诱导型一氧化氮合酶及肿瘤坏死因子-α基因多态与矽肺易感性

目的探讨诱导型一氧化氮合酶(iNOS)基因和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)基因多态性与矿工矽肺易感性的关系.方法采用病例对照设计,以男性矽肺病人184例为病例组,111例无矽肺的男性接尘矿工为对照组.应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析(PCR-RFLP)技术检测iNOS Ser608Leu和TNF-α-308位点的多态性.结果 iNOS Ser608Leu位点携带T等位基因(C/T或T/T)的个体患矽肺的危险性降低(OR=0.48,95%CI=0.29～0.80),且与矽肺期别相关(P＜0.01).在矽尘高暴露组中,T等位基因的保护作用明显(OR=0.43,95%CI=0.24～0.78).TNF-α-308基因多态与矽肺危险性之间无相关性(P＞0.05),但携带A等位基因(G/A或A/A基因型)的吸烟工人更易发生矽肺(OR=2.48,95%CI=1.16～5.32).结论iNOS基因16外显子C＞T突变可能是抵抗矽肺发生和发展的保护因素,TNF-α-308位点基因多态在矽肺发病的遗传易感因素中不起主要作用,但该多态性与吸烟有交互作用.

慢性心房颤动患者右心耳IL-1β、IL-6和肿瘤坏死因子-α基因表达的研究

目的 观察慢性心房颤动(房颤)患者右心耳白介素-1β(IL -1β)、白介素- 6(IL -6)和肿瘤坏死因子-α(TNF α)基因表达的改变。方法 将术中获取的48例风湿性瓣膜病患者的右心耳分为2组,其中窦性心律组27 例,慢性房颤组21 例,以GAPDH为内参照基因,采用逆转录聚合酶链反应(RT- PCR)技术测定心房组织中IL -1β、IL- 6和TNF -α的mRNA含量,用病理学检查评价心房组织纤维化程度,用免疫组织化学检查评价IL- 1β和TNF- α的表达情况。结果 与窦性心律组相比,慢性房颤组IL- 1β、IL- 6和TNF -α的mRNA表达显著增加。慢性房颤患者心房组织有显著的纤维化,而且心房肌细胞IL- 1β和TNF -α的表达强度也显著大于窦性心律组。结论 慢性房颤患者心房组织IL- 1β、IL -6和TNF- α的mRNA表达显著增加,炎症反应可能是房颤发生和维持的因素之一。

肿瘤坏死因子-α基因-环境交互作用与不明原因复发性流产易感性的关系

目的探讨肿瘤坏死因子(TNF)基因rs1800629、rs361525位点多态性及基因—环境交互作用与不明原因复发性流产(URSA)易感性的关系。方法使用SNaPshot多重SNP分型技术对150例URSA患者和150名健康对照检测TNF基因相关位点多态性,采用关联分析和广义多因子降维法(GMDR)分析其与URSA的关系。结果多因素回归分析显示,在共显性、显性和隐性遗传模式以及等位基因模式下,TNF基因rs1800629、rs361525位点均未发现与URSA发病风险增加有关(P>0.05)。但按流产次数进行分层分析,结果显示rs361525位点在显性遗传模式中,A等位基因携带者显著增加发生2次流产的风险(OR=2.402,95%CI:1.041~5.545)。GMDR分析显示,rs1800629、rs361525,工作属性存在交互作用。结论rs361525位点A等位基因可能为中国兰州地区URSA患者,特别是流产2次患者的易感等位基因。TNF基因-环境交互作用可能增加URSA发病风险。未发现TNF基因rs1800629多态性与USRA之间的联系。

大鼠脊髓损伤后白细胞介素-10、肿瘤坏死因子-α基因表达的变化

目的 探讨大鼠脊髓损伤后白细胞介素 1 0 (IL 1 0 )、肿瘤坏死因子 α(TNF α)mRNA表达的时序变化规律。方法 SD大鼠 4 2只 ,随机分为 7组 ,采用改良Allen’s脊髓损伤打击模型 ,以逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)法测定伤段脊髓组织中IL 1 0、TNF αmRNA的表达情况。结果 正常脊髓组织内存在IL 1 0、TNF αmRNA的表达 ;脊髓损伤后IL 1 0mRNA表达逐渐上调 ,伤后 72小时明显上调 ,1 6 8小时达到高峰 ;TNF αmRNA伤后 1小时表达明显上调并达峰值 ,高表达持续至损伤后 2 4小时。结论 脊髓继发性损伤过程中抗炎性细胞因子与前炎性细胞因子共同存在 ;

