肿瘤坏死因子受体相关因子5对缺氧诱导心肌细胞损伤的影响及作用机制研究

目的:分析肿瘤坏死因子受体相关因子5(TRAF5)对缺氧诱导心肌细胞损伤的影响及相关分子机制。方法:体外培养H9c2细胞,以800μmol/L浓度的二氯化钴(CoCl2)处理细胞建立缺氧诱导心肌细胞损伤模型,采用脂质体转染法将TRAF5过表达质粒(pcDNA-TRAF5)和空载质粒(pcDNA-NC)转染至缺氧诱导的H9c2细胞。采用实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)法检测细胞TRAF5基因表达水平,细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞存活率,流式细胞术检测细胞凋亡率,试剂盒法检测乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性及丙二醛(MDA)含量,蛋白免疫印迹(Western Blot)法检测细胞中TRAF5、细胞外信号调节激酶(ERK)、磷酸化ERK(p-ERK)、p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)、磷酸化p38 MAPK(p-p38 MAPK)、氨基末端激酶(JNK)、磷酸化JNK(p-JNK)蛋白表达水平。结果:与Control组比较,Hypoxic组H9c2细胞中TRAF5 mRNA和蛋白表达水平均降低,细胞存活率降低,细胞凋亡率升高,细胞中LDH水平、MDA含量升高,SOD、GSH-Px水平降低,细胞中p-ERK/ERK、p-p38 MAPK/p38 MAPK、p-JNK/JNK比值均升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。与Hypoxic组比较,Hypoxic+pcDNA-TRAF5组H9c2细胞中TRAF5 mRNA和蛋白表达水平均升高,细胞存活率升高,细胞凋亡率降低,细胞中LDH水平、MDA含量降低,SOD、GSH-Px水平升高,细胞中p-ERK/ERK、p-p38 MAPK/p38 MAPK、p-JNK/JNK比值均降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:TRAF5通过介导心肌酶活性和氧化应激水平减轻缺氧诱导的心肌细胞损伤,其作用机制可能与调控MAPK信号通路有关。

生长停滞特异性蛋白6和C1q/肿瘤坏死因子相关蛋白4水平与2型糖尿病患者颈动脉粥样硬化的关联

目的 探讨血浆生长停滞特异性蛋白6(GAS6)、血清C1q/肿瘤坏死因子相关蛋白4(CTRP4)水平与2型糖尿病(T2DM)患者颈动脉粥样硬化(CAS)的关联。方法 回顾性选取经超声检查确诊CAS的60例T2DM患者并纳入T2DM+CAS组,按照年龄(±2岁)、性别进行1∶1匹配后选取经超声检查确认无CAS的60例T2DM患者并纳入T2DM组。制订资料调查问卷收集患者的临床资料,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测患者血浆GAS6水平和血清CTRP4水平。采用Logistic回归分析评估T2DM患者发生CAS的危险因素;绘制受试者工作特征(ROC)曲线并计算曲线下面积(AUC),评估血浆GAS6水平、血清CTRP4水平对T2DM患者发生CAS的预测效能。结果 2组患者在年龄、体质量指数、腰围、是否吸烟、血压和相关生化指标水平方面比较,差异无统计学意义(P>0.05);T2DM+CAS组高血压病患病率高于T2DM组,GAS6、CTRP4水平低于T2DM组,差异有统计学意义(P<0.05)。Logistic回归分析结果显示,GAS6、CTRP4水平每升高1 ng/mL, T2DM患者发生CAS的风险分别降低0.508倍(OR=0.508, 95%CI:0.345~0.747,P=0.001)、0.883倍(OR=0.883, 95%CI:0.819~0.952,P=0.001),高血压病使T2DM患者发生CAS的风险增加3.051倍(OR=3.051, 95%CI:1.438~6.473,P=0.004)。GAS6、CTRP4单独和联合预测T2DM患者发生CAS的最大约登指数分别为0.417、0.384和0.517,对应的敏感度分别为85.0%、81.7%和81.7%,特异度分别为58.3%、56.7%和70.0%。结论 T2DM患者血浆GAS6水平、血清CTRP4水平与CAS发生风险呈负相关,且血浆GAS6联合血清CTRP4对T2DM患者发生CAS的预测效能良好。

