心肌梗死患者血清miR-34a-5p和C1q/肿瘤坏死因子相关蛋白-9水平及其与心肌重构的相关性

目的探讨心肌梗死患者血清微小RNA(miR)-34a-5p、C1q/肿瘤坏死因子相关蛋白-9(CTRP9)水平及其与心肌重构的相关性。方法选取2019年3月至2021年3月于该院治疗的急性心肌梗死患者100例作为观察组,另选取同期在该院体检的健康体检者100例作为对照组;采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测血清中miR-34a-5p水平;采用酶联免疫吸附试验检测血清中CTRP9水平;通过心脏彩色超声诊断仪检测心肌重构指标[左心房内径(LAD)、左心室重构指数(LVRI)、左心室质量指数(LVMI)、左心室后壁厚度(LVPW)];采用Pearson相关分析血清miR-34a-5p与CTRP9的相关性及二者与心肌重构指标的相关性;采用多因素Logistic回归分析急性心肌梗死发生的影响因素。结果与对照组相比,观察组血清miR-34a-5p水平、LVPW、LVMI、LAD均明显增加(P<0.05),CTRP9水平、LVRI均明显降低(P<0.05)。Pearson相关分析结果显示,miR-34a-5p与CTRP9、LVRI呈负相关(r=-0.572、-0.645,P<0.05),与LVPW、LVMI、LAD呈正相关(r=0.418、0.420、0.569,P<0.05);CTRP9与LVRI呈正相关(r=0.424,P<0.05),与LVPW、LVMI、LAD均呈负相关(r=-0.583、-0.469、-0.518,P<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,miR-34a-5p水平、LVPW、LVMI、LAD、LVRI、CTRP9水平均是急性心肌梗死发生的影响因素(P<0.05)。结论在急性心肌梗死患者血清中miR-34a-5p水平明显增加,CTRP9水平明显降低,二者呈负相关,且与心肌重构密切相关,是急性心肌梗死发生的影响因素。

肿瘤坏死因子A-308基因多态性与维吾尔族慢性牙周炎的关系

目的:探讨肿瘤坏死因子A-308(turmor necrosis factor A-308,TNFA-308)基因多态性与维吾尔族慢性牙周炎(chron ic periodontitis,CP)易感性的关系。方法:收集维吾尔族重度CP 4 l例、中度CP 43例、轻度CP 49例和同族健康对照92例个体的颊黏膜拭子,提取DNA,采用序列特异引物多聚酶链反应(sequence spec ific prim ers-polym erase chain reaction,SSP-PCR)法测定TNFA-308位点的基因型,比较各基因型检出率的差别。结果:TNFA-308位点基因型分布在重度CP、中度CP、轻度CP与健康组之间无差异。结论:TNFA-308位点基因型可能与维吾尔族CP遗传易感性无相关性。

肿瘤坏死因子-α-863位点基因多态性与心绞痛的相关性研究

目的 了解湖北地区汉族人群心绞痛患者肿瘤坏死因子 -α(TNF-α) - 86 3位点基因型的分布特点。方法 应用聚合酶链反应 -限制性片段长度多态性 (PCR- RFL P)技术检测 78例心绞痛患者和 115例正常人的TNF- α基因型。结果 TNF- α- 86 3位点基因型 CC、CA+AA频率在患者组和对照组分别为 80 .8%、19.2 %和6 2 .6 %、37.4 % ;等位基因 C、A频率在患者组和对照组分别为 89.7%、10 .3%和 80 .4 %、19.6 %。两组基因型和等位基因频率比较均有显著性差异 (P<0 .0 5 )。结论 TNF-α- 86 3位点基因多态性与心绞痛有相关性 。

肿瘤坏死因子A-308基因型与重度慢性牙周炎的关系

目的 :探讨肿瘤坏死因子 (Tumor Necrosis Factor-α,TNF) A - 30 8位点基因多态性与重度慢性牙周炎易感性的关系。方法 :分别选取新疆伊犁地区哈萨克族 4 5例重度慢性牙周炎 (CP)患者、85例牙周健康 (或仅轻度牙龈炎 )对照者 ,收集其颊粘膜拭子 ,采用 Chelex- 10 0法提取 DNA,采用多聚酶链反应 -限制性片段长度多态性(PCR- RFL P)方法对其进行基因型检测 ,分析 CP患者与对照者之间基因型的分布情况。结果:TNFA- 30 8基因型在新疆伊犁地区哈萨克族重度慢性牙周炎组以及健康对照组之间的分布差异无统计学意义 (P >0 .0 5 )。 结论 :TNFA- 30 8基因多态性与重度慢性牙周炎无关。

