妇科恶性肿瘤淋巴引流路径及前哨淋巴结活检研究进展

女性生殖系统的淋巴引流路径极为复杂且具有双侧性,同时妇科恶性肿瘤患者区域淋巴结的状态对其选择手术方案、制定辅助治疗、分析生存预后均有重要意义。前哨淋巴结(SLN)活检对于阳性淋巴结具有较高的识别能力,且可降低并发症发生率,在特定恶性肿瘤手术方案中逐渐成为首要或次优选择。现将梳理宫颈癌、子宫内膜癌、卵巢癌等常见的女性生殖系统肿瘤的淋巴引流及SLN的分布规律相关文献研究,旨在为今后临床治疗妇科恶性肿瘤患者提供新的实践依据。

人结直肠癌和肿瘤引流淋巴结组织中Foxp3^+调节性T细胞和髓样树突状细胞的表达及其意义

目的:探讨Foxp3^+调节性T细胞(Tregs)和CD11c^+髓样树突状细胞(mDCs)在结直肠癌(CRC)组织中的表达及在肿瘤引流淋巴结(TDLN)组织中的浸润,并探讨其临床意义。方法:收集CRC患者手术切除的标本52例,采用免疫组织化学方法检测CRC患者标本及TDLN组织样本中Foxp3^+ Tregs及CD11c^+mDCs的表达,并探讨其表达频数与CRC患者临床病理特征的关系。结果:CRC患者癌组织中Foxp3^+ Tregs的阳性表达频数高于癌旁正常组织(P<0.01);淋巴结转移阳性者癌组织中Foxp3^+ Tregs阳性表达频数高于淋巴结转移阴性者(P<0.01);TNM分期Ⅲ+Ⅳ期组患者癌组织中Foxp3^+ Tregs阳性表达频数高于TNM分期Ⅰ+Ⅱ期组患者(P<0.01);肿瘤引流阳性淋巴结(mTDLN)组织中Foxp3^+ Tregs阳性表达频数明显高于肿瘤引流阴性淋巴结(mfTDLN)组织(P<0.01)。CRC患者癌组织中CD11c^+mDCs的阳性表达频数高于癌旁正常组织(P<0.01);淋巴结转移阳性者癌组织中CD11c^+mDCs阳性表达频数低于淋巴结转移阴性者(P<0.01);TNM分期Ⅲ+Ⅳ期组患者癌组织中CD11c^+mDCs阳性表达频数低于TNM分期Ⅰ+Ⅱ期组患者(P<0.01);不同浸润深度癌组织中CD11c^+mDCs阳性表达频数比较差异有统计学意义(P<0.05);mTDLN组织中CD11c^+mDCs阳性表达频数明显低于mfTDLN组织(P<0.01)。CRC和TDLN组织中Foxp3^+ Tregs表达与CD11c^+mDCs的表达无相关性(P>0.05)。结论:CRC的发生发展与癌组织局部微环境中Foxp3^+ Tregs及CD11c^+mDCs的表达频数有关。Foxp3^+ Tregs和CD11c^+mDCs在抑制肿瘤微环境的细胞免疫中发挥作用。

