急性胰腺炎患者血清三结构域35和肿瘤坏死因子受体相关因子3表达水平及其临床意义

目的探究急性胰腺炎(AP)患者血清三结构域35(TRIM35)和肿瘤坏死因子受体相关因子3(TRAF3)表达水平及其与病情程度和预后的相关性。方法采用前瞻性研究的方法,选取青海红十字医院2020年7月至2022年9月AP患者93例(观察组),其中轻症急性胰腺炎(MAP)40例,中重症急性胰腺炎(MSAP)29例,重症急性胰腺炎(SAP)24例;另选取同期健康体检者40例作为健康对照组。采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)法检测血清TRIM35和TRAF3水平。随访入院28 d后的生存状况。相关性分析采用Pearson法;采用多因素Logistic回归分析血清TRIM35和TRAF3与AP患者预后的关系;采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清TRIM35和TRAF3对AP患者预后的评估价值。结果观察组血清TRIM35和TRAF3水平明显高于健康对照组(3.76±1.36比1.02±0.19和5.37±2.18比1.04±0.16),差异有统计学意义(P<0.01)。MSAP和SAP患者血清TRIM35和TRAF3水平明显高于MAP患者(4.11±1.73和4.96±1.47比2.79±1.04、5.43±2.15和7.01±2.85比4.35±1.79),SAP患者明显高于MSAP患者,差异有统计学意义(P<0.05)。随访结果显示,死亡11例,存活82例。死亡患者血清TRIM35和TRAF3明显高于存活患者(4.94±1.01比3.60±1.67和7.08±1.43比5.14±2.57),差异有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关分析结果显示,AP患者血清TRIM35水平与血清TRAF3水平呈正相关(r=0.483,P<0.01)。多因素Logistic回归分析结果显示,血清TRIM35和TRAF3水平是影响AP患者预后的独立危险因素(OR=1.86和1.37,95%CI 1.12~3.09和1.02~1.82,P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,血清TRIM35联合TRAF3水平评估AP患者预后的曲线下面积明显大于血清TRIM35和TRAF3单独评估(0.85比0.81和0.81,Z=0.03和0.04,P<0.05),血清TRIM35和TRAF3水平的最佳截断值为4.90和6.11。结论AP患者血清TRIM35和TRAF3水平明显升高,且与病情程度有关,血清TRIM35和TRAF3水平是影响AP患者预后的独立影响因素,两者联合检测评估AP患者的预后更有价值。

肝细胞生长因子/酪氨酸蛋白激酶MET 信号通路与乳腺癌侵袭转移的相关性分析

目的探讨分析肝细胞生长因子(HGF)/酪氨酸蛋白激酶MET(c-met)信号通路与乳腺癌侵袭转移的相关性。方法选择2018年3月至2019年3月承德医学院附属医院临床术后经病理证实的乳腺癌标本75例、乳腺纤维腺瘤标本60例以及癌旁正常乳腺组织标本50例。采用SP免疫组化法以及逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测各组织标本HGF、c-met、β连环素(β-catenin)蛋白表达和mRNA表达情况。结果HGF[82.67%(62/75)比48.33%(29/60)比14.00%(7/50)]、c-met[86.67%(65/75)比55.00%(33/60)比20.00%(10/50)]、β-catenin[78.67%(59/75)比41.67%(25/60)比6.00%(3/50)]在乳腺癌组织、乳腺纤维腺瘤组织以及癌旁正常乳腺组织中的表达均差异有统计学意义(P<0.05)。在乳腺癌、乳腺纤维腺瘤以及癌旁正常乳腺组织中HGF、c-met mRNA相对表达量差异有统计学意义(P<0.05),其中乳腺癌相对表达量最高、乳腺纤维腺瘤相对表达量次之;而乳腺癌、乳腺纤维腺瘤以及癌旁正常乳腺组织中β-catenin mRNA相对表达量比较差异无统计学意义(P>0.05)。HGF表达阳性率与病人TNM分期、淋巴结转移、肿瘤大小、ER表达、HER-2表达有关(P<0.05)。c-met蛋白表达阳性率与病人肿瘤TNM分期、淋巴结转移密切相关(P<0.05)。β-catenin蛋白表达异常率与病人TNM分期、淋巴结转移、肿瘤大小密切相关(P<0.05)。结论乳腺癌组织中HGF、c-met蛋白高表达而β-catenin蛋白异常表达,且HGF/c-met信号通路及β-catenin蛋白与乳腺癌侵袭转移密切相关。

糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子受体在Tregs介导下的免疫耐受作用的研究进展

糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子受体(glucocorticoid-induced TNF receptor,GITR)是胸腺和外周淋巴器官中调节性T细胞(regulatory T cells,Tregs)表达的一个重要功能分子,在Tregs的分化和扩张中起关键性作用,是人类Tregs非常有效的标记物,在Tregs的免疫调节中发挥重要作用。GITR具有许多重要的生物学活性,包括细胞的增殖、分化、存活和凋亡等,其相互作用可打破Tregs介导的免疫耐受,诱发或加重自身免疫性疾病,如哮喘、糖尿病、关节炎、系统性红斑狼疮等。妊娠选择了免疫耐受这一基本机制,Tregs在保护胎儿免受母体免疫攻击方面发挥重要作用,许多研究已表明:在妊娠期间中断Tregs的相互作用会导致胎儿特异性抗原的产生,继而导致不良妊娠结局。综述GITR在Tregs介导下的免疫耐受作用。