干扰miR-148a-5p对肿瘤坏死因子-α诱导血管平滑肌细胞增殖和迁移的影响

目的探讨干扰miR-148a-5p对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导的血管平滑肌细胞(VSMC)增殖和迁移的影响。方法体外培养VSMC,分为对照组、TNF-α组、TNF-α+anti-miR-NC组和TNF-α+anti-miR-148a-5p组,实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测细胞中miR-148a-5p表达水平,流式细胞术检测细胞周期和凋亡,蛋白免疫印迹(Western Blot)法检测细胞中细胞核增殖抗原Ki67、上皮型钙黏附蛋白(E-cadherin)和神经型钙黏附蛋白(N-cadherin)表达水平。双荧光素酶报告基因实验验证miR-148a-5p与第10号染色体缺失的磷酸酶张力蛋白同源物基因(PTEN)调控关系。结果与对照组比较,TNF-α组细胞中miR-148a-5p的表达水平升高(P<0.05),G0/G1期明显降低(P<0.05),S期明显升高(P<0.05),细胞迁移数和Ki67、N-cadherin蛋白表达水平明显升高(P<0.05),E-cadherin蛋白表达水平明显降低(P<0.05)。与TNF-α+anti-miR-NC组比较,TNF-α+anti-miR-148a-5p组细胞G0/G1期明显升高(P<0.05),S期明显降低(P<0.05),细胞迁移数和Ki67、N-cadherin蛋白表达水平明显降低(P<0.05),E-cadherin蛋白表达水平明显升高(P<0.05)。双荧光素酶报告基因结果显示,miR-148a-5p可降低PTEN野生型的荧光素酶活性(P<0.05)。结论干扰miR-148a-5p表达可抑制TNF-α诱导的VSMC增殖和迁移。

变应性鼻炎与肿瘤坏死因子水平及肿瘤坏死因子-863C/A基因多态性的关系初步探讨

目的探讨肿瘤坏死因子水平及肿瘤坏死因子-863 C/A基因多态性与变应性鼻炎的关系。方法用放免法测定TNF水平,运用多聚酶链反应技术检测90名无亲缘关系的尘螨变应性鼻炎患者和107名无血缘关系的健康汉族人肿瘤坏死因子-863 C/A基因多态性。结果变应性鼻炎组肿瘤坏死因子TNFα-863 C/C、A/C、A/A表型频率分别为:0.7222、0.2667、0.0111,对照组分别为0.7477、0.2429、0.0094;变应性鼻炎组TNFα-863 A、TNFα-863 C基因频率分别为0.8556、0.1444,对照组分别为0.8692、0.1308;TNFα-863各种基因型频率在变应性鼻炎组与正常对照组之间差异无统计学意义(P<0 05)。而血浆中TNF水平,变应性鼻炎组明显高于对照组,两组之间比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论血清TNF水平显著升高,提示炎性反应在变应性鼻炎病程中有重要作用,肿瘤坏死因子TNFα-863 C/A基因多态性与变应性鼻炎无明显相关。

150例广东籍汉族人肿瘤坏死因子TNFα-863C/A基因突变频率的检测

目的建立一种简便、准确、实用的人肿瘤坏死因子(TNF)α-863 C/A基因突变频率的检测方法 ,并了解广东籍汉族人TNFα-863 C/A C基因的分布特点。方法应用聚合酶链反应(特异性扩增人TNFα-863 C/A基因序列,扩增产物用限制性内切酶以Tai I酶切,琼脂糖凝胶电泳后,观察酶切位点的限制性片段长度多态性图谱,对150例广东籍正常人TNFα-863 C/A基因进行检测,并结合文献进行了不同地区间的分析比较。结果 TNFα-863 C/A C/C野生型纯合子频率为75.33%,C/A杂合子频率为24.00%,A/A突变型纯合子频率为0.67%;突变等位基因频率为0.1267。结论该方法简便、快速、准确,适合于一般实验室检测及大规模的人群调查,TNFα-863 C/A基因多态性在不同地区间分布存在着一定的差异。

