乳腺癌肿瘤干细胞标记物CD44^+ESA^+CD24^(-Λow)在非小细胞肺癌组织中的表达及其意义

背景与目的:人体各种组织都存在干细胞,肿瘤组织也存在肿瘤干细胞(tumor stem cell,TSC)。乳腺癌TSC已经被分离出来,其标记物也已被确定,但肺癌的TSC仍未被分离出来。本研究旨在探讨乳腺癌肿瘤干细胞标记物(CD44+ESA+CD24-Λow)在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达及其意义。方法:应用免疫组织化学法检测77例NSCLC组织中CD44、ESA与CD24的表达,分析其与患者吸烟、肿瘤的大小、癌的组织学类型、组织分化程度、淋巴结转移和预后的关系。结果:77例NSCLC组织中CD44、ESA与CD24的阳性率分别为63.6%、66.2%和7.8%。低分化及未分化组CD44的阳性率明显高于高分化组,高分化组ESA的阳性率明显高于中度分化组和低分化及未分化组;腺癌组ESA的阳性率明显高于鳞癌组(P<0.05)。CD44+ESA+CD24-Λow标记的阳性率为36.4%,与患者吸烟、肿瘤的大小、癌的组织学类型、组织分化程度、淋巴结转移和预后无关(P>0.05)。结论:乳腺癌肿瘤干细胞标记物(CD44+ESA+CD24-Λow)表达与NSCLC肿瘤的大小、癌的组织学类型、组织分化程度、淋巴结转移和预后等临床病理学指标无关。

肿瘤干细胞标记CD44和CD133在鼻咽癌细胞株中的表达检测

目的探索肿瘤干细胞标记物CD44和CD133在鼻咽癌(NPC)中的表达量及其有效分选方式。方法常规培养SUNE-1 5-8F细胞,采用免疫荧光技术及流式细胞学技术检测SUNE-1 5-8F细胞中CD44、CD133的表达,并用流式细胞仪分选CD44+、CD44+CD133+细胞。结果激光共聚焦镜下鼻咽癌SUNE-1 5-8F细胞株细胞膜上可以观察到CD44分布;流式细胞学技术检测SUNE-1 5-8F中CD44+其表达率为42.4%～52.5%,经流式细胞仪分选得到的CD44+和CD44-细胞,其纯度分别达98.3%和97.9%。流式细胞仪检测到CD44+CD133+细胞(P2)在SUNE-1 5-8F细胞株中的表达约为3.1%。结论 SUNE-1 5-8F细胞株中肿瘤干细胞标记含量较高,适合鼻咽癌干细胞的研究,且流式细胞学技术不失为一种有效的分选细胞手段。

肿瘤干细胞标记物ALDH1和Ki67在子宫内膜腺癌中的表达和意义

肿瘤干细胞（Cancer Stem Cell，CSC）为存在于肿瘤组织中的数量极少、具有无限增殖潜能，可分化为肿瘤细胞，且对肿瘤的发生、发展和转移起决定性作用的细胞。乙醛脱氢酶1（aldehyde dehygeoge-nase1，ALDH1），是在ALDH基因家族指导下合成的一类酶，主要存在于肝脏与肾脏细胞中，在体内主要发挥乙醛的代谢解毒功能，也与细胞的增殖、分化相关，可作为干细胞标志物［1］；同时也是肿瘤起始细胞（cancer-initiatingcells，CICs）的标志物之一［2］。本研究以5例子宫内膜单纯性增生病例为对照，利用免疫组织化学方法观察31例子宫内膜腺癌的ALDH1和Ki67的表达，并探讨二者表达的相关性，为以肿瘤干细胞为靶向诊断和治疗子宫内膜腺癌提供理论和实验依据。

肿瘤干细胞标记物在胶质瘤临床应用中的研究

由于患者对治疗的反应不同，且有不同预后，因此寻找胶质瘤中新的预后评估标志物是目前一研究热点。最近的研究提示肿瘤生物学抗治疗性与肿瘤干细胞（Cancer stem cells，CSCs）的存在密切相关。因此，研究与胶质瘤干细胞存在密切相关的肿瘤标记物标志物，对评估胶质瘤患者预后具有重要意义。 CSC假说提示存在一种肿瘤细胞种群，即肿瘤干细胞，其拥有独特的自我更新能力，能够使肿瘤持续生长。此外，若干研究显示， CSCs除了强大的耐药机制，还具有肿瘤发生潜能。现有研究证实了CSCs存在于包括胶质母细胞瘤在内的不同癌症类型。本文将介绍目前研究报告中公认的胶质瘤CSC 标志物及其预后价值。我们将总结每个标志物并讨论他们的预后价值。

