼠肺功能,用酶联免疫吸附实验法测定TNF-α含量,用蛋白质印迹(Western blot)法检测肺组织NF-κB的表达水平。结果低、高剂量实验组和地塞米松组、补中益气丸组、模型组、空白组的小鼠呼吸频率分别为(138.1±26.6),(132.8±21.6),(126.7±20.4),(134.7±25.1),(171.5±29.9)和(121.2±15.9)bpm,支气管肺泡灌洗液中TNF-α含量分别为(168.83±19.34),(133.20±15.71),(108.61±13.10),(153.04±17.68),(215.91±25.20)和(58.55±7.69)pg·mL^(-1),肺组织中TNF-α含量分别为(230.86±26.66),(176.16±18.82),(156.83±17.76),(221.40±25.64),(275.62±29.41)和(79.83±8.57)pg·mL^(-1),肺组织NF-κB蛋白相对表达水平分别为0.86±0.03,0.54±0.02,0.45±0.02,0.83±0.03,0.95±0.04和0.38±0.01。低、高剂量实验组的上述指标与模型组比较,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论党参对COPD具有治疗作用,下调TNF-α/NF-κB信号通路而缓解气道炎症是其作用机制之一。

利拉鲁肽通过下调NF-κB及相关炎性因子减轻糖尿病大鼠脑缺血损伤的研究

目的探讨利拉鲁肽减轻糖尿病大鼠脑缺血损伤的作用及机制。方法实验动物为SPF级SD雄性大鼠54只,分为假手术组(S组)、糖尿病合并脑缺血组(Di组)、利拉鲁肽干预糖尿病合并脑缺血组(Li组),每组18只。采用神经功能缺损评分对各组大鼠的神经功能进行评估;采用2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色法检测脑梗死面积;采用过氧化氢还原法检测脑组织中的髓过氧化物酶(MPO)活性;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测脑组织中的IL-1β水平;采用Western blot检测脑组织核转录因子-κB(NF-κB)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的蛋白表达水平。结果神经功能缺损评分显示:S组、Li组和Di组分别为0、(2.57±0.64)、(3.50±0.55)分,Di组和Li组的评分均高于S组(P<0.05),Li组的评分低于Di组(P<0.05)。TTC染色显示:S组、Li组和Di组的梗死面积百分比分别为0、(29.44±2.52)%、(36.58±4.85)%,Di组和Li组的梗死面积百分比均高于S组(P<0.05),Di组高于Li组(P<0.05);MPO活性的测定:S组、Di组和Li组分别为(0.067±0.003)、(0.973±0.049)、(0.549±0.420)U/mL,Di组和Li组均高于S组(P<0.05),Li组比Di组显著降低(P<0.05)。IL-1β水平的测定:S组、Di组和Li组分别为(35.43±2.35)、(72.42±6.13)、(56.94±2.15)pg/mL,Di组和Li组均高于S组(P<0.05),Li组比Di组显著降低(P<0.05)。NF-κB、TNF-α蛋白表达的相对水平:Di组和Li组均高于S组(P<0.05),Li组比Di组显著降低(P<0.05)。结论利拉鲁肽具有减轻糖尿病大鼠局灶性脑缺血损伤的作用,其机制与降低MPO活性、降低NF-κB及相关炎性因子TNF-α、IL-1β的表达有关。