广东汉族人肿瘤坏死因子A-308基因多态性

目的了解广东汉族人肿瘤坏死因子A-308基因的分布特点。方法应用聚合酶链反应技术对230例正常人肿瘤坏死因子A-308基因进行扩增,以NcoⅠ进行限制性内切酶酶切图谱分析,并结合文献进行了不同种族间的分析比较。结果TNF-α1/1、TNF-α1/2、TNF-α2/2表型频率分别为:0·8869、0·1087、0·0044,TNF-α1、TNF-α2基因频率分别为:0·9413、0·0587。结论肿瘤坏死因子A-308基因多态性在不同种族间分布存在着明显的差异。

葡萄膜炎与肿瘤坏死因子-863 C/A基因多态性的关系初探

目的探讨TNFα-863 C/A基因型和基因变异与葡萄膜炎发病的可能关系。方法使用多聚酶链反应(PCR-RFLP)技术检测51例葡萄膜炎及121例正常人肿瘤坏死因子TNFα-863 C/A基因多态性。结果葡萄膜炎组肿瘤坏死因子TNFα-863 C/C、A/C、A/A表型频率分别为:0.7255、0.2745、0,对照组分别为0.7521、0.2397、0.0082;葡萄膜炎组TNFα-863 A、TNFα-863 C基因频率分别为:0.8719、0.1281,对照组分别为:0.8627、0.1373;TNFα-863三种基因型频率和基因频率在葡萄膜炎组与正常对照组间无统计学差别(p>0.05)。结论肿瘤坏死因子TNFα-863 C/A基因多态性与葡萄膜炎无明显相关。

miR-34a-5p/PLCD3轴调控骨关节炎进展的机制

背景:目前已有针对miRNA/mRNA轴调节骨关节炎疾病进程的分子机制研究。先前生物信息学研究发现具有临床预测价值的mRNA(磷脂酶Cδ3:phospholipase C delta 3,PLCD3)及其靶向miRNA(miR-34a-5p),尚缺实验验证其调控骨关节炎的具体作用及机制。目的:探讨miR-34a-5p/PLCD3轴对骨关节炎进展的调控作用及机制。方法:选择15例膝骨关节炎患者的滑膜为骨关节炎组,同时选择同期因创伤致髌骨骨折行内固定术的15例年轻患者的健康滑膜为对照组,Real-time PCR法检测滑膜中PLCD3及miR-34a-5p的表达。通过细胞转染的方法,将人滑膜关节炎成纤维细胞(human fibroblast like synovial cells-osteoarthritis,HFLS-OA)进行处理,并分为miR-34a-5p模拟物组、pCDH-PLCD3组、miR-34a-5p模拟物+pCDH-PLCD3组、miR-34a-5p抑制剂组、si-PLCD3组、miR-34a-5p抑制剂+si-PLCD3组,通过Real-time PCR法检测PLCD3和miR-34a-5p表达的关系;通过CCK-8法、细胞划痕实验检测各组HFLS-OA细胞活力及细胞迁移的影响;使用Western Blot法检测凋亡标记蛋白表达水平;使用ELISA法检测炎症因子的表达。结果与结论:①PLCD3是miR-34a-5p的直接靶标,同时PLCD3和miR-34a-5p表达水平呈负相关。②PLCD3上调会促进HFLS-OA细胞的增殖并抑制细胞迁移,而miR-34a-5p上调会显著抑制HFLS-OA细胞的活性并增强细胞迁移;miR-34a-5p过表达使HFLS-OA细胞Casp3和Casp9蛋白水平显著升高,而PLCD3过表达则表现出相反趋势。③PLCD3过表达显著增加了HFLS-OA细胞白细胞介素6和肿瘤坏死因子α的表达,而miR-34a-5p模拟物则表现出保护活性。④结果说明,miR-34a-5p/PLCD3轴可能通过调节滑膜细胞的炎症过程或凋亡来影响骨关节炎的进展。