类肿瘤干细胞标记物及缺氧诱导因子-1α在口腔鳞癌组织中的表达及相关性研究

目的:检测类肿瘤干细胞(cancer stem-like cell,CSC)标记物(CD44、ALDH1、NANOG)及缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)在口腔鳞癌组织中的表达并进行相关性分析。方法:应用免疫组化法检测40例重庆医科大学附属口腔医院颌面外科手术切除的口腔鳞癌组织、10例癌旁组织、10例淋巴结转移的淋巴结组织以及10例正常淋巴结组织中CD44、ALDH1、NANOG及HIF-1α的表达,采用Fisher确切概率法及秩和检验分析这些标记物与HIF-1α之间及其与肿瘤分化程度、分期及淋巴结转移的关系。结果:(1)CD44、NANOG、HIF-1α在口腔鳞癌组织与癌旁组织中的表达差异均存在统计学意义(P_(CD44)=0.000;P_(NANOG)=0.000;P_(HIF-1α)=0.000);(2)HIF-1α与CD44在口腔鳞癌中的表达存在相关性(r_s=0.498,P=0.027);(3)CD44、ALDH1、NANOG及HIF-1α在口腔鳞癌组织中的表达与分化程度、临床分期及淋巴结转移均无明显相关性。结论:CD44、NANOG、HIF-1α在口腔鳞癌组织中呈高表达,其中CD44与HIF-1α的表达具有相关性。联合检测CD44、NANOG、HIF-1α可能对口腔鳞癌早期诊断具有重要意义。

恶性肿瘤干细胞标记物CD34在鼻咽癌细胞系的表达

背景:在多种肿瘤中已证实CD34与肿瘤的发生、发展、复发、转移、耐药密切相关,但是CD34与鼻咽癌的关系目前还知之甚少。目的:分选鼻咽癌细胞株中CD34+与CD34-细胞的增殖和迁移能力。方法:利用流式细胞术检测CD34在鼻咽癌细胞株5-8F、6-10B、CNE1、CNE2中的表达,根据细胞表面标志物分选出CD34+与CD34-细胞,进行纯度鉴定;通过体外MTT法、平板克隆形成实验以及划痕实验分析CD34+细胞与CD34-细胞增殖和迁移能力。结果与结论:(1)4种鼻咽癌细胞株中CD34表达均恒定在0.1%-0.2%,且CD34水平与细胞的生长密度关系密切;(2)分选的CD34+细胞群中,CD34+细胞例能达到98%以上,在CD34-细胞群中未能检测到CD34+细胞;(3)CD34+细胞在第1,3,5,7天增殖速度显著高于CD34-细胞(P<0.05);(4)CD34+细胞克隆形成率显著高于CD34-细胞(P<0.05);(5)CD34+细胞向划痕区迁移的细胞明显多于CD34-细胞(P<0.05);(6)结果提示,CD34+细胞体外培养具有更高的增殖和转移能力,具有鼻咽癌肿瘤干细胞潜能。

膀胱移行细胞癌中候选肿瘤干细胞标记物USP22mRNA水平定量分析及其与肿瘤分级的关系

目的:研究肿瘤干细胞标记物USP22 mRNA在不同级别膀胱移行细胞癌和正常膀胱黏膜中的表达差异,并探讨其与肿瘤分级,临床分期的关系。方法:分别抽提不同级别的膀胱移行细胞癌组织标本和正常膀胱黏膜组织标本的总RNA,经RT为cDNA后,采用qRT-PCR法检测USP22 mRNA的表达情况。结果:正常膀胱黏膜组织中USP22的表达明显低于膀胱肿瘤组织,几乎不表达;不同级别膀胱肿瘤组织中,低度恶性潜能的乳头状尿路上皮癌和低级尿路上皮癌中USP22的表达要明显高于其在高级尿路上皮癌中的表达;特别是Ⅲ级膀胱移行细胞癌组,USP22的表达仅略高于其在正常膀胱黏膜中的表达。结论:USP22可能是正常干细胞向肿瘤干细胞恶变的关键调节分子,可能成为一个新的诊断移行上皮癌侵袭性的有效指标。干扰其蛋白质合成将成为一个抗肿瘤生长的新靶点。