CRP 与 TNF-α对人外周血单核细胞分泌妊娠相关血浆蛋白-A 的影响

[目的]探讨 C反应蛋白（CRP）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）对人外周血单核细胞分泌妊娠相关血浆蛋白-A （PAPP-A）的影响。[方法]采用密度梯度离心法分离及培养人外周血单核细胞，超敏ELISA法测定CRP或rhTNF-α刺激单核细胞后细胞上清液中PAPP-A的含量，Trans AMTM 技术检测CRP或rhTNF-α对单核细胞NF-κB活性的影响，并与空白对照组比较。同时观察给予核因子-κB （NF-κB）抑制剂 BAY11-70682预处理后，CRP 或 rhTNF-α对单核细胞合成分泌PAPP-A的影响。[结果]与空白对照组细胞上清液中PAPP-A含量（1．1＆#177;0．1） mIU/L相比，CRP（20 mg/L）刺激单核细胞2h后，PAPP-A含量开始显著增加（2．2＆#177;0．2）mIU/L，在24h达最高值（9．8＆#177;0．5）mIU/L（P ＜0．05），呈时间依赖性。给予rhTNF-α（100 ng/mL）刺激后，细胞上清液中PAPP-A含量在8 h达到高峰（14．5＆#177;1．1） mIU/L（ P ＜0．05），24h（11．7＆#177;0．9）mIU/L仍高于空白对照组（ P ＜0．05）。CRP和 rhTNF-α均呈剂量依赖性增加细胞上清液 PAPP-A 含量。CRP和rhTNF-α可增加单核细胞的磷酸化 NF-κB p65水平[分别为（0．88＆#177;0．06） mg/L、（1．06＆#177;0．12） mg/L]，显著高于对照组（0．35＆#177;0．04） mg/L（ P ＜0．05）。给予BAY11-70682预处理后，CRP和 rhTNF-α诱导单核细胞 NF-κB活性增加和分泌PAPP-A的作用受到抑制。[结论]CRP和TNF-α能促进人外周血单核细胞合成分泌PAPP-A ，其作用与NF-κB信号通路的激活有关。这可能是急性冠脉综合征患者血清PA PP-A升高的机制。

肺高血压大鼠肺组织肿瘤坏死因子受体相关因子6表达的变化

目的明确肺高血压(PH)大鼠肺组织肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)表达的变化。方法SPF级健康雄性SD大鼠16只,8周龄,体质量200~220 g,采用随机数字表法分为2组(n=8):对照组(C1组)和PH1组。采用皮下注射野百合碱的方法制备大鼠PH模型。模型制备开始后28 d时,测量大鼠平均肺动脉压力(mPAP),计算Fulton指数,计算肺中小动脉中膜厚度百分比,计算肌化血管百分比,Western blot法检测肺组织TRAF6、信号转导和转录激活因子3(STAT3)、磷酸化信号转导和转录激活因子(p-STAT3)和G1/S-特异性周期蛋白-D1(Cyclin D1)表达,计算p-STAT3/STAT3,免疫共沉淀法检测TRAF6与STAT3的相互作用。原代培养正常大鼠肺动脉平滑肌细胞(C2组)和PH大鼠肺动脉平滑肌细胞(PH2组)于6孔板(n=3)。采用qPCR法检测TRAF6 mRNA表达,Western blot法检测TRAF6、STAT3、p-STAT3和Cyclin D1表达。结果与C1组比较,PH1组大鼠mPAP、Fulton指数、肺中小动脉中膜厚度百分比及肌化血管百分比升高,肺组织TRAF6和Cyclin D1表达上调,p-STAT3/STAT3升高(P<0.05或0.01),免疫共沉淀结果显示,TRAF6和STAT3相互作用。与C2组比较,PH2组TRAF6及其mRNA表达上调,Cyclin D1表达上调,p-STAT3/STAT3升高(P<0.05或0.01)。结论PH大鼠肺组织TRAF6表达上调,可能与促进STAT3活化,导致肺血管重构有关。

肿瘤坏死因子受体相关因子6在食管癌组织中的表达及意义

目的：探讨肿瘤坏死因子受体相关因子6（TRAF6）在食管癌组织中的表达及临床意义。方法收集72例食管癌患者的临床资料，采用免疫组织化学方法测定 TRAF6在食管癌及其癌旁正常组织中的表达，并探讨其与临床病理特征的关系。结果 TRAF6在食管癌组织中阳性表达率为66．13％，显著高于正常组织中的13．89％，差异有统计学意义（χ2＝56．850，P ＜0．01），TRAF6表达水平与食管癌临床分期、淋巴结转移存在明显相关性（χ2＝6．818、4．428，均 P ＜0．05）；但其与年龄、性别、肿瘤分化程度无明显相关性。结论TRAF6在食管癌中的表达水平明显升高，且与患者临床病理特征存在明显相关性。