TNF-A-863和CGRP基因多态性与中国汉族人重度慢性牙周炎易感性的关系

目的:探讨TNF-A-863与CGRP979基因多态性与重度慢性牙周炎易感性的关系。方法:收集100例重度慢性牙周炎患者和118例健康对照组的颊黏膜拭子并抽提DNA,应用PCR-LDR方法检测TNF-A-863与CGRP979基因型,用计算机软件统计分析患者和对照组间基因型分布的差异。结果:TNF-A-863在重度慢性牙周炎组中TNF-A-863"A/C"杂合子占优势,在健康对照组中TNF-A-863"C/C"纯合子基因型为主,TNF-A-863基因型分布在两组间的差异有统计学意义(P<0.05)。CGRP979在重度慢性牙周炎患者中"A/G"基因型明显占多数,两组间基因型分布有统计学意义(P<0.05)。结论:TNF-A-863基因多态性与重度慢性牙周炎有相关性;CGRP979等位基因"A/G"杂合子基因型可能是重度牙周炎的易感因素。

丰富康复训练联合rTMS对卒中后认知障碍患者认知功能及血浆miR-146a-5p TNF-α水平的影响

目的探讨丰富康复训练联合重复经颅磁刺激(rTMS)对卒中后认知障碍(PSCI)患者的认知功能和血浆miR-146a-5p、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平的影响。方法选取2018-11—2020-09西安交通大学医学院附属三二〇一医院收治的PSCI患者132例,随机分为常规组、联合组,每组66例,常规组采取丰富康复训练,联合组采取丰富康复训练联合rTMS干预,比较2组患者干预前后认知功能变化和生活活动能力,使用实时定量PCR(RT-PCR)检测PSCI患者治疗前后血浆miR-146a-5p表达水平,酶联免疫吸附法检测血浆TNF-α、白细胞介素(IL)-6、IL-1β水平和血清神经递质、神经损伤标志物水平。结果治疗8周后,常规组、联合组PSCI患者的MMSE、MoCA、MBI、FIM评分和血浆miR-146a-5p表达均高于治疗前(P<0.05),血清Ach、DA、NE水平均高于治疗前(P<0.05),血清NSE、VILIP-1、MBP水平均低于治疗前(P<0.05),血浆TNF-α、IL-6、IL-1β水平低于治疗前(P<0.05);联合组PSCI患者的MMSE、MoCA、MBI、FIM评分和血浆miR-146a-5p表达均高于常规组(P<0.001),血清Ach、DA、NE水平均高于常规组(P<0.001),血清NSE、VILIP-1、MBP水平均低于常规组(P<0.001),血浆TNF-α、IL-6、IL-1β水平低于常规组(P<0.001)。结论丰富康复训练联合rTMS可改善PSCI患者认知功能、生活活动能力,改善神经损伤,可能与提高miR-146a-5p表达、降低促炎因子水平有关。

TNF-α通过miR-125a-5p/JAK2/STAT3通路参与亚急性甲状腺炎发病的机制研究

目的 探讨肿瘤坏死因子α(TNF-α)对甲状腺滤泡细胞增殖、凋亡的影响及可能机制。方法 选择50例亚急性甲状腺炎患者(观察组),其中男性23例,女性27例;年龄29~57岁,平均年龄46.02岁。50例健康体检人群(正常对照组),其中男性24例,女性26例;年龄28~56岁,平均年龄45.86岁。用质量浓度10、50、100 ng/mL TNF-α处理甲状腺滤泡上皮FRTL-5细胞。FRTL-5细胞分别转染miR-125a-5p mimcs(miR-125a-5p组)、阴性对照miR-NC(miR-NC组),无任何处理的细胞作为Contol组。四甲基偶氮唑蓝(MTT)检测细胞增殖能力,流式细胞术、TUNEL染色检测细胞凋亡,酶联免疫吸附分析(ELISA)法检测血清TNF-α、细胞上清液白细胞介素6(IL-6)含量,实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测细胞miR-125a-5p、IL-6水平,Western blot检测细胞JAK2、STAT3、p-JAK2、p-STAT3蛋白表达水平。结果观察组患者外周血TNF-α、IL-6、miR-125a-5p含量高于正常对照组,差异有显著统计学意义(t=74.390、15.140、205.400,P=0.000、0.000、0.000)。TNF-α处理后的细胞的光密度(OD)值降低、凋亡率升高,miR-125a-5p、IL-6水平升高,呈浓度依赖性。与miR-NC组比较,miR-125a-5p组细胞IL-6及miR-125a-5p水平升高,OD值降低、凋亡率升高(P <0.01)。与miR-NC组比较,miR-125a-5p组细胞p-JAK2/JAK2比值、p-STAT3/STAT3比值升高(P <0.01)。结论 TNF-α在亚急性甲状腺炎患者中高表达,过表达TNF-α可促进miR-125a-5p表达,进而激活JAK2/STAT3通路上调IL-6表达。