益气活血复方含药血清对人脐静脉内皮细胞TLR4及其下游髓样分化因子88、肿瘤坏死因子受体相关因子-6表达的影响

目的研究益气活血复方含药血清对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)Toll样受体4(TLR4)及其下游信号转导通路主要元件髓样分化因子88(MyD88)、肿瘤坏死因子受体相关因子-6(TRAF-6)表达的影响,从mRNA和蛋白水平探讨益气活血复方含药血清防治动脉粥样硬化的机制。方法选择新西兰大耳白兔20只,随机分为4组,即正常组、中药高、中、低浓度(1.6、0.8、0.4g/mL)组,每组5只。各组白兔分别以生理盐水和高、中、低浓度益气活血复方连续灌胃7天。末次灌胃给药2h后,心脏采血,离心后分离血清。体外培养HUVECs,随机分为6组,即空白对照组、模型组、西药对照组、中药高、中、低浓度组,用LPS刺激后,分别加入高、中、低浓度益气活血复方含药血清干预24h,收集细胞,用荧光定量PCR方法和Western blotting法分别测定TLR4、MyD88及TRAF-6 mRNA和蛋白的表达。结果用LPS刺激HUVECs后,引起TLR4、MyD88及TRAF-6 mRNA和蛋白的高表达(与空白对照组比较,P<0.01),用益气活血复方含药血清干预以后显著抑制TLR4、MyD88及TRAF-6 mRNA和蛋白的高表达(与模型组比较,P<0.01,P<0.05)。结论益气活血复方可阻断TLR4高表达,同时阻断TLR4胞内信号转导的MyD88依赖性途径,抑制下游NF-κB以及各种相关基因表达,这可能是其抗动脉粥样硬化的作用机制之一。

胃腺癌组织中肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体受体-4的表达

目的:探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体4(TRAIL R4)在诱导胃癌细胞凋亡过程中的作用。方法:应用Westernblot、RT PCR、原位杂交和免疫组织化学技术,检测31例正常胃黏膜和胃腺癌组织中TRAIL R4蛋白和mRNA的表达。结果:Westernblot结果显示,正常胃黏膜组织中TRAIL R4蛋白的阳性表达率80.65%,高于其在胃腺癌组织中的阳性表达率6.45%(P<0.05);免疫组织化学结果显示,正常胃黏膜组织中TRAIL R4蛋白均有强染色,在胃腺癌组织中染色均为阴性(P<0.05);RT PCR结果显示,正常胃黏膜组织中TRAIL R4mRNA表达高于胃腺癌组织中的表达(P<0.05);原位杂交结果显示,正常胃黏膜组织中TRAIL R4mRNA染色均为阳性,而在胃腺癌组织中阳性表达率为3.23%(P<0.05)。结论:TRAIL R4在胃癌组织中的表达缺失是TRAIL特异性诱导肿瘤细胞凋亡的原因之一。

Toll样受体4/NF-κB信号通路参与黄芪多糖对肿瘤坏死因子α诱导的乳大鼠心肌细胞肥大的抑制作用

目的探讨黄芪多糖(APS)对肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导的乳大鼠心肌细胞肥大的保护作用及机制。方法 原代培养乳大鼠心肌细胞分别加入APS 25,50和100 mg.L-1作用30 min后再加入TNF-α50μg.L-1作用48 h。考马斯亮蓝法测定心肌细胞蛋白含量;消化分离法及计算机图像分析系统检测细胞体积;RT-PCR检测心肌心钠素(ANP)和Toll样受体4(TLR4)的mRNA表达;Western印迹法检测心肌细胞p65和IκBα的蛋白表达;ELISA法检测细胞外液白细胞介素1β(IL-1β)的含量。结果 与正常对照组相比,TNF-α组心肌细胞蛋白含量增加了52.8%,细胞体积增大了66.7%,ANP和TLR4 mRNA分别增加了60.3%和68.7%,p65蛋白表达增加了50.5%,IκBα蛋白表达减少了43.1%,IL-1β表达增加了59.0%,差异均有统计学意义(P<0.01)。与TNF-α模型组相比,APS 50,100 mg.L-1和IκBα阻断BAY11-7082 5μmo.l L-1组蛋白含量、细胞体积、ANP mRNA、TLR4 mRNA、IL-1β和p65蛋白表达显著降低(P<0.05),IκBα蛋白表达明显增高(P<0.05);APS 25 mg.L-1组蛋白含量、细胞体积和ANP mRNA表达显著性降低(P<0.05)。结论 APS对TNF-α诱导的乳大鼠心肌细胞肥大有保护作用,其机制可能与抑制TLR4/NF-κB信号通路有关。