尖锐湿疣患者外周血Toll样受体7、髓系分化因子88、肿瘤坏死因子受体相关因子6的表达

目的探讨Toll样受体7（TLR7）及其相关信号转导分子在人类乳头瘤病毒（HPV）感染和尖锐湿疣复发机制中的作用。方法用双色免疫荧光抗体染色流式细胞仪检测30例健康人、35例初发尖锐湿疣患者，32例复发尖锐湿疣患者和30例使用咪喹莫特联合氨基酮戊酸光动力疗法（ALA—PDT）治疗的复发性尖锐湿疣患者外周血不同亚群T细胞内TLR7的表达，使用SPSS13．0软件进行t检验。用Western印迹方法检测各组尖锐湿疣患者及健康人外周血CD3＋T细胞内接头蛋白MyD88及相关信号分子TRAF6、P13K、AKT、p42／44和核因子KB（NF—KB）等表达的变化。结果健康人外周血CD3＋CD4＋T细胞和CD3＋CD8＋T细胞内均可检测到TLR7的表达。与健康对照组比较，初发和复发尖锐湿疣患者外周血CD3＋CD8＋T细胞内TLR7的表达水平无显著改变，而CD3＋CD4＋T细胞内TLR7的表达明显增加（健康对照组为12．6％±6．3％，初发尖锐湿疣组为23．3％±8．4％，t=4．72，P〈0．01；复发尖锐湿疣组为32．8％±8．9％，t：10．76，P〈0．01）；与复发尖锐湿疣患者比较，咪喹莫特联合ALA—PDT治疗组尖锐湿疣患者外周血CD3＋CD4＋T细胞内TLR7的表达水平显著降低（20．3％±5．7％，t=5．41，P〈0．01）。初发和复发尖锐湿疣患者外周血CD3＋T细胞内MyD88、TRAF6、P13K、p42／44和NF—KB蛋白表达显著增加，而AKT蛋白表达变化不明显；咪喹莫特联合ALA—PDT治疗组尖锐湿疣患者外周血CD3＋T细胞内MyD88、TRAF6、p42／44和NF—KB蛋白表达显著降低。结论尖锐湿疣患者外周血CD3＋CD4＋T细胞内表达上调的TLR7可作为HPV病毒感染的识别受体，参与机体的抗HPV免疫应答。

微小RNA-146a肿瘤坏死因子受体相关因子6白细胞介素-1受体相关激酶1在强直性脊柱炎患者外周血中的表达及其意义

目的研究强直性脊柱炎（As）患者外周血单个核细胞（PBMCs）中微小RNA（miR）．146a、肿瘤坏死因子受体相关因子6（TRAF6）和白细胞介素-1受体相关激酶1（IRAKl）的表达及其与病情活动度的相关性，探讨miR．146a、TRAF6、IRAKl在AS发病机制中的作用。方法采用实时荧光定量聚合酶反应（qRT-PCR）检测45例As患者miR-146a．TRAF6、IRAKl的相对表达量与22名健康对照组比较，并与BathAS疾病活动指数（BASDAI）、红细胞沉降率（ESR）、C反应蛋白（CRP）、免疫球蛋白（Ig）等进行相关分析。统计学处理采用t检验，非参数检验，单因素方差分析，Pearson、Spearman相关分析。结果①miR-146a在AS患者PBMCs中相对表达量显著高于健康对照组[1．46（0．39，4．79）与0．81（0．17，1．90），P〈0．05]、活动组显著高于稳定组[2．93（0．95，7．95）与0．54（0．28，1．69），P〈0．05]、用药组与未用药组差异无统计学意义[1．28（0．31，2．37）与2．22（0．49，7．71），P〉0．05]；②IRAKl表达水平明显高于健康对照组（1．4±0．7与1．1±0．4，P〈0．05），未用药组与用药组、活动组与稳定组表达量差异均无统计学意义（1．5＋0．9与1．4±0．5；1．6±0．7与1．3±0．7，P〉0．05）；③TRAF6表达量明显低于健康对照组（1．3±0．6与1．7±0．8，P〈0．05），TRAF6在未用药组、活动组均明显低于健康对照组（1．1＋0．7与1．7~0．8；1．1±0．5与1．7＋0．8，P〈0．05）。④AS患者miR．146a表达与BASDAI、晨僵时间呈正相关（r=0．557，P=-0．000；r=0．363，P=O．018），IRAKl与IgM呈负相关（r=-O．313，P=0．046）。结论①miR-146a可能参与As疾病活动；②IRAKl、TRAF6表达异常可能在AS的发病机制中起作用。