基于TNF-α/NF-κB信号通路探讨银莱汤治疗肺炎的作用机制

目的基于肿瘤坏死因子-α(transforming necrosis factor-α,TNF-α)/核转录因子-κB(nuclear factorκB,NF-κB)信号通路探讨银莱汤治疗肺炎的作用机制。方法将40只SPF级4周龄雄性大鼠随机分为4组,分别为正常组、肺炎组、银莱汤治疗组和醋酸泼尼松组,每组10只。使用脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)(0.5 mg/mL)连续雾化吸入3天制备肺炎模型。第4天麻醉后取血及相关脏器组织。采用HE染色观察肺组织、结肠组织形态学变化;ELISA法检测各组大鼠肺组织和结肠组织中炎症因子TNF-α、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)水平的变化;Western blotting法检测肺组织和结肠组织中肿瘤坏死因子受体1(tumor necrosis factor receptor-1,TNFR1)、TNFR1相关死亡结构域蛋白(TNFR1-associated death domain protein,TRADD)、肿瘤坏死因子受体相关因子2(TNF receptor associated factor2,TRAF2)、受体相互作用蛋白1(receptor interacting protein1,RIP1)、IκB激酶β(ikappaB kinaseβ,IKKβ)、细胞核因子-κBp65(nuclear factor-κBp65,NF-κBp65)蛋白的表达。结果与正常组相比,肺炎组大鼠肺、结肠组织中炎症因子TNF-α、IL-6、IL-1β含量明显升高(P<0.05),肺、结肠组织中TNFR1、TRADD、TRAF2、RIP1、IKKβ、NF-κBp65蛋白含量表达明显升高(P<0.05)。与肺炎组相比,银莱汤治疗组和醋酸泼尼松组大鼠肺、结肠组织中炎症因子TNF-α、IL-6、IL-1β含量明显降低(P<0.05),肺、结肠组织中TNFR1、TRADD、TRAF2、RIP1、IKKβ、NF-κBp65蛋白含量表达明显降低(P<0.05)。结论银莱汤可以调控TNF-α/NF-κB信号通路中的TNFR1、TRADD、TRAF2、RIP1、IKKβ、NF-κBp65蛋白表达水平,降低肺、结肠中炎症因子TNF-α、IL-6、IL-1β水平,银莱汤通过TNF-α/NF-κB信号通路改善肺、肠组织的病理损伤,达到肺、肠同治的作用。

消瘤方对子宫内膜异位症盆腔粘连大鼠粘连组织中TLR4/NF-κB/TNF-α信号通路表达的影响

目的探究消瘤方对子宫内膜异位症(EMs)盆腔粘连大鼠粘连组织中TOLL样受体4(TLR4)/核因子-κB(NF-κB)/肿瘤坏死因子-α(TNF-α)信号通路表达的影响。方法30只SD大鼠随机分为对照组、模型组、米非司酮组、消瘤方低剂量组、消瘤方高剂量组,每组6只。除对照组外,其余各组大鼠均构建EMs盆腔粘连模型,米非司酮组、消瘤方低剂量组、消瘤方高剂量组大鼠分别用米非司酮、5g/kg和10g/kg消瘤方腹腔灌胃治疗。比较各组大鼠盆腔粘连评分和TLR4/NF-κB/TNF-α信号通路的表达差异。结果模型组、米非司酮组、消瘤方低剂量组和消瘤方高剂量组大鼠盆腔粘连评分均显著高于对照组(P<0.05);与模型组比较,米非司酮组、消瘤方低剂量组和消瘤方高剂量组大鼠盆腔粘连评分均显著降低(P<0.05);与消瘤方低剂量组比较,消瘤方高剂量组大鼠盆腔粘连评分显著改善(P<0.05)。与对照组比较,其余各组大鼠TLR4/NF-κB/TNF-α信号通路的表达均显著上调(P<0.05);与模型组比较,米非司酮组、消瘤方低剂量组、消瘤方高剂量组大鼠TLR4/NF-κB/TNF-α信号通路的表达均显著下调(P<0.05);与消瘤方低剂量组比较,消瘤方高剂量组大鼠TLR4/NF-κB/TNF-α信号通路的表达显著下调(P<0.05)。结论消瘤方可通过抑制TLR4/NF-κB/TNF-α信号通路的活化,改善EMs大鼠盆腔粘连程度,抑制EMs疾病进展。