食管癌患者肿瘤引流淋巴结中淋巴细胞亚群的分析

目的:研究淋巴细胞亚群比例在食管癌患者肿瘤引流淋巴结(tumor-draining lymph node,TDLN)中的变化及其在肿瘤进展中的意义。方法:收集在河北医科大学第四医院行食管癌切除术患者的引流淋巴结样本70例,根据转移情况将样本分为转移组和未转移组,并根据患者肿瘤临床分期标准分为早期组和晚期组,无菌分离TDLN内淋巴细胞并应用流式细胞术检测以下亚群在总淋巴细胞中所占比例:CD3+T细胞、CD3+CD4+T细胞、CD3+CD8+T细胞、CD3-CD19+B细胞、CD3-CD16+CD56+NK细胞和CD4+CD25+Treg细胞。采用Pearson积差相关分析Treg细胞与其他淋巴细胞比例之间的关系,采用t检验或Mann-Whitney U检验分析各组间TDLN淋巴细胞亚群的差异。结果:食管癌患者TDLN中的Treg细胞与T细胞、CD4+T细胞比例显著相关(P=0.002,P=0.003),与CD8+T细胞、B细胞、NK细胞比例无相关性(P>0.05)。与未转移组淋巴结相比,转移组的T细胞、CD4+T细胞、CD8+T细胞和NK细胞比例显著降低(P=0.000,P=0.000,P=0.016,P=0.038),B细胞、Treg细胞比例显著提高(P=0.000,P=0.018),CD4+/CD8+T细胞比值差异没有统计学意义(P=0.687)。与早期食管癌组淋巴结相比,晚期食管癌组的T细胞、CD4+T细胞、CD8+T细胞和NK细胞比例显著降低(P=0.000,P=0.008,P=0.027,P=0.022),B细胞、Treg细胞比例显著提高(P=0.000,P=0.043),CD4+/CD8+T细胞比值差异没有统计学意义(P=0.770)。结论:食管癌患者TDLN内淋巴细胞亚群分布紊乱,是促进肿瘤向淋巴结转移并提高临床分期的重要因素之一。

癌相关抗原粘蛋白前体诱导人肿瘤引流区淋巴结的细胞毒作用

人肿瘤相关抗原可诱导宿主的细胞免疫反应已被证实。一些肿瘤粘蛋白也证实可诱发T细胞细胞毒作用。本研究是观察从胰腺癌细胞株提取的粘蛋白核芯肽诱导人肿瘤引流区淋巴结细胞的抗肿瘤免疫作用。4例乳腺癌、3例胃癌、3例结肠癌的肿瘤引流区淋巴结手术切除后立即在体外培养于含50μg/ml胰癌核芯肽及50单位IL-2的培养基中,观察其对多种癌细胞的杀伤效应(MMT法)。结果表明体外经胰癌核芯肽刺激后增殖的淋巴结细胞对多种肿瘤细胞有杀伤作用,如结肠癌、胃癌、胰腺癌及白血病细胞K562。本研究结果为以肿瘤粘蛋白核芯肽制备疫苗用于主动特异性免疫治疗或过继免疫治疗打下基础。

肿瘤引流淋巴结中免疫活性细胞分布的原位分析

目的:观察人乳腺癌和胃癌局部引流淋巴结(LDLN)从无转移、微转移到晚期转移过程中,免疫组织学变化及免疫活性细胞(ICC)的分布特征。方法:采用传统的病理学方法,对22例乳腺癌LDLN(71个)和7例进展期胃癌LDLN(28个)进行组织形态学分类,并以抗穿孔素、抗颗粒酶B、抗CD8、抗CD56、抗CD68、抗S-100、抗CD134及抗CD25单克隆抗体(mAb)进行催化信号放大(Catalyzedsignalamplification,CSA)免疫组化染色,检测肿瘤LNDN中ICC的分布。结果:肿瘤LDLN中以副皮质区增生和窦组织细胞增生为主,细胞毒性T淋巴细胞(CTL)及树突状细胞(DC)的数量,从无转移、微转移到晚期转移过程中有逐渐减少的趋势。在无和微转移的淋巴结内,穿孔素+、颗粒酶B+及S100+DC的数量高于晚期转移淋巴结(P<0.05);而S100+DC不仅数量减少,而且其形态也有变化,呈多角形、星形,并有胞质突起,与周围淋巴细胞接触呈活化状态的DC变为椭圆形,少有胞质突起或呈短突起的静止状态的DC。CD134+细胞及CD25+细胞的数量在晚期转移淋巴结中明显高于无和微转移淋巴结(P<0.01)。ICC在无和微转移的前哨和非前哨淋巴结中的分布无统计学意义(P>0.05)。结论:肿瘤LDLN中ICC分布的变化,提示随着肿瘤的进展,其免疫微环境向抑制机体抗肿瘤免疫的方向偏移。