血清补体C1q肿瘤坏死因子相关蛋白-3、D-二聚体水平与脑梗死溶栓后超急性期出血转化及脑损伤的相关性分析

目的了解血清补体C1q肿瘤坏死因子相关蛋白-3(CTRP-3)、D-二聚体与脑梗死溶栓后超急性期出血转化及脑损伤的相关性。方法回顾性分析2016年8月至2019年8月六盘水市人民医院神经内、外科及重症监护病房行溶栓治疗的160例脑梗死患者临床资料。其中静脉溶栓后发生超急性期出血转化者29例(发生组)、无出血转化者131例(未发生组);前循环脑梗死者132例,后循环脑梗死者28例。采用logistic回归分析法分析溶栓后超急性期发生出血转化的相关因素;绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析溶栓后次日晨血清CTRP-3、D-二聚体对溶栓后超急性期发生出血转化的预测价值;采用Pearson相关系数法分析血清CTRP-3、D-二聚体水平与患者脑损伤的相关性。结果发生组溶栓前美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分、梗死灶直径≥5 cm占比、心房颤动占比、血清D-二聚体水平均高于未发生组[(18.6±2.2)比(14.0±2.1)分,69.0%(20/29)比39.7%(52/131),72.4%(21/29)比44.3%(58/131),(3.02±0.31)比(2.24±0.23)mg/L],血清CTRP-3水平低于未发生组[(251.3±26.9)比(285.7±29.2)μg/L],发病至治疗时间长于未发生组[(4.61±0.43)比(2.96±0.52)h],差异均有统计学意义(t=10.62,P<0.01;χ^2=8.22,P<0.01;χ^2=7.52,P<0.01;t=15.44,P<0.01;t=5.82,P<0.01;t=15.91,P<0.01)。logistic回归分析显示溶栓前NIHSS评分(OR=1.69,95%CI:1.02~2.15,P<0.01)、梗死灶直径>5 cm占比(OR=3.73,95%CI:1.96~5.10,P<0.01)、心房颤动(OR=2.14,95%CI:1.25~2.96,P<0.01)、发病至治疗时间(OR=3.44,95%CI:1.85~5.02,P<0.01)、血清D-二聚体(OR=2.37,95%CI:1.56~3.30,P<0.01)、血清CTRP-3(OR=2.90,95%CI:1.91~4.25,P<0.01)均为脑梗死溶栓后超急性期发生脑出血转化的危险因素。以CTRP-3为262.58μg/L、D-二聚体为2.96 mg/L为界值,对脑梗死溶栓后超急性期发生出血转化预测的ROC曲线下面积(AUC)分别为0.723、0.796,两者联合的AUC为0.823。28例前循环脑梗死患者的NIHSS评分为(18.7±2.1)分,Rankin修订量表(mRS)评分为(3.8±0.5)分,132例后循环脑梗死患者分别为(14.0±1.9)分和(3.2±0.6)分,前、后循环脑梗死患者CTRP3水平分别为(253.7±28.5)μg/L、(284.9±32.4)μg/L,D-二聚体水平分别为(3.1±0.4)mg/L、(2.2±0.3)mg/L,经Pearson相关性分析,血清CTRP-3水平与前循环脑梗死患者脑损伤NIHSS评分呈强负相关(r=-0.72,P<0.01),与后循环脑梗死患者脑损伤NIHSS评分呈弱负相关(r=-0.35,P<0.01),与脑损伤mRS评分呈强正相关(r=0.80,P<0.01);血清D-二聚体水平与前循环脑梗死患者脑损伤NIHSS评分呈强正相关(r=0.88,P<0.01),与后循环脑梗死患者脑损伤NIHSS评分呈弱正相关(r=0.24,P<0.01),与脑损伤mRS评分呈强负相关(r=-0.76,P<0.01)。结论血清CTRP-3、D-二聚体联合检测对脑梗死溶栓后超急性期发生脑出血转化有较高的预测价值,并与患者脑损伤程度具有一定相关性。

重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白剂量递减联合改善病情的抗风湿药治疗外周型活动性强直性脊柱炎的临床评价