肺癌组织中ERO1L、TNFRSF4的表达与患者免疫功能、炎症反应因子及预后的关系

目的探究肺癌组织中内质网氧化物蛋白(ERO1L)、肿瘤坏死因子受体4(TNFRSF4)的表达与肺癌患者免疫功能、炎症反应因子及其预后的关系。方法选取2018年7月~2020年7月于本院进行手术治疗的108例肺癌患者,收集术中留取的癌组织和癌旁组织标本。采用qRT-PCR检测ERO1L和TNFRSF4的mRNA相对表达量;使用免疫组织化学法检测ERO1L和TNFRSF4蛋白表达情况,分析二者表达水平与患者临床病理特征的关系,采用Kaplan-Meier法分析ERO1L、TNFRSF4蛋白表达水平与患者预后的关系。肺癌患者预后生存率的影响因素采用Cox多因素分析。结果肺癌患者癌组织中ERO1L mRNA表达水平显著高于癌旁组织,TNFRSF4 mRNA表达水平显著低于癌旁组织(P<0.05);肺癌组织中ERO1L蛋白高表达率显著高于癌旁组织,TNFRSF4蛋白高表达率显著低于癌旁组织(P<0.05)。ERO1L蛋白高表达组患者CD3^(+)、CD4^(+)显著低于低表达组(P<0.05),IL-1β、IL-6、TNF-α显著高于低表达组(P<0.05);TNFRSF4蛋白高表达组患者CD3^(+)、CD4^(+)显著高于低表达组,IL-1β、IL-6、TNF-α显著低于低表达组(P<0.05)。ERO1L高表达组患者3年累积生存率显著低于低表达组(Log rankχ^(2)=6.100,P=0.014),TNFRSF4高表达组患者3年累积生存率显著高于低表达组(Log rankχ^(2)=11.296,P=0.001)。肺癌组织的低分化、淋巴结转移、TNM分期为Ⅲ-Ⅳ期、ERO1L高表达、TNFRSF4低表达是影响患者生存率的危险因素。结论肺癌组织中ERO1L、TNFRSF4表达与患者免疫功能、炎症因子以及预后具有一定关系。

C1q和肿瘤坏死因子相关蛋白4(CTRP4)降低子痫前期大鼠滋养层细胞的caspase-1和IL-1β水平

目的探讨C1q和肿瘤坏死因子相关蛋白4(CTRP4)对子痫前期大鼠胎盘滋养层细胞的影响。方法构建子痫前期大鼠模型,采集正常孕鼠和模型大鼠胎盘滋养层组织,运用实时定量PCR和Western blot法检测CTRP4、白细胞介素1β(IL-1β)和caspase-1 mRNA和蛋白表达水平;分离培养正常孕鼠和模型鼠滋养层细胞,在不同时间点,运用流式细胞术检测碘化丙啶和caspase-1双阳性(PI+caspase-1+)细胞(pyroptosis),运用实时定量PCR和Western blot法检测IL-1β和caspase-1表达水平;在模型大鼠滋养层细胞培养基中分别加入(0.5、5、15、25、50)ng/m L CTRP4重组蛋白或(10、20)ng/m L CTRP4蛋白中和抗体,处理72 h后检测pyroptosis细胞数目和caspase-1、IL-1β水平。结果子痫前期大鼠胎盘滋养层组织caspase-1、IL-1β表达增强,CTRP4表达水平下调;CTRP4重组蛋白处理体外培养的大鼠滋养层细胞可显著减少PI+caspase-1+细胞数量并降低caspase-1、IL-1β水平,而CTRP4蛋白中和抗体处理显著增加PI+caspase-1+细胞数量并增强炎症反应。结论 CTRP4可显著抑制caspase-1/IL-1β炎症调节通路的活性,并抑制子娴前期大鼠胎盘滋养层细胞的pyroptosis。