不同刺激诱导肺癌患者引流淋巴结细胞抗自体肿瘤的体外研究

目的:探索适合于临床大规模应用的有效刺激、活化肿瘤引流淋巴结(Tumor-draininglymphnode,TDLN)细胞的方法。方法:对3种刺激剂(IL-2、IL-2+自身肺癌细胞抗原和IL-2+GM-CSF+IL-4+自身肺癌细胞抗原)诱导TDLN细胞体外抗自体肿瘤作用,通过乳酸脱氢酶法测定了CTL杀伤活性,观察了细胞形态学变化,通过流式细胞技术测定了细胞CD83的阳性表达率。结果:经MTT法检测,IL-2+GM-CSF+IL-4+自身肺癌细胞抗原诱导的TDLN细胞的增殖程度明显高于IL-2+自身肺癌细胞抗原刺激组和IL-2刺激组(P<0·01)。IL-2+GM-CSF+IL-4+自身肺癌细胞抗原诱导的肿瘤特异性CTL活性明显高于IL-2+自身肺癌细胞抗原刺激组和IL-2刺激组,CD83阳性表达细胞率也明显高于IL-2+自身肺癌细胞抗原刺激组和IL-2刺激组。结论:用IL-2+GM-CSF+IL-4+自身肺癌细胞抗原刺激和活化TDLN,优于单独用IL-2刺激或IL-2+自身肺癌细胞抗原刺激,该作用可能与其诱导TDLN细胞产生DC数量的增加有关。

胃癌肿瘤引流淋巴结内Foxp3^+调节性T细胞的分布

采用免疫组织化学方法检测胃癌肿瘤引流淋巴结和第二站淋巴结内调节性T细胞(Treg细胞)的分布和细胞数量。结果显示Foxp3+Treg细胞弥散地分布于胃癌引流淋巴结的副皮质区和髓质区。胃癌肿瘤引流淋巴结内Treg细胞数明显多于第二站淋巴结(P<0.01),进展期胃癌肿瘤引流淋巴结内Treg细胞数多于早期胃癌(P<0.01)。Treg细胞聚集胃癌肿瘤引流淋巴结内可能通过形成免疫耐受环境而促进肿瘤淋巴转移的发生。

食管癌引流淋巴结细胞诱导肿瘤细胞凋亡机制探讨

目的探讨食管癌引流淋巴结(TDLN)细胞诱导肿瘤细胞凋亡的机制。方法将TDLN细胞分为3组进行培养。TDLN-Ⅰ组培养基中添加IL-2,TDLN-Ⅱ组添加IL-2+IL-4+GM-CSF,TDLN-Ⅲ组添加IL-2+IL-4+GM-CSF+自身食管癌细胞抗原(tAg)。用术中切取的食管癌组织块建立荷瘤裸鼠模型,随机分为空白对照组、IL-2组、TDLN-Ⅰ组、TDLN-Ⅱ组、TDLN-Ⅲ组,分别给予生理盐水、IL-2及相应TDLN细胞。利用流式细胞术检测瘤细胞凋亡率和Fas、FasL、Bax、Bc l-2、survivin蛋白的表达。结果对照组、IL-2组、TDLN-Ⅰ组、TDLN-Ⅱ组、TDLN-Ⅲ组肿瘤细胞的凋亡率分别为6.4%±3.1%、11.1%±1.3%、22.0%±2.8%、23.3%±1.9%、33.6%±5.2%,两两比较,P均<0.05;Fas蛋白的FI值分别为1.38±0.02、1.39±0.09、1.36±0.06、1.34±0.11、1.32±0.05,两组相比,P均>0.05;FasL蛋白的FI值分别为1.45±0.09、1.49±0.11、1.50±0.15、1.47±0.06、1.49±0.08,两组相比,P均>0.05;Bax蛋白的FI值分别为1.18±0.08、1.20±0.12、1.48±0.18、1.56±0.08、1.66±0.07。结论TDLN细胞可能通过影响Bax/Bc l-2和survivin蛋白表达诱导肿瘤细胞凋亡。