目的评价重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白（rhTNFR—Fc）剂量递减联合改善病情的抗风湿药（DMARDs）治疗外周型活动性强直性脊柱炎（AS）的临床疗效和安全性。方法第一阶段，即开始后的头8周，将60例纳入研究的AS患者按年龄、病程、病情、疾病活动性配对，然后随机纳入rhTNFR—Fc正常推荐剂量（25mg，每周2次×16次，皮下注射）作为对照组和rhTNFR—Fc剂量递减（25mg，每周1次×4次；随后改为12．5mg，每周1次×4次；再改为12．5mg，每10d1次×6次；后改为12．5mg，每15d1次×4次，皮下注射）＋甲氨蝶呤（MTX）（7．5mg，每周1次，口服）＋柳氮磺砒啶（SASP）（1g，每日2次，口服）＋沙利度胺（100mg，每晚1次，口服）联合治疗为受试组。第二阶段即第9．24周为开放研究，在原有30例的基础上新纳入42例，全部采用受试组治疗方案治疗。全部病例在第0、4、8、16、24周进行临床和实验室评价。结果在第一阶段到达4周时，总体疗效评价达到AS疗效评价标准20％（ASAS20）改善标准者2组均为100％，达到ASAS50改善标准者对照组为97％（29／30），受试组为83％（25／30）；当第8周时，2组达到ASAS20改善标准者均为100％，达到ASAS50改善标准者对照组为100％（13／13例），受试组为97％（29／30例）；差异均无统计学意义（P〉0.05）。在第二阶段72例纳入开放研究，16周时，72例全部获得ASAS20改善标准，63例（88％）获得ASAS50改善标准；24周时，72例（100％）均保持ASAS20改善标准，71例（99％）获得ASAS50改善标准。安全性和耐受性均佳，2组患者中各有1例出现感染，1例转氨酶轻度升高，受试组中有2例白细胞轻度降低，对照组中2例有注射部位的皮肤反应。结论rhTNFR—Fc剂量递减联合DMARDs治疗外周型活动性AS是一种高效、优价、安全、具有良好耐受性和依从性的好方法，少数病例出现转氨酶轻度升高、白细胞轻度降低和感染增加，需予关注。

重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白联合玻璃酸钠关节腔注射治疗类风湿关节炎疗效观察

目的 探讨注射用重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白联合玻璃酸钠关节腔注射治疗类风湿关节炎的临床疗效.方法 选择大同市第二人民医院2016年2月至2018年2月治疗的类风湿关节炎患者40例为观察对象,采用随机数字表法分为观察组和对照组各20例,观察组采用注射用重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白联合玻璃酸钠关节腔注射治疗,对照组采用单纯注射用重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白关节腔注射治疗.比较两组治疗前后关节肿胀、关节疼痛、关节活动度、晨僵、X线表现评分及总有效率.结果 治疗前,两组关节疼痛、关节压痛、关节活动度、晨僵、临床评分和X线分期等差异均无统计学意义(均P>0.05).治疗后,两组患者症状和体征明显好转,观察组关节疼痛、关节压痛、关节活动度、晨僵及总评分分别为(1.2 ± 1.2)分、(0.8 ± 0.7)分、(0.5 ± 0.4)分、(0.7 ± 0.7)分、(4.5 ± 2.6)分,均明显优于对照组的(2.2 ± 1.4)分、(1.5 ± 0.9)分、(1.5 ± 0.9)分、(1.5 ± 0.6)分、(8.6 ± 4.6)分(U=125、111、68、89、97,均P<0.05).观察组总有效率为100%(20/20),对照组总有效率为75%(15/20),两组差异有统计学意义(χ^2 =14.10,P<0.01).结论 注射用重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白联合玻璃酸钠关节腔注射治疗类风湿关节炎可有效改善患者的临床症状,而且较单用效果明显.

肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体系统和核因子KB在糖尿病大鼠肾脏中的表达

目的探讨肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体（TRAIL）系统在糖尿病肾病发生发展中的作用。方法观察TRAIL及其死亡受体4（DR4）、诱骗受体2（DcR2）和核因子KB（NF-KB）在糖尿病大鼠不同时期肾脏中的表达及分析其与肾功能的关系。将80只Wistar大鼠随机分为对照组（NC组）和糖尿病组（DM组），一侧肾切除后，腹腔注射链脲佐菌素（STZ，55mg／kg）建立糖尿病大鼠模型。在第4、8、12、16周末，随机处死各组8只大鼠，收集血液、尿液和肾组织，检测血生化指标、尿蛋白量（24h）和肥大指数等。应用荧光实时定量RT-PCR和免疫组织化学的方法检测肾皮质TRAIL及其受体DR4、DcR2和NF-KB的mRNA和蛋白的表达情况。结果各时间点DM组大鼠尿蛋白量（24h）和肥大指数（肾质量，体质量）均显著高于NC组（P〈0．05）；血白蛋白在第8周末开始显著低于NC组（P〈0．01）；Scr、BUN于第16周末显著高于NC组（P〈0．01）。DM组大鼠TRAIL及其受体DR4mRNA在第4、8及12周末时表达均显著低于NC组（P〈0．01）；第16周末时表达显著高于NC组（P〈0．01）。DM组大鼠DcR2mRNA在第4、8及12周末时表达均显著高于NC组（P〈0．01）；NF-KB的基因表达均显著高于NC组（P〈0．05）。免疫组化结果显示TRAIL及其受体DR4、DcR2主要在肾小管表达，而在肾小球和脉管系统未见表达；NF-KB在肾小球和肾小管均有表达；TRAIL及其受体和NF-KB在各组表达趋势与PCR结果一致。结论TRAIL系统作为调节细胞凋亡的一组重要因子，参与了糖尿病肾病的发生发展。