肿瘤坏死因子-α基因多态性与中国汉族人群乙肝病毒感染的相关性研究

目的探讨中国汉族人群肿瘤坏死因子-α(TNF-α)基因单核苷酸多态性(rs1800629和rs361525)与乙型肝炎病毒(HBV)感染的相关性。方法用TaqMan探针对纳入的1 097例样本进行TNF-α、rs1800629和rs361525位点多态性检测,血样本包括429例慢性HBV感染者(CH组)、429例乙肝感染后自发清除者(SR组)及239例健康对照者(HC组)。结果 1CH组与SR组比较,rs1800629 GA基因型与G等位基因与感染后病毒的自发清除有关[基因型:O■=0.369,P=0.000;等位基因:O■=2.210,P=0.000;显性模型(GG vs GA+AA):O■=0.536,P=0.000]。2CH组与SR组比较,SNP rs361525 GA基因型或A等位基因与感染后病毒的自发清除密切相关[基因型:O■=0.288,P=0.000;等位基因:O■=0.549,P=0.000;显性模型(GG vs GA+AA):O■=0.634,P=0.000]。结论 TNF-α基因多态性与中国汉族人群HBV病毒感染后的自发清除密切相关。

肿瘤坏死因子-α基因与精神分裂症的关联研究

目的:探讨肿瘤坏死因子-α(TNF-α)基因rs1800629位点与精神分裂症及其临床特征的关系。方法:采用Taq Man探针SNP基因分型技术对稳定期精神分裂症患者(患者组) 254例和健康对照者(正常对照组) 339名TNF-α基因rs1800629位点进行分型;采用阳性和阴性症状量表(PANSS)评定患者组精神病性症状,分析比较rs1800629位点3种不同基因型间症状严重程度。结果:患者组与正常对照组TNF-α基因rs1800629位点基因型的观察值和期望值Hardy-Weinberg平衡吻合度良好(χ2=2. 70,P=0. 10;χ2=2. 58,P=0. 11);患者组与正常对照组在rs1800629位点基因型和等位基因频率分布比较,差异无统计学意义(χ2=3. 16,P=0. 21;χ2=3. 44,P=0. 06);携带A等位基因患者阳性症状分、阴性症状分、一般病理分及PANSS总分较不携带A等位基因患者更高(F=6. 03,P=0. 015; F=14. 82,P=0. 000; F=42. 02,P=0. 000; F=35. 19,P=0. 000)。结论:TNF-α基因rs1800629位点可能与精神分裂症无关;但与疾病的严重程度有关。

人肿瘤坏死因子-α基因转导绒癌耐药细胞系体外耐药逆转的研究

目的 将人肿瘤坏死因子 alpha(hTNF α)基因导入已建立的绒癌耐药细胞系 ,观察hTNF α基因转导后对绒癌细胞耐药性逆转的体外作用。方法 通过阳离子脂质体将hTNF α基因转导绒癌耐药细胞系 ,用新霉素筛选含hTNF α片段的单细胞克隆 ,用RT PCR方法和细胞免疫组织化学方法 ,检测转导hTNF α基因的耐药细胞中MDR1mRNA和MDR1蛋白 (P gp)表达水平的改变。采用四甲基偶氮唑蓝比色法 ,检测转导hTNF α基因的耐药细胞对足叶乙甙 (VP 16 )的耐药指数。结果 转导hTNF α基因后 ,绒癌耐药细胞中检测出hTNF αmRNA表达 ,转导hTNF α基因在mRNA水平能一定程度的逆转绒癌耐药细胞的MDR1,而在P gp蛋白水平几乎能完全逆转绒癌耐药细胞的MDR1。转导hTNF α基因的细胞的耐药指数明显降低。结论 hTNF α基因转导后 ,可通过调节MDR1的表达 。