高良姜总黄酮对宫颈癌细胞生长和肿瘤干细胞标记物表达水平的影响及意义

目的：前期研究中，我们报道高良姜根来源的总黄酮（ general flavonoids， GFs）可抑制SiHa宫颈癌细胞增殖，诱导细胞凋亡。以往研究证明肿瘤干细胞是SiHa细胞群体的重要组成部分，故本研究探讨高良姜GFs影响细胞凋亡、细胞周期相关基因及肿瘤干细胞标记物表达调控的机理，为抗肿瘤药物研发提供依据。方法以0、100和200μg／ml剂量的高良姜GFs干预SiHa宫颈癌细胞24 h，提取细胞总RNA，采用荧光定量RT-PCR方法对CDK4、 bcl-2、 ALDH1 A1、 OCT4和Twist1等5种基因表达水平进行定量分析。结果高良姜GFs干预SiHa宫颈癌细胞后， CDK4和bcl-2基因表达水平显著下降（ P＜0.05），呈剂量依赖性，说明该GFs可能调节细胞增殖和生存相关的基因表达调控，诱导细胞凋亡；随着药物剂量增加，肿瘤干细胞标记物ALDH1 A1、 OCT4和Twist1表达水平也梯度性下降，并有统计学差异（ P＜0.05）。结论本研究结果提示高良姜GFs可能抑制肿瘤干细胞基因表达水平，从而抑制细胞增殖，促进细胞凋亡，此为揭示宫颈癌发病机制及抗肿瘤新药研发提供重要依据。

胃癌组织中肿瘤干细胞表面标志物CD44v6、CD133与OCT3/4的表达变化及意义

目的观察胃癌组织中肿瘤干细胞表面标志物CD44v6、CD133与OCT3/4的表达变化,并探讨其意义。方法收集50例胃癌患者癌组织标本及其对应的癌旁正常组织标本,采用免疫组化法检测CD44v6、CD133与OCT3/4表达情况,并分析其与胃癌患者临床病理特征的关系。结果胃癌组织中CD44v6、CD133、OCT3/4阳性表达率高于癌旁组织,差异有统计学意义(P均<0.01)。CD44v6、CD133与OCT3/4在胃癌组织中的表达不存在相关性。CD44v6表达与胃癌细胞浸润、淋巴结转移有关;CD133表达与胃癌组织分化程度、淋巴结转移有关;OCT3/4表达与胃癌细胞浸润、淋巴结转移有关。结论 CD44v6、CD133与OCT3/4在胃癌组织中呈高表达,三者与胃癌的发生、转移及浸润等存在一定关系。

肿瘤干细胞及其潜在影响实体瘤的治疗

有越来越多的证据表明,多种人类癌症细胞中包含小部分具有干细胞特性的癌细胞,称为肿瘤干细胞。肿瘤干细胞维持肿瘤的生长;可能引发转移。本篇文章的目的是评估肿瘤干细胞存在的证据,及其对现行治疗实体肿瘤的影响。在评估中我们发现肿瘤干细胞具有与正常干细胞相似的两个主要特征,自我更新和分化。肿瘤干细胞的存在与癌症治疗方面具有广阔的临床意义。肿瘤干细胞的靶向治疗,对肿瘤干细胞进行表面标记,在实体瘤中对肿瘤干细胞的鉴别和分离,逆转肿瘤干细胞对放化疗的抵制。临床试验表明肿瘤干细胞能够驱使和维持人类多种类型恶性肿瘤生存。然而,多年的肿瘤干细胞靶向治疗仍然面临多方面困难。

CD44蛋白在胃癌中的表达情况及临床意义分析

目的:分析胃癌中白细胞分化抗原44(CD44)蛋白的表达情况与临床意义。方法:回顾性分析2019年1月—2022年1月于苏州市立医院接受手术治疗的胃癌患者139例的临床资料,并采用免疫组织化学法检测患者胃癌组织病理标本中CD44蛋白表达情况。分析CD44蛋白表达情况与临床病理特征及预后的关系。结果:胃癌组织中CD44蛋白表达率高于正常胃黏膜组织,差异有统计学意义(P<0.001)。阳性病例中,低分化胃癌患者CD44蛋白免疫组化评分高于高/中分化胃癌患者,肿瘤最大径≥4 cm胃癌患者CD44蛋白免疫组化评分高于肿瘤最大径<4 cm胃癌患者,差异有统计学意义(P<0.001);CD44蛋白阳性与CD44蛋白阴性胃癌患者性别、年龄、Lauren分型比较,差异无统计学意义(P>0.05);CD44蛋白阳性胃癌患者肿块最大径≥4 cm、低分化、血管侵犯阳性、淋巴结转移阳性、TNM分期为Ⅲ或Ⅳ期占比高于CD44蛋白阴性者,差异有统计学意义(P<0.05);CD44阳性表达者生存期短于阴性表达者,差异有统计学意义(P=0.003)。结论:不同分化程度、肿瘤最大径的胃癌患者CD44蛋白表达存在明显差异,CD44蛋白阳性与CD44蛋白阴性胃癌患者肿块最大径、分化程度、血管侵犯情况、淋巴结转移情况、TNM分期存在明显差异,可将CD44蛋白作为胃癌浸润、转移及判读预后的生物学标记物。