蠲痹胶囊对膝骨关节炎豚鼠关节软骨组织形态及滑膜中Toll样受体4、NF-κB p65及肿瘤坏死因子-α表达的影响

目的:观察蠲痹胶囊对膝骨关节炎(knee osteoarthritis,KOA)豚鼠关节软骨组织形态及滑膜中Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)、NF-κB p65及肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)表达的影响,探讨其治疗KOA的可能作用机制。方法:将40只1月龄豚鼠随机分为正常组、3月龄组、5月龄组、氨基葡萄糖组和蠲痹胶囊组,每组8只。分组后正常组豚鼠直接进行标本采集,其余4组饲养至3月龄建立自发性KOA模型。造模结束后,3月龄组豚鼠进行标本采集;5月龄组、氨基葡萄糖组和蠲痹胶囊组分别以纯水、盐酸氨基葡萄糖胶囊和蠲痹胶囊灌胃,每天1次,连续干预2个月后进行标本采集。采集标本为豚鼠左后下肢膝关节髌下韧带表面的滑膜和胫骨内侧平台软骨,制成石蜡切片。软骨组织切片以番红固绿染色后光镜下观察软骨组织形态,采用Mankin’s病理评分标准进行评分;滑膜组织切片进行免疫组织化学染色(SP法),用Image-pro Plus 6.0图像分析软件对阳性染色的平均光密度值进行半定量分析,测定指标包括TLR4、NF-κB p65及TNF-α的表达水平。结果:5组豚鼠关节软骨Mankin’s评分比较,差异有统计学意义[(0.132±0.125)分,(5.011±0.180)分,(7.324±0.293)分,(4.250±0.250)分,(2.500±0.327)分,F=108.400,P=0.000];3月龄组评分高于正常组(P=0.000),5月龄组评分高于3月龄组(P=0.000),氨基葡萄糖组评分低于5月龄组(P=0.000),蠲痹胶囊组评分低于氨基葡萄糖组(P=0.000)。5组豚鼠关节滑膜中TLR4、NF-κB p65及TNF-α表达量比较,组间差异均有统计学意义(0.000±0.000,0.268±0.021,0.454±0.043,1.879±0.013,0.116±0.015,F=97.000,P=0.000;0.023±0.019,0.251±0.142,0.525±0.103,0.217±0.087,0.211±0.019,F=40.293,P=0.000;0.047±0.023,0.386±0.142,0.812±0.174,0.289±0.151,0.204±0.108,F=78.242,P=0.000);3月龄组TLR4、NF-κB p65及TNF-α表达量均高于正常组(P=0.000,P=0.000,P=0.000),5月龄组TLR4、NF-κB p65及TNF-α表达量均高于3月龄组(P=0.000,P=0.000,P=0.000),氨基葡萄糖组TLR4、NF-κB p65及TNF-α表达量均低于5月龄组(P=0.000,P=0.000,P=0.000),蠲痹胶囊组TLR4、NF-κB p65及TNF-α表达量均低于氨基葡萄糖组(P=0.011,P=0.019,P=0.008)。结论:蠲痹胶囊和盐酸氨基葡萄糖均可延缓KOA豚鼠关节软骨退变,蠲痹胶囊的作用更加明显;其作用机制可能是通过激活TLR4/NF-κB信号转导通路来抑制炎性因子TNF-α表达,从而减轻组织炎症反应。