肿瘤坏死因子-α基因启动子区点突变与乙型肝炎相关

目的:调查我国汉族健康人群和乙肝患者中TNF-α基因启动子区点突变的分布特点,并探讨HBV感染与TNF-α基因多态性之间的关系.方法:采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析(PCR-RFLP)的方法对健康人群(103例)与HBV患者(232例)的TNF-α基因启动子区-308G→A单碱基突变多态性进行了分析.结果:TNF-α基因启动子区-308G→A单碱基突变频率在HBV患者中的分布明显低于健康人群(4.7%vs9.7%,P<0.05).不同性别、不同HBV血清标记类型、不同HBVDNA肝炎患者之间TNF-α(-308G→A)基因型与突变频率均无显著性差异.结论:我国汉族人群TNF-α的基因启动子区-308nt单碱基多态性可能与HBV的发病及易感性相关.

人肿瘤坏死因子-α基因转染与干扰素-γ联合应用对舌癌细胞生长的影响

目的 :探讨干扰素_γ(IFN_γ)与人肿瘤坏死因子_α(hTNF_α)基因转染联合应用对舌癌细胞生长的影响。方法 :将培养细胞分为 2组 ,其中一组转染hTNF_α基因 ,另一组不转染 ;再将每一组又分为 5个小组 ,每一小组分别加入IFN_γ ,使其终浓度分别为 0、1、10、10 0、10 0 0U/ml,培养 4 8h后 ,用MTT法测定Tca8113细胞的存活率 ,用免疫细胞化学染色法观察hTNF_α的表达。结果 :单纯加入IFN_γ对舌癌细胞的活性无影响 ;hTNF_α基因转染与IFN_γ联合应用时 ,不同浓度的IFN_γ均有协同hTNF_α基因转染杀伤舌癌细胞的作用 ,而且其抑瘤效应与IFN_γ的浓度呈正相关(r=0 86 7,P <0 0 1) ;与未转染组相比 ,转染组细胞hTNF_α呈明显的高表达。结论

低分子质量壳寡糖对蛋鸡生产性能、蛋品质、血清生化指标、盲肠微生物数量及脾脏白细胞介素-2、肿瘤坏死因子-α基因表达的影响

本试验旨在研究饲粮中添加不同水平的低分子质量(1 000 u)壳寡糖对蛋鸡生产性能、蛋品质、血清生化指标、盲肠微生物数量以及脾脏白细胞介素-2(IL-2)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)基因表达的影响。选取体重和产蛋率相近的58周龄海兰褐壳蛋鸡600只,随机分为4组,每组5个重复,每个重复30只。对照组饲喂基础饲粮,试验组分别饲喂在基础饲粮中添加300、600、900 mg/kg壳寡糖的试验饲粮。预试期为7 d,正试期为42 d。结果表明:1)添加300、600和900 mg/kg壳寡糖组的产蛋率分别比对照组提高了4.52%(P<0.05)、2.99%(P>0.05)和4.08%(P>0.05)。2)试验第3、6周末,添加600和900 mg/kg壳寡糖组的鸡蛋哈夫单位分别比对照组提高了6.87%、6.69%和6.47%、6.60%(P<0.05)。3)与对照组相比,饲粮添加600、900 mg/kg壳寡糖显著降低了血清葡萄糖、胆固醇含量和谷草转氨酶活性(P<0.05)。4)与对照组相比,饲粮添加600、900 mg/kg壳寡糖显著提高了盲肠双歧杆菌和乳酸杆菌的数量(P<0.05),显著降低了盲肠金黄色葡萄球菌的数量(P<0.05)。5)与对照组相比,饲粮添加300、600 mg/kg壳寡糖显著提高了脾脏IL-2 m RNA表达水平(P<0.05),饲粮添加600 mg/kg壳寡糖显著提高了脾脏TNF-αm RNA表达水平(P<0.05)。由此可见,饲粮中添加不同水平的壳寡糖,提高了蛋鸡的产蛋率和哈夫单位,调节了肠道微生物菌群,增强了蛋鸡的免疫力,适宜壳寡糖添加水平为600 mg/kg。