白藜芦醇对糖尿病白内障大鼠正沉默信息调节因子2相关酶1基因表达的影响

目的探讨白藜芦醇对糖尿病白内障大鼠晶状体正沉默信息调节因子2相关酶1(SIRT1)基因表达的影响。方法 80只Wistar大鼠随机分为4组:正常对照组、糖尿病模型组及白藜芦醇低剂量组及白藜芦醇高剂量组。糖尿病模型组、白藜芦醇低剂量组及白藜芦醇高剂量组一次性腹腔注射链脲菌素(STZ)(60 mg/kg)制备糖尿病大鼠模型。成模后低剂量组每日20 mg/kg,高剂量组每日100 mg/kg予白藜芦醇灌胃。裂隙灯显微镜照相机记录各组晶状体变化。12周实验结束时测定各组大鼠晶状体丙二醛(MDA)、超氧化物岐化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化酶含量。逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测各组大鼠晶状体SIRT1、肿瘤抑制因子P53、叉头转录因子1、核转录因子κB(NF-κB)表达情况。结果糖尿病模型组大鼠晶状体均发生不同程度混浊,甚至完全混浊,形成白内障。白内障糖尿病大鼠晶状体MDA(7.96±0.51)nmol/mg·prot较正常对照组(4.21±0.27)nmol/mg·prot升高(P<0.01),糖尿病白内障大鼠晶状体SOD、谷胱甘肽过氧化酶[(31.92±5.03)和(7.43±1.53)u/mg·prot]较正常对照组[(61.86±6.17)和(13.61±2.27)u/mg·prot]降低(P<0.01)。高剂量白藜芦醇组大鼠晶状体MDA(4.64±0.42)nmol/mg·prot较白内障糖尿病大鼠晶状体(7.96±0.51)nmol/mg·prot降低(P<0.01)。高剂量白藜芦醇组大鼠晶状体SOD、谷胱甘肽过氧化酶[(52.41±6.54)和(12.76±1.72)u/mg·prot]较白内障糖尿病大鼠晶状体SOD、谷胱甘肽过氧化酶[(31.92±5.03)和(7.43±1.53)u/mg·prot]增高(P<0.01)。白内障糖尿病大鼠晶状体SIRT1 mRNA表达(0.187±0.034)较正常对照组大鼠(0.523±0.089)降低(P<0.01)。高剂量白藜芦醇组大鼠晶状体SIRT1 mRNA表达(0.497±0.072)较白内障糖尿病大鼠晶状体(0.187±0.034)增强(P<0.01)。白内障糖尿病大鼠晶状体P53、叉头转录因子1、NF-κB mRNA表达(0.816±0.153)、(1.269±0.231)、(0.896±0.029)较正常对照组(0.592±0.104)、(0.674±0.112)、(0.495±0.008)增强(P<0.01)。高剂量白藜芦醇组糖尿病大鼠晶状体P53、叉头转录因子1、NF-κB mRNA表达(0.609±0.107)、(0.713±0.121)、(0.397±0.018)较白内障糖尿病大鼠(0.816±0.153)、(1.269±0.231)、(0.896±0.029)降低(P<0.01)。结论白藜芦醇可能通过调节SIRT1表达,进一步调节下游基因P53、叉头转录因子1、NF-κB的表达,抑制和延缓晶状体上皮细胞凋亡,延缓糖尿病大鼠白内障的发生发展。

TNF-α抑制剂对风湿性膝关节滑膜炎大鼠氧化应激抑制作用及下游信号通路的影响

目的分析肿瘤坏死因子-α(TNF-α)抑制剂对风湿性膝关节滑膜炎大鼠氧化应激抑制作用及下游信号通路的影响。方法取36只SD大鼠,随机分为对照组(正常大鼠)、模型组(风湿性膝关节滑膜炎+生理盐水)、干预组(风湿性膝关节滑膜炎+TNF-α抑制剂),每组12只。经苏木精-伊红染色行病理学检查,检测血清TNF-α、白细胞介素(IL)-1β、IL-6、基质金属蛋白酶9(MMP-9)和C反应蛋白;同时测定血清超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽和丙二醛水平;Western blot检测膝关节滑膜组织TNF-α转换酶(TACE)和核转录因子-κB(NF-κB)蛋白表达,并进行统计学分析。结果病理检查显示模型组、干预组大鼠关节组织出现明显病理变化。相比对照组,模型组和干预组血清TNF-α、IL-1β、IL-6、MMP-9、C反应蛋白及丙二醛水平均明显升高,谷胱甘肽和SOD水平均明显降低(P<0.05);相比模型组,干预组血清TNF-α、IL-1β、IL-6、MMP-9、C反应蛋白、丙二醛水平均明显降低,谷胱甘肽和SOD含量均明显升高(P<0.05)。模型组、干预组膝关节滑膜组织TACE和NF-κB蛋白表达水平较对照组均明显上调,干预组TACE和NF-κB蛋白表达明显低于模型组(P<0.05)。结论采用TNF-α抑制剂可有效减轻风湿性膝关节滑膜炎大鼠氧化应激和炎症状态,缓解膝关节损伤程度,其作用机制可能与TNF-α抑制剂可通过阻滞TACE/NF-κB信号通路而减轻大鼠风湿性膝关节滑膜炎密切相关。