肿瘤引流淋巴结的免疫学性质及其抗肿瘤作用的研究进展

肿瘤引流淋巴结（ＴＤＬＮ）主要由抗原提呈细胞（ＡＰＣ）和免疫活性细胞组成，前者主要执行提呈抗原的功能，后者介导免疫应答。ＴＤＬＮ既是暂时阻止瘤细胞转移的天然屏障，也是肿瘤细胞远处转移的中介者。免疫制剂或某些化疗药物可以通过解除ＴＤＬＮ局部的免疫受抑状态，增强局部的抗肿瘤作用，也可以通过离体激活和扩增ＴＤＬＮ细胞用于过继免疫治疗（ＡＩＴ）。肿瘤基因治疗的发展使基因治疗专家和肿瘤治疗专家注意到ＴＤＬＮ的潜在用途，ＴＤＬＮ细胞疗法治疗肿瘤是一条很有前途的肿瘤治疗途径。

肿瘤疫苗(Lipostn)诱导肿瘤引流区淋巴结淋巴细胞的体外溶瘤作用

从12例胃癌患者，6例结肠癌患者引流区淋巴结中分离淋巴细胞，与肿瘤疫苗(Lipostn)中非佐剂部分在体外共培养扩增．借助MTT比色法及^61Cr释放实验研究了淋巴结淋巴细胞在Lipostn的刺激后对抗原表达阳性和阴性的传代肿瘤细胞系的杀伤效应。实验结果表明：(1)．肿瘤引流区淋巴细胞与在无分裂原的刺激下被Lipostn刺激，

肿瘤混合粘液核芯肽诱导的人肿瘤引流区淋巴结细胞毒反应

我们采用凝胶过滤和密度梯度离心技术从胰腺癌细胞株SW1990细胞匀浆和细胞培养上清中提取了肿瘤粘液，用无水氢氟酸去掉糖链后，经鉴定为不含糖的肿瘤混合粘液核芯肽(MUC)，主要成份为MU-C1、MUC2和MUC3。动物实验表明具有诱发细胞免疫反应作用，本研究进一步观察其诱导人肿瘤引流区淋巴结细胞的体外扩增及溶瘤的作用。

肿瘤引流淋巴结细胞对瘤细胞杀伤作用的体外实验研究

为认识肿瘤引流淋巴结(TDLN)细胞对恶性肿瘤细胞的杀伤作用及其机制,用光镜、扫描电镜和透射电镜,观察了重组白细胞介素2(rIL—2)诱导下TDLN细胞体外杀伤K562细胞1～48h的形态变化。效靶细胞共育后,光镜和扫描电镜下见TDLN细胞包围瘤细胞,以伪足与瘤细胞紧密接触、粘附,二者形成花环状;有的TDLN细胞嵌入瘤细胞胞体,而后瘤细胞退变、崩解。透射电镜下,见瘤细胞胞质肿胀,内质网扩张,线粒体肿胀、空化或结构消失;核染色质凝集、边移、核膜破裂致细胞溶解。结果表明,rIL—2诱导下TDLN细胞有较强的杀伤瘤细胞作用,杀瘤过程主要为对癌细胞的直接攻击和促使瘤细胞发生退变、凋亡。

肿瘤引流淋巴结的免疫学性质与免疫治疗

肿瘤引流淋巴结(TDLN)是指肿瘤细胞通过淋巴管道所到达的淋巴结,其内包含各类型免疫细胞,如自然杀伤细胞、T细胞、抗原呈递细胞和B细胞。由于这些免疫细胞的存在,以及TDLN位于肿瘤下游这一位置的独特性,使得TDLN成为机体抗肿瘤免疫反应的重要场所;然而TDLN还常常扮演另外一个角色,即对肿瘤产生免疫耐受进而成为肿瘤细胞远组织转移的中转站。在TDLN的免疫治疗中,除常见的离体激活细胞疗法和体内激活细胞疗法外,一些新的治疗方式如靶向治疗等正成为研究热点。本文综述了TDLN的免疫学性质,以及目前与TDLN相关免疫治疗的机制和研究进展。