糖尿病小鼠睑板腺功能障碍及其炎性因子和脂类代谢因子表达变化

目的观察糖尿病模型小鼠睑板腺形态和功能及睑板腺组织中炎性因子和脂类代谢因子的表达变化。方法采用随机数字表法将清洁级8周龄雄性C57BL/6小鼠50只分为正常对照组20只和糖尿病模型组30只。采用腹腔内注射10 mg/ml链脲佐菌素法制备糖尿病模型,鼠尾静脉血糖≥16.7 mmol/L视为造模成功,每周监测血糖,对比2个组小鼠体质量,每4周2个组任意选取10只小鼠行角膜荧光素钠染色评估角膜上皮完整性,于造模后8周和16周每组任意选取5只小鼠取睑板腺组织,行苏木精-伊红染色观察组织形态学变化;造模后16周每组任意选取5只小鼠对睑板腺组织行油红O染色对比观察睑酯分布情况;造模后16周,采用实时荧光定量PCR法检测睑板腺组织中肿瘤坏死因子(TNF)-α、色素上皮衍生因子(PEDF)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)和脂类分化相关蛋白(ADFP)mRNA的相对表达量。结果糖尿病模型组小鼠成模率为100%,饲养过程中存活率为83.3%(25/30)。糖尿病模型组小鼠造模后8周和16周体质量均较同期正常对照组明显降低,血糖较同期正常对照组升高,差异均有统计学意义(均P<0.05)。糖尿病模型组不同时间点角膜荧光素钠染色评分值比较差异有统计学意义(F=27.155,P<0.05)。造模后16周糖尿病模型组睑板腺导管管壁变薄,管腔扩大,腺泡膨胀,睑板腺大部分腺泡内油红O着染。造模后16周,糖尿病模型组睑板腺组织中TNF-α和PPARγ mRNA相对表达量分别为3.33±0.91和1.55±0.25,明显高于正常对照组的1.00±0.16和1.00±0.27,PEDF mRNA相对表达量为0.42±0.08,明显低于正常对照组的1.00±0.34,差异均有统计学意义(均P<0.05);2个组间ADFP mRNA相对表达量比较,差异无统计学意义(t=0.943,P=0.38)。结论 TNF-α、PEDF和PPARγ可能参与糖尿病诱导睑板腺功能障碍的发生。

TRAIL和EGFR配体寡肽与力达霉素辅基蛋白融合蛋白制备过程的优化

目的对以包涵体形式表达的TRAIL和EGFR配体寡肽与力达霉素辅基蛋白融合蛋白Ec-LDP-TRAIL的制备过程进行优化。方法对大肠杆菌原核表达Ec-LDP-TRAIL目的蛋白的温度、诱导物浓度、起始菌体密度及时间等条件进行优化;在Ni2+亲和层析纯化蛋白过程中对样品预处理以及纯化缓冲液成分进行优化;对纯化后蛋白的分步透析复性过程进行一系列优化,并通过基于ELISA的结合活性实验分析Ec-LDP-TRAIL与肿瘤细胞的结合能力。结果经过工艺优化后,纯化后的融合蛋白Ec-LDP-TRAIL纯度达95%以上,复性后LB培养基活性蛋白收率约为2.2 mg/L,与初始复性条件相比提高近2倍。复性后融合蛋白Ec-LDP-TRAIL显示出能够与人表皮癌A431和人大细胞肺癌H460细胞的结合活性。结论融合蛋白Ec-LDP-TRAIL制备过程的优化为后续研发和生产奠定了实验基础,同时也为其他以包涵体形式表达的基于TRAIL的抗肿瘤蛋白药物的制备提供借鉴。

顺铂对肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体逆转胃癌多药耐药现象的增敏作用及机制

目的：研究顺铂（DDP）对肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（TRAIL）逆转人胃腺癌耐长春新碱（ VCR） SGC7901-VCR细胞多药耐药现象的增敏作用，以及可能的分子机制。方法采用四甲基偶氮唑蓝（ MTT）法检测不同化疗药物处理组SGC7901和SGC7901-VCR细胞的半数抑制浓度（ IC50）和细胞存活率。以不同浓度的DDP和TRAIL单独或联合处理SGC7901-VCR细胞，采用逆转录PCR、荧光定量PCR和Western blot法检测不同处理组中多种基因的mRNA和蛋白表达。以c-myc-siRNA干扰、重组c-myc质粒转染SGC7901-VCR细胞，采用逆转录PCR和Western blot法检测不同处理组SGC7901-VCR细胞中死亡受体（ DR）4、DR5、c-myc基因的mRNA和蛋白表达。结果与单用TRAIL组和空白对照组比较，联合DDP后，VCR、DDP、阿霉素和氟尿嘧啶对SGC7901-VCR细胞的IC50均明显降低（均P＜0．05）。 TRAIL联合DDP时，对SGC7901-VCR细胞中caspase-3的激活作用以及对DNA-PKcs／Akt／GSK-3β信号通路、耐药基因MDR1、MRP1的抑制程度明显高于TRAIL单独作用时（均P＜0．01）。以siRNA干扰沉默c-myc后，SGC7901-VCR细胞中c-myc、DR4和DR5的表达明显减低（均P＜0．01）；以重组 c-myc质粒转染高表达 c-myc后，SGC7901-VCR细胞中 c-myc、DR4和DR5的表达明显增加（均P＜0．01）。10 ng／ml TRAIL组、0．25μg／ml DDP＋10 ng／ml TRAIL组和0．5μg／ml DDP＋10 ng／ml TRAIL组c-myc蛋白的相对表达量分别为0．314±0．012、0．735±0．026和0．876±0．028，细胞色素C（cyt C）蛋白的相对表达量分别为0．339±0．036、0．593±0．020和0．735±0．031，差异有统计学意义（P＜0．05）；DR4、DR5、活性caspase-9和活性caspase-3蛋白的相对表达量也随着DDP 浓度的增加而增加。结论 SGC7901-VCR的多药耐药性与DNA-PKcs／Akt／GSK-3β信号通路的激活以及耐药基因MDR1和MRP1的高表达有关。与TRAIL 联合时，DDP能够通过增加c-myc的表达促进DR4和DR5的高表达，并促进线粒体释放cyt C进一步激活TRAIL通路的caspase阶梯反应，来增强TRAIL对SGC7901-VCR细胞多药耐药特性的逆转作用。