肿瘤坏死因子A-308位点基因多态性与成人重度牙周炎的关系

目的 探讨肿瘤坏死因子 (tumornecrosisfactor,TNF)A 30 8位点基因多态性与汉族成人重度牙周炎易感性的关系。方法 收集 6 5例成人重度牙周炎患者和 96名健康对照者的颊粘膜拭子 ,采用Chelex 10 0法提取DNA ,PCR限制性内切酶片段长度多态性 (PCR RFLP)法检测基因多态性 ,用计算机软件统计分析患者和对照组间基因型分布的差异。结果 TNFA 30 8位点等位基因 1和 2的分布在患者和对照组间差异有高度显著性 (P <0 0 0 1) ,患者中“1/ 1”基因型明显占多数 ,危险分析显示等位基因“1/ 1”纯合子个体患重度牙周炎的几率比“1/ 2”、“2 / 2”基因型个体高 3 6 4倍。结论 TNFA 30 8等位基因 1/ 1纯合子基因型可能是重度牙周炎的易感因素。

miR-146a-5p通过调控TRAF6表达影响滋养细胞生物学行为

目的探讨微小核糖核酸miR-146a-5p通过调节TRAF6对滋养细胞系JEG-3细胞生物学行为的影响,了解miR-146a-5p参与子痫前期发生、发展的分子机制。方法体外培养绒毛膜癌细胞JEG-3,经脂多糖(LPS)诱导后,制备体外子痫前期细胞模型。对LPS诱导后JEG-3细胞,采用Real-time PCR检测miR-146a-5p mRNA表达,采用Western blot检测肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)蛋白的表达。分别设置Mimics NC、LPS、miR-146a-5p inhibitor、Inhibitor NC组对JEG-3细胞进行诱导,Western blot技术检测各组TRAF6蛋白的表达,CCK-8实验检测各组细胞增殖能力,划痕实验检测各组细胞迁移能力,Transwell小室实验检测细胞侵袭能力。结果①LPS诱导后,与对照组相比,miR-146a-5p表达显著上调(P<0.05)。②经LPS诱导后,与对照组相比,TRAF6蛋白表达显著下调(P<0.05)。③与Mimics NC组相比,LPS组的TRAF6蛋白表达显著下降(P<0.05);与Inhibitor NC组相比,miR-146a-5p inhibitor组的TRAF6蛋白表达显著上升(P<0.05)。④LPS诱导JEG-3细胞后显著抑制其增殖、迁移和侵袭,反之,miR-146a-5p inhibitor组细胞增殖、迁移和侵袭能力均增强。结论miR-146a-5p可能通过抑制TRAF6的表达来抑制滋养细胞的生物学能力,miR-146a-5p可能参与子痫前期的发生、发展。