妇科恶性肿瘤患者腹腔镜下腹膜后淋巴结切除术后放置引流管的必要性分析

目的分析妇科恶性肿瘤患者腹腔镜下腹膜后淋巴结切除术后放置引流管的必要性。方法选取行腹腔镜下腹膜后淋巴结切除术的子宫颈癌或子宫内膜癌患者100例,其中术后放置引流管45例(引流组)、未放置引流管55例(非引流组),比较两组术后并发症发生情况、抗生素使用时间、住院时间及术后排气时间。结果引流组术后并发淋巴回流障碍、发热、下肢静脉血栓形成、尿潴留情况及排气时间与非引流组比较差异无统计学意义;引流组术后抗生素使用时间及住院时间长于非引流组(P均<0.05)。结论妇科恶性肿瘤患者腹腔镜下腹膜后淋巴结切除术后不放置引流管是可行的。

肿瘤引流淋巴结的特殊微环境及其靶向治疗

肿瘤引流淋巴结(TDLN)在肿瘤发生发展过程中起到介导肿瘤细胞转移和激发抗肿瘤免疫的双重作用。鉴于肿瘤免疫治疗的成功,需要对TDLN进行深入探讨以重新评估TDLN的手术切除与相关放疗。TDLN中有着与肿瘤微环境同样重要的特殊微环境,其中包括一系列免疫刺激和免疫抑制机制的对抗,并影响TDLN中包括T细胞、NK细胞在内的多种免疫细胞的活性及后续的抗肿瘤作用。TDLN间高度异质性也意味着需要对不同状态的TDLN采取系统化的研究以设计针对性的治疗措施。TDLN在肿瘤免疫中的重要地位使得可以通过靶向TDLN的方式达到提高疗效和减少毒副作用的效果。

结直肠癌肿瘤引流淋巴结T细胞的特征及其功能

目的:探讨结直肠癌(colorectal cancer,CRC)肿瘤引流淋巴结(tumor-draining lymph node,TDLN)中T细胞的免疫学特性及其抗肿瘤作用。方法:收集2018年12月至2021年1月贵州医科大学附属医院收治的33例CRC患者的临床资料和淋巴结标本。采用染料法示踪,配对采集CRC患者TDLN和非肿瘤引流淋巴结(non-TDLN,NTDLN)。用流式细胞术检测已制备成单细胞悬液的TDLN和NTDLN中免疫细胞亚群和功能表型差异,酶联免疫斑点法比较TDLN和NTDLN中肿瘤反应性T细胞比例,多色免疫荧光组织化学技术分析两种淋巴结中免疫细胞空间分布情况。体外扩增TDLN-T细胞,检测其T细胞亚群和表型变化以及肿瘤免疫反应能力。结果:与NTDLN相比,TDLN中含有更高比例肿瘤反应性T细胞(P<0.05),调节性T(Treg)细胞比例较高(P<0.01),但单核样髓源性抑制细胞比例较低(P<0.05),T细胞活化标志物ICOS、CD28和抑制标志物PD-1、TIGIT比例均显著升高(P<0.05或P<0.01)。Treg细胞和滤泡性T细胞主要分布在淋巴结皮质区和生发中心。TDLN-T细胞扩增后,以CD8^(+)T细胞为主(P<0.01),ICOS、CD28表达升高(P<0.05或P<0.01),肿瘤反应性T细胞比例升高(P<0.01)。结论:CRC的TDLN中T细胞处于免疫激活状态,同时高表达免疫抑制标志物;体外培养可以增加TDLN-T细胞活化水平,并提高抗肿瘤T细胞比例。