脂多糖介导的人牙周膜成纤维细胞损伤过程中TRAF-6蛋白表达的研究

目的观察在不同浓度脂多糖(LPS)干预下,肿瘤坏死因子受体相关分子(TRAF)6在人牙周膜成纤维细胞(HPLFs)损伤过程中表达的情况。方法取原代培养至5～7代的HPLFs,以LPS梯度浓度干预,采用免疫组织化学方法检测TRAF-6在HPLFs中的表达。结果TRAF-6在正常的HPLFs中呈阴性表达,随LPS干预浓度由0.1μg/ml增加到100μg/ml,TRAF-6表达有先逐渐增高然后又降低的趋势。结论TRAF-6在LPS引发的HPLFs炎症损伤中发挥重要的作用,为细胞因子调控网络增添新资料。

血必净联合纤维支气管镜吸痰灌洗治疗重症肺炎的疗效及对血清炎性因子水平的影响

目的探讨血必净联合纤维支气管镜吸痰灌洗治疗重症肺炎病人的疗效及对血清炎性因子水平的影响。方法将周口市中心医院呼吸重症监护病房2018年3月至2019年2月收治的104例重症肺炎病人按随机数字表法分为对照组(n=50)和试验组(n=54),对照组应用纤维支气管镜吸痰灌洗,试验组给予血必净+纤维支气管镜吸痰灌洗治疗,比较两组治疗后疗效、机械通气时间、抗菌药物治疗使用时间、肺啰音消失时间、ICU住院时间,治疗前后氧分压(PaO2)、二氧化碳分压(PaCO2)、血氧饱和度(SpO2)和血清肿瘤坏死因子 a(TNF α)、降钙素原(PCT)、C反应蛋白(CRP)水平等。结果治疗7 d后,试验组总体疗效优于对照组(P<0.05);治疗后,试验组机械通气时间(6.19±1.39)d、肺啰音消失时间(6.28±1.49)d、抗菌药物治疗使用时间(5.93±1.32)d和ICU住院时间(13.19±2.49)d显著短于对照组的(9.26±1.39)d、(10.24±2.20)d、(9.62±1.54)d、(17.84±3.24)d(P<0.05);治疗前两组PaCO2、PaO2、SpO2及血清TNF α、PCT、CRP水平组间比较均差异无统计学意义(P>0.05),治疗后试验组PaO2(83.24±6.50)mmHg、SpO2(93.16±7.29)%高于对照组的(73.53±5.76)mmHg、(84.62±6.82)%,PaCO2(43.07±3.61)mmHg和血清TNF α(51.29±6.68)ng/L、PCT(0.59±0.13)pg/L、CRP(23.66±3.06)mg/L水平低于对照组的(47.27±3.82)mmHg、(65.34±7.12)ng/L、(1.38±0.39)pg/L、(41.63±5.18)mg/L,差异有统计学意义(P<0.05)。结论血必净联合纤维支气管镜吸痰灌洗可降低重症肺炎机体炎症反应程度,改善血气分析指标,缩短ICU住院时间,提高临床疗效。