肿瘤坏死因子-α基因多态性与慢性阻塞性肺疾病的关系

目的:探讨中国北方汉族人肿瘤坏死因子鄄α(TNF鄄α)基因多态性与慢性阻塞性肺疾病(COPD)易感性的关系。方法:应用聚合酶链反应限制性片段长度多态性法(PCR鄄RFLP)检测TNF鄄α基因鄄308位基因型在58例中国北方汉族人COPD患者和60例健康对照者中基因频率的分布。结果:58例COPD患者和60例健康对照者TNF2频率分别为17.5%、7.5%,2者差异有统计学意义(P<0.025,OR=2.56)。结论:TNF鄄α(308)的基因多态性与中国北方汉族人COPD易感性有关。

肿瘤坏死因子-α基因多态性及其血清水平与脑梗死的相关性

目的探讨肿瘤坏死因子（TNF）-α T1031C多态性位点及血清水平与动脉粥样硬化性脑梗死的病情严重程度和发病风险的关系。方法选择动脉粥样硬化性脑梗死患者（病例组）120例，健康者75例为对照组。采用限制性片段长度多态性分析技术，检测两组TNF—α T1031C多态的分布。采用酶联免疫吸附法（ELLSA）检测两组患者血清TNF-α水平。结果病例组TNF—αT1031C的cc基因型、C等位基因频率明显高于对照组（P〈0．05）。TNF—α T1031C的各基因型与脑梗死病情严重程度无相关性（P〉0．05）。Logistic回归校正性别、年龄、吸烟、血糖、血压等因素后，TNF-αT1031C的CC基因型脑梗死发病风险明显增加（OR=3．671，95％CI：10．26～13．135，P=0．046）。病例组TNF-α血清水平明显高于对照组（P〈0．05）。病例组和对照组TNF—α T1031C各基因型的血清TNF-α 水平无显著差异（P〉0．05）。结论TNF-α基因T1031C的CC基因型增加动脉粥样硬化性脑梗死的发病风险，C等位基因是脑梗死的遗传易感基因之一。

白细胞介素4及肿瘤坏死因子-α基因多态性与湖北汉族儿童哮喘相关性研究

目的 探讨白细胞介素 (IL) 4基因启动子区C +33T及肿瘤坏死因子 α (TNF α) 30 8位基因多态性与湖北汉族儿童哮喘的易感性的关系。方法 用聚合酶链反应和限制片段长度多态性 (PCR/RFLP)的方法对湖北汉族115例哮喘患儿及 75例健康儿童进行IL 4启动子的 +33位点多态性分析 ,对 113例哮喘患儿及 12 6例健康儿童进行TNF α的 30 8位点多态性分析。结果 哮喘患儿与健康对照组IL 4基因启动子C +33T位点的基因型频率和等位基因频率CC、CT、TT之间有显著性差异 (P <0 0 0 1)。TNF α的 30 8位点的基因型频率和等位基因频率在两组的比较中无显著性差异 (P >0 0 5 )。结论 IL 4启动子 +33位点基因多态性与湖北汉族儿童哮喘易感性相关 ,TNF α 30

子宫内膜异位症与肿瘤坏死因子-α基因多态性的相关性

目的探讨TNF基因多态性与子宫内膜异位症(内异症)的遗传易感性的关系,力求在基因水平上探讨内异症发病的机制。方法应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性技术(PCR-RFLP技术)检测82例内异症患者(内异症组)80例非内异症妇女(对照组)的TNF-α基因启动子区域-308位点(TNF-α-308)的多态性,并分析TNF基因多态性与内异症风险之间的关系。结果TNF-α-308位点等位基因和基因型频率分布在两组间比较,差异无显著性(χ2=0.542 9,χ2=0.640,均P>0.05)。结论TNF-α-308位点上基因多态性的单独存在可能与内异症无明显关联,TNF-α-308位点的突变基因可能与广东汉族妇女内异症遗传易感无关。