Toll样受体4与肿瘤坏死因子α在脑缺血再灌注小鼠顶叶皮质神经元中的表达及意义

目的：探讨Toll样受体4（TLR4）在脑缺血再灌注损伤炎症反应中的作用。方法：采用TLR4抗体封闭TLR4受体，H—E染色观察小鼠顶叶皮质组织病理学改变、免疫印迹法检测顶叶皮质TLR4蛋白表达、RT-PCR检测顶叶皮质TLR4mRNA表达量、免疫组织化学显色法检测顶叶皮质TNF-α表达情况，TLR4mRNA表达水平与TNF-α含量相关分析。小鼠随机分为假手术组、缺血再灌注组和TLR4阻断组，各组又分12、24、48、72h4个时间点组。结果：缺血再灌注组TLR4蛋白、TLR4mRNA、TNF-α表达水平明显高于假手术组表达水平，而TLR4阻断组TLR4蛋白、TLR4mRNA、TNF-α表达水平明显低于缺血再灌注组，相关分析表明，TLR4mRNA表达水平与TNF-α含量呈显著正相关。结论：缺血再灌注可激活TLR4，TLR4在脑缺血再灌注损伤中起重要作用；炎性因子TNF-α的产生、分泌可能与TLR4mRNA表达存在着密切联系。

Toll样受体4、肿瘤坏死因子-α在溃疡性结肠炎大鼠结肠组织中的表达及意义

目的:研究Toll样受体4(Toll-like receptor,TLR4)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis facorα,TNF-α)在溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)大鼠模型结肠组织中的表达及相互关系,探讨TLR4信号通路在UC发病中的意义。方法:80只SD大鼠,随机抽取60只为模型组,另外20只为对照组。采用"三硝基苯磺酸+乙醇"法造模后,观察和评估结肠黏膜的大体形态和组织学变化。免疫组织化学方法检测TLR4、TNF-α在模型组与对照组的结肠组织中的表达水平。结果:造模成功率97%。TLR4、TNF-α在模型组结肠上皮和炎症细胞中的表达率分别是84.5%、89.7%,均高于对照组的20.0%、30.0%(P<0.01);TLR4、TNF-α的表达率随模型组的组织学分级增高而上升(P<0.01),且TLR4与TNF-α的表达水平呈正相关关系(P<0.01)。结论:UC大鼠结肠黏膜中TLR4、TNF-α的表达与UC的发生、发展密切相关。

Toll样受体4和肿瘤坏死因子-α在脑出血大鼠血肿周围脑组织的表达

目的:探讨大鼠脑出血(ICH)后脑水肿情况及其血肿周围Toll样受体4(TLR4)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的动态表达情况.方法:采用注入自体血方法复制脑出血模型,SD大鼠随机分为假手术组和模型组(ICH 12 h、ICH 24 h、ICH 72h及ICH 7 d).干湿重法检测各时间点脑组织含水量(BWC);尼氏染色观察脑组织病理学变化;免疫组织化学检测TLR4、TNF-α蛋白的表达变化;免疫印迹检测TLR4、TNF-α蛋白的表达水平.结果:脑出血后脑含水量较假手术组明显增加;ICH模型组神经细胞内尼氏体丢失明显;脑组织血肿周围TLR4和TNF-α在脑出血后12h开始表达,随时间延长蛋白表达增加,3d达到高峰,随后表达降低.结论:大鼠脑出血后TLR4的大量激活可能进一步诱导了TNF-α的表达,加重了脑出血后的继发性炎症损伤和脑水肿的形成.

支气管哮喘患儿外周血单核细胞培养上清液中肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-17和免疫球蛋白E水平与Toll样受体4表达的相关性

目的探讨支气管哮喘患儿外周血单核细胞(PBMC)培养上清液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-17(IL-17)、免疫球蛋白E(IgE)水平与PBMC中Toll样受体4(TLR4)mRNA表达的相关性。方法选择2017年4月至2019年5月中国人民解放军空军军医大学第二附属医院收治的160例支气管哮喘患儿,其中急性发作期患儿91例(急性发作组),缓解期患儿69例(缓解组),另选择同期体检健康儿童160例为健康对照组。采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验测定PBMC培养上清液中TNF-α、IL-17、IgE水平,实时荧光定量聚合酶链反应检测PBMC中TLR4 mRNA表达。结果急性发作组患儿PBMC培养上清液中TNF-α、IL-17、IgE水平高于缓解组和健康对照组,缓解组患儿PBMC培养上清液中TNF-α、IL-17、IgE水平高于健康对照组(P<0.05)。急性发作组TLR4 mRNA相对表达量高于缓解组及健康对照组,缓解组患儿PBMC中TLR4 mRNA相对表达量高于健康对照组(P<0.05)。急性发作组TLR4阻断后PBMC培养上清液中TNF-α、IL-17、IgE水平均低于阻断前(P<0.05)。支气管哮喘患儿PBMC培养上清液中TNF-α、IL-17、IgE水平与PBMC中TLR4 mRNA表达呈正相关(r=6.272、7.653、7.019,P<0.05)。结论支气管哮喘患儿PBMC培养上清液中TNF-α、IL-17、IgE表达升高,且与PBMC中TLR4表达呈正相关,TLR4可能通过调控TNF-α、IL-17、IgE的表达而参与支气管哮喘的发生和发展。