藏雪莲多糖通过P38丝裂原激活蛋白激酶通路减轻中波紫外线辐射后皮肤角质形成细胞凋亡引起炎性损伤的研究

目的探讨藏雪莲(SSB)多糖是否通过P38丝裂原激活蛋白激酶(P38MAPK)通路减轻中波紫外线(UVB)辐射后皮肤角质形成细胞(Ha Ca T细胞)凋亡引起炎性损伤。方法 2014年10月—2015年3月,提取SSB多糖,体外培养Ha Ca T细胞,将Ha Ca T细胞分为低剂量辐射组(30 m J/cm2,辐射1 h,A组)和高剂量辐射组(60 m J/cm2,辐射1 h,B组);将A组和B组又分别分为对照组(1组)、辐射组(UVB,2组)、低剂量SSB多糖组(UVB+SSB 10 mg/ml,3组)和高剂量SSB多糖组(UVB+SSB 40 mg/ml,4组)。采用酶联免疫吸附实验(ELISA)法检测并比较白介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、P38MAPK、P53、B细胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)、Bcl-2相关X(Bax)、半胱氨酸蛋白酶3(Caspase-3)水平。结果 A2组IL-6、TNF-α、P38MAPK、P53、Bax、Caspase-3水平高于A1组,Bcl-2水平低于A1组(P<0.05);A3组IL-6、TNF-α、P38MAPK、Caspase-3水平高于A1组(P<0.05);A4组TNF-α、Bcl-2水平高于A1组(P<0.05);A3组、A4组IL-6、TNF-α、P38MAPK、P53、Bax、Caspase-3水平低于A2组,Bcl-2水平高于A2组(P<0.05);A4组IL-6、TNF-α、Caspase-3水平低于A3组,Bcl-2水平高于A3组(P<0.05)。B2组IL-6、TNF-α、P38MAPK、P53、Bax、Caspase-3水平高于B1组,Bcl-2水平低于B1组(P<0.05);B3组IL-6、TNF-α水平高于B1组,Bcl-2水平低于B1组(P<0.05);B4组IL-6、Bcl-2水平高于B1组,TNF-α、Caspase-3水平低于B1组(P<0.05);B3组、B4组IL-6、TNF-α、P38MAPK、P53、Bax、Caspase-3水平低于B2组,Bcl-2水平高于B2组(P<0.05);B4组IL-6、TNF-α、Caspase-3水平低于B3组,Bcl-2水平高于B3组(P<0.05)。结论 SSB多糖通过P38MAPK通路减少UVB辐射后Ha Ca T细胞凋亡,进而减轻Ha Ca T细胞的炎性损伤。

社区获得性肺炎患者血清CTRP5水平及与炎症细胞因子的关系

目的探讨社区获得性肺炎(CAP)患者血清补体C1q/肿瘤坏死因子相关蛋白5(CTRP5)水平及与炎症细胞因子水平的关系。方法选取2014年1月-2017年12月诸暨市第三人民医院内科住院治疗的CAP患者80例作为CAP组,同期本院健康体检者80例作为对照组。CAP患者根据病情分为普通CAP组58例和重症CAP组22例。测定血清CTRP5水平和C反应蛋白(CRP)、降钙素原(PCT)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-ɑ(TNF-ɑ)水平。结果CAP组患者治疗前血清CTRP5、CRP、PCT、IL-6、TNF-ɑ水平高于对照组(P<0.05)。重症CAP组血清CTRP5、CRP、PCT、IL-6、TNF-ɑ水平高于普通CAP组(P<0.05)。普通CAP组与重症CAP组患者治疗后血清CTRP5、CRP、PCT、IL-6、TNF-ɑ水平均低于治疗前(P<0.05)。CAP患者治疗前血清CTRP5水平与血清CRP、PCT、IL-6、TNF-ɑ水平均呈正相关(r=0.521、0.625、0.523和0.584,P<0.05)。结论CAP患者血清CTRP5水平升高,其水平高低可反映病情严重程度和炎症反映程度。

缺氧缺血性脑病患儿脑血流动力学调节中免疫细胞因子的作用及其机制(英文)

背景:细胞因子对脑血流动力学的调节作用是否通过调节血浆内皮素-1(endothelin-1,ET-1)、降钙素基因相关肽(calcitoningene-relatedpep-tide,cGRP)、C型利钠肽(C-typenatriureticpeptide,CNP)等血管活性因子的变化而实现的。目的:探讨细胞因子对缺氧缺血性脑病(hypoxic-ischemicencephalopa-thy,HIE)患儿脑血流动力学的调节作用及其机制。设计:非随机对照实验研究。地点、材料和干预:研究对象为1999-05/2001-06来源于首都医科大学附属北京妇产医院,用放射免疫法检测40例HIE患儿与40例正常新生儿生后1,3,和7d外周血白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6),肿瘤坏死因子-α(tumornecrosisfactor-alpha,TNF-α),白细胞介素-8(interleukin-8,IL-8)与内皮素-1(endothelin-1,ET-1)、降钙素基因相关肽(calcitoningene-relatedpeptide,cGRP)、C型利钠肽(C-typenatriureticpeptide,CNP)水平,由北京东亚免疫技术研究所负责检测。于生后第1天用脉冲多普勒超声检测两组新生儿大脑中动脉的血流动力学参数。结果:HIE患儿血清TNF-α升高、IL-6、IL-8降低,并与脑血流动力学紊乱和ET-1,cGRP,CNP的变化具有一定相关性,即阻力指数(RI)与IL-6呈负相关(r=-0.61,P<0.01),与IL-8,TNF-α呈正相关(r=0.80,0.72,P<0.01)。