肿瘤坏死因子-α基因多态性与恶性肿瘤糖代谢异常的关系

目的探讨肿瘤坏死因子-α（TNF-α）基因启动子区-238、-308位点基因多态性与恶性肿瘤糖代谢异常的关系。方法新乡医学院第一附属医院2013年4月至2014年5月经病理诊断确诊的恶性肿瘤患者根据口服葡萄糖耐量试验分为肿瘤且糖耐量正常患者（糖耐量正常组）、肿瘤合并糖耐量受损患者（糖耐量受损组）和肿瘤合并糖尿病患者（糖尿病组）,各组按照入院顺序随机抽取40例作为观察对象;另外,在知情同意的原则下随机选取40例体检健康者作为健康对照组。采用聚合酶链反应-限制性片断长度多态性分析法检测正常糖耐量组、糖耐量受损组、糖尿病组患者和健康对照组的TNF-α基因启动子-238、-308多态性,确定其基因型和等位基因频率的分布。结果糖耐量正常组患者的GA＋AA基因型频率与健康对照组比较差异无统计学意义（χ2=5.871,P〉0.05）。糖耐量受损组和糖尿病组患者的GA＋AA基因型频率高于健康对照组和糖耐量正常组（χ2=7.211、25.621,P〈0.05;χ2=5.267、18.015,P〈0.05）。糖尿病组患者的GA＋AA基因型频率与糖耐量受损组比较差异无统计学意义（χ2=4.236,P〉0.05）。糖耐量正常组和糖耐量受损组患者的TNF-α-308 A等位基因频率与健康对照组比较差异无统计学意义（χ2=2.137、3.215,P〉0.05）。糖尿病组患者的TNF-α-308 A等位基因频率显著高于健康对照组和糖耐量正常组（χ2=8.469、24.430,P〈0.05）,且显著高于糖耐量受损组（χ2=3.625,P〈0.05）。健康对照组仅1例出现AA基因型,糖耐量正常组、糖耐量受损组和糖尿病组患者中均未出现AA基因型,TNF-α-238基因型和A等位基因频率分布在各组间比较差异无统计学意义（χ^2=3.472、2.894,P〉0.05）。结论恶性肿瘤糖代谢异常与TNF-α-308基因的多态性有关。

肿瘤坏死因子-α基因多态性与慢性阻塞性肺病的关系

目的:探讨肿瘤坏死因子-α(TNF-α)基因启动子多态性与慢性阻塞性肺病(COPD)间的关系。方法:用聚合酶链反应及测序法研究66例吸烟COPD患者、42例吸烟非COPD患者及43例不吸烟非COPD患者的TNF-α308及TNF-α238位点基因型和A等位基因的分布情况。结果:(1)吸烟COPD组与吸烟非COPD组、吸烟COPD组与不吸烟非COPD组在308及238位点上的基因型(GG、GA、AA)频率均无显著差异(P>0.05)。(2)吸烟COPD组和吸烟非COPD组A等位基因频率在308与238位点分别为3.4%、6.1%及5.1%、2.4%,两组间均无显著差异(P>0.05)。(3)重度COPD组与轻中度COPD组在这两位点的基因频率也无明显不同,分别为(2.2%对4.2%和4.3%对5.6%)(P>0.05),且在这两亚组中TNF*2等位基因仅以TNF1/2的杂合子形式存在。(4)吸烟COPD组与吸烟非COPD组,吸烟COPD组与不吸烟非COPD组相比血中TNF-α浓度明显增高,均有显著差异(P<0.01)。结论:TNF-α308及TNF-α238位点基因多态性与吸烟有关的COPD易感性及其严重程度无明显相关性。TNF-α与COPD的发生相关,可能与其他基因位点的多态性有关。