舒芬太尼对大鼠心肌缺血再灌注中Toll样受体4以及肿瘤坏死因子α的影响

目的观察舒芬太尼对大鼠心肌缺血再灌注中Toll样受体4(TLR4)以及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的影响,讨论舒芬太尼对心肌缺血再灌注损伤的保护机制。方法 40只Wistar大鼠随机分为假手术组,缺血再灌注组,缺血后处理组以及药物后处理组。建立大鼠心肌缺血再灌注模型。免疫组化法检测大鼠心肌组织中Toll样受体4以及大鼠血清中肿瘤坏死因子-α的含量。结果假手术组中Toll样受体4以及肿瘤坏死因子-α的含量低于其他3组,差异均有统计学意义(P<0.05),药物后处理组低于缺血后处理组及缺血再灌注组,差异均有统计学意义(P<0.05),缺血后处理组低于缺血再灌注组,差异有统计学意义(P<0.05),缺血再灌注组高于其他3组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论舒芬太尼对心肌缺血再灌注损伤有保护机制,TLR4参与了心肌缺血再灌注损伤的形成,并对TNF-α可能有重要影响。舒芬太尼可能抑制了TLR4的信号传导表达。

肿瘤坏死因子相关激活蛋白、CD4^(+)/CD8^(+)、IL-4与儿童细菌性社区获得性肺炎经典炎症标志物的关系研究

目的:探讨肿瘤坏死因子相关激活蛋白(CD40L)、CD4^(+)/CD8^(+)、白细胞介素-4(IL-4)与儿童细菌性社区获得性肺炎(CAP)经典炎症标志物的关系及预测抗菌治疗效果的效能。方法:选取300例儿童细菌性CAP患儿,均给予化痰、止咳、平喘及抗感染治疗,其中43例治疗无效(观察组)及257例治疗有效(对照组),比较2组治疗前白细胞计数(WBC)、C反应蛋白(CRP)、降钙素原(PCT)及CD40L、CD4^(+)/CD8^(+)、IL-4,采用Pearson分析CD40L、CD4^(+)/CD8^(+)、IL-4与经典炎症标志物的关系及CD40L、CD4^(+)/CD8^(+)、IL-4之间的关系,采用logistic回归方程分析CD40L、CD4^(+)/CD8^(+)、IL-4与治疗无效的关系,采用受试者工作特征曲线(ROC)及ROC下面积(AUC)分析CD40L、CD4^(+)/CD8^(+)、IL-4预测抗菌治疗效果的效能。结果:观察组WBC、CRP、PCT、CD40L、IL-4水平均高于对照组(P<0.01),CD4^(+)/CD8^(+)低于对照组(P<0.01);CD40L与WBC、CRP、PCT均呈正相关(r=0.720、0.433、0.832,P<0.01),CD4^(+)/CD8^(+)与WBC、CRP、PCT呈负相关(r=-0.709、-0.449、-0.698,P<0.01),IL-4与WBC、CRP、PCT呈正相关(r=0.889、0.760、0.723,P<0.01);CD40L、CD4^(+)/CD8^(+)、IL-4均与治疗无效的相关性具有统计学意义(P<0.01);CD40L与CD4^(+)/CD8^(+)呈负相关(r=-0.776,P<0.01),与IL-4呈正相关(r=0.554,P<0.01);CD4^(+)/CD8^(+)与IL-4呈负相关(r=-0.538,P<0.01);单一指标中IL-4预测抗菌治疗效果的AUC最大为0.805,各指标联合预测抗菌治疗效果的AUC为0.867,敏感度达79.07%,大于任一单一指标(P<0.01)。结论:CD40L、IL-4、CD4^(+)/CD8^(+)与经典炎症标志物存在一定相关性,可在一定程度上反映细菌性CAP患儿病情程度,治疗期间进行动态监测可及早预测疗效,为细菌性CAP患儿后续治疗提供参考依据。