miR-146a-5p靶向肿瘤坏死因子受体相关因子6抑制缺血性脑卒中神经元凋亡和自噬

目的探究miR-146a-5p靶向肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)对缺血性脑卒中神经元凋亡和自噬的影响。方法将mimic-NC质粒、miR-146a-5pmimic质粒、pc-TRAF6质粒、miR-146a-5 pmimic质粒联合pc-TRAF6质粒分别转染N2a细胞,然后构建氧、葡萄糖剥夺(OGD)1h/再灌注(R)24h模型进行体外实验观察。另取雄性C57BL/6小鼠90只,分为6组(n=15),将上述不同的质粒分别注射至小鼠右脑室,制作大脑中动脉闭塞(MCAO)模型进行体内实验观察。采用qRT-PCR方法检测miR-146a-5p和TRAF6表达,苏木精-伊红染色观察脑组织损伤情况,并进行神经功能评分,流式细胞术检测N2a细胞凋亡,TUNEL检测海马神经元凋亡,蛋白免疫印迹法检测TRAF6、Bax、Bcl-2、cleaved caspase-3、Beclin1、Atg7和LC3Ⅱ/LC3Ⅰ蛋白表达。结果①OGD/R和MCAO后miR-146a-5p低表达,而TRAF6高表达,且miR-146a-5p靶向负调控TRAF6;②miR-146a-5p过表达后,MCAO致中脑损伤显著减轻、神经功能改善(P<0.01);③miR-146a-5p过表达后,可明显降低OGD/R和MCAO神经元凋亡率,下调cleaved caspase-3、Bax、Beclin1、Atg7和LC3Ⅱ/LC3Ⅰ蛋白表达,上调Bcl-2蛋白表达(P<0.01)。结论miR-146a-5p过表达通过靶向负调控TRAF6抑制缺血性脑卒中神经元凋亡和自噬。

miR-92a-3p对TNF-α,IL-6和DcR3的影响

目的探讨miR-92a-3p对肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-6(IL-6)和诱导因子3(DcR3)的影响。方法用人急性单核细胞白血病细胞(THP-1)设置阴性对照组(NC)。用1μg/mL LPS分别处理THP-1细胞6 h和24 h,实时荧光定量聚合酶链反应(q-PCR)检测TNF-α,IL-6和DcR3的表达,作为Sepsis组(NC+LPS)。利用1μg/mL的LPS处理过表达miR-92a-3p的THP-1细胞,作为过表达miR-92a-3p的Sepsis组(miR-92a-3p+LPS)。利用q-PCR,酶联免疫吸附试验(ELISA)和Western blot分别检测各组TNF-α,IL-6和DcR3的表达情况。结果q-PCR,ELISA和Western blot检测结果显示,TNF-α和IL-6在LPS组、miR-92a-3p+LPS组和NC组的相对表达量均呈下调趋势,差异有统计学意义(P<0.05),DcR3表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论miR-92a-3p可抑制TNF-α和IL-6的释放,具有抗炎作用,但是其对DcR3的作用不显著。

甲状腺相关眼病与肿瘤坏死因子α基因启动子区-863C/A多态性相关性的初步研究

目的探讨肿瘤坏死因子α(TNFα)基因启动子区863C/A多态性与甲状腺相关眼病(TAO)的相关性。方法选择2002年7月至2003年12月于我院内分泌门诊就诊的符合本研究入选标准的患者和正常对照者,并抽取外周抗凝血提取基因组DNA,采用多聚酶链反应限制性片段长度多态性(PCRRFLP)方法检测76例正常对照者(对照组)、54例TAO患者(TAO组)和60例自身免疫性甲状腺疾病(AITD)无眼病患者(无眼病组)TNFα基因863C/A多态性。分析比较此多态位点的基因型和等位基因频率在不同人群中分布的差异。结果(1)TAO组、无眼病组及对照组CA+AA基因型频率分别为46.3%、30.0%、25.0%,A等位基因频率分别为27.8%、15.0%、12.5%。(2)TAO组A等位基因频率显著高于无眼病组和对照组(P=0.018,P=0.002)。(3)按性别分层后,TAO组男性患者CA+AA基因型与A等位基因频率均显著高于对照组男性(OR=4.31,P=0.019;OR=4.81,P=0.003)和无眼病组男性患者(OR=4.87,P=0.027;OR=5.38,P=0.008);而女性患者组间比较差异无统计学意义(均P>0.05)。(4)TAO组ATA分级5+6级眼病患者CA+AA基因型和A等位基因的频率均显著高于无眼病组(OR=20.68,P=0.021;OR=39.67,P<0.001)。结论TNFα基因启动子区863位点A等位基因可能是TAO尤其是男性TAO患者的易感基因。