肿瘤引流淋巴结的免疫抑制微环境研究进展

肿瘤引流淋巴结(tumor draining lymph nodes,TDLNs)是肿瘤抗原首先进入的二级淋巴器官,其作为机体免疫监视的枢纽,是决定肿瘤免疫的关键初始部位。研究表明,在肿瘤进展过程中,肿瘤细胞会通过多种途径驯化淋巴结中的基质细胞和免疫细胞,塑造转移前生态位,形成免疫抑制微环境,为肿瘤细胞的定植和远处转移提供条件。本文回顾了TDLNs免疫抑制微环境形成的机制,并进一步探讨了靶向TDLNs的免疫疗法,旨在为精准的肿瘤免疫治疗提供新思路。

彩超诊断睾丸恶性肿瘤及引流区淋巴结探查的价值

目的探讨睾丸恶性肿瘤的声像图表现,提高对睾丸恶性肿瘤的诊断率。方法回顾性分析病理诊断32例睾丸恶性肿瘤的声像图表现及彩超探查引流区淋巴结转移情况。结果病理诊断的32例睾丸恶性肿瘤,超声诊断恶性30例,良性2例,诊断率93.75%,其中彩超诊断精原细胞瘤20例,漏误诊6例;胚胎癌7例,漏误诊4例;淋巴瘤0例,漏误诊3例;恶性畸胎瘤3例,漏误诊3例;横纹肌肉瘤0例,漏诊1例。彩超探查患侧腹股沟淋巴结转移9例,腹股沟及腹膜后淋巴结均转移5例,同侧肾上腺转移1例,并经手术及病理证实。结论彩超是诊断睾丸恶性肿瘤的首选方法 ,并通过对引流区淋巴结探查,了解有无远处转移,为治疗方案的选择提供重要信息,但对恶性肿瘤之间的鉴别诊断有待提高。

癌肿病人有关肿瘤的淋巴结引流

20年前已确认肿瘤的区域淋巴结引流对癌肿病人的重要性。本世纪初外科医生强调另一研究的结果,即1968年声称的“恶性肿瘤手术不是器官手术,而是淋巴系统的解剖”,强调切除肿瘤引流的淋巴组织。当时认为肿瘤淋巴结引流的作用是播散肿瘤细胞的屏障。因此,术中切除肿瘤的淋巴引流组织是合理和必需的。癌细胞离心播散的生物学概念,经50多年的手术实践形成了根治手术治疗的基础。然而新近的观察对这一概念发生怀疑,如在某些恶性肿瘤,切除与不切除淋巴结的总存活率无区别。因为隐(?)

不同刺激剂诱导肺癌患者引流淋巴结细胞分泌细胞因子的研究

目的:探讨多种刺激剂对肿瘤引流淋巴结(TDLN)细胞分泌细胞因子的影响及其抗肿瘤效应和机制。方法:采用ELISA和Griess法测定不同刺激组(分别为IL2、IL2+自身肺癌细胞抗原、IL2+GMCSF+IL4+自身肺癌细胞抗原和IL2+GMCSF+IL4+LPS)刺激TDLN后第7、14、21天,分泌IL12p70、IFNγ、TNFα和NO的水平。结果:IL2+GMCSF+IL4+自身肺癌细胞抗原和IL2+GMCSF+IL4+LPS组刺激的TDLN细胞中,CD83+细胞的比率明显增多,分泌IL12p70、IFNγ及TNFα的水平也明显高于IL2和IL2+自身肺癌细胞抗原刺激组,IL2+GMCSF+IL4+LPS组刺激的TDLN细胞分泌NO的水平明显高于其他3组。各种刺激剂刺激TDLN细胞后,分泌IL12p70、IFNγ和NO的水平在第14天时达到高峰。结论:不同刺激剂诱导TDLN细胞中的CD83+细胞数量不同,故具有不同的抗肿瘤活性。