C1q肿瘤坏死因子相关蛋白4研究进展

C1q肿瘤坏死因子相关蛋白(C1q/tumor necrosis factor-related proteins,CTRPs)是一类新发现的蛋白超家族,与脂联素具有高度同源性。CTRPs组织分布广泛,生物学功能多样,参与调节物质代谢、血管壁细胞功能、血小板聚集、炎性反应等。CTRP4是该家族成员之一,其结构特殊,包含2个球状C1q结构域,缺乏胶原结构域。CTRP4对肿瘤、代谢、炎症及心血管疾病有重要调节作用。该文介绍CTRP4的结构特点、分布表达及其生物学功能。

脂氧素A4、肿瘤坏死因子及其比值与子痫前期发生发展的相关性研究

目的探讨脂氧素A4(LXA4)、肿瘤坏死因子(TNF-α)在子痫前期(PE)中的表达及意义。方法选取2016年2月至2017年2月在海南省人民医院分娩的PE产妇78例,其中轻度PE产妇45例,重度PE产妇33例,同时选取正常产妇50例作为对照组,采用ELISA法检测产妇血清LXA4、TNF-α表达,采用免疫组化法检测胎盘组织LXA4受体和TNF-α表达。结果轻度PE组和重度PE组胎盘组织中LXA4受体蛋白阳性表达率为55.55%、60.61%,明显低于对照组(χ2值分别为19.077、14.246,均P<0.05),而TNF-α蛋白阳性表达率为80.00%和81.82%,明显高于对照组(χ2值分别为25.688、23.035,均P<0.05)。轻度PE组血清LXA4为(176.55±43.21)ng/L,明显高于对照组和重度PE组(t值分别为12.163、10.476,均P<0.05);轻度PE组和重度PE组TNF-α分别为(18.03±1.43)ng/m L和(18.22±2.03)ng/m L,明显高于对照组(t值分别为48.500、37.304,均P<0.05);重度PE组LXA4/TNF-α为(5.02±1.10),明显低于对照组和轻度PE组(t值分别为25.271、16.106,均P<0.05);轻度PE组LXA4/TNF-α为(9.80±1.42),明显低于对照组(t=16.970,P<0.05)。轻度PE组和重度PE组血清LXA4与TNF-α呈负相关(r值分别为-0.522、-0.413,均P<0.05);对照组和重度PE组胎盘组织LXA4受体和TNF-α表达呈负相关(rs值分别为-0.344、-0.321,均P<0.05);LXA4/TNF-α与PE患者病情呈负相关(rs=-0.412,P<0.05)。结论 PE患者血清LXA4、TNF-α及胎盘组织LXA4受体、TNF-α表达异常,可能与疾病的发生发展有关,其中LXA4/TNF-α比值可一定程度反映患者病情程度。