miR-146a-5p靶向IRAK1、TRAF6抑制小细胞肺癌耐药

目的初步探讨miR-146a-5p在小细胞肺癌(SCLC)耐药机制中的作用。方法通过qRT-PCR检验SCLC耐药细胞株(H69-AR)和敏感细胞株(H69)中miR-146a-5p表达水平,探究miR-146a-5p与SCLC耐药的相关性;分别通过慢病毒载体以稳定转染miR-146a-5p mimic或miR-146a-5p inhibitor使其细胞中的miR-146a-5p上调或抑制,再利用CCK-8法和划痕实验验证miR-146a-5p对SCLC细胞株的生物学影响;查阅相关文献以及应用目前生物学最权威软件预测miR-146a-5p的靶基因,应用Western blot、qRT-PCR检测miR-146a-5p与预测靶基因两者之间的关系。结果H69-AR相对H69细胞株的miR-146a-5p表达水平为(1∶22.70),差异有统计学意义(P<0.05);生物学信息数据库预测miR-146a-5p可能靶基因为白介1受体相关激酶1(IRAK1)和肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6);H69-AR相对H69细胞株中mIRAK1、mTRAF6的表达水平差异分别为(4.92∶1.00)、(2.76∶1.00),差异有统计学意义(P<0.05);H69-AR细胞株转染miR-146a-5p mimic后,与对照组比较,细胞抑制率上升,迁移速度减缓,同时mIRAK1、mTRAF6表达水平分别减少为(1.00∶14.55)、(1∶3.20),并且IRAK1、TRAF6蛋白表达也分别减少为(0.24∶1.00)、(0.31∶1.00),差异有统计学意义(P<0.05);H69细胞株转染miR-146a-5p inhibitor后,与对照组相比,细胞抑制率下降,迁移速度增快,同时mIRAK1、mTRAF6表达水平分别增加为(10.86∶1.00)、(4.64∶1.00),IRAK1、TRAF6蛋白表达也分别增加为(4.76∶1.00)、(3.96∶1.00),差异有统计学意义(P<0.05)。结论miR-146a-5p通过靶向IRAK1和TRAF6基因抑制SCLC耐药。

首发精神分裂症患者血清miR-146a-5p、TRAF6的表达及意义

目的 探究首发精神分裂症(SZ)患者血清微小RNA-146a-5p(miR-146a-5p)、肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)的表达水平变化并分析其临床意义。方法 选取2019年2月至2021年4月于杭州师范大学附属萧山医院收治的95例首发SZ患者作为SZ组,同期体检健康者98例作为健康人对照组;qRT-PCR检测各受试者血清miR-146a-5p、TRAF6 mRNA的表达水平;Pearson相关系数法分析miR-146a-5p与TRAF6 mRNA表达水平的相关性;以及二者分别与阳性和阴性症状量表(PANSS)评分和威斯康星卡片分类测验(WCST)评分的相关性;ROC曲线评估miR-146a-5p与TRAF6在首发SZ中的诊断价值;Logistic回归分析影响首发SZ发生的因素。结果 与健康人对照组相比,SZ组患者血清miR-146a-5p的表达水平显著降低,TRAF6 mRNA的表达水平显著增加(P<0.01),且二者呈显著负相关(r=-0.444,P=0.000);与治疗前相比,治疗后SZ组患者血清miR-146a-5p的表达显著增加(P<0.01),TRAF6 mRNA的表达显著降低(P<0.01),且二者呈显著负相关(r=-0.428,P=0.000);PANSS总评分、PANSS阳性、一般精神病理症状、非持续性错误数、错误应答数与miR-146a-5p水平均呈负相关,而与TRAF6 mRNA水平均呈正相关(P<0.05);相较于miR-146a-5p、TRAF6 mRNA单独诊断首发SZ发生,二者联合检测诊断首发SZ发生时的ROC曲线下面积显著增加(Z=2.037,P=0.042;Z=2.162,P=0.031);Logistic回归分析结果表明,miR-146a-5p低表达及TRAF6高表达是影响首发SZ发生的危险因素。结论 首发SZ患者血清miR-146a-5p的表达显著降低,TRAF6 mRNA的表达显著增加,且二者与疾病严重程度存在密切相关性,有望成为首发SZ的早期诊断指标。