基于CADD探究新疆胀果甘草查尔酮A对宫颈癌细胞增殖、凋亡作用及其分子机制

以新疆胀果甘草查尔酮A(licochalcone A,LicoA)为物质基础,研究其对宫颈癌细胞的增殖抑制活性、促凋亡作用及对周期的影响,并对其分子机制进行初探。从新疆胀果甘草中提取LicoA单体成分,通过1H NMR、13 C NMR及HR-EI-MS进行结构表征;通过MTT法检测在不同浓度下LicoA对人宫颈癌细胞(SiHa和HeLa)的抑制率并计算IC 50值,选取SiHa细胞为研究对象,采用流式细胞术,以AnnexinV-FITC/PI双染法检测细胞凋亡率,并测定对细胞周期的影响。通过CADD法预测LicoA作用靶点,荧光定量RT-PCR法检测宫颈癌肿瘤干细胞标记物(Bcl-2、ALDH1A1、OCT-4、UHRF1、BIRC7、BIRC5)基因及细胞周期蛋白依赖性激酶4(cyclin-dependent kinase 4,CDK4)基因的mRNA表达量。结果显示,LicoA能显著抑制2种宫颈癌细胞增殖,且呈现显著的时间和浓度依赖性;随着LicoA浓度的增加,细胞增殖速度减慢,细胞呈皱缩形态;LicoA诱导细胞凋亡作用显著,在30μg/mL时,SiHa细胞凋亡率达52.0%;LicoA可能将SiHa细胞的增殖周期阻滞在S期和G 2/M期;分子对接结果显示对CDK4蛋白有较好结合能力,预测可能具有较强的抑制作用;LicoA显著下调宫颈癌肿瘤干细胞标记物(Bcl-2、ALDH1A1、OCT-4、UHRF1、BIRC7、BIRC5)的表达量,同时抑制周期相关基因CDK4的mRNA表达。LicoA抑制宫颈癌细胞增殖的机制可能是通过将SiHa细胞的增殖周期阻滞在S期和G 2/M期,诱导细胞凋亡及抑制细胞分化。

黏附分子CD24在常见消化道肿瘤中的研究进展

我国消化道肿瘤的发病率逐年升高,但目前对于消化道肿瘤的早发现、早诊断、早治疗仍缺乏有效的手段。近年来,肿瘤干细胞研究备受关注,黏附分子CD24(cluster of differentiation 24)作为肿瘤干细胞常见的表面标志物,在消化道肿瘤患者血清及组织中呈过量表达,且与肿瘤的发生、发展密切相关。本文就CD24在常见消化道肿瘤中的表达及其作用机制研究进展进行综述,以期为肿瘤的二级预防提供理论基础。

一种新型α-甲基查尔酮的制备、抗宫颈癌活性及对Akt-MDM2-p53信号通路的影响

课题组前期实验中发现,新疆胀果甘草中的微量特殊成分甘草查尔酮A(LicoA)具有较强的体外抗宫颈癌活性并对多种肿瘤干细胞标记物具有显著的下调作用,但是因其在胀果甘草中含量极低(约0.36%)^([1])并且合成制备成本昂贵,制约其开发利用。因此,本文旨在对LicoA进行结构修饰,合成一种具有替代LicoA潜力的新型查尔酮类化合物并研究其抗宫颈癌活性。

喉癌干细胞:克服多药耐药性的潜在治疗靶点

喉癌是头颈部最常见的恶性肿瘤之一,尽管喉癌检测和治疗的进步增加了早期治愈的可能性,但大多数患者最终因耐药和复发而死亡,因此治疗耐药性和转移是当今喉癌治疗的主要挑战。随着研究的深入,肿瘤干细胞的存在已被证明与肿瘤发生和治疗抗性密切相关。喉癌的早期诊断和治疗有赖于肿瘤干细胞标志物的发现和鉴定,这对喉癌的靶向治疗有着深远的意义。回顾了目前国内外对喉癌干细胞的研究,从肿瘤干细胞起源,喉癌干细胞可能的耐药机制、并对维持喉癌干性的表面标志物与喉癌靶向治疗的相关进展进行综述,旨在为喉癌的临床治疗提供新的方向及作用靶点。