肿瘤坏死因子受体相关因子4在结直肠癌中的表达及临床意义

目的:探讨肿瘤坏死因子受体相关因子4(tumor necrosis factor receptor-associated factor 4,TRAF4)在结肠癌组织中的表达及临床意义。方法:用免疫组织化学染色法检测112例结肠癌组织标本及其配对的癌旁组织标本中TRAF4的表达。根据染色结果将病人分为高表达组和低表达组,比较2组临床病理学资料和生存预后。生存分析用Kaplan-Meier法,组间生存率比较用Log-rank检验;用COX比例风险回归模型分析结肠癌病人预后的影响因素。结果:TRAF4主要表达于细胞核中。结肠癌组织中TRAF4高表达率为73.21%(82/112),明显高于癌旁组织的33.04%(37/112)(P<0.01)。低分化结肠癌病人的TRAF4高表达率明显高于高分化病人(P<0.01),T分期越高,TRAF4高表达率越大(P<0.01),M1期结肠癌病人的TRAF4高表达率明显高于M0期病人(P<0.01)。分化程度、T分期、N分期、M分期和TRAF4均为结肠癌病人总体生存时间的独立影响因素(P<0.05),分化程度、N分期、M分期和TRAF4均为结肠癌病人无进展生存时间的独立影响因素(P<0.05)。高表达组总体生存率和无进展生存率分别为64.29%和69.64%,均低于低表达组的82.43%和90.18%(P<0.05)。高表达组中位生存时间和无进展生存时间分别为70.92个月和72.55个月,均低于低表达组的84.81个月和89.66个月(P<0.05)。结论:TRAF4与结肠癌分化程度、T分期、M分期有关,TRAF4高表达往往预示着结肠癌的不良生存预后。

健心颗粒对慢性心衰大鼠心室肌toll样受体4、肿瘤坏死因子-α蛋白表达的影响

目的探讨健心颗粒对慢性心衰大鼠心室肌toll样受体(toll-like receptors,TLR)4、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α蛋白表达的影响。方法将15周龄的自发性高血压大鼠120只随机分为培哚普利组、健心颗粒低剂量组、健心颗粒中剂量组、健心颗粒高剂量组、阴性对照组,每组24只。前四组分别予培哚普利0.36 mg/(kg·d),健心颗粒1.6 g/(kg·d)、3.2 g/(kg·d)、6.1 g/(kg·d),以2 m L生理盐水溶解,阴性对照组予生理盐水2 m L,灌胃给药,每天2次。实验后每7天各组分别随机处死6只大鼠,采用免疫印迹检测上述各点心室肌组织TLR4蛋白表达,免疫组织化学显色检测上述各点心室肌组织TNF-а蛋白表达。结果第7天,对照组、健心颗粒低、中、高剂量组间比较,大鼠心室肌TLR4、TNF-α蛋白表达无显著差异(P>0.05),但培哚普利组明显下降(P<0.05);第14天、21天,与对照组比较,其他各组大鼠心室肌TLR4、TNF-α蛋白表达均显著下降(P>0.05),但培哚普利组较其他组下降更明显(P<0.05);第28天,与对照组比较,其他各组大鼠心室肌TLR4、TNF-α蛋白表达均显著下降(P>0.05),但培哚普利组、健心颗粒中、高剂量组明显低于低剂量组(P<0.05)。结论健心颗粒具有显著抗炎作用。

Toll样受体4基因单核苷酸多态性与白内障发病的相关性研究

目的研究Toll样受体4(TLR4)基因单核苷酸多态性(SNPs)与白内障发病的相关性。方法收集皖南医学院第二附属医院2021年1—12月100例年龄相关性白内障(ARC)病例为观察组,86例年龄、性别相匹配的无亲属关系的健康志愿者为对照组,采用单碱基延伸法(SNaPshot)对TLR4两个SNPs位点rs4986790及rs4986791进行基因分型,检验两组2个SNPs基因型与等位基因频率,分离被研究对象外周血单个核细胞(PBMC),酶联免疫吸附法(ELISA)检测其PBMC上清液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及白细胞介素-6(IL-6)水平,分析其与ARC病人TLR4基因SNPs之间的关系。结果Hardy-Weinberg平衡试验结果提示,两组病人TLR4基因rs7986790位点及rs4986791位点的基因型频率分布实际值与理论值符合Hardy-Weinberg遗传平衡(P>0.05);观察组与对照组TLR4基因rs7986790位点基因型及其等位基因占比比较,差异有统计学意义(P<0.05)。rs7986790基因分型为GA及GG者PBMC上清液中TNF-α及IL-6水平[(22.36±4.15)μg/L、(846.69±179.68)ng/L]均高于基因型为AA者[(17.02±2.36)μg/L、(613.45±163.59)ng/L](P<0.05)。结论ARC病人TLR4基因rs7986790位点基因型分布与正常者间存在差异,rs7986790位点等位基因G可能通过促进炎症反应,增加ARC患病风险。