人肿瘤坏死因子-α基因转染人胚成肌细胞的表达和分泌研究

目的应用人肿瘤坏死因子_α(hTNF_α)基因转染人胚成肌细胞,观察转染hTNF_α基因后人胚成肌细胞表达和分泌hTNF_α的水平。方法用阳离子脂质体DOSPER介导含hTNF_α基因的穿梭质粒pSV23SHTNF转染人胚成肌细胞;对照组只给予等量的脂质体,不加入质粒。转染基因后24、48、72、96h用免疫组织化学染色观察hTNF_α基因在人胚成肌细胞细胞浆和细胞膜的表达水平,并用ELISA法检测人胚成肌细胞培养上清液中hTNF_α的浓度。结果免疫组织化学染色发现实验组人胚成肌细胞在转染hTNF_α基因后24、48、72、96h均见细胞浆和细胞膜hT NF_α呈强阳性表达,而对照组均呈弱阳性;ELISA检测发现实验组人胚成肌细胞培养上清液中hTNF_α平均浓度在各时期均高于对照组(P<0.05),尤以转染72h后最高,达401.0pg/ml。结论hTNF_α基因转染成肌细胞,可使成肌细胞持续高表达和高浓度分泌hTNF_α,提示可以用hTNF_α基因转染舌癌周围肌细胞,使癌周微环境肌细胞持续表达和分泌高浓度hTNF_α来抑制舌癌向肌深层浸润。

人肿瘤坏死因子-α基因转染对舌癌细胞的抑制作用

目的 :探讨人肿瘤坏死因子_α(hTNF_α)基因转染对舌癌细胞生长的影响。方法 :制备和纯化含hTNF_α基因的穿梭质粒 ,用DOSPER阳离子脂质体介导转染Tca8113舌癌细胞 ,对照组只给予等量的脂质体 ,不加入质粒 ;转染基因 2 4、4 8、72、92h后用ELISA法检测细胞培养上清液中hTNF_α的浓度 ,并用MTT法检测细胞的存活率。结果 :基因转染 2 4、4 8、72、96h后转染组与对照组细胞培养上清液中hTNF_α浓度之间的差异均有显著性 (P <0 0 5 ) ,转染组各个时期浓度均高于对照组 ;MTT法检测相应各时期转染组与对照组平均OD值之间的差异均有显著性 (P <0 0 5 ) ,转染组各个时期平均OD值均低于对照组 ,转染细胞的存活率降低 ,生长受抑制。结论

豫北地区急性脑梗死患者白细胞介素-1β和肿瘤坏死因子-α基因多态性

目的探讨白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)基因多态性与急性脑梗死的相关性。方法选择2016年4月至2017年8月新乡医学院第二附属医院神经内科收治的86例脑梗死患者为研究对象(脑梗死组),另选择同期健康体检者92例为对照组。采用序列特异性引物和聚合酶链式反应(PCR)、限制性内切酶酶切技术检测2组受试者血液中IL-1β(-511)C/T、TNF-α(-238)G/A基因多态性。结果2组受试者IL-1β(-511)位点基因型频率和TNF-α(-238)位点基因型频率均符合Hardy-Weinberg遗传平衡定律(P>0.05)。脑梗死组患者IL-1β(-511)位点TT基因型频率高于对照组(OR=2.059,95%可信区间:1.087~3.899,P<0.05);脑梗死组患者IL-1β(-511)位点C等位基因频率低于对照组(OR=0.486,95%可信区间:0.256~0.920,P<0.05)。2组受试者TNF-α(-238)位点基因型频率和等位基因频率比较差异无统计学意义(P>0.05)。其中AA基因型在全部研究对象中未检出,G等位基因见于全部研究对象。结论IL-1β(-511)C/T多态性可能与脑梗死有关,TNF-α(-238)G/A多态性可能与脑梗死无关。

健康人群肿瘤坏死因子-α基因多态性的分析

了解汉族健康人群中TNF-A基因多态性的分布,研究TNF-α表达与相关疾病之间的联系。采用PCR-限制性长度片段多态分析法检测140名重庆地区汉族健康人群的TNF-A-308,TNF-A-857位点基因多态性,计算其基因型和等位基因频率,结果显示TNF-A-308 G/G、G/A、A/A基因型的频率分别为89%、11%、1%,其等位基因的发生频率以G等位基因最常见(93%),其次为A等位基因(7%)。TNF-A-857 C/C、C/T、T/T基因型的频率分别为68%、36%、8%,其等位基因发生频率以C等位基因最常见(81%),其次为T等位基因(19%)。由结果可以得出重庆地区汉族健康人群TNF-A-308位点存在G/A多态性,TNF-A-857位点存在C